Nrf2在支气管哮喘豚鼠炎症细胞中调控γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶的表达

目的：探讨核因子相关因子-2(Nrf2)调控γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)在支气管哮喘豚鼠肺泡灌洗液(BALF)炎症细胞中的表达。方法：38只健康雄性豚鼠随机分为对照组（A组）、哮喘组（B组）和地塞米松治疗组（C组），卵蛋白致敏法复制哮喘模型，检测3组豚鼠肺组织匀浆中丙二醛（MDA）浓度，收集BALF，行细胞计数和分类。离心，细胞涂片行免疫细胞化学和原位杂交，检测Nrf2、Bach1、γ-GCS蛋白和mRNA。结果：（1）B组嗜酸性粒细胞数（EOS）比例高于A组和C组；（2）肺组织中MDA浓度B组高于A组和C组；（3）γ-GCS原位杂交A组A值高于B组和C组；Nrf2、Bach1原位杂交A值3组差异无显著；（4）γ-GCS 免疫细胞化学B组A值低于A组；Nrf2细胞核内阳性率 B组低于A组和C组；Bach1细胞核内阳性率B组高于A组和C组；（5）γ-GCS mRNA表达（A值）与Nrf2核内阳性率呈正相关，与Bach1核内阳性率呈负相关；B组BALF 中γ-GCS mRNA表达（A值）与EOS比例呈负相关。结论：支气管哮喘豚鼠体内存在氧化/抗氧化失衡，炎症反应使γ-GCS在豚鼠支气管哮喘炎症细胞中的表达降低，地塞米松可以通过调节Nrf2/Bach1核转位而增加γ-GCS表达。     

支气管哮喘豚鼠BALF炎症细胞中PPARγ、Nrf2和γ-GCS-h表达的变化

目的:研究支气管哮喘急性发作豚鼠肺泡灌洗液(BALF)炎症细胞中PPARγ、Nrf2和γ-GCS-h表达变化并探索PPARγ对Nrf2/γ-GCS-h作用。方法:40只健康雄性豚鼠随机化原则分成对照组(A组)、哮喘组(B组)、地塞米松组(C组)和罗格列酮组(D组),每组10只豚鼠,卵蛋白致敏法复制哮喘模型。收集BALF,行细胞计数和分类,离心,上清液行活性氧(ROS)和丙二醛(MDA)浓度测定,细胞涂片原位杂交检测PPARγ、Nrf2和γ-GCS-hmRNA表达,细胞涂片免疫细胞化学检测PPARγ、Nrf2和γ-GCS-h蛋白表达。结果:B组嗜酸性粒细胞数(EOS)比例高于A组、C组和D组,差异显著(P0.01),BALF中ROS和MDA浓度在B组中最高,4组间差异显著(均P0.05);PPARγ、Nrf2和γ-GCS-hmRNA和蛋白在B组表达最低,4组表达差异显著(均P0.01)。PPARγ与Nrf2/γ-GCS-h表达均呈正相关(均P0.05);γ-GCS-h与Nrf2表达呈正相关(r=0.954,P0.05);哮喘组PPARγ、γ-GCS-h和Nrf2表达均与浸润的嗜酸性粒细胞数呈负相关(均P0.05)。结论:PPARγ和Nrf2/γ-GCS-h在卵蛋白致敏急性支气管哮喘模型BALF炎症细胞中表达均下降;PPARγ可上调Nrf2/γ-GCS-h表达,在抑制炎症反应和氧化应激中发挥重要作用,这可能为支气管哮喘防治开辟新途径。     

支气管哮喘豚鼠肺组织中丝裂原活化蛋白激酶对γ-谷氨酰半胱氨酸合酶的作用

目的： 研究在支气管哮喘豚鼠肺组织中丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路对γ-谷氨酰半胱氨酸合酶（γ-GCS）的影响。方法: 成年雄性豚鼠20只随机分成哮喘组和对照组，每组10只，以腹腔内注射联合雾化吸入卵蛋白复制哮喘模型。测支气管肺泡灌洗液（BALF）细胞总数并进行分类计数；原位杂交和RT-PCR测肺组织中γ-GCS-h mRNA表达；免疫组化测γ-GCS、磷酸化细胞外激活蛋白激酶（p-ERK）、磷酸化c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)和磷酸化 p38（p-p38）在肺组织中的表达;Western blotting 测 p-ERK、p-JNK和p-p38在肺组织中的表达；双酶法测γ-GCS的活性。结果: （1）哮喘组BALF中细胞总数、嗜酸性粒细胞明显多于对照组 (P<0.01)。（2）免疫组化显示肺组织中p-ERK、p-p38、p-JNK和γ-GCS 蛋白质表达哮喘组明显高于对照组（P<0.01）；Western blotting 亦显示肺组织中p -ERK、p-JNK和p-p38 蛋白质表达哮喘组均明显高于对照组。（3)原位杂交和RT-PCR显示在肺组织中γ-GCS-h mRNA 表达哮喘组明显高于对照组(P<0.01)。（4) γ-GCS活性哮喘组明显高于对照组（P<0.01）。（5）直线相关性分析显示：在肺组织中p-ERK、p-p38与γ-GCS-h mRNA、γ-GCS蛋白质呈显著正相关，p-JNK与γ-GCS-h mRNA、γ-GCS蛋白质无明显相关性。结论: 支气管哮喘豚鼠肺中 p-ERK、p-p38、p-JNK和γ-GCS表达均增加；p-ERK和p-p38可能上调γ-GCS表达。     

γ—谷氨酰半胱氨酸合成酶基因及其调控

γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶 (γ GCS)基因由γ GCS HS基因和γ GCS LS基因组成 ,γ GCS HS基因的 5′ 端序列包括很多调控γ GCS HS基因表达的抗氧化剂反应元件。不同的细胞在不同的刺激物下 ,γ GCS两亚单位基因有着不同的表达调控方式     

阻断MEK1上调支气管上皮细胞谷氨酰半胱氨酸合成酶的表达

目的探讨MEK1信号通路与支气管上皮细胞(16-HBE)谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)表达的关系。方法应用MEK1抑制剂PD9805950μmol/L分别孵育16-HBE 2、8、16及24h。用Western印迹方法和荧光定量PCR检测细胞γ-GCS重链蛋白和mRNA的表达。用显色方法检测细胞内谷胱甘肽(GSH)的含量。用Western印迹方法检测细胞c-jun的水平。结果经PD98059孵育4、8、16及24h后,γ-GCS重链蛋白和mRNA的表达和细胞内GSH的含量较对照组均增加。各时间段c-jun表达较各对照组减少。结论在支气管上皮细胞中MEK1抑制剂PD98059对16-HBE的γ-GCS和GSH有明显的上调作用。阻断激活蛋白-1(AP-1)途径不能减少γ-GCS和GSH的合成。     

阻断MEK1上调支气管上皮细胞谷氨酰半胱氨酸合成酶的表达

目的 探讨MEK1信号通路与支气管上皮细胞(16-HBE)谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)表达的关系.方法 应用MEK1抑制剂PD98059 50μmol/L分别孵育16-HBE 2、8、16及24 h.用Western印迹方法和荧光定量PCR检测细胞γ-GCS重链蛋白和mRNA的表达.用显色方法检测细胞内谷胱甘肽(GSH)的含量.用Western印迹方法检测细胞c-jun的水平.结果 经PD98059孵育4、8、16及24 h后,γ-GCS重链蛋白和mRNA的表达和细胞内GSH的含量较对照组均增加.各时间段c-jun表达较各对照组减少.结论 在支气管上皮细胞中MEK1抑制剂PD98059对16-HBE的γ-GCS和GSH有明显的上调作用.阻断激活蛋白-1(AP-1)途径不能减少γ-GCS和GSH的合成.     

γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶基因调控的初步研究

目的研究抗氧化基因——大鼠γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶（γ-GCS）基因的功能区及其调控表达。方法克隆1．76kb大鼠γ-GCS基因的重链亚单位——GCLC基因的上游调控序列，并构建含荧光素酶基因的报道载体GCLC—Luc（GCLC／pGL-3）。利用嵌顿缺失方法构建GCLC基因的缺失体，并将其表达载体转染大鼠肺泡上皮细胞，在细胞中分析该基因的调控区域。通过该方法初步发现GCLC基因的上游调控序列的-745～-705bp属负性调控区域。利用EMSA和supershift证实大鼠肺泡上皮细胞GCLC基因负调控区域的E—box元件能与转录因子USF1／USF2特异性的结合。将USF的真核表达载体和逆转录病毒表达载体分别导入肺泡上皮细胞，观察GCLC基因的转录活性和GCLC蛋白的表达情况。结果GCLC基因的-403～-111bp和-705～-613bp区段属正调控区域；-745～-705bp属负调控区域。EMS和supershifl证实上游刺激因子（USF）能与该负调控区域的E—box元件结合抑制GCLC基因的转录和表达。结论发现GCLC基因其中2个正调控区域（-403～-111bp与-705～-613bp）和1个负调控区域（-745～-705bp），其中负调控区域-745～-705bp上的E—box元件通过与USF结合介导GCLC基因的负性表达调控。     

香烟烟雾提取物经aPKC√ζ-NRF2上调大鼠气道上皮细胞γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶表达

目的 观察香烟烟雾提取物（CSE）是否通过不典型蛋白激酶Cι/ζ (aPKCι/ζ) -红系衍生的核因子相关因子2（NRF2）信号通路调控大鼠气道上皮细胞γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶（γ-GCS）。方法 用Western blot法检测γ-GCS、NRF2和p-aPKCι/ζ蛋白,免疫细胞化学法观察γ-GCS蛋白表达,反转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测γ-GCS mRNA,免疫荧光法检测NRF2蛋白。结果 NRF2蛋白在CSE 3h组主要表达在胞核,其胞核蛋白高表达。p-aPKCι/ζ蛋白在CSE 3h组显著高于对照组（P＜0.05）。γ-GCS蛋白及其mRNA在CSE 3h组较对照组显著增强（P＜0.05）。预先加入aPKCι/ζ抑制剂RO813220,NRF2胞质蛋白表达增强,p-aPKCι/ζ蛋白、γ-GCS蛋白及其mRNA均明显低于CSE 3h组（均P <0.05）。相关性分析显示NRF2与γ-GCS、p-aPKCι/ζ呈正相关,p-aPKCι/ζ与NRF2、γ-GCS呈正相关（P＜0.05）。结论 CSE可能通过aPKCι/ζ-NRF2调节γ-GCS表达。     

γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶基因调控的初步研究

目的 研究抗氧化基因--大鼠γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)基因的功能区及其调控表达.方法 克隆1.76 kb大鼠γ-GCS基因的重链亚单位--GCLC基因的上游调控序列,并构建含荧光素酶基因的报道载体GCLC-Luc (GCLC/pGL-3).利用嵌顿缺失方法构建GCLC基因的缺失体,并将其表达载体转染大鼠肺泡上皮细胞,在细胞中分析该基因的调控区域.通过该方法初步发现GCLC基因的上游调控序列的-745～-705 bp属负性调控区域.利用EMSA和supershift证实大鼠肺泡上皮细胞GCLC基因负调控区域的E-box元件能与转录因子USF1/USF2特异性的结合.将USF的真核表达载体和逆转录病毒表达载体分别导入肺泡上皮细胞,观察GCLC基因的转录活性和GCLC蛋白的表达情况.结果 GCLC基因的-403～-111 bp和-705～-613 bp区段属正调控区域;-745～-705 bp属负调控区域.EMS和supershift证实上游刺激因子(USF)能与该负调控区域的E-box元件结合抑制GCLC基因的转录和表达.结论 发现GCLC基因其中2个正调控区域(-403～-111 bp与-705～-613 bp)和1个负调控区域(-745～-705 bp), 其中负调控区域-745～-705 bp上的 E-box元件通过与USF结合介导GCLC基因的负性表达调控.     

aPKC及ERK在慢性阻塞性肺疾病大鼠中对NRF2-γ-GCS的调控作用

目的: 探讨慢性阻塞性肺疾病（COPD）大鼠模型中非典型蛋白激酶C(aPKC)、细胞外信号调节激酶(ERK)对红系衍生的核因子2相关因子2（NRF2）-γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶（γ-GCS）的调控。方法: 雄性Wistar大鼠16只，随机分COPD模型组和对照组。检测γ-GCS活性，γ-GCS的基因表达和NRF2、磷酸化的aPKC（p-aPKC_ι/ζ）、磷酸化的ERK（p-ERK）的蛋白质表达。结果: （1）γ-GCS 活性在COPD组中明显高于对照组。（2）γ-GCS mRNA广泛高表达于COPD组支气管平滑肌细胞，而对照组在相应部位呈弱表达。对照组肺匀浆中有一定量γ-GCS mRNA表达，但相对于COPD组仍较低。（3） p-aPKC、p-ERK、NRF2、γ-GCS在COPD组支气管上皮细胞胞浆中高表达,而对照组相应部位呈弱表达。COPD组γ-GCS和p-aPKC、p-ERK、NRF2蛋白表达皆有明显上调。（4）NRF2蛋白表达与γ-GCS蛋白、mRNA表达呈正相关,p-aPKC_ι/ζ、p-ERK与NRF2蛋白表达也呈正相关。结论: aPKC、ERK可能通过使NRF2转录活性增加的方式上调NRF2，进而上调γ-GCS的表达，在COPD的氧化应激机制中可能起重要作用。     

转化生长因子β1对香烟诱导的大鼠肺泡巨噬细胞γ-谷氨酰半胱氨酸合酶表达的影响

目的：探讨转化生长因子（TGF）-β1对香烟诱导的大鼠肺泡巨噬细胞γ-谷氨酰半胱氨酸合酶（γ-GCS）和活化蛋白(AP)-1亚单位c-fos mRNA及其蛋白表达的影响。方法:通过支气管肺泡灌洗获取大鼠肺泡巨噬细胞，随机分为对照组、香烟组和TGF-β1组。TGF-β1组加入终浓度为3 μg/L的TGF-β1,2 h后除对照组外，余2组均加入香烟烟雾提取物,对照组加入磷酸盐缓冲液。分别用逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）和免疫细胞化学方法检测肺泡巨噬细胞中γ-GCSh(重链亚单位)及c-fos mRNA和蛋白的表达。结果:香烟组γ-GCSh和c-fos mRNA及其蛋白表达水平显著高于对照组(分别P<0.05,P<0.01)。TGF-β1组γ-GCSh mRNA及其蛋白表达水平明显低于香烟组(均P<0.01)；而c-fos mRNA及其蛋白表达水平明显高于香烟组(均P<0.01)。结论:转化生长因子-β1参与香烟所致慢性阻塞性肺疾病肺氧化/抗氧化失衡的发病机制。     

慢性阻塞性肺疾病大鼠中磷酸化蛋白激酶B与γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶的表达研究

目的通过观察慢性阻塞性肺疾病（COPD）大鼠模型中γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶（γ-GCS）与磷酸化蛋白激酶B（p-PKB）的表达,研究p-PKB和γ-GCS在COPD中可能的参与机制。方法28只健康雄性Wistar大鼠随机分为COPD组和对照组。采用每日熏香烟和两次气管内注入脂多糖（LPS）法制作COPD大鼠模型。检测肺组织中1-GCS活性,原位杂交检测肺组织中γ-GCS mRNA的表达,免疫组化和Western印迹分析肺组织中γ-GCS与p-PKB蛋白水平。结果γ-GCS活性在COPD组大鼠中明显高于对照组,组间差异有统计学意义（P〈0．05）。原位杂交显示COPD组大鼠支气管、肺泡上皮细胞与小动脉平滑肌细胞γ-GCS mRNA广泛表达,与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。COPD组大鼠γ-GCS与p-PKB免疫组化可见肺泡、支气管壁细胞及小血管平滑肌细胞胞浆有较强蛋白阳性信号;图像定量分析显示COPD组γ-GCS与p-PKB蛋白表达高于对照组,两组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。Westernblot显示,γ—GCS与p-PKB在COPD组蛋白表达高于对照组,且差异有统计学意义（P〈0．05）。SPSS10．0直线相关分析得出p-PKB蛋白表达与γ-GCS活性、mRNA及蛋白表达呈正相关。结论COPD大鼠肺组织1．GCS蛋白和mRNA表达增高,p-PKB蛋白也有相应高表达,提示p-PKB和γ-GCS可能在COPD的发病机制中起作用,且PKB可能参与了γ-GCS的信号转导。     

Nrf2对香烟烟雾提取物诱导的人支气管上皮细胞中IKKs表达的影响

目的:探讨香烟烟雾提取物(cigarette smoke extract,CSE)刺激后人支气管上皮细胞中核因子E2相关因子2(nuclear factor E2-related factor 2,Nrf2)的表达与IκB激酶家族(I kappa B kinases,IKKs)的关系。方法:培养人支气管上皮细胞,分为正常对照(control)组、CSE组、15-脱氧-前列腺素J2(15-deoxy-prostaglandin J2,15dPGJ2)预处理后CSE刺激(15d-PGJ2+CSE)组和Nrf2 siRNA转染后CSE刺激(Nrf2 siRNA+CSE)组。首先通过CSE刺激人支气管上皮细胞,再通过15d-PGJ2预处理和Nrf2 siRNA转染的方法来增加和降低Nrf2的水平,并用RT-PCR法及Western blot法观察各组细胞Nrf2与IKKs的表达。结果:支气管上皮细胞在CSE的刺激下,Nrf2和IKKα/β的mRNA表达水平均明显升高,蛋白表达水平亦明显增高(P0.05)。在支气管上皮细胞中,15d-PGJ2预处理可增加Nrf2的表达,而Nrf2 siRNA可成功抑制Nrf2的表达。Nrf2表达增加伴有IKKα/β表达明显降低;而Nrf2表达被抑制后,IKKα/β表达明显增加(P0.05)。这些变化在转录水平和翻译水平是一致的。结论:Nrf2能抑制CSE诱导的人支气管上皮细胞中IKKs的表达。     

PPARγ影响γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶活性及表达在大鼠慢性阻塞性肺疾病中的作用

目的： 探讨过氧化物酶体增生物激活受体γ(PPARγ)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)活性及表达的影响,及在COPD发病中的作用。方法：用每天熏香烟和2次气管内滴入脂多糖（LPS）法制作大鼠COPD模型,同时利用PPARγ激活剂罗格列酮(RGZ)对其进行干预,测定3组大鼠肺功能和病理变化结果;并检测3组大鼠肺内ROS含量和γ-GCS活性;应用免疫组化、免疫印迹(Western blotting)、原位杂交和逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测PPARγ、γ-GCS mRNA及蛋白在3组大鼠肺组织中的表达情况。结果：RGZ干预组大鼠肺功能指标（FEV0.3、FEV0.3/FVC%与PEF）均较COPD组明显好转;光镜下COPD组肺组织病理变化符合COPD的特征性改变,RGZ干预组肺组织病理变化较COPD组显著减轻;RGZ干预组ROS含量较COPD组显著减少,而γ-GCS活性较COPD组升高;PPARγ、γ-GCS mRNA及其蛋白质表达在COPD组均较对照组明显增高（均P<0.01）,而在RGZ干预组均较COPD组增高（均P<0.0５）;直线相关分析显示PPARγ蛋白与γ-GCS活性呈正相关(r=０.634,P<0.01),与ROS含量无明显相关性(r=0.214, P>0.05);PPARγ蛋白与γ-GCS蛋白及mRNA表达呈正相关（r=0.553、r=0.442, 均P<0.01）。结论：RGZ活化PPARγ可减轻COPD氧化/抗氧化失衡程度,对COPD的防治起重要作用;另外,PPARγ可能通过减少肺内ROS的产生,增强γ-GCS活性及其基因表达而在COPD中起重要的抗氧化保护作用。     

转录因子Nrf2/Bach1及MAPK激酶调控γ-GCS在大鼠慢性阻塞性肺疾病中的作用

目的： 研究转录因子红系衍生核因子相关因子-2(Nrf2)及 BTB-CNC异体同源体1(Bach1)在慢性阻塞性肺疾病大鼠肺组织中的表达,探索其感受氧化应激调控谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)表达的可能机制。方法: 复制慢性阻塞性肺疾病（COPD）模型,通过免疫组化、Western blotting、逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）技术研究肺组织Nrf2、Bach1、γ-GCS　mRNA及其蛋白和p-ERK、p-p38、p-JNK蛋白的表达。结果： 免疫组化结果显示COPD组p-ERK、p-p38、γ-GCS、Nrf2蛋白水平较对照组升高（P<0.01）,而Bach1、p-JNK蛋白水平无差异（P>0.05）;Western blotting结果显示COPD组p-ERK、p-JNK、Nrf2核蛋白质水平较对照组升高（P<0.01）,Bach1、p-p38浆蛋白水平较对照组升高(P<0.01）而Bach1 核蛋白水平较对照组降低(P<0.01）;RT-PCR结果显示,COPD组Nrf2、 Bach1 mRNA水平较对照组无差异（P>0.05）, 而γ-GCS mRNA水平升高（P<0.01）;直线相关分析结果表明,γ-GCS mRNA表达水平与Nrf2、p-ERK、p-p38总蛋白质水平,Nrf2、p-ERK、p-JNK核蛋白水平和Bach1、p-p38浆蛋白质水平均呈正相关（P<0.01）,而与Bach1 核蛋白质水平呈负相关（P<0.01）;Nrf2 核蛋白质水平与p-ERK、p-JNK核蛋白水平呈正相关（P<0.01）,而Bach1 核蛋白质水平与p-ERK、p-JNK核蛋白水平呈负相关（P<0.01）。结论: 在慢性阻塞性肺疾病的发病过程中转录因子Nrf2 /Bach1可能在核内竞争反向调节抗氧化基因γ-GCS的表达; 信号转导蛋白p-ERK、p-JNK在调控Nrf2 /Bach1核内平衡中起重要作用,且调控主要发生在转录后水平;γ-GCS可能还存在其它转录调节机制。     

磷脂酰肌醇-3激酶、蛋白激酶B及γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶在慢性阻塞性肺疾病患者中的表达

目的观察慢性阻塞性肺疾病（COPD）患者中磷脂酰肌醇-3激酶（H3K）、蛋白激酶B（PKB）与γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶（γ-GCS）的表达,研究P13K、PKB通路和γ-GCS的关系。方法将手术切馀的肺癌患者肺组织标本（16例）分为COPD组和对照组,每组8例,检测肺组织中γ—GCS活性,原位杂交检测肺组织中γ-GCSmRNA的表达,免疫组化分析肺组织中H3K、PKB与γ-GCS的蛋白水平。结果COPD组中1．GCS活性明显高于对照组,差异有统计学意义（P〈0．01）。原位杂交显示COPD组支气管、肺泡上皮细胞与小动脉平滑肌细胞γ-GCSmRNA广泛表达,与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。P13K、PKB与γ-GCS免疫组化在COPD组可见肺泡、支气管壁细胞及小血管平滑肌细胞胞浆中皆有蛋白阳性信号表达,图像定量分析显示COPD组H3K、PKB与γ—GCS蛋白表达显著高于对照组,差异有统计学意义（P〈0．01）。直线相关分析得出H3K、P-PKB蛋白表达与γ-GCS活性、mRNA及蛋白表达呈正相关。结论COPD患者肺组织γ-GCS蛋白和mRNA表达增高,P13K、p-PKB蛋白也有相应高表达,提示P13K、PKB和γ-GCS可能在COPD的发病机制中发挥作用,且可能参与了γ-GCS的信号传导通路。     

三白草酮通过调控海马Nrf2/HO-1表达减少酒精戒断大鼠抑郁样行为

目的：探讨三白草酮(sauchinone,Sau)对酒精戒断大鼠抑郁样行为可能的影响及其机制。方法：取成年雄性Sprague-Dawley大鼠,随机分为正常对照组、酒精戒断模型组、低剂量Sau治疗组和高剂量Sau治疗组,每组8只。正常对照组腹腔注射等体积生理盐水,其余3组每日1次腹腔注射酒精3 g/kg,连续28 d,然后戒断3 d诱导酒精戒断模型。在戒断期间,Sau低、高剂量治疗组分别每日1次腹腔注射5和25 mg/kg Sau,连续3 d。末次给药30 min后通过蔗糖偏好实验、悬尾实验(tail suspension test,TST)和强迫游泳实验(forced swimming test,FST)检测大鼠行为学变化;采用商品化试剂盒测定海马组织中总超氧化物歧化酶(total superoxide dismutase,T-SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)和谷胱甘肽(glutathione,GSH)水平;Western blot检测海马核因子E2相关因子2(nuclear factor E2-related fac...     

NGF在哮喘豚鼠支气管肺泡灌洗液细胞中的表达

为了通过对神经生长因子和支气管肺泡灌洗液细胞在哮喘发病中的作用的研究进而探讨哮喘的神经免疫调节机制 ,本研究应用免疫组织化学方法研究了哮喘豚鼠支气管肺泡灌洗液细胞中神经生长因子的表达变化。结果发现 ,哮喘豚鼠神经生长因子阳性嗜酸细胞和淋巴细胞百分率明显增加 ( P<0 .0 1,P<0 .0 5 ) ;肺泡巨噬细胞绝对数量增加 ,神经生长因子表达也明显上调 ( P<0 .0 1) ,且呈 NGF阳性反应的小型肺泡巨噬细胞数量大大多于大型肺泡巨噬细胞。提示 ,气道炎症细胞内的神经生长因子可能参与哮喘发病的病理生理过程     

白芍总苷调控Nrf-2/HO-1信号通路对支气管哮喘小鼠气道重塑的影响

目的：探究白芍总苷（TGP）对支气管哮喘模型小鼠气道重塑的影响及潜在机制。方法：将50只小鼠随机分为对照组（Control组）、模型组（OVA组）、TGP低剂量组（TGP-L,460 mg/kg）、TGP高剂量组（TGP-H,920 mg/kg）、TGP+ML385组（TGP 920 mg/kg+ML385 30 mg/kg），每组10只。采用卵清白蛋白（OVA）致敏和激发两个阶段建立哮喘小鼠模型。在每次激发前1 h,TGP各剂量组灌胃相应剂量的TGP混悬液，TGP+ML385组给予30 mg/kg的ML385和920 mg/kg的TGP灌胃，连续给药8周，实验过程中观察各组小鼠的行为学变化，最后一次激发24 h后收集支气管肺泡灌洗液（BALF）,ELISA检测BALF中TGF-β1、半胱氨酰白三烯1(CysLT1)、半胱氨酰白三烯受体1(CysLTR1)水平；检测肺匀浆中总抗氧化能力（T-AOC）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、过氧化氢酶（CAT）活性；HE和AB-PAS染色观察肺组织病理学变化；RT-qPCR检测肺组织TGF-β1、基质金属蛋白酶9(...     

吸烟对大鼠肺内谷胱甘肽与γ-GCS的影响及乙酰半胱氨酸的干预作用

 探讨被动吸烟对SD大鼠BALF中谷胱甘肽浓度（GSH）和肺组织中γ-GCS表达的影响以及乙酰半胱氨酸NAC的干预作用。 方法：SD大鼠被分成吸烟、吸烟同时加用NAC和单纯吸烟3组，分别采用GSH 特异性的 DTNB-GSH还原酶循环法及免疫组化的方法检测GSH浓度及γ-GCS的表达水平。 结果：单纯被动吸烟大鼠肺BLAF中GSH水平较对照和加用NAC组明显升高（P＜0.05）。肺组织内γ-GCS阳性染色明显增强；吸烟与吸烟同时服用NAC组比较没有显著区别（P＞0.05）。 结论：被动吸烟促进SD大鼠肺内GSH和γ-GCS表达，这可能是机体的一种自我代偿反应；NAC对吸烟导致的气道炎症具有一定的保护作用。