4-羟苯基维胺脂增敏放疗诱导宫颈癌HeLa细胞系凋亡作用的研究

目的探讨4－羟苯基维胺脂（4-HPR）对HeLa细胞生长抑制和凋亡的影响,研究小剂量4-HPR对HeLa细胞的放射增敏效应。方法用四甲基偶氮唑蓝比色法（MTT）观察4-HPR对HeLa细胞的生长抑制情况;电镜观察4-HPR、放疗处理后HeLa细胞超微结构的改变;流式细胞仪检测单用4-HPR、γ－射线以及两者联合使用HeLa细胞凋亡率和细胞周期变化;用Hoechst染色法检测细胞核的改变。结果4－HPR和2Gy^60Co照射单独作用均可引起HeLa细胞超微结构改变,发生早期凋亡,4－HPR低剂量组（1μmol／L,2μmol／L）、单纯放射组与无药对照组凋亡率比较,差异均无统计学意义（均P〉0．05）;4-HPR4μmol／L组与无药对照组差异有统计学意义（P〈0．01）。2Gy^60Co照射和4-HPR（2μmol／L,4μmol／L）联合使用细胞凋亡率较单纯放射组凋亡率差异有统计学意义（P〈0．05,P〈0．01）;4-HPR作用后,HeLa细胞周期发生变化,表现为G。期减少,S期增加。结论4．HPR可诱导肿瘤细胞凋亡,小剂量4-HPR可增加HeLa细胞对放疗的敏感性。     

胡桃醌及其与顺铂联用对宫颈癌HeLa细胞存活和凋亡的影响

目的探讨胡桃醌及其与顺铂联合用药对宫颈癌HeLa细胞存活和凋亡的影响。方法体外培养人宫颈癌HeLa细胞,加入胡桃醌10～200μmo.lL-1或者胡桃醌20μmo.lL-1+顺铂20μmo.lL-1继续培养8 h或24 h,用倒置显微镜观察细胞形态的变化,用MTT法测定细胞存活率,用流式细胞仪检测细胞周期和细胞早期凋亡率。结果胡桃醌10,20,50,100和200μmo.lL-1与HeLa细胞作用24 h,随着胡桃醌浓度的增加,光镜下HeLa细胞逐渐变小、变圆;HeLa细胞存活率明显降低,分别由对照组的(100.0±0.0)%降低至(87.2±5.6)%,(66.2±4.8)%,(54.5±4.9)%,(42.5±6.4)%和(32.0±2.2)%(P<0.05,P<0.01);HeLa细胞G2/M期百分率逐渐增加,分别由对照组的(7.5±1.2)%增加到(12.9±1.2)%,(16.2±2.8)%,(23.6±3.9)%,(34.2±4.2)%和(52.6±7.8)%(P<0.05,P<0.01)。胡桃醌联合顺铂作用24 h,光镜下脱壁细胞增加,细胞形态变圆,较胡桃醌和顺铂单用组更加明显;联合用药组细胞存活率为(35.0±6.1)%,较胡桃醌和顺铂单用组〔(78.2±12.5)%和(58.5±10.9)%〕明显降低(P<0.01)。胡桃醌联合顺铂作用8 h,HeLa细胞早期凋亡率为(24.6±5.7)%,高于胡桃醌和顺铂单用组〔(6.7±1.5)%和(0.4±2.8)%〕(P<0.01)。结论胡桃醌可抑制HeLa细胞存活,促进HeLa细胞凋亡,与顺铂联合使用具有协同作用。     

天花粉蛋白对宫颈癌HeLa细胞顺铂化疗增敏作用

目的 观察天花粉(TCS)联合顺铂对宫颈癌HeLa细胞的化学治疗(化疗)增敏作用,并探讨其作用机制。方法 细胞计数检测试剂盒(CCK8)法检测TCS、顺铂单独或联合用药对宫颈癌HeLa细胞增殖的影响;CompuSyn软件分析TCS联合顺铂的联合用药指数(CI值);细胞划痕实验与Transwell法检测药物对细胞迁移的影响;流式细胞术检测药物对细胞凋亡的影响;蛋白印迹法检测药物对HeLa细胞凋亡相关蛋白表达水平的影响。结果 TCS与顺铂均能抑制宫颈癌HeLa细胞增殖,TCS+顺铂抑制作用更强,TCS对顺铂增敏指数为3.04;不同浓度TCS联合顺铂作用HeLa细胞48 h后,CI值均<1,且具有浓度依赖性(P<0.05);细胞划痕实验与Transwell法实验中,TCS+顺铂较TCS或顺铂单独给药能更明显抑制HeLa细胞迁移(P<0.05);流式细胞术中,与TCS或顺铂单独给药相比,TCS+顺铂可增加HeLa细胞凋亡比例(P<0.05);蛋白印迹实验中,与TCS或顺铂相比,TCS+顺铂可上调促凋亡蛋白Bax、c-PARP表达,下调凋亡抑制蛋白Bcl-2表达(P<...     

紫杉醇联合顺铂化疗治疗宫颈癌的护理

宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤[1],我国宫颈癌死亡率居恶性肿瘤死亡率第六位[2]。近年来使用紫杉醇联合顺铂治疗宫颈癌不断增多。我院自2009年8月～2011年2月使用紫杉醇联合顺铂化疗治疗宫颈癌37例共97例次,收到较好的效果,     

左旋紫草素对顺铂耐药人宫颈癌HeLa细胞的逆转作用研究

目的:探讨左旋紫草素(L-SHK)对顺铂(DDP)耐药人宫颈癌HeLa细胞(HeLa/DDP)的逆转作用及其可能机制。方法:以人宫颈癌HeLa细胞株为研究对象,以DDP诱导获得HeLa/DDP耐药细胞;采用CCK-8法测定HeLa/DDP细胞的耐药指数以及不同剂量L-SHK(0.125、0.25、0.5、1、2、4、8、16μmol/L)对该细胞的抑制率、半数抑制浓度(IC₅₀)和逆转倍数;采用流式细胞术检测低、中、高剂量L-SHK(0.3、0.6、1.2μmol/L)联合DDP对HeLa/DDP细胞周期及凋亡率的影响,采用Western blotting法检测低、中、高剂量L-SHK(0.3、0.6、1.2μmol/L)联合DDP对HeLa/DDP细胞凋亡相关蛋白[剪切型胱天蛋白酶3(Cleaved caspase-3)、Bcl-2、Bax]表达的影响。结果:所得HeLa/DDP细胞的耐药指数为11.8。L-SHK对HeLa/DDP细胞的抑制率有随剂量增加而逐渐升高的趋势。与单用DDP比较,DDP+低、中、高剂量L-SHK组细胞的IC₅₀值...     

紫杉醇联合顺铂、5-FU治疗宫颈癌的临床效果观察

目的探讨紫杉醇联合顺铂、5-FU方案化疗治疗宫颈癌的疗效及安全性。方法选择2009年6月至2012年6月间于我院治疗的患者95例,随机分为对照组(48例)和观察组(47例),观察组给予紫杉醇联合顺铂、5-FU方案化疗治疗,对照组给予顺铂、5-FU方案治疗,治疗结束后评价近期疗效及患者的不良反应发生率。结果观察组化疗方案的总有效率达到55.3%,明显优于对照组(37.5%),比较差异有统计学意义(Z=2.07,P=0.04);观察组的不良反应发生率高于对照组,但比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论紫杉醇联合顺铂、5-FU方案治疗宫颈癌患者的疗效确切,可延长患者的生存率,不良反应无明显增加,是一种治疗宫颈癌的有效方案。     

顺铂联合5-Fu治疗晚期宫颈癌近期疗效观察

目的探讨局部晚期宫颈癌应用顺铂联合5-氟尿嘧啶（5-Fu）治疗中的近期疗效及安全性。方法对新沂市人民医院2008年12月—2012年9月收治的确诊为IIb2-IIIb期的局部宫颈癌患者33例为研究对象,按治疗方式的不同随机分为研究组（17例）与对照组（16例）,其中对照组行广泛性子宫切除加盆腔淋巴结清扫术,研究组先行顺铂联合5-氟尿嘧啶化疗,化疗结束后再行广泛性子宫切除加盆腔淋巴结清扫术,观察两组患者的近期临床效果及不良反应。结果本研究结果显示不同期别宫颈癌患者术前化疗后IIb有效率为70．0％,IIIa为75．0％,IIIb为60．0％。术后病理学检查发现研究组患者盆腔淋巴结阳性率明显低于对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）。术后官旁浸润阳性率研究组与对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论局部晚期宫颈癌患者应用顺铂联合5一氟尿嘧啶治疗近期临床疗效显著,且能提高手术质量。     

藏红花素联合顺铂对人宫颈癌HeLa细胞协同抑制作用的研究

目的 探索藏红花素联合顺铂对人宫颈癌HeLa细胞的协同抑制作用及相关调控机制。方法 取对数生长期人宫颈癌HeLa细胞,设置空白对照组（DMSO）、藏红花素组（400 μg·mL^-1）、顺铂组（5 μg·mL^-1）、联合组（藏红花素400 μg·mL^-1+顺铂5 μg·mL^-1）。干预48 h后,CCK-8检测HeLa细胞增殖抑制率,采用CompuSyn软件计算藏红花素与顺铂的联合指数（CI）,Annexin V-FITC染色法检测细胞凋亡,流式细胞术检测细胞周期分布,Western blotting检测激活型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Cleaved Caspase-3）、B细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、细胞周期素D1（Cyclin D1）、周期蛋白依赖激酶2（CDK2）的表达。结果 与顺铂组比较,联合组细胞增殖抑制率显著升高（P<0.05）,CI为0.68,具有中度协同效应;细胞凋亡率显著升高（P<0.01）,G₀/G₁期细胞比例显著升高（P<0.05）,而G₂/M期比例显著降低（P<0.01）,Cleaved Caspase-3、Bax蛋白表达水平及Bax/Bcl-2比值均显著升高（P<0.05）,Cyclin D1、CDK2蛋白表达水平显著降低（P<0.01）。与空白对照组比较,藏红花素组G₀/G₁期细胞比例显著升高而G₂/M期比例显著降低（P<0.01）,Cleaved Caspase-3、Bax表达水平及Bax/Bcl-2比值均显著升高（P<0.01）,Cyclin D1、CDK2表达水平显著降低（P<0.05）。结论 藏红花素联合顺铂可协同抑制人宫颈癌HeLa细胞的增殖和生长,其作用机制可能与调控凋亡相关蛋白的表达从而促进细胞凋亡、阻滞细胞周期进程有关。     

大蒜素联合顺铂对人宫颈癌细胞增殖的抑制作用

目的探讨大蒜素联合顺铂对人宫颈癌HeLa细胞增殖的抑制作用并探讨其机制。方法取对数生长期HeLa细胞,设对照组、大蒜素（50 μg/mL）组、顺铂（5 μg/mL）组、联合给药组（大蒜素50 μg/mL+顺铂5 μg/mL）。药物干预48 h后,通过MTT法检测细胞增殖抑制率,运用CompuSyn软件计算大蒜素与顺铂联合指数（CI）,流式细胞术检测细胞周期分布和细胞凋亡水平,Western blotting法检测Cyclin D1、CDK2、P27、Cleaved Caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白表达。结果与大蒜素组和顺铂组比较,联合给药组HeLa细胞增殖抑制率显著升高（P<0.05、0.01）,CI为0.69（提示大蒜素与顺铂具有中度协同效应）。与对照组比较,大蒜素组和顺铂组G₀/G₁期细胞比例和细胞凋亡率显著升高（P<0.05、0.01）,Cyclin D1、CDK2、Bcl-2表达显著下调且P27、Cleaved Caspase-3、Bax表达显著上调（P<0.05、0.01）,Bax/Bcl-2比值显著升高（P<0.01）。与大蒜素组和顺铂组比较,联合给药组G₀/G₁期细胞比例和细胞凋亡率显著升高（P<0.05、0.01）,Cyclin D1表达显著下调且P27、Cleaved Caspase-3、Bax表达显著上调（P<0.05、0.01）,Bax/Bcl-2值显著升高（P<0.01）。结论大蒜素联合顺铂具有协同抑制人宫颈癌HeLa细胞增殖的作用,可能与调节细胞周期和凋亡相关蛋白表达,进而阻滞细胞周期进程并促进细胞凋亡有关。     

N-(4-羟基苯基)维生素甲酰胺诱导肿瘤细胞凋亡的机制

N-(4-羟基苯基)维生素甲酰胺(4-HPR)是一种维甲酸类化合物，通过诱导肿瘤细胞凋亡抑制肿瘤生长，其诱导凋亡的机制包括升高活性氧、神经酰胺的水平和增加Caspase活性等不依赖受体的机制和依赖维甲酸受体的机制，以及在其中发挥作用的其他因素。     

山楂酸与顺铂合用对肺癌A549细胞增殖、凋亡的影响

目的探讨山楂酸与顺铂合用对肺癌细胞A549增殖及凋亡产生的影响。方法将人的肺癌细胞系A549经过药物干预(山楂酸、顺铂),并将干预后的肺癌细胞通过MTT实验,分析细胞增殖能力变化,通过流式细胞技术,分析细胞的凋亡水平变化。通过Western blot分析细胞中XIAP、Survivin的表达水平变化。结果山楂酸和顺铂合用后,A549细胞的增殖率显著降低,凋亡水平显著提高;荧光电子显微镜下观察到凋亡细胞明显增加,核碎裂明显,细胞大片脱落;Western blot结果显示,山楂酸和顺铂合用,显著下调XIAP、Survivin的蛋白表达量。结论山楂酸和顺铂合用抑制肺癌细胞的增殖,促进肺癌细胞的凋亡,并下调细胞中凋亡抑制相关指标XIAP、Survivin的表达水平。     

新木脂素VB1 对宫颈癌HeLa 细胞凋亡的影响

目的探讨新木脂素即6-羟基-4-(4-羟基-3-甲氧基苯基)3-羟甲基-5-甲氧基-3,4-二氢(3R,4S)-2-醛基萘(VB1)诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡的作用和机制。方法体外培养HeLa细胞,碘化丙啶(PI)染色后,用流式细胞术(FCM)分析细胞的凋亡率;酶联免疫吸附法(ELISA)测定细胞组蛋白/DNA碎片水平;Westernblot检测细胞内Mcl-1蛋白的表达。结果 VB1以浓度依赖性方式增加HeLa细胞的凋亡率和细胞内组蛋白/DNA碎片水平(P<0.05),同时降低HeLa细胞内Mcl-1蛋白的表达。结论 VB1可以浓度依赖的方式诱导宫颈癌HeLa细胞的凋亡,这种作用可能与其下调细胞内Mcl-1蛋白的表达有关。     

N-Myc down regulation induced differentiation, early cell cycle exit, and apoptosis in human malignant neuroblastoma cells having wild type or mutant p53

Neuroblastomas, which mostly occur in children, are aggressive metastatic tumors of the sympathetic nervous system. The failure of the previous therapeutic regimens to target multiple components of N-Myc pathway resulted in poor prognosis. The present study investigated the efficacy of the combination of N-(4-hydroxyphenyl) retinamide (4-HPR, 0.5 μM) and genistein (GST, 25 μM) to control the growth of human neuroblastoma cells (SH-SY5Y and SK-N-BE2) harboring divergent molecular attributes. Combination of 4-HPR and GST down regulated N-Myc, Notch-1, and Id2 to induce neuronal differentiation. Transition to neuronal phenotype was accompanied by increase in expression of e-cadherin. Induction of neuronal differentiation was associated with decreased expression of hTERT, PCNA, survivin, and fibronectin. This is the first report that combination of 4-HPR and GST mediated reactivation of multiple tumor suppressors (p53, p21, Rb, and PTEN) for early cell cycle exit (due to G1/S phase arrest) in neuroblastoma cells. Reactivation of tumor suppressor(s) repressed N-Myc driven growth factor mediated angiogenic and invasive pathways (VEGF, b-FGF, MMP-2, and MMP-9) in neuroblastoma. Repression of angiogenic factors led to the blockade of components of mitogenic pathways [phospho-Akt (Thr 308), p65 NF-κB, and p42/44 Erk 1/2]. Taken together, the combination of 4-HPR and GST effectively blocked survival, mitogenic, and angiogenic pathways and activated proteases for apoptosis in neuroblastoma cells. These results suggested that combination of 4-HPR and GST could be effective for controlling the growth of heterogeneous human neuroblastoma cell populations.     

顺铂诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡作用及其对线粒体膜电位变化的研究

目的研究线粒体膜电位在顺铂诱导胃癌细胞凋亡中的作用机制。方法采用MTT比色法测定顺铂对胃癌SGC7901细胞的生长抑制曲线;将胃癌SGC7901细胞分成对照组及10μg/ml顺铂组处理,用流式细胞仪（FCS）分别检测线粒体膜电位（Δψm）和分析细胞周期变化情况。结果顺铂可明显抑制胃癌细胞增殖。在24h后可见细胞大部分受阻于G1期,且出现了典型的凋亡峰;在10h后线粒体膜电位明显降低。结论顺铂诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡的途径可能是通过使线粒体膜通透性的改变,膜电位的下降来而实现的。     

Phase II trial of fenretinide in advanced renal carcinoma

Summary Purpose: Fenretinide, a synthetic form of retinoid, induced apoptosis even in chemotherapy resistant cell lines. A phase II study was hence conducted to evaluate toxicity and efficacy of fenretinide in metastatic renal cancer. Methods: Eligibility included unresectable or metastatic renal cell carcinoma (RCC), adequate organ function and Zubrod performance status 2. Prior immunotherapy and a maximum of one prior chemotherapy regimen were allowed. Fenretinide was administered at a dose of 900 mg/m² twice daily orally for 7 days in a 21-day cycle. Toxicity was assessed at the start of each cycle, and response every 2 cycles. Results: Nineteen eligible patients enrolled of which fifteen had visceral/bone metastases. Seventeen patients had prior nephrectomy and 11 had prior immunotherapy. 76 cycles of therapy were delivered. Therapy was very well tolerated with few severe toxicities consisting of thrombosis in 1 individual and grade 3 fatigue, nausea and diarrhea in 1 patient. 5 patients had grade 2 nyctalopia and 3 patients had transient grade 2 visual toxicity. No objective responses were noted. Stable disease was seen in seven of nineteen cases (37%, 90% C.I. 0.21–0.59). Median time to progression was 1.5 months and median duration of stable disease was 5.8 months (90% C.I. 3.0–8.4). Median survival was 10 months. Tumor fenretinide levels were obtained in three patients and were in the lower end of the therapeutic range. Conclusion: Fenretinide was well tolerated but demonstrated minimal activity that was consistent with results of intratumoral drug measurements. Strategies are needed that will increase systemic and tumor levels of fenretinide.Supported in part by NCI Cancer Center Support Grant CA-22453.     

Cyclin L2在化疗诱导肝癌细胞凋亡中的作用

目的探讨cyclin L2基因在化疗药物顺铂（DDP）、5-氟尿嘧啶（5-FU）和多西紫杉醇（Doc）诱导的肝癌细胞凋亡中的作用。方法用肝癌SMMC7721细胞株进行培养传代,MTT试验检测DDP、5-FU和Doe不同药物浓度对肝癌细胞生长的抑制作用,以及cyclin L2转染及反义转染后对该细胞生长抑制作用的影响。用流式细胞术定量检测细胞凋亡。结果不同浓度DDP、5-FU和Doc对肝癌细胞生长均有明显的浓度依赖性抑制作用。细胞凋亡率和cyclinL2基因表达率成正相关。在5-FU和DDP作用下,cyclin L2转染组凋亡率均高于对照组（P〈0．01）,反义转染组细胞凋亡率低于对照组（P〉0．05）。结论Cyclin L2基因在化疗药物诱导肝癌细胞凋亡中起重要作用。     

紫杉醇联合顺铂用于局部晚期宫颈癌24 例疗效观察

目的评价紫杉醇联合顺铂（TP）治疗对局部晚期宫颈癌的临床疗效。方法 2007年3月～2011年5月经病理确诊的24例Ib-IIIb期宫颈癌患者,采用TP方案化疗2个疗程后行广泛性子宫切除术及盆腔淋巴结清扫术。观察宫颈癌病灶、宫旁组织在化疗前、后的改变,化疗毒副反应以及术后病理情况等。结果化疗后,完全缓解3例（12.5%）,部分缓解16例（66.7%）,化疗有效率为79.2%（19/24）,且宫颈癌病灶、宫旁组织有不同程度的改善。化疗后21例患者进行了广泛性子宫切除术及盆腔淋巴结清扫术,手术切除率达到87.5%。结论术前紫杉醇联合顺铂化疗可提高宫颈癌的近期疗效,患者能较好耐受。     

紫花前胡苷抗宫颈癌细胞作用研究

目的 探究紫花前胡苷抗宫颈癌HeLa细胞的作用效果及相关信号通路.方法 HeLa细胞在0、0.1、1和10 mmol/L浓度的紫花前胡苷作用24 h后,通过CCK-8法检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞凋亡水平;通过蛋白免疫印迹法检测细胞内凋亡相关cleaved-caspase 3(cle-caspase 3)、Cy...     

奇果菌素促进宫颈癌HeLa细胞凋亡的蛋白质组研究

目的寻找与奇果菌素促进宫颈癌HeLa细胞凋亡相关的蛋白质。方法随机将宫颈癌HeLa细胞分成两组,一组为对照组,另一组以奇果菌素(剂量为半数抑制率)处理24 h。提取蛋白质做双向电泳(2-dimensional electrophoresis,2-DE),基质辅助激光解吸/离子化飞行时间质谱仪(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectros-copy,MALDI-TOF-MS)鉴定2组细胞间有明显差异表达的蛋白质。结果奇果菌素作用于HeLa细胞的蛋白质组,质谱鉴定出6种蛋白质表达差异有显著性,分别是:塌陷反应介导蛋白1(CRMP-1)、转胶蛋白2(Transgelin-2)、磷酸化应激诱导蛋白1(StIP1)、腺苷酸环化酶(ATPase)、磷酸甘油酸变位酶1(PGM-1)和原肌球蛋白4(TPM-4);其中StIP1表达下调,其他蛋白均上调。结论奇果菌素能够通过诱导宫颈癌HeLa细胞发生凋亡而发挥抑制HeLa细胞生长作用,奇果菌素可能通过上调或下调上述蛋白质的表达参与促进宫颈癌HeLa细胞的凋亡。