IL-1β对RAW264.7细胞表达IL-4mRNA,GATA-3mRNA的影响

目的 探讨IL-1β对RAW264.7细胞表达IL-4,GATA-3mRNA的影响.方法 常规培养RAW264.7细胞后进行干预,A组：IL-1β（0mg/L,1mg/L,10mg/L,20mg/L）刺激细胞1h,B组：IL-1β（10mg/L）刺激0h,30min,1h,3h,6h,C组：IL-1β（10mg/L）刺激0h,30min,1h,1.5h,2h,采用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）分别检测IL-4,GATA-3mRNA的表达.结果 IL-Iβ刺激RAW264.7细胞不同浓度、不同时间与空白对照组比较IL-4,GATA-3mRNA的表达增高（P＜0.05）;IL-1β（10mg/L）刺激RAW264.7细胞1h时,IL-4mRNA的表达量最高,1.5h时GATA-3mRNA的表达量最高.结论 IL-1β在RAW264.7细胞中促进IL-4,GATA-3mRNA的表达呈浓度、时间依赖性,提示IL-1β通过促进单核巨噬细胞分泌IL-4,GATA-3,诱导Th2型细胞分化,促进和加重哮喘的慢性炎症.     

前列腺素E2对重症急性胰腺炎大鼠血清IL-10和IL-1β的影响

目的 :探讨前列腺素E2 (PGE2 )对重症急性胰腺炎大鼠血清IL 1β和IL 10调节作用。 方法 :SD大鼠 91只随机分为 4组 :假手术组 (n =7) ,ANP组 ,PGE2 前、后干预组 (后三组每组 2 8只 ,分别随机分为 1h、3h、6h、12h时段组 ,n =7)。大鼠ANP模型用 5 %牛磺胆酸钠制备。前干预组在ANP诱导前 2h肌肉注射 15 0μg·kg-1PGE2 ,后干预组在ANP模型完成时即刻肌肉注射 15 0 μg·kg-1PGE2 。采用ELISA检测各组不同时段大鼠血清IL 10与IL 1β含量 ,观察PGE2 前、后干预对大鼠血清IL 10与IL 1β的调节作用。 结果 :PGE2 前、后干预组大鼠血清IL 10峰值分别位于 3h和 6h时段 ,均显著高于ASP组 (P <0 .0 0 1) ;前、后干预组所有时段大鼠血清IL 1β均比ASP组降低 (P <0 .0 0 1) ,差异有显著性 ;前干预组 3h时段IL 10峰值 (2 31pg/ml)比后干预组IL 10相应时段 (2 0 9pg/ml)高 (P <0 .0 1) ,差异有显著性 ;6h时段IL 10 (5 4.0 7pg/ml )比后干预组 (118.2 6pg/ml)低 ,差异有显著性 (P <0 .0 0 1)。前干预组 1～ 6h时段大鼠血清IL 1β均显著低于后干预组 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 0 1)。结论 :PGE2 能上调大鼠血清IL 10 ,并降低IL 1β含量。     

前列腺素E2对人肝癌细胞β1-integrin表达调控及相关机制的研究

目的:阐明前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)通过EP1受体上调肝癌细胞Huh-7中β1-integrin的表达及其相关的信号转导通路?方法:用PGE2?EP1受体激动剂(17-PT-PGE2)?EP1受体抑制剂SC19220?NF-κB抑制剂PDTC处理Huh-7细胞,通过Western blot?免疫荧光组织化学实验等方法检测β1-integrin蛋白表达水平和NF-κB的活性?结果:5 μmol/L的PGE2处理Huh-7细胞24 h后,β1-integrin的表达水平与对照组相比上升了129.48% (P < 0.01),5 μmol/L EP1受体激动剂17-PT-PGE2处理使细胞β1-integrin的蛋白表达水平升高了216.34%(P < 0.01)?10 μmol/L的EP1受体抑制剂SC19220处理后β1-integrin表达水平与PGE2组相比下降了34.51%(P < 0.05)?免疫荧光组织化学实验显示17-PT-PGE2处理Huh-7细胞120 min后,NF-κB核表达水平明显增加;Western blot实验显示5 μmol/L 17-PT-PGE2处理Huh-7细胞120 min后,磷酸化NF-κB-p65上升了209.27%(P < 0.01)?NF-κB抑制剂PDTC处理Huh-7细胞后β1-integrin蛋白表达水平与EP1受体激动剂组相比降低了63.49%(P < 0.01)?结论:PGE2可通过EP1受体上调Huh-7细胞中β1-integrin的表达,此调节作用可能与NF-κB信号转导通路有关?     

对乙酰氨基酚对发热大鼠下丘脑中前列腺素E2受体的影响

目的 观察对乙酰氨基酚对发热大鼠下丘脑中前列腺素E2受体EP1、EP4 mRNA表达的影响，进一步探讨对乙酰氨基酚的新作用靶点和解热机制。方法健康成年雄性SD大鼠24只，随机分为3组：①正常组；②发热组；③对乙酰氨基酚组．8只，组。发热组与对乙酰氨基酚组大鼠皮下注射20％酵母混悬液（10ml／kg）造发热模型；造模1h后，对乙酰氨基酚组按0．6g/kg灌肠给药，发热组则灌肠给予等量生理盐水；给药后4h取大鼠下丘脑组织备用。用实时荧光定量聚合酶链反应检测各组大鼠下丘脑中EP1、EP4受体mRNA表达的相对差异。结果：与发热组比，对乙酰氨基酚组的EP1、EP4受体mRNA相对表达量减少（P〈0．05或P〈0．01）。结论 对乙酰氨基酚能抑制发热组大鼠下丘脑中前列腺素E受体EP1、EP4 mRNA的表达。     

模拟高原急性缺氧对大鼠下丘脑神经肽Y受体Y1 mRNA表达的影响

目的探讨高原急性缺氧对大鼠食欲及其下丘脑神经肽Y受体Y1mRNA表达的影响.方法雄性Wistar大鼠随机分为平原对照组、3 000 m缺氧组、4 000 m缺氧组,5 000 m缺氧组和6 000 m缺氧组,各缺氧组设置缺氧后1、2、3 d 3个时相点,观察低氧环境下大鼠食欲的变化;采用RT-PCR方法检测大鼠下丘脑中Y1受体mRNA的表达.结果①高原急性缺氧后,大鼠食欲减退.②对照组和缺氧组大鼠下丘脑中均存在Y1受体mRNA表达.高原急性缺氧后,下丘脑Y1受体mRNA表达降低,并随着海拔高度的上升和缺氧时间的延长逐渐降低.结论高原急性缺氧对大鼠食欲有抑制作用;高原急性缺氧后下丘脑Y1受体mRNA表达降低,这可能是大鼠食欲减退的重要原因之一.     

针刺对脑出血大鼠IL-1β表达的影响

目的:探讨针刺头部腧穴对脑出血大鼠白介素-1β(IL-1β)表达的影响.方法:选取健康雄性Wistar大鼠160只,先随机分为3个组:模型对照组(简称模型组),模型十针刺组(简称针刺组),模型十脑复康组(简称脑复康组),每组50只大鼠,每组又分为术后6小时、1天、3天、7天5个时相点,每个时相点10只大鼠,制备脑出血模型,另设10只正常大鼠作为空白对照组(简称正常组).在光镜下观察各组大鼠脑组织形态学改变.运用免疫组化及原位杂交的检测方法,观察不同时相点针刺对脑出血大鼠IL-1β的表达.结果:针刺组及模型组大鼠IL-1β阳性细胞数及阳性细胞平均光密度值随不同时相点的变化而逐渐增加,至3天时达高峰,7天时有所下降.在相同时相点,针刺组与模型组比较,IL-1β表达均明显低于模型组,两者比较差异有统计学意义(p<0.01).结论:针刺头部腧穴能够抑制脑出血大鼠血肿周围脑组织IL-1β的表达.     

转化生长因子-β1、β3及其受体βRI、βRII mRNA及蛋白在子宫肌瘤组织中的表达

人体内卵巢雌孕激素通过局部的生长因子以自分泌或旁分泌的形式调节肌瘤细胞的生长和分化 ,转化生长因子 β(transforminggrowthfactor β ,TGF β)是备受关注的一种。其在哺乳动物中存在 3种形式 ( β1、β2、β3)及 3种受体 (Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型 )。人体组织纤维化、免疫抑制、肿瘤发生以及其他功能失调均与TGF β1、TGF β3行为异常有关。本研究通过免疫组织化学、原位杂交 2种方法 ,分别从基因和蛋白水平上了解TGF β1、TGF β3及其受体TGF βRⅠ、TGF βRⅡ在子宫肌瘤及邻近健康肌层中的表达 ,初步探讨TGF β1、TGF β3及其受体…     

前列腺素E1对梗阻性肾病中TGF-β1和CTGF表达的影响的实验研究

目的:探讨前列腺素E1对梗阻性肾病中转化生长因子-β1和结缔组织生长因子表达的影响。方法:60只Wistar大鼠,随机分为PGE1治疗组、生理盐水组和假手术组,然后制作梗阻性肾病动物模型,最后在光镜下观察肾脏组织的病理学改变;采用免疫组化法检测肾脏的TGF-β1和CTGF的表达,分析肾脏纤维化与TGF-β1和CTGF的表达之间的相关性。结果:①生理盐水组和PGE1治疗组大鼠的间质纤维化的程度均高于假手术组(P<0.05),大鼠肾组织TGF-β1和CTGF表达高于假手术组(P<0.05),且与Masson染色结果呈正相关关系;②PGE1组以上各项指标均低于生理盐水组。结论:PGE1可以抑制TGF-β1、CTGF的表达,减轻肾间质纤维化,从而防治梗阻性肾病。     

稳定表达β1、β2及β3肾上腺素受体细胞株的鉴定

目的:对稳定转染有携带入β1、β2或β3肾上腺素受体基因质粒的CHO-K1细胞(β1-CHO、β2-CHO和β3-CHO细胞)进行鉴定,以为将这几种细胞用于β3肾上腺素受体激动剂的筛选奠定基础.方法:采用免疫细胞化学、免疫荧光、western blott 和放射性配体结合法对3种细胞进行鉴定.结果:β1-CHO、β2-...     

前列腺素E2受体EP3在AngⅡ-AT1信号转导通路中的作用

目的 研究前列腺素E2活性受体EP3在AngⅡ信号转导通路中的作用.方法 通过培养稳定传代的LVIP2.0Zc细胞,分别转染进AT1受体和EP3受体的DNA质粒,以不同浓度的AngⅡ和sulprostone对转染后的细胞进行刺激,用荧光标记法检测细胞内游离钙离子的浓度变化.结果 仅转染了AT1受体DNA质粒的细胞,在AngⅡ的刺激下,钙离子浓度呈剂量依赖性上升.在细胞共同转染了AT1受体和EP3受体DNA质粒后,细胞内游离钙离子浓度随AngⅡ剂量的增加而增加,再加入sulprostone后,随药液浓度的增加,细胞内钙离子浓度在原有已升高基础上继续上升,P＜0.001,有统计学差异.结论 前列腺素E2受体EP3可正向调节血管紧张素Ⅱ与AT1受体结合导致钙离子增加的信号转导路径.     

鼻咽癌患者血清VCAM-1表达及其与IL-1β、IL-4等细胞因子的关系

目的:观察鼻咽癌患者血清血管内皮细胞粘附因子-1(VCAM-1)和IL-Iβ、IL-2、IL-4、IL-10表达,了解鼻咽癌患者血清VCAM-1表达规律及其与诱导因子IL-1β、IL-4的关系;获得有关鼻咽癌免疫环境的信息.方法:用ELISA方法检测34例鼻咽癌患者和13例慢性鼻咽炎患者血清标本中VCAM-1、IL-lβ、IL-2、IL-4和IL-10浓度.结果:鼻咽癌患者血清VCAM-1水平明显高于慢性鼻咽炎组(P=0.045);临床晚期明显低于早期(P=0.045),且随肿瘤体积增大而降低(P=0.002);鼻咽癌患者血清VCAM-1水平与IL-Iβ、IL-4无明显相关(P-0.101和0.116);血清IL-1β、IL-4和IL-10水平在鼻咽癌和慢性鼻咽炎组间元显著性差异;鼻咽癌组血清IL-2水平明显高于慢性鼻咽炎组(P=0.037),且随肿瘤体积增大而升高(P-0.002),但当出现淋巴结转移时则明显降低(P=0.018).结论:鼻咽癌患者血清VCAM-I升高是一临床早期事件;鼻咽癌患者血清VCAM-1变化与IL-1B、IL-4无明显关系;IL-4和IL-10指标在鼻咽癌和鼻咽炎组间无明显变化,显示Th2主导的体液免疫在鼻咽癌形成和发展过程中无明显激活迹象;IL-2指标的变化提示鼻咽癌细胞可能有较强的刺激细胞免疫作用.     

IL-1β及其Ⅰ型受体在大鼠肺纤维化发生过程中的动态表达

目的：观察大鼠肺纤维化发生中IL-1β及其Ⅰ型受体（IL-1RⅠ）的动态表达。方法：采用气管内注入博莱霉素制备肺纤维化模型,设正常组、模型组和甲强龙组,于第1、3、7、14、28天分批处死大鼠,观察各组大鼠各期病理切片,检测肺泡灌洗液及血清中IL-1β和其Ⅰ型受体的含量。结果：模型组早期肺泡炎症明显,后期肺组织实变。灌洗液及血清中IL-1β于7d时达峰值,14d时显著下降,28d时回到正常水平,Ⅰ型受体的表达规律与IL-1β相同。结论：IL-1β及其Ⅰ型受体在肺纤维化早期呈现短暂的表达高峰,提示其可能在肺纤维化发生的早期起关键作用。     

IL-1β反义RNA表达载体的构建及对肝癌细胞中IL-1β水平的影响

目的构建小鼠IL-1β反义RNA表达载体，观察对肝癌细胞中IL-1β表达的阻断效果。方法提取细胞总RNA，RT-PCR扩增IL-1β1和IL—1β2，将其反向连接到肝癌组织特异性表达载体PafpIRES2-EGFP，构建Pafp IRES2-antilIL-1β1和PafpIRES2-antiIL-1β2反义RNA表达载体，利用jetPEI转染H22肝癌细胞和YAC-1淋巴细胞，荧光显微镜下观察反义RNA载体的表达，RT—PCR方法分析H22细胞中IL-1β表达水平的变化。结果RT—PCR扩增到两条长度分别为264和284bp的片段，与IL-1β1和IL—1β2相符，将其反向与Pafp IRES2-EGFP连接，经菌落PCR和DNA序列分析证实，获得了PafpIRES2-antiIL-1β1和Pafp IRES2-antiIL-1β2反义RNA表达载体。上述载体转染H22细胞后，荧光显微镜下可见细胞表达出明亮绿色荧光，而YAC-1细胞则未见荧光。RT—PCR分析证实转染反义RNA后H22细胞中IL-1β表达水平明显下降，尤以IL-1β2反义RNA的阻断效果更为显著。结论成功构建了小鼠IL-1β肝癌细胞特异性反义RNA表达载体PafpIRES2-antiIL-1β1，PafpIRES2-antiIL—1β2，两载体能有效地阻断肝癌细胞中IL-1β的表达。     

原位杂交法检测胃癌组织中IL-6及其受体mRNA的表达

胃癌是最常见的癌肿之一,应用原位杂交技术检测胃癌组织中IL—6及其受体mRNA的表达情况,具有灵敏度高、特异性强的特点,而且较直观地在组织原位和转录水平对标本中IL—6及其受体进行研究,这使得形态学观察与功能学检测相结合,更能反映胃粘膜不同病变细胞分泌IL—6及其受体的情况。     

不同麻醉方式对细胞因子IL-1β和IL-6的影响

目的评价不同麻醉方法对IL-1β和IL-6的影响。方法比较硬膜外麻醉下与全麻下患者IL-1β和IL-6的变化。结果硬膜外组与全麻组术中IL-6均明显升高,持续至术后第1日晨。硬膜外组患者IL-6水平在术中及术后各时点均较全麻组高,但组间比较差异无显著性。两组患者IL-1β围术期各时间点均未检测到。结论手术创伤可引起外周血炎性细胞因子IL-6的表达增强,不同麻醉方法对其影响较小。     

Damon自锁矫治器远移尖牙对龈沟液白介素-1β及前列腺素E2表达的影响

目的:比较Damon Q自锁托槽与传统托槽远移尖牙过程中龈沟液中白介素-1β (IL-1β)及前列腺素E2 (PGE2)表达变化,探讨自锁托槽移动牙齿对牙周组织的影响?方法:选取需拔除上颌双侧第一双尖牙的恒牙列患者15例,年龄11~13岁?患者上颌一侧尖牙粘结自锁托槽,对侧尖牙粘结传统直丝弓MBT托槽,牙列排齐整平后,镍钛螺簧以100 g牵引力远移尖牙,在加力前?加力后1?24?72 h及1?2?3?4周分别提取上颌尖牙颊侧龈沟液,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测龈沟液中IL-1β及PGE2含量?结果:正畸加力24 h后,自锁托槽组尖牙龈沟液中IL-1β含量明显升高,并在加力后72 h,其含量显著高于传统直丝弓托槽组,随后逐渐下降,在加力第4周,两者仍存在显著性差异;龈沟液中PGE2含量在加力后逐渐升高,在72 h自锁托槽组与普通托槽组有显著差异,并在第4周仍显著高于普通托槽组?结论:Damon Q自锁托槽与传统直丝弓托槽远移尖牙过程中,龈沟液IL-1β及PGE2含量变化存在差异,自锁托槽产生的生物学效应较强而持久?     

大鼠创伤性脑损伤后NGF mRNA表达变化及外源性IL-1β对其影响

目的　观测大鼠脑损伤后NGFmRNA表达变化及IL 1β对其的影响 ,探讨NGF及IL 1β在脑创伤中的作用机制。方法　在建立流体脑创伤模型的基础上 ,采用RT PCR、分子杂交及免疫细胞化学等技术 ,观测脑创伤后NGFmRNA的表达变化以及外源性IL 1β对其的影响。 结果　NGFmRNA在伤后 12h脑伤灶及其周围即出现表达的增加 ,在脑致伤后2 4h及 3dNGFmRNA的表达明显增加 ,达到峰值 ,其后逐渐降低但表达仍然高于对照组。IL 1β处理组致伤后 3h即出现NGFmRNA表达的增加 ,NGFmRNA的含量明显高于单纯致伤组及对照组 (P <0 .0 1) ,并在伤后 2 4h达到峰值。结论　脑创伤后NGFmRNA表达的增加可能和创伤早期对神经细胞的保护作用和修复机制有关。IL 1βmRNA的表达增加早于脑创伤后NGFmRNA的表达增高。外源性IL 1β能提高脑创伤后NGFmRNA的表达水平。     

不明原因不孕患者子宫内膜种植窗口期IL-1β、IL-1ra mRNA的表达

目的检测IL-1β及IL-1ra mRNA在不明原因不孕患者子宫内膜种植窗口期的表达,探讨其与不明原因不孕症的相关性。方法采用逆转录—聚合酶链式反应(RT-PCR),对50例不明原因不孕患者及正常女性子宫内膜种植窗内IL-1β、IL-1ra mRNA的表达进行半定量检测。结果在参与试验的病例子宫内膜种植窗口期几乎均存在IL-1β及IL-1ra mRNA表达;与正常女性相比,不明原因不孕患者子宫内膜种植窗口期IL-1β表达下降,而IL-1ra mRNA表达则明显上升,差异有统计学意义(P<0.05);且不明原因不孕患者IL-1ra与IL-1β表达比平均值明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 IL-1β及IL-1ra mRNA表达失调可能是导致不明原因不孕的重要分子机制。