长链非编码RNA AFAP1-AS1在口腔鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的:探讨长链非编码RNA (lncRNA) 肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA1(AFAP1-AS1)在口腔鳞癌及癌旁组织中的表达及其临床意义。方法:利用实时定量PCR(RT-qPCR)法检测75例口腔鳞癌组织及其配对癌旁正常组织中lncRNA AFAP1-AS1的表达情况,并分析其与口腔鳞癌临床病理学特征之间的联系;应用小干扰RNA(siRNA)干扰lncRNA AFAP1-AS1表达,CCK-8实验检测lncRNA AFAP1-AS1对口腔鳞癌细胞株Tca8113细胞增殖能力的影响。结果:RT-qPCR检测结果显示lncRNA AFAP1-AS1在癌组织中的相对表达水平是癌旁组织的5.16倍,差异有统计学意义(P＜0.01)。lncRNA AFAP1-AS1的表达与临床分期、分化程度及淋巴结转移显著相关(P＜0.05)。CCK-8实验结果显示,转染48 h、72 h实验组A₄₅₀值较对照组显著降低(P＜0.01),表明siRNA沉默AFAP1-AS1表达后,抑制了Tca8113细胞的增殖。结论:lncRNA AFAP1-AS1在口腔鳞癌中的表达上调可能与口腔鳞癌的发生发展有关。     

舌鳞癌组织长链非编码RNA的Ion Torrent高通量检测和分析

目的 研究舌鳞癌组织及其癌旁组织之间长链非编码RNA( long non-coding RNA,LncRNA)表达谱的差异,探讨LncRNA在基因调控中的作用. 方法 应用Ion Torrent高通量测序技术对1例新鲜舌鳞癌组织及其癌旁组织的LncRNA表达谱进行检测比较. 将测出的LncRNA序列和Ensemble 6. 8数据库中LncRNA的数据进行比对,用Bowtie2的方法挑出LncRNA的读序,然后用Cufflinks方法计算LncRNA每百万读序中来自某基因每千碱基长度的读序数( reads per kilo bases per million reads,RPKM). 截取癌症组织比癌旁组织RPKM值大于10和小于0. 1的LncRNA作为候选目标. 结果 纳入候选目标LncRNA的有52个,其中表达上调的有28个,表达下调的有24个. 结论 舌鳞癌组织和癌旁组织中存在差异表达的LncRNA分子,提示其靶基因有可能成为舌鳞癌基因治疗的潜在靶点.     

牛磺酸上调基因1在舌鳞状细胞癌中的作用研究

目的：研究长链非编码RNA牛磺酸上调基因1（taurine upregulated gene 1,TUG1）在舌鳞状细胞癌及癌旁组织中的表达差异,探讨TUG1在舌鳞状细胞癌中可能的作用机理。方法荧光实时定量PCR法检测19例患者舌鳞状细胞癌组织及其对应的癌旁组织中TUG1的表达差异,利用小干扰RNA（small interfering RNA,siRNA）技术在舌鳞状细胞癌细胞系CAL27中沉默TUG1的表达,并用四甲基偶氮唑盐（methylthiazolyl tetrazolium ,MTT）法检测细胞增殖能力变化,荧光实时定量PCR法检测下游相关基因诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase,iNOS）基因的表达改变。结果 TUG1在舌鳞状细胞癌组织标本中相对癌旁组织呈高表达状态（P<0.001）。利用siRNA技术沉默TUG1的表达后,舌鳞状细胞癌细胞系CAL27细胞增殖能力显著下降,转染siRNA后24 h、48 h、72 h,细胞增殖抑制率分别为14.16％、16.96％、21.40％。实验组、空白对照组和阴性对照组iNOS基因的相对表达量为1.000±0.034、0.974±0.045、0.729±0.039,沉默TUG1的实验组的iNOS基因表达受到了明显抑制（P＝0.002）。结论长链非编码RNA TUG1在舌鳞状细胞癌中可能起到致癌基因的作用,且其可能通过促进iNOS的表达调控舌鳞状细胞癌的生长。     

干扰MT1-MMP表达对口腔鳞癌细胞增殖、侵袭的影响

目的：检测膜型基质金属蛋白酶-1(MT1-MMP)在口腔鳞癌（OSCC）中的表达,探讨其对OSCC细胞增殖、侵袭的影响。方法：选取40例OSCC及癌旁组织样本,实时荧光定量PCR检测样本中MT1-MMP及上皮细胞钙黏蛋白（E-cadherin）mRNA表达。采用小干扰RNA(siRNA)靶向干扰HSC3细胞MT1-MMP基因,实验分为siControl、siMT1-MMP、siControl+转化生长因子-β1(TGF-β1)及siMT1-MMP+TGF-β1组。采用CCK-8法检测细胞增殖,Transwell实验检测细胞侵袭能力,Western blot检测MT1-MMP、E-cadherin、TGF-β信号通路相关蛋白CUTL1及Wnt5a的表达。结果：相对于癌旁组织,OSCC组织中MT1-MMP mRNA水平为高表达,E-cadherin为低表达（P<0.05）;在干扰MT1-MMP表达后,HSC3细胞的增殖能力无明显变化（P>0.05）;与siControl和siMT1-MMP组比较,siControl+TGF-β1组和siMT1-MMP+TGF-β1组细胞侵袭能力...     

长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因22调控微小RNA-27b-3p对口腔鳞状细胞癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响

目的 探究长链非编码RNA (LncRNA)小核仁RNA宿主基因（SNHG） 22调控微小RNA (miR)-27b-3p对口腔鳞状细胞癌（OSCC）细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法 收集52例OSCC患者的癌组织及癌旁组织标本,体外培养人正常口腔角质细胞HOK和3种人OSCC细胞（CAL-27、SCC-25和HSC-3）,实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测癌组织、癌旁组织、HOK细胞和3种OSCC细胞中SNHG22、miR-27b-3p表达情况。对SCC-25细胞进行转染并将其分为Ctrl组（未进行转染）、si-SNHG22组、si-NC组、miR-27b-3p inhibitor组、inhibitor-NC组、si-SNHG22+inhibitor-NC组和si-SNHG22+miR-27b-3p inhibitor组,检测各组SCC-25细胞增殖情况[细胞计数试剂盒8 (CCK-8)法检测增殖率、流式细胞术检测增殖指数（PI）];Transwell实验检测各组SCC-25细胞侵袭情况;划痕愈合实验检测各组SCC-25细胞迁移情况;双荧光素酶实验验证SNHG22与miR...     

LncTUG1通过靶向miR-212-3p对口腔鳞状细胞癌细胞NK细胞杀伤敏感性的影响

目的 探讨长链非编码RNA（Lnc）牛磺酸调节基因1(taurine up-regulated gene 1,TUG1)对口腔鳞状细胞癌细胞自然杀伤细胞(nature killer cell, NK)杀伤敏感性的影响。方法 以口腔鳞状细胞癌细胞作为体外实验对象,转染TUG1 siRNA,利用qRT-PCR、MTT、流式细胞术、LDH方法,分别检测TUG1表达量、细胞增殖、细胞凋亡和NK细胞杀伤率。利用生物信息学软件预测TUG1与miR-212-3p靶向互补结合,构建荧光素酶报告载体,鉴定靶向关系。在口腔鳞状细胞癌细胞中共转染TUG1 siRNA和miR-212-3p 抑制剂,评估miR-212-3p 抑制剂对TUG1 siRNA影响口腔鳞状细胞癌细胞增殖凋亡和NK细胞杀伤敏感性的影响。采用SPSS 21.0软件包对实验数据进行统计学分析。结果 TUG1 siRNA可显著降低口腔鳞状细胞癌细胞中TUG1的表达水平（P=0.000）,降低细胞增殖能力（P=0.001）,促进细胞凋亡（P=0.000）,增加NK细胞杀伤率（P<0.01）。TUG1 siRNA靶向提高miR-212-3p表达量。miR-212-3p 抑制剂可逆转TUG1 siRNA对口腔鳞状细胞癌细胞增殖、凋亡和NK细胞杀伤率的影响。结论 下调TUG1可靶向负调控miR-212-3p,抑制口腔鳞状细胞癌细胞增殖并诱导凋亡,提高NK细胞杀伤敏感性。     

BTG1在78例口腔鳞癌中的表达及临床意义

目的:探讨B细胞易位基因1(BTG1)在口腔鳞状细胞癌中的表达及临床意义.方法:采用免疫组织化学染色检测78例口腔鳞癌组织、78例癌旁组织、20例正常口腔黏膜组织及80例颈淋巴结中BTG1蛋白的表达水平;使用蛋白免疫印迹及实时荧光定量PCR分别检测78例口腔鳞癌组织及癌旁组织中BTG1蛋白及mRNA的表达水平.采用SP...     

过表达miR-509对人舌鳞癌细胞SCC15纳武单抗敏感性的影响及机制研究

目的:探讨miR-509对人舌鳞癌细胞SCC15纳武单抗敏感性的影响及机制。方法:纳入40例舌鳞癌患者的癌组织及癌旁组织，PCR法检测miR-509水平。取0～80μmol/L纳武单抗处理后以及分别转染miR-509 mimic和mimic NC的SCC15细胞，PCR法检测miR-509水平、流式细胞仪检测细胞凋亡率、蛋白印迹法检测凋亡相关蛋白。结果:癌组织中miR-509水平低于癌旁组织。细胞存活率随纳武单抗浓度的增加而降低(P<0.05)。与mimic-NC组比较，miR-509 mimic组miR-509表达水平、细胞凋亡率、活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cleaved caspase3)以及Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达升高，B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)蛋白表达降低(P<0.05)。结论:过表达miR-509增强SCC15细胞对纳武单抗的敏感性，可能是通过激活促凋亡蛋白表达，抑制抗凋亡蛋白表达发挥调控作用。     

环状RNA BICD2对口腔鳞状细胞癌细胞生物学行为的影响及机制研究

目的探讨环状RNA(circular RNA, circRNA)BICD2(circ-BICD2)对口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma, OSCC)谷氨酰胺代谢、细胞增殖、迁移侵袭、凋亡的影响和可能机制。方法纳入2016年1月至2018年1月就诊于郑州大学第一附属医院口腔科, 手术切除的35例OSCC患者的肿瘤组织及其癌旁正常组织样本。通过实时定量PCR(real-time quantitative PCR, RT-qPCR)和蛋白质印迹法检测OSCC组织与癌旁组织、OSCC细胞(CAL27、SCC9、SCC15)与正常上皮细胞HIOEC细胞中circ-BICD2、miR-296-5p和转录球蛋白2(transgelin2, TAGLN2)的表达水平。生物信息学方法、双荧光素酶报告实验、RNA结合免疫沉淀反应(RNA binding protein immunoprecipitation, RIP)实验检测circ-BICD2与miR-296-5p、miR-296-5p与TAGLN2的靶向关系。在CAL27和SCC9细胞中分别转染circ-BICD...     

c-fos调控p16/CyclinD1信号途径并促进口腔鳞状细胞癌增殖和迁移

目的:探讨c-fos对口腔鳞状细胞癌增殖和迁移的影响及作用机制.方法:免疫组化法分别检测口腔鳞状细胞癌组织标本和正常口腔黏膜组织标本(n=60)中的CyclinD1、p16和c-fos.根据不同处理将HN6和SCC9细胞分为空白对照组、siRNA-scramble组、siRNA-c-fos组.检测各组细胞中CyclinD1和p16 mRNA和蛋白表达量的变化,以及细胞增殖和迁移能力的变化.结果:与正常组比较,病例组中c-fos和CyclinD1表达增加,p16表达降低;与空白对照组相比,siRNA-c-fos组HN6和SCC9细胞中CyclinD1表达显著降低,p16表达明显上升,细胞的增殖能力和迁移能力都显著下降.结论:c-fos可以通过p16/CyclinD1信号途径增强口腔鳞状细胞癌增殖和迁移.     

miR-503靶向作用RECK调控口腔鳞状细胞癌细胞增殖、侵袭和凋亡的机制研究

目的：通过研究miR-503靶向回复引导半胱氨酸丰富蛋白Kazal基元(reversion inducing cysteine rich protein with Kazal motifs,RECK)在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)进展中的作用。方法：将人OSCC细胞SCC-4分为NC inhibitor组(转染miR-503 inhibitor阴性对照序列)、miR-503 inhibitor组(转染miR-503 inhibitor)、si-NC组（转染RECK siRNA阴性对照序列）、si-RECK组(转染RECK siRNA)、miR-503 inhibitor+si-NC组（共转染miR-503 inhibitor和RECK siRNA阴性对照序列）和miR-503 inhibitor+si-RECK组(共转染miR-503 inhibitor和RECK siRNA)。实时定量聚合酶链反应（real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR）检测miR-503...     

长链非编码RNA肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA1在口腔鳞状细胞癌中的表达及其相关功能

目的 分析长链非编码RNA（lncRNA）肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA1（AFAP1-AS1）在口腔鳞状细胞癌（OSCC）中的表达及其对OSCC细胞生物行为学的影响,初步探讨其可能的作用机制。方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测OSCC患者（55例）癌组织、癌旁正常黏膜组织及人口腔鳞状细胞癌SCC25、人正常口腔角质细胞株（NOK）细胞中lncRNA AFAP1-AS1的表达,分析AFAP1-AS1与OSCC患者病理特征的相关性,通过Kaplan-Meier生存曲线分析AFAP1-AS1与患者预后的关系。AFAP1-AS1 siRNA转染SCC25细胞,细胞计数（CCK-8）及Transwell实验分别检测细胞增殖、迁移和侵袭的变化,蛋白质印迹（Western blot）检测侵袭相关蛋白、肌动蛋白纤维相关蛋白1（AFAP1）及Rho GTP酶家族成员蛋白的表达情况,免疫荧光染色检测细胞骨架肌动蛋白微丝结构的变化。结果 OSCC组织中AFAP1-AS1的表达高于癌旁正常黏膜组织,SCC25细胞中AFAP1-AS1的表达高于NOK细胞（P<0.001）。AFAP1-AS1的表达与OSCC的分化程度、TNM分期及淋巴结转移密切相关（P<0.05）,AFAP1-AS1高表达患者的生存率低于AFAP1-AS1低表达者（P<0.05）。AFAP1-AS1 siRNA转染后AFAP1-AS1的表达水平下调,SCC25细胞的增殖、迁移和侵袭能力降低,AFAP1、RhoA、Rac2、Rab10、RhoGDI和Pfn1的表达上调,RhoC的表达下调,细胞骨架中应力纤维丝减少,肌动蛋白完整性丢失。结论 lncRNA AFAP1-AS1在OSCC组织及SCC25细胞中高表达,与OSCC的发生进展及预后相关。下调AFAP1-AS1能够抑制OSCC的增殖、迁移和侵袭能力,其可能是通过调控肌动蛋白纤维丝的完整性实现的。     

长链非编码RNA肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA1在口腔鳞状细胞癌中的表达及其相关功能

目的 分析长链非编码RNA（lncRNA）肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA1（AFAP1-AS1）在口腔鳞状细胞癌（OSCC）中的表达及其对OSCC细胞生物行为学的影响,初步探讨其可能的作用机制。方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测OSCC患者（55例）癌组织、癌旁正常黏膜组织及人口腔鳞状细胞癌SCC25、人正常口腔角质细胞株（NOK）细胞中lncRNA AFAP1-AS1的表达,分析AFAP1-AS1与OSCC患者病理特征的相关性,通过Kaplan-Meier生存曲线分析AFAP1-AS1与患者预后的关系。AFAP1-AS1 siRNA转染SCC25细胞,细胞计数（CCK-8）及Transwell实验分别检测细胞增殖、迁移和侵袭的变化,蛋白质印迹（Western blot）检测侵袭相关蛋白、肌动蛋白纤维相关蛋白1（AFAP1）及Rho GTP酶家族成员蛋白的表达情况,免疫荧光染色检测细胞骨架肌动蛋白微丝结构的变化。结果 OSCC组织中AFAP1-AS1的表达高于癌旁正常黏膜组织,SCC25细胞中AFAP1-AS1的表达高于NOK细胞（P<0.001）。AFAP1-AS1的表达与OSCC的分化程度、TNM分期及淋巴结转移密切相关（P<0.05）,AFAP1-AS1高表达患者的生存率低于AFAP1-AS1低表达者（P<0.05）。AFAP1-AS1 siRNA转染后AFAP1-AS1的表达水平下调,SCC25细胞的增殖、迁移和侵袭能力降低,AFAP1、RhoA、Rac2、Rab10、RhoGDI和Pfn1的表达上调,RhoC的表达下调,细胞骨架中应力纤维丝减少,肌动蛋白完整性丢失。结论 lncRNA AFAP1-AS1在OSCC组织及SCC25细胞中高表达,与OSCC的发生进展及预后相关。下调AFAP1-AS1能够抑制OSCC的增殖、迁移和侵袭能力,其可能是通过调控肌动蛋白纤维丝的完整性实现的。     

CircBARD1靶向miR-495-3p/TLR4调控LPS诱导的人牙周膜细胞增殖、凋亡和炎症

目的:研究circBARD1对LPS诱导的人牙周膜细胞(periodontal ligament cells, PDLCs)增殖、凋亡和炎症的影响，并探讨其潜在的调控机制。方法:脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)处理PDLCs建立体外牙周炎细胞模型。qRT-PCR检测circBARD1表达；分别采用CCK8实验和流式细胞术检测细胞增殖活性和凋亡情况；Western blot检测凋亡相关蛋白的表达；ELISA检测炎性因子水平。双荧光素酶报告基因实验验证circBARD1、miR-495-3p和TLR4之间的靶向关系。结果:LPS诱导PDLCs中circBARD1和TLR4表达上调，miR-495-3p表达下调。敲低circBARD1促进LPS诱导的PDLCs的增殖活性，抑制细胞凋亡和炎症反应。circBARD1靶向负调控miR-495-3p的表达，抑制miR-495-3p能够逆转circBARD1敲低对PDLCs的影响。TLR4是miR-495-3p的靶基因，敲低circBARD1可作为miR-495-3p海绵，抑制TLR4的表达。过表达TLR4能够逆转circBA...     

RNA干扰XBP1基因表达对口腔鳞状细胞癌生物学特性的影响研究

目的:检测口腔鳞状细胞癌组织中X盒结合蛋白1(XBP1)的表达及观察抑制其表达后对人口腔鳞状细胞癌Tca8113增殖凋亡的影响,并探讨其机制。方法:RT-PCR检测42例口腔鳞状细胞癌及癌旁组织中XBP1基因的mRNA表达;NC-siRNA和XBP1-siRNA转染至Tca8113细胞内,不经任何处理的细胞作为空白对照组,48 h后,CCK8实验、流式细胞仪分别检测XBP1基因转染对细胞增殖、凋亡的影响;Western blot检测Cleaved caspase3、β-catenin、Cyclin D1蛋白表达的变化。结果:口腔鳞状细胞癌中XBP1基因的mRNA表达显著高于癌旁组织(P<0.01);转染XBP1-siRNA能够显著降低XBP1的蛋白表达,降低细胞的存活率,促进细胞的凋亡,上调Cleaved caspase3蛋白表达,下调β-catenin、Cyclin D1蛋白表达(P<0.01)。结论:RNA干扰沉默XBP1基因表达可通过抑制Wnt/β-catenin信号通路降低Tca8113增殖及诱导细胞凋亡。     

自噬相关基因Beclin1和MAP1LC3在口腔鳞状细胞癌中的表达及意义

目的:通过检测自噬相关基因Beclin1和MAP1LC3在口腔鳞状细胞癌中的表达,探讨自噬在口腔鳞状细胞癌发生中的作用。方法:采用免疫组织化学方法,观察自噬相关基因Beclin1和MAP1LC3在47例口腔鳞状细胞癌和16例癌旁组织中的表达情况。结果:Beclin1在口腔鳞状细胞癌组织和癌旁组织中的表达率分别为40.43%和75%;MAP1LC3在口腔鳞状细胞癌组织和癌旁组织中的表达率分别为29.79%和62.5%,Beclin1和MAP1LC3在癌组织中的表达率明显低于癌旁组织,2组间均有显著差异(P<0.05)。Beclin1在高分化鳞状细胞癌组织中的表达率为42.31%,在中低分化鳞癌中的表达率为38.1%;MAP1LC3在高分化鳞状细胞癌组织中的表达率为30.77%,在中低分化鳞癌中的表达率为28.57%,Beclin1和MAP1LC3这2组之间的差异均无显著性差异。Beclin1在有淋巴结转移的癌组织和无淋巴结转移的癌组织中的表达率分别为9.09%和50%;MAP1LC3在有淋巴结转移的癌组织和无淋巴结转移的癌组织中的表达率分别为0%和38.89%,这2组均有显著性差异(P<0.05)。结论:Beclin1和MAP1LC3在口腔鳞状细胞癌中表达明显低于癌旁组织,在有淋巴结转移的口腔鳞状细胞癌组织中的表达明显低于无淋巴结转移组织。     

外泌体为载体的微小RNA-1基因运送抑制人口腔鳞状细胞癌CAL-27细胞增殖的研究

目的用供体细胞基因过表达的方法构建微小RNA-1 (miR-1)高表达的细胞内源性外泌体,探讨以外泌体为载体,运送miR-1对口腔鳞状细胞癌CAL-27细胞增殖的作用。方法采用超速离心法提取过表达miR-1的HEK293细胞的外泌体,并用透射电子显微镜、纳米颗粒分析仪、Western blot及定量聚合酶链反应(qPCR)进行外泌体鉴定。过表达miR-1的HEK293细胞外泌体(miR1-EXO)、HEK293细胞的外泌体(CON-EXO)及等体积磷酸盐缓冲液(PBS)分别与CAL-27细胞共培养,用免疫荧光检测外泌体向细胞的转运,用qPCR检测CAL-27细胞miR-1及下游靶基因MET的表达变化,用噻唑蓝比色法(MTT)检测CAL-27细胞增殖情况,用流式细胞术进行细胞周期检测。同时,miR1-EXO、CON-EXO及等体积PBS分别与人正常口腔黏膜上皮角化细胞(NOK)共培养,用MTT法检测NOK细胞增殖情况。结果 miR1-EXO、CON-EXO均呈典型的球形或杯状结构,直径约110 nm,并高表达外泌体标志性蛋白CD9、Alix及Tsg101。miR1-EXO中miR-1的表...     

Cyclin D1和中期因子在口腔鳞状细胞癌中表达的实验研究

目的:研究Cyclin D1和中期因子(Midkine,MK)在口腔鳞状细胞癌组织中的蛋白表达情况,探讨它们在口腔鳞状细胞癌发生发展中的作用以及相互关系。方法:应用免疫组织化学Envision二步法检测40例口腔鳞状细胞癌组织与癌旁正常黏膜组织中MK和Cyclin D1的蛋白表达情况,分析MK和Cyclin D1的蛋白表达率与临床病理学特征之间的关系以及二者蛋白表达之间的相关性。结果:(1)Cyclin D1阳性表达主要定位于肿瘤细胞核;CyclinD1在口腔鳞癌组织中的表达显著高于正常口腔黏膜组织(P<0.01);CyclinD1的表达与肿瘤的颈淋巴结转移密切相关(P<0.01),而与病人的性别、年龄、临床分期及肿瘤大小无明显相关(P>0.05)。(2)MK阳性表达主要定位于肿瘤细胞浆;MK在口腔鳞癌组织中的表达显著高于正常口腔黏膜组织(P<0.05);MK的表达与肿瘤的颈淋巴结转移密切相关(P<0.01),而与病人的性别、年龄、临床分期及肿瘤大小无明显相关(P>0.05)。(3)Cyclin D1的阳性表达和MK的阳性表达显著相关(P<0.05)。结论:Cyclin D1、MK的表达与口腔鳞癌的发生、发展和淋巴结转移密切相关。Cyclin D1的表达不仅促进了口腔鳞状细胞癌的发生而且通过某种途径促进了MK的表达,MK的表达促进了肿瘤血管生成,以及肿瘤的转移。     

SPHK1在舌鳞癌中的表达及其表达下调对Tca8113细胞迁移能力的影响

目的:研究鞘氨醇激酶1(SPHK1)在舌鳞癌组织中的表达及其表达下调对Tca8113细胞迁移的影响。方法:采用免疫组织化学检测45例舌鳞癌组织、36例癌旁异常增生组织和45例正常舌上皮组织中SPHK1蛋白的表达。利用脂质体2000将SPHK1 siRNA和对照siRNA分别转染Tca8113细胞,Western blotting检测细胞中SPHK1蛋白的表达;分别采用CCK-8和Boyden小室检测细胞增殖和细胞迁移能力的变化;用Western blotting检测细胞迁移相关蛋白MMP-2和MMP-9表达的变化。结果:舌鳞癌组织中SPHK1蛋白的表达显著高于癌旁异常增生组织和正常舌上皮组织(χ2=55.608,P=0.000)。SPHK1 siR-NA能显著下调Tca8113细胞中SPHK1蛋白的表达,其表达下调能明显抑制舌鳞癌细胞的增殖和降低细胞的迁移能力。SPHK1表达的下调能明显降低舌鳞癌细胞中MMP-2和MMP-9蛋白的表达。结论:SPHK1的过表达可能在舌鳞癌的发生发展过程中发挥重要作用,其表达下调介导的舌鳞癌细胞迁移能力的降低可能与MMP-2和MMP-9的下调密切相关。     

CyclinD1和P73在口腔粘膜鳞状细胞癌化疗前后的表达及临床意义

目的研究CyclinD1和P73在口腔粘膜鳞状细胞癌中应用奥铂联合替加氟化疗前后的表达及临床意义。方法选取30例口腔粘膜鳞状细胞癌患者的癌组织为实验组,10例口腔粘膜良性肿瘤患者的正常黏膜为对照组。将癌组织和正常粘膜组织分为三组,即A组(化疗前)、B组(化疗后)和C组(正常粘膜)。应用免疫组织化学SP法和流式细胞术,检测CyclinD1和P73在各组中的表达。结果①免疫组化:CyclinD1在化疗前口腔粘膜鳞状细胞癌中阳性率为91.29±3.10%,化疗后为71.78±4.46%,正常黏膜组织阳性率为51.32±2.29%;P73在化疗前口腔粘膜鳞状细胞癌中阳性率为88.97±4.2%,化疗后为72.14±11.6%,正常黏膜组织阳性率为53.49±5.01%。②流式细胞术:CyclinD1在化疗前口腔粘膜鳞状细胞癌中的表达为1.89±0.10,化疗后为1.35±0.15,正常口腔粘膜细胞为1.0±0.04。各组之间比较有显著性差异(P<0.01)。P73在化疗前为1.75±0.18,化疗后为1.29±0.15,正常粘膜细胞为0.99±0.04。各组之间比较有显著性差异(P<0.01)。结论 CyclinD1和P73可能是口腔黏膜癌变的早期事件,可作为癌变监测和临床疗效观察的辅助指标。