趋化因子CCL19在介导免疫细胞抗肿瘤中的作用

趋化因子是一类能趋化免疫细胞定向移动的小分子分泌蛋白。趋化因子CCL19和其受体CCR7在树突状细胞、T细胞和多种肿瘤细胞上表达。近年来,CCL19及CCR7在抗肿瘤治疗中的作用成为研究热点并取得显著进展,它们在趋化树突状细胞、CD4+和CD8+T细胞浸润肿瘤,介导免疫细胞释放细胞因子,抑制肿瘤增殖、迁移和侵袭以及协助治疗肿瘤过程中发挥关键作用,对其深入研究有助于找到新的肿瘤治疗手段和基因疫苗。该文对CCL19在介导免疫细胞抗肿瘤中的作用作一综述。     

沉默CCL19对结直肠癌增殖、迁移、侵袭和促血管形成的影响

目的研究趋化因子CCL19在结直肠肿瘤中的作用。方法采用Real—TimePCR和Westernblotting技术筛选高表达CCL19的细胞株SW620细胞作为研究对象,并用siRNA沉默SW620中的CCL19基因。分别采用细胞增殖实验、Transwell迁移、侵袭实验和小管形成实验来检测SW620细胞的增殖、迁移、侵袭和促血管形成能力的变化。结果Westernblotting和Real—TimePCR证实SW620中CCL19相对其他细胞株高表达。经siRNA-CCL19干扰后,SW620细胞在48～120h内细胞增殖能力显著上升（P〈0．05）,细胞迁移、侵袭能力亦明显上升（P〈0．05）,促血管形成能力明显增强。结论SW620是相对高表达CCL19的细胞株,沉默CCL19基因后可以明显促进SW620细胞在体外的增殖、迁移、侵袭和促血管形成能力,因此认为CCL19在结直肠癌发展中起着抑制作用,并有应用于抗癌药物研究的前景。     

CXCR7与VEGF在结直肠癌组织中的表达及意义

目的 探讨趋化因子受体7（chemokine receptor 7,CXCR7）和血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）在结直肠癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系.方法 采用免疫组织化学方法检测73例结直肠癌组织及20例癌旁正常组织CXCR7与VEGF的表达.结果 （1）CXCR7在癌旁正常组织中的阳性表达率为20.00％,癌组织中的阳性表达率为71.23％,其表达与浸润深度、淋巴结转移、TNM分期显著相关（P＜0.05）.（2）VEGF在癌旁正常组织中的阳性表达率为10.00％,癌组织中的阳性表达率为67.12％,其表达与浸润深度、淋巴结转移、TNM分期有显著相关性（P＜0.05）.（3）Spearman等级相关分析显示两者在结直肠癌组织中的表达呈正相关（rs=0.629,P＜0.05）.结论 CXCR7与VEGF在结直肠癌发展、侵袭和转移过程中起重要作用,并可能参与肿瘤血管形成为肿瘤进展提供物质基础.     

Oncol2012: 腹腔镜下CO2气腹对结直肠癌细胞表达趋化因子受体CXCR4及CCR7的影响

目的 探讨不同压强、不同作用时间下持续性CO2气腹对结直肠癌细胞表达趋化因子受体的影响。 方法 建立体外气腹模型,选用人结直肠癌细胞株SW480,分别在6、9、12、15mmHg四种不同压强CO2气体下作用1h、2h及4h后,放在与无气腹组(37℃、5%CO2常规培养)相同的环境中分别培养0、24、48、72h后,使用免疫细胞化学法及RT-PCR检测趋化因子受体CXCR4、CCR7的表达。 结果 免疫细胞化学法检测结果显示SW480在相同作用时间下,经6、9、12、15mmHg压强的持续CO2气腹处理后,CXCR4表达下降;经12、15mmHg压强的持续CO2气腹处理后,CCR7表达下降,与无气腹组表达水平的差异均有统计学意义(P＜0.05),上述趋化因子受体表达在气腹处理后常规培养24、48h均增至无气腹组水平(P＞0.05)。CXCR4及CCR7的表达在相同作用时间下,随着压强增高,其表达量逐渐降低;在相同压强下,随着作用时间延长,其表达量无明显差异。 RT-PCR结果显示SW480在相同作用时间下经6、9、12、15mmHg压强的持续CO2气腹处理后,CXCR4 mRNA、CCR7 mRNA表达下降,与无气腹组表达水平的差异均有统计学意义(P＜0.05),上述趋化因子受体的mRNA表达在气腹处理后常规培养48h均增至无气腹组水平(P＞0.05)。CXCR4及CCR7的mRNA表达在相同作用时间下,随着压强增高,其表达量无明显差异;在相同压强下,随着作用时间延长,其表达量也无明显差异。 结论 不同压强CO2气腹能对结直肠癌细胞表面的趋化因子受体表达产生一过性影响,随CO2气腹压强的增高,可抑制趋化因子受体的表达。不同作用时间CO2气腹对结直肠癌细胞表面趋化因子受体的表达无明显影响。     

CCR7-SLC/ELC生物学轴在乳腺癌亲嗜性淋巴结转移中的作用

目的探讨趋化因子受体7(CCR7)-次级淋巴组织因子(SLC)/EB配体趋化因子(ELC)生物学轴在乳腺癌淋巴结转移中的作用。方法 采用免疫组织化学方法分别检测48例乳腺癌组织,23例乳腺癌腋窝转移淋巴结,15例相应癌旁组织及同期15例纤维腺瘤中CCR7、SLC、ELC蛋白表达情况。结果 (1)转移淋巴结、乳腺癌组织、癌旁组织及纤维腺瘤中CCR7的表达率为87.0%(20/23),62.5%(30/48),33.3%(5/15),20.0%(3/15)。转移淋巴结中CCR7蛋白表达高于其他3组,差异均有统计学意义。在对乳腺癌组织CCR7表达与临床病理特征比较中发现,有淋巴结转移组CCR7表达率为66.7%(20/30),无淋巴结转移组为33.3%(6/18),比较差异有统计学意义(P<0.01)。肿瘤不同分期及雌孕激素不同表达组间CCR7的表达差异无统计学意义。(2)转移淋巴结、乳腺癌组织、癌旁及纤维腺瘤中SLC的表达率分别为91.3%(21/23),66.7%(32/48),7.0%(7/15),40.0%(6/15)。乳腺癌组织与转移淋巴结中SLC的表达差异有统计学意义(P<0.02),而与癌旁及纤维腺瘤组比较差异无统计学意义(P>0.05)。临床病理特征比较中发现Ⅲ期及有淋巴结转移组与Ⅰ、Ⅱ期及无淋巴结转移组间差异有统计学意义(P<0.05)。(3)转移淋巴结、乳腺癌组织、癌旁及纤维腺瘤中ELC的表达率为95.7%(22/23),70.8%(34/48),66.7%(10/15),53.3%(8/15)。不同组间ELC的表达差异结果与SLC一致。结论 CCR7-SLC/ELC轴与乳腺癌癌亲嗜性淋巴结转移中有密切关系,而SLC、ELC的表达和肿瘤的侵袭性及恶性程度有关。     

microRNA-29a在结直肠癌组织中的表达及意义

目的 探讨microRNA-29a（miR-29a）在结直肠癌组织中的表达,以及miR-29a反义寡核苷酸对结直肠癌细胞增殖和侵袭的影响。方法 选取行手术治疗的初诊结直肠癌患者195例,利用实时荧光定量聚合酶链反应检测结直肠癌和癌旁组织中miR-29a表达,培养人结直肠癌LoVo细胞,随机分为ASO-miR-29a组、ASO-对照序列组和空白对照组,检测各组细胞中miR-29a表达,MTT法检测各组细胞增殖能力,Transwell小室检测各组细胞迁移和侵袭能力。结果 结直肠癌组织miR-29a相对表达量为（1.93±0.19）,癌旁组织为（1.26±0.12）,两者比较差异有统计学意义（P?<0.05）;结直肠癌组织中miR-29a相对表达量与TNM分期和淋巴结转移有关（P?<0.05）,多元线性回归分析结果显示,TNM分期和淋巴结转移是影响结直肠癌组织中miR-29a表达的因素（P?<0.05）;ASO-miR-29a组细胞中miR-29a相对表达量低于ASO-对照序列组和空白对照组（P?<0.05）;MTT实验结果显示,ASO-miR-29a组与ASO-对照序列组和空白对照组相比吸光度值降低（P?<0.05）;与ASO-对照序列组和空白对照组比较,ASO-miR-29a 组迁移细胞数和侵袭细胞数均减少（P?<0.05）。结论 miR-29a在结直肠癌组织中呈高表达,参与结直肠癌发生、进展过程,特异性抑制结直肠癌细胞中miR-29a表达可减少细胞增殖,抑制细胞迁移和侵袭能力。     

CCR6及CCL20在相关疾病中的研究进展

<正>趋化因子也称化学趋化性细胞因子(chemoattractant cytokines),是一组由组织细胞和炎性细胞产生的具有多种生物学功能的小分子生物活性肽,相对分子质量为8 000-10 000(含70-100个氨基酸残基)。根据其N末端保守的半胱氨酸(Cys)的排列方式可分为CXC亚族、CC亚族、C亚族和CX3C亚族四类。趋化因子受体是一类具有7个跨膜区的G蛋白偶联蛋白,主要表达于内皮细胞和免疫细胞。根据结合配体的不同,趋化因子受体也可分为CXCR类、CCR类、C类和CX3CR四类。CCR6属CCR类,表达于未成熟DCs、B细胞、CD4+T细胞亚群、CD8+T细胞亚群、NKT细胞及多种肿瘤细胞[1-3]。趋化因子CCL20是目前发现的CCR6在体内唯一的配体,表达于肝脏组织、皮肤角质上皮细胞和肠道上皮细胞等部位[4-5]。CCL20生理条件下表达较低的基础水平,但是可经强烈的促炎信号诱发其表达升高,如主要细胞因子TNFα、来源于细菌的Toll样受体激动剂[6]。CCL20可趋化CCR6+细胞向抗原出现的组织部位定向迁移[7]。近年来国内外对CCR6/CCL20功能及其在体内的作用进行了大量研究,现在我们对趋化因子受体CCR6及其配体CCL20在炎性疾病、自身免疫性疾病及肿瘤领域的研究展开简单的综述。     

趋化因子受体CCR7在不同类型肺癌组织中的表达及其临床意义

目的:探讨趋化因子受体CCR7在不同类型肺癌组织中的表达及其临床意义.方法:采用免疫组织化学方法检测110(鳞癌40,腺癌40,小细胞癌30)例肺癌和30例癌旁正常肺组织中CCR7的表达.结果:在110例肺癌组织中有77例CCR7表达阳性(70.0%),30例癌旁正常肺组织中仅5例表达阳性(16.7%,P＜0.05).鳞癌、腺癌及小细胞癌CCR7阳性率分别为60.0%,92.5%,53.3%(P＜0.01);腺癌CCR7阳性率明显高于鳞癌和小细胞癌(分别P＜0.01,P＜0.01).68例伴淋巴结转移的病例CCR7阳性率83.3%,42例不伴淋巴结转移的病例CCR7阳性率47.6%(P＜0.01).Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期肺癌病例CCR7阳性率分别为59.5%,76.2%,69.2%,100.0%(P＜0.05).不同性别患者肺癌组织中CCR7阳性率分别为男66.7%,女80.8%(P＞0.05).小于等于60岁和大于60岁年龄组肺癌组织中CCR7阳性率分别为70.3%,69.6%(P＞0.05).结论:CCR7上调表达是肺鳞癌、腺癌及小细胞癌的一个普遍特征,高水平的CCR7表达与肺癌的淋巴结转移和高TNM分期有关,而与年龄、性别无关.     

CCL28-CCR10通路在类风湿关节炎单核细胞迁移中的作用

目的：观察类风湿关节炎(rheumatoid arthritis, RA)患者关节中单核/巨噬细胞趋化因子受体CCR10的表达,探讨趋化因子CCL28与其受体CCR10在RA单核细胞迁移中的作用及机制。方法：采用免疫组织化学法分析8例RA患者、4例骨关节炎(osteoarthritis, OA)患者和4例正常对照者滑膜组织中CCR10的表达并进行细胞染色评分(0～5分),流式细胞术检测26例RA患者和20例健康对照者外周血、15例RA患者滑液CD14⁺单核细胞中CCR10阳性细胞比例,Transwell迁移实验检测CCL28对RA和健康对照单核细胞的趋化性,Western blotting检测CCL28干预RA单核细胞的细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase, ERK)、蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)通路磷酸化。结果：CCR10表达在RA滑膜衬里层细胞及衬里下层的巨噬细胞、血管内皮细胞、淋巴细胞;RA滑膜衬里层细胞和衬里下层巨噬细胞的CCR10表达明显高于OA和正常对照的滑膜(P均&l...     

血清趋化因子CCL19、CCL21在儿童支气管哮喘中的表达

目的:分析儿童支气管哮喘(BA)患者中血清趋化因子配体19(CCL19)和趋化因子配体21(CCL21)的表达,探讨其在儿童BA中可能介导的病理过程及其在哮喘中是否具有临床指导意义。方法:收集2021年7月至2022年12月于包头市第四医院就诊的BA儿童共72例作为哮喘组,其中急性发作期(AA)32例,临床缓解期(CR)40例;同期选取正常体检儿童33例作为正常对照组(HC)。所有入组儿童均采用ELISA法检测CCL19、CCL21水平,行统计学比较,并评价CCL19、CCL21在儿童支气管哮喘中的诊断效能。结果:(1)各组间血清CCL19、CCL21表达水平比较,差异有统计学意义(P<0.05),其中哮喘组血清CCL19、CCL21表达水平均高于HC组,且AA组又高于CR组;(2)BA儿童CCL19、CCL21水平呈正相关(r=0.819,P<0.05);(3)ROC曲线结果显示,CCL19诊断曲线下面积(AUC)为0.797,最佳截断值为131.58 pg/mL,其敏感度为79.2%,特异度为69.7%;CCL21的AUC为0.771,最佳截断值为307.33 pg/m...     

趋化因子受体CCR7在人胃癌组织中的表达及其与胃癌转移的关系

目的 观察趋化因子受体CCR7在胃癌中的表达情况,探讨CCR7表达水平与临床病理特征的关系.方法 采用Real-time PCR、Western blot及免疫组化技术检测CCR7在60例胃癌组织及相应的癌旁组织中的表达分布情况,并分析其表达差异与胃癌临床病理特征的相关性.结果 在60例胃癌组织中,CCR7在胃癌组织中mRNA表达水平均显著高于癌旁组织(P＜0.05).免疫组化检测结果显示CCR7在胃癌组织中的蛋白表达定位于细胞质,且CCR7蛋白在癌旁组织与胃癌组织中的阳性表达率分别为25％(15/60)和73％(44/60).经x2检验,两者差异有统计学意义(x2=24.000,P＜0.001).Western blot结果显示CCR7蛋白在胃癌组织中的表达水平显著高于癌旁组织.胃癌组织中CCR7表达水平在胃癌浸润深度、淋巴结转移、远处转移及TNM分期差异有统计学意义(P＜0.05),在患者性别、年龄及肿瘤大小差异无统计学意义.结论 CCR7在胃癌组织中高表达,其表达水平与胃癌侵袭转移密切相关,有望成为胃癌治疗新靶点.     

缺氧微环境中CCL28高表达促进HCCLM3细胞迁移和侵袭

 目的  探讨缺氧条件下HCCLM3细胞趋化因子CCL28表达情况及作用 。方法  实时定量PCR和ELISA方法检测缺氧条件下肝癌细胞HCCLM3 趋化因子CCL28表达水平;运用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)和Lipofectamine 2 000细胞转染技术下调CCL28表达;用Transwell和 Matrigel观察肝癌细胞HCCLM3侵袭迁移情况;采用明胶酶谱法测定CCL28 siRNA干扰后细胞上清中的基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase enzyme,MMP)含量。应用实时定量PCR检测50例肝细胞癌组织中CCL28 mRNA表达情况,运用卡方检验和Kaplan Meier法分析CCL28表达与临床病例特征及患者总体生存时间的关系。结果  肝癌HCCLM3细胞内CCL28 mRNA在缺氧培养6 h后表达增高,蛋白水平在缺氧培养12 h后表达增高,呈时间依赖性。SiRNA抑制CCL28表达后,缺氧条件下HCCLM3细胞迁移数目(65.2±4.49)较siRNA阴性组(85±5.91)和空白组(87.4±8.44)有所减少(P<0.001);穿过Matrigel膜细胞数目(43.2±5.36)较siRNA阴性组(58±3.87)和对照组(54.6±9.53)有所减少(P=0.011)。明胶酶谱法发现CCL28表达抑制后HCCLM3分泌MMP 2减少。PCR结果提示,肝癌组织CCL28 mRNA表达量为0.0254 ±0.0755,与正常肝组织相比,23例(46%)呈高表达,CCL28表达高低与肿瘤最大径(P=0.027)、术后复发相关(P=0.019);CCL28高表达与低表达组之间总体生存无明显差异(χ2=0.008,P=0.927)。结论  缺氧条件下趋化因子CCL28高表达并参与肝癌细胞HCCLM3迁移侵袭过程。肝癌组织中CCL28表达增高与术后复发相关。     

CCL27 CCL28及 CCR10在癫痫小鼠急性期表达增高

目的：探讨趋化因子 CCL27、CCL28及其受体 CCR10在小鼠癫痫急性期外周血中的表达变化。方法取正常及癫痫小鼠急性期不同时间点(10 min、30 min、1 h、2 h)外周血利用实时荧光定量 PCR(Real-time PCR)法检测毛果云香碱致癫痫发作小鼠急性期外周血中 CCL27、CCL28 mRNA 水平;同期取正常及癫痫急性期不同时间点(10 min、30 min、1 h、2 h)肝素抗凝外周血,提取淋巴细胞层后利用 FACSsort 型流式细胞仪检测外周血淋巴细胞 CCR10蛋白水平的表达变化。结果癫痫小鼠发作急性期外周血中 CCL27、CCL28 mRNA 水平、淋巴细胞中 CCR10蛋白表达水平均在癫痫发作2 h 高于对照组(P <0.05)。结论癫痫发作早期已出现外周血免疫功能紊乱,该病理变化可能与癫痫发病过程中的炎性反应和神经细胞的凋亡相关。     

趋化因子受体CCR7对口腔鳞(癌细胞增殖和迁移的影响

目的 检测趋化因子受体CCR7[Chemokine(C-C)Receptor 7]的表达及其对口腔鳞癌细胞增殖和迁移的影响.方法 采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western Blot 检测 20例口腔鳞癌组织 、口腔鳞癌细胞系Tca-8113 、腺样囊性癌细胞系ACC-M(Adenoid Cystic Carcinoma,ACC-M)和10例正常口腔黏膜组织中 CCR7的表达.用MTT法检测细胞的增殖能力,通过趋化实验观察在CCR7的配体次级淋巴组织趋化因子(Secondary Lymphoid-tissue Chemokine,SLC)作用下对口腔鳞癌细胞的趋化迁移作用.结果 ①在口腔鳞癌组织和Tca-8113细胞中,CCR7在mRNA及蛋白水平均有强的表达,ACC-M细胞系中CCR7弱表达,而在正常口腔黏膜组织细胞不表达.②口腔鳞癌细胞在SLC作用下增殖反应明显增强,CCR7抗体可明显抑制肿瘤细胞的增殖.③体外实验显示SLC可诱导口腔鳞癌细胞发生明显迁移,在30、50 ng/ml的实验浓度范围内,诱导口腔鳞癌细胞迁移的作用呈明显量效关系.结论 CCR7/ SLC受体配体系统可通过介导口腔鳞癌细胞的增殖、侵袭和迁移,从而在口腔鳞细胞向颈部淋巴结转移中发挥着重要作用,CCR7有可能成为口腔鳞癌治疗的新靶点.     

趋化因子受体CCR7在胃癌组织中的表达及意义

目的探讨趋化因子受体CCR7在胃癌组织中的表达及其临床意义。方法采用RT—PCR及Western blot法检测32例胃癌及其癌旁对照组织中CCR7的表达。结果CCR7mRNA在胃癌组织中的表达水平为癌旁对照组的1．66倍（P〈0．01），且其表达水平与肿瘤TNM分期（P〈0．05）、浸润深度（P〈0．05）及淋巴结转移有关（P〈0．05）；Western blot结果显示CCR7蛋自在胃癌组织中的表达水平为癌旁对照组的2．3倍（P〈0．01），且高表达于肿瘤分期较晚（P〈0．05）、分化较差（P〈0．05）、浸润较深（P〈0．05）、有淋巴结转移（P〈0．05）和远处转移（P〈0．05）的组织。结论趋化因子受体CCR7可能与胃癌的发生、发展、侵袭、转移有关。     

长链非编码RNA HSALNT0000015对结直肠癌细胞生物学行为的影响

目的 探讨长链非编码RNA（lncRNA）HSALNT0000015对结直肠癌细胞生物学行为的影响及其作用机制。方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测80例结直肠癌组织及配对的15例癌旁组织,同时检测人结直肠癌细胞（Lovo、SW480、HT-29、HCT116）和正常人肠黏膜上皮细胞HIEC中lncRNA HSALNT0000015的表达水平;将HCT116细胞分为空白组、对照组及实验组,分别不感染慢病毒、只感染空载质粒及感染sh-HSALNT0000015-慢病毒,采用MTT法检测细胞增殖能力,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,免疫印迹法检测转录因子Slug、上皮钙黏素（E-Cadherin）及波形蛋白（Vimentin）的表达。结果 结直肠癌组织lncRNA HSALNT0000015表达水平高于癌旁组织（P?<0.05）。结直肠癌细胞中lncRNA HSALNT0000015的表达水平均高于正常人肠黏膜上皮细胞（P?<0.05）。细胞培养12、24、48及72 h后,实验组光密度值（490 nm）低于空白组和对照组（均P?<0.05）。敲减lncRNA HSALNT0000015后,HCT116迁移及侵袭能力下降（均P?<0.05）,E-cadherin表达水平上升（P?<0.05）,转录因子Slug和Vimentin表达水平下降（均P?< 0.05）。结论 lncRNA HSALNT0000015可能通过上皮间质转化过程促进结直肠癌细胞迁移及侵袭。     

趋化因子CCL22对肺癌细胞迁移和侵袭的影响

目的观察趋化因子CCL22对肺癌SBC-5细胞迁移和侵袭能力的影响。方法取肺癌细胞系SBC-5细胞,RPMI-1640培养基培养,5%CO2培养箱孵育,清洗消化后传代培养。予100ng/m L的CCL22诱导肺癌SBC-5细胞,设Control组、CCL22组(100ng/m L)、MIX组(CCL22 100ng/m L+蛋白激酶抑制剂U0126 10μmol),观察细胞迁移及侵袭能力的变化;加入蛋白激酶抑制剂(U0126)后细胞迁移及侵袭能力的变化。结果 CCL22诱导肺癌SBC-5细胞后,CCL22组细胞迁移距离(351.9±16.4)μm,明显大于Control组的(112.6±27.2)μm和MIX组的(145.1±29.6)μm(P0.05),MIX组和Control组比较差异无统计学意义(P0.05)。CCL22组平均侵袭细胞数(505.5±66.3)个,显著高于Control组的(199.2±32.8)个和MIX组的(95.7±19.1)个(P0.05),MIX组明显低于Control组(P0.05)。结论趋化因子CCL22可在体外诱导肺癌SBC-5细胞迁移和侵袭,而蛋白激酶抑制剂(U0126)可抑制CCL22诱导肺癌细胞的迁移及侵袭。