二甲基亚砜(DMSO)对人肝癌HepG2 细胞的诱导分化作用的实验研究

目的:探讨二甲基亚砜(DMSO)对人肝癌HepG2细胞的诱导分化作用。方法:体外培养人肝癌HepG2细胞,用DMSO干预细胞,MTT法检测药物对细胞增殖活力的影响;倒置相差显微镜和瑞氏-姬姆萨染色观察细胞形态学的变化;放射免疫法检测细胞甲胎蛋白（AFP）和清蛋白(ALB)的分泌量;酶促反应试剂盒检测细胞中γ-谷胺酰转肽酶（γ-GT）、碱性磷酸酶（ALP）的活性。结果:用DMSO处理HepG2细胞72h后,能显著抑制细胞的增殖（P＜0.05）;细胞的形态向成熟细胞分化;细胞AFP的分泌量和γ-GT酶的活性明显降低,ALP活性和ALB含量则显著升高（P＜0.05）。结论:DMSO具有诱导人肝癌HepG2向正常细胞分化的作用并抑制细胞增殖。     

AFP通过激活STAT3的磷酸化促进肝癌细胞的增殖

摘 要：［目的］ 研究AFP基因过表达对肝癌细胞系HepG2细胞增殖的影响及其机制。［方法］ 利用慢病毒转染技术对HepG2细胞进行AFP基因过表达,通过Western Blot检测转染后HepG2细胞中AFP表达情况,采用流式细胞技术和CCK8细胞增殖实验检测细胞的增殖情况,Western Blot检测AFP过表达后STAT3、p-STAT3蛋白水平的变化。［结果］ CCK8细胞增殖实验显示,AFP过表达组HepG2细胞较对照组细胞增殖速度快（P<0.05）。流式细胞实验显示,AFP基因过表达组处于G1期和S期的细胞占比分别为49%和21%,而对照组相应的G1期、S期细胞占比分别为61%和12%,差异具有统计学意义（P<0.05）。AFP基因过表达后,HepG2细胞中p-STAT3表达水平升高,表明存在STAT3蛋白的激活。［结论］ AFP可促进HepG2肝癌细胞的增殖,其机制涉及STAT3蛋白的激活。     

苦参碱联合X线对肝癌细胞协同杀伤作用的实验

目的 探讨苦参碱和X线对人肝癌HepG2细胞协同杀伤作用以及诱导细胞凋亡的机制。方 法 采用MTT法检测细胞活力; ELISA试剂盒检测细胞凋亡; Real-time RT-PCR 检测Bcl-2及Bax表达;Western blot检测caspase-9、pro-caspase-9及细胞色素C（cytochondrial-C）的表达;NobiFlow GOTIFCC和NobiFlow LDH-L试剂盒测定LDH、AST水平。结果 0.3 mg/ml苦参碱预处理12 h能显著增加X线（3Gy）对HepG2细胞的杀伤作用,增加HepG2细胞凋亡率,抑制Bcl-2的表达,提高胞质内细胞色素C及caspapase-9水平;联合应用X线及苦参碱后人肝细胞中LDH及AST水平、细胞形态均未发生显著改变。结论 苦参碱联合X线能协同抑制HepG2细胞生长、诱导细胞凋亡,同时不会加重对人肝细胞的损害。     

养阴抗毒胶囊对兔肝VX2移植瘤射频治疗前后cAMP、cGMP及CORT影响的实验研究

目的：探讨中药养阴抗毒胶囊对兔肝VX2移植瘤射频消融（RFA）术前后CORT、cAMP、cGMP的动态变化的影响。方法：将40只新西兰大白兔采用移植法建立兔肝移植瘤模型,分为：A组中药干预组、B组RFA组、C组模型组、D组空白组,在B超引导下行RFA治疗,术前1天、术后1、3、5、7天检测血清中CORT、cAMP、cGMP动态变化。结果：RFA后普遍存在cAMP和CORT升高、cGMP降低现象,中药养阴抗毒胶囊可显著升高cAMP、降低cGMP并使CORT在适当范围内波动。结论：中药养阴抗毒胶囊可能通过升高cAMP,降低cGMP而启动人体内第二信使并激活HPA使CORT在适当范围内波动而提高RFA治疗效果。     

苦参碱对宫颈癌SiHa细胞增殖的抑制作用及JAK-STAT信号通路的 影响

目的:观察苦参碱对宫颈癌SiHa细胞JAK-STAT信号通路的影响。方法:苦参碱作用于宫颈癌SiHa细胞。用MTT法检测不同浓度苦参碱对SiHa细胞增殖的抑制作用。Western blot法检测不同浓度苦参碱对宫颈癌细胞JAK1、JAK2和STAT3蛋白表达的影响。结果:苦参碱能够抑制宫颈癌SiHa细胞的增殖,呈时间-剂量依赖性。苦参碱能降低JAK1、JAK2和STAT3蛋白表达量（P<0.01）,有剂量依赖性。结论:苦参碱对宫颈癌SiHa细胞有抑制作用。其作用机制可能为下调宫颈癌细胞JAK1、JAK2、STAT3蛋白表达水平,阻断细胞信号转导通路,从而抑制宫颈癌细胞增殖。     

lncRNA PVT1调控肝癌细胞放射敏感性的分子机制

目的:探讨lncRNA PVT1调控肝癌细胞对放射照射增殖、凋亡的敏感性及机制。方法:运用qRT-PCR检测人肝癌细胞HepG2、人正常肝细胞L02中PVT1的表达。si-NC组（转染si-NC）、si-PVT1组（转染si-PVT1）、IR+si-NC组（转染si-NC后放射照射）、IR+si-PVT1组（转染si-PVT1后放射照射）均用脂质体法转染至HepG2细胞。MTT法检测各组细胞增殖;流式细胞术检测各组细胞凋亡;Western blot检测各组细胞中p-ATM、p-p53、p-Chk2、Bcl-2、Bax的蛋白表达。结果:与人正常肝细胞L02相比,人肝癌细胞HepG2中PVT1的表达显著升高（P<0.05）;敲减PVT1联合放射照射可明显抑制HepG2细胞增殖,促进凋亡且可下调p-ATM、p-p53、p-Chk2、Bcl-2蛋白表达,上调Bax蛋白表达。结论:敲减lncRNA PVT1可通过抑制HepG2细胞增殖,促进凋亡,增强其对放射照射的敏感性,为提高肝癌的治疗效率提供新靶点。     

ESO联合DDP对肝癌HepG2细胞增殖的抑制效应及其机制

目的： 探讨海洋生物口虾咕乙酸乙酯提取物（ethyl acetate extract of Squilla Oratoria , ESO）联合顺铂（cisplatin,DDP）对人肝癌HepG2细胞增殖的抑制效应及其机制。 方法： MTT法测定不同浓度ESO和DDP 单独或联合处理对HepG2细胞增殖的抑制作用,并计算联合效应指数（CI）;流式细胞术检测ESO对细胞周期和细胞凋亡的影响,Western blotting检测HepG2细胞Survivin、Bax和Bcl-2的蛋白表达水平。建立裸鼠皮下HepG2细胞移植瘤模型,并观察ESO和DDP单用或联用对移植瘤的抑制效应。 结果： ESO能有效地抑制HepG2细胞的生长（呈浓度依赖性）,促进细胞凋亡,将细胞周期阻滞在S期;与DDP联合用药时,对HepG2细胞增殖的抑制呈现出协同效应,凋亡率明显增加（ P <0.05）。ESO可下调Survivin和Ｂcl-2蛋白表达、上调Bax蛋白表达,且呈浓度依赖性（ P <0.05）。裸鼠成瘤抑制实验发现,随着ESO浓度的增大,肿瘤增长的速度减慢,以联合用药组抑制作用更为明显。 结论： ESO可通过细胞周期阻滞及促细胞凋亡作用抑制HepG2细胞增殖;与顺铂联合用药,能对HepG2细胞增殖产生协同抑制效应。     

siRNA下调表达HDGF对HepG2细胞增殖能力及ADAM9表达的影响

目的：探讨HDGF基因特异性siRNA对肝癌细胞系HepG2的增殖能力及ADAM9基因表达的影响.方法：设计并合成HDGF基因特异性的siRNA干扰序列,瞬时转染HepG2细胞.实时荧光定量PCR检测HDGF和ADAM9 mRNA的表达变化;MTT法观察细胞增殖能力的变化.结果：转染48h时HDGF和ADAM9的基因表达抑制最为明显,分别为阴性对照组表达量的7％和5％（P＜0.05）.转染48h时HepG2细胞增殖能力受到明显抑制（P＜0.05）.结论：HDGF siRNA能够显著抑制HDGF和ADAM9基因的表达,降低HepG2细胞的增殖能力.     

苦参碱对人类肝癌细胞HepG2增殖、细胞周期及凋亡的影响

 目的　探讨苦参碱（MT）对人类肝癌细胞株HepG2增殖、细胞周期及凋亡的影响。方法　用不同质量浓度的MT（0.0125、0.025、0.05、0.1、0.2、0.4、0.8、1.6 g／L）对培养的HepG2细胞作用不同时间（24、48、72 h）,用四氮噻唑蓝（MTT） 比色法检测MT对细胞增殖的影响;流式细胞术（FCM）检测MT对HepG2细胞周期及凋亡的影响。结果　质量浓度≥0.1 g／L的MT有抑制HepG2细胞增殖的作用,且作用随药物质量浓度的增加及时间的延长而加强（P＜0.01）。FCM检测分析显示,0.8 g／L MT作用48 h能将HepG2细胞阻滞在G1期[（75.3±6.5）%对（64.1±6.3）%]（P＜0.05）,1.6 g／L MT作用48 h能将HepG2细胞阻滞在G2期[（29.1±9.1）%对（11.6±2.1）%]（P＜0.01）。0.4、0.8、1.6 g／L MT作用12、24、48 h对HepG2细胞都有诱导凋亡作用,且作用随药物质量浓度的增加及作用时间的延长而加强（P＜0.01）。结论　MT能够抑制HepG2细胞的增殖、诱导其凋亡并影响其细胞周期,呈时间和剂量依赖性。MT抗肝癌的机制可能与影响肝癌细胞周期、抑制细胞增殖及诱导凋亡有关。     

Lin28 对肝癌HepG2 细胞5-Fu 敏感性的影响及其分子机制

目的：探讨RNA结合蛋白Lin28 对肝癌HepG2细胞5-氟尿嘧啶（5-Fu）敏感性的影响及其机制。方法：应用pcDNA3.1-Lin28 或si-Lin28 转染HepG2 细胞,采用qPCR及WB法检测转染后HepG2 细胞Lin28 的表达水平,CCK-8 法检测5-Fu 作用后转染细胞增殖活性变化并计算5-Fu 对细胞作用的IC50,流式细胞术检测5-Fu 处理后细胞凋亡情况、WB法检测凋亡相关蛋白的表达变化,qPCR法检测转染后耐药相关miRNA（let-7a 和let-7b）及肿瘤干细胞标记物（Oct4、Nanog和Sox2）的mRNA表达水平。结果：与空载对照组（HepG2/Vector）相比,HepG2/Lin28 组细胞中Lin28 mRNA和蛋白的表达水平均显著升高（P<0.05 或P<0.01）,过表达Lin28 可显著抑制HepG2 细胞对5-Fu 作用的敏感性（IC50明显升高,P<0.05）和增强细胞增殖活性、使细胞凋亡率和凋亡相关蛋白caspase-3 表达明显降低（均P<0.01）。与阴性对照组（si-control）相比,si-Lin28 细胞中Lin28 表达水平显著下降（P<0.01）;敲减Lin28 可使细胞增殖活性及5-Fu 的IC50显著降低（均P<0.01）,凋亡率及凋亡蛋白表达明显增加（P<0.01）。与HepG2/Vector 组比较,HepG2/Lin28 细胞中let-7a、let-7b 及肿瘤干细胞标记物（Oct4、Nanog 和Sox2）的表达水平明显上调（均P<0.01）,而si-Lin28 细胞中let-7a、let-7b 及Oct4、Nanog、Sox2 的表达水平较si-control 组明显下调（均P<0.01）。结论：Lin28 可通过调节miRNAs的表达及肿瘤干细胞的形成从而调节肝癌HepG2细胞对化疗的敏感性,靶向调节Lin28 表达有望成为提高肝癌化疗疗效的手段。     

子宫内膜增生过长与内膜腺癌腺上皮细胞DNA定量分析

本文采用显微分光光度计技术对26例正常子宫内膜、子宫内膜增生过长和子宫内膜腺癌的腺上皮细胞DNA进行定量测定,结果表明:7例囊腺型增生过长细胞核DNA含量与正常增殖期内膜相近;7例腺瘤型增生DNA平均含量介于囊腺型增生与内膜癌之间,其中2例DNA含量及细胞倍体分布与内膜癌相似;8例内膜癌DNA含量显著高于增殖期内膜细胞,非整倍体细胞明显增多。DNA含量的测定能更客观精确地反映内膜细胞的增生、分化程度,并作为探索内膜癌早期诊断的一项指标。     

颅咽管瘤的预后分析

198 2年 1月至 1 993年 2月术后放疗颅咽管瘤 4 4例。 5年生存率为 78 9%。其中 ,成人 1 5例 ,儿童 2 9例。儿童颅咽管瘤与成人的比较 :5年生存率高 ,疗后生存质量差 ,但无统计学差异。儿童颅咽管瘤术后放疗剂量 5 6 1～ 6 0Gy组与 4 5～ 5 6Gy组比较 :5年生存率无差别 ,但疗后闭经 -性功能障碍发生率增加 (P <0 0 5 ) ;疗后生存质量Ⅱ～Ⅲ级的比例明显增加 (P <0 0 1 )。我们建议对儿童颅咽管瘤部分切除术后应给予放疗 ,术后放疗剂量以 4 5～ 5 6Gy/ 5～ 6周为宜。     

食管贲门癌术后胸胃排空障碍的成因和预防

目的探讨食管贲门癌术后胸胃排空障碍的成因和预防措施。方法食管贲门癌手术１５４７例，发生胸胃排空障碍１５例，均为上腹、右胸、左颈吻合。手术方式由术中将食膈孔扩张至４指使胃通过时充分舒张，改为行食膈孔处切断部分膈肌。结果行食膈孔处切断部分膈肌，术后未发生胸胃排空障碍。结论胸胃排空障碍与迷走神经切断致胃解剖位置变化而影响胃十二指肠压力梯度和胃窦部功能及胃泌素分泌的功能有关，也与常规扩张食膈孔后膈肌自行回缩、膈肌重建过紧、胸胃远端呈“Ｓ”型扭曲、幽门位于膈肌以上使十二指肠呈关闭状、胃扭曲和术后粘连等机械性因素有关。     

17例早期贲门癌临床分析

自1978—1984年12月共收集17例贲门癌,占同期贲门癌切除病例(320例)的5％,早期贲门癌在临床上比较少见,如能早期发现、早期诊断、早期治疗,手术切除和五年生存率比进展期高。贲门癌的研究处于初期阶段,文章着重讨论国内外专家对贲门癌范围的认识,笔者使用内窥镜诊断以及外科治疗点滴体会。     

影响贲门癌手术患者预后的相关因素分析

目的：探讨影响贲门癌患者生存时间的影响因素。方法：收集236例贲门癌患者临床资料和随访资料，使用单因素Log-rank检验、Cox比例危险模型对影响预后的因素进行单因素、多因素回归分析。结果：肿瘤长度、淋巴结转移、组织病理学类型和TNM分期对患者的预后有影响。结论：早发现、早治疗是提高患者生存率的关键。     

某电厂周围大气颗粒物提取物的致畸效应

本文以惧某电厂下风顺居民区内的大气颗粒物，经二氯甲烷提取，减压浓缩制成受试物。以１，１０，２０和４０ｍｇ／ｋｇ剂量腹腔注射于妊娠６－１５ｄ的孕鼠，然后按传统致畸试验方法处理。结果发现：所试剂量对孕鼠无毒性，对胚胎产生毒效应，２０和４０ｍｇ／ｋｇ组与对照组有明显差异，并抑制胎仔的正常生长发育，其作用与剂量有关，并在２０和４０ｍｇ／ｋｇ时产生一定的致畸效庆，表现为外观畸形和骨骼发育。     

南澳县食管癌减寿年数指标的分析

广东南澳县是中国食管癌高发区之一。本文作者应用减寿数指标分析了南澳县十年来食管癌死因资料，描述该肿瘤减寿的时间和人群间的分布。     

亲和组化法检测乳腺癌雌,孕激素受体状态的研究

用亲和组化法（半定量分析法）同时检测６７例乳腺癌和良性病变组织印片和石腊切片的ＥＲ／ＰｇＲ状态，二种玻片的ＥＲ阳性、阴性和总符合率分别为８９．５％、９６．６％和９２．５％；双顶阳性（ＥＲ＋／ＰｇＲ＋）、双项阴性（ＥＲ－／ＰｇＲ－）和双项总符合率分别为７５．９％、９２．６％和８２．１％；同种方法检测１５７例随机乳腺癌石腊切片，发现ＥＲ阳性率为５８．６％（９２例）；ＰｇＲ阳性率４８．４％（７６例）．１５７例随访资料提示，受体双项阳性者，其健康良好。乳腺癌分期同ＥＲ／ＰｇＲ状态的比较，ＥＲ＋／ＰｓＲ＋者的Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ期病例分别为３７．５％、４５．３％和１７．２％，无Ⅳ期病例：而ＥＲ－／ＰｇＲ－者则为１３．８％、２２．４％和４３．１％．提示，用亲和组化法测定乳腺癌石腊切片ＥＲ／ＰｇＲ状态有较好的可信性。但对乳腺粘液腺癌和派杰氏病宜用切片或针吸涂片。     

贲门癌手术径路的合理选择

目的 研究贲门癌选择各种手术径路的临床价值。方法 对本组贲门癌患者,术前进行充分的讨论,依据病灶范围、全身情况,选择适合的手术径路施术,对手术彻底性、切除率、切缘阳性率、术后总并发症、吻合口瘘、心肺功能影响等进行分析。结果 本组手术彻底性高,手术切除率为９５％,全胃切除率１２％,淋巴结转移率８４．６％,总并发症８．７％,吻合口瘘０．４％,心血管并发症３％,呼吸系统并发症４．４％,住院死亡率０．４％     

120例大肠癌的外科治疗

目的 讨论大肠癌的诊断和手术治疗.方法 大肠癌诊断遵循肛门指检、钡剂灌肠、纤维结肠镜检查步骤,对急性梗阻性结肠癌患者,除腹部X线片,条件允许可作钡灌肠,明确梗阻部位.采用梗阻近端肠腔充分减压,大量抗菌素溶液冲洗,尽量使吻合口“上空、中松、下通”引流管放过安全期的方法.结果 肛指检查对诊断直肠癌是可靠的,本组15例急性梗阻左半结肠癌作Ⅰ期切除吻合术,无吻合口瘘发生.结论 对便血、大便习惯改变的患者,必须按上述顺序作肛指和其他检查来提高早期诊断和术后五年生存率,按上述方法,急性梗阻性左半结肠癌Ⅰ期切除吻合是安全的.