补气活血药对急性心肌梗死模型大鼠梗死心肌边缘区域新生血管的影响

目的：探讨补气活血药物对急性心肌梗死模型大鼠梗死心肌边缘区新生微血管数目以及VEGF,bFGF蛋白表达的影响。方法：构建大鼠急性心肌梗死动物模型。造模成功后,将大鼠随机分为：假手术组、模型组、丹参-黄芪（1：2）组、丹参-黄芪（1：1）组、川芎-黄芪（1：2）组、丹参组、川芎组、赤芍组、麝香保心丸组,每组5只。各给药组按照13.5 g·kg^-1·d^-1灌胃,每日1次,共给药3周。采用免疫组化SP法检测心肌组织中vWF的表达,计数微血管数目（MVC）;采用Western blotting印迹法检测心肌组织中VEGF,bFGF蛋白的表达。结果：假手术组、模型组、各给药组大鼠梗死心肌边缘区域均可见vWF因子标记染色的新生微血管,假手术组大鼠心肌中新生微血管不明显,模型组大鼠梗死心肌边缘区域可见到少量新生成的微血管,各给药组大鼠梗死心肌边缘区域可见较多新生微血管。模型组与假手术组比较,差异有统计学意义（P<0.05）;各给药组与模型组相比较差异有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。假手术组大鼠心肌中的VEGF,bFGF的蛋白表达最少,模型组与之相比较,差异具有统计学意义（P<0.05）,各给药组与模型组相比较,VEGF,bFGF的蛋白表达有较显著的增多,差异具有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。结论：丹参、川芎、赤芍、丹参-黄芪（1：2）组、丹参-黄芪（1：1）组、川芎-黄芪（1：2）组药物可以促进血管的生成,推测这些药物促进血管生成的机制可能是通过促进VEGF,bFGF的蛋白表达,从而增加VEGF,bFGF的含量以促进新生血管的生成。     

丹参素和羟基红花黄色素A促血管新生及抗大鼠心肌梗死作用研究

目的观察丹参素(DSS)和羟基红花黄色素A(HSYA)单用及其配伍对心肌梗死模型大鼠的保护作用及心肌微血管新生的影响。方法结扎冠状动脉左前降支法,建立大鼠心肌梗死模型,将造模成功的大鼠随机分成4组:模型组,DSS组(2mg/kg),HSYA组(0.1 mg/kg)以及DSS和HSYA合用组(1mg/kg+0.05 mg/kg);假手术组开胸,但不结扎冠状动脉;术后1至7天尾静脉注射给药,每天1次;模型组和假手术组给予0.9%氯化钠溶液(2ml/kg)。末次给药6h后,记录大鼠左心室收缩压(LVSP)、左心室舒张末期压力(LVEDP)、左心室压力最大变化速率(±dp/dtmax);伊文思蓝(EB)、2,3,5-氯化三苯基四氮唑蓝(TTC)双染法测定心肌梗死面积;免疫组化法测定大鼠梗死心肌边缘区CD34阳性微血管密度(MVD);免疫印迹法测定大鼠心肌血管内皮生长因子(VEGF)、基质细胞衍生因子-l(SDF-1)、CXC趋化因子受体4(CXCR4)的蛋白表达。结果造模后,大鼠心功能明显下降(P0.01),心肌梗死面积显著增加(P0.01),梗死心肌边缘区MVD和VEGF、SDF-1、CXCR4的蛋白表达无明显变化;与模型组比较,各给药组均能显著改善大鼠心功能,减少心肌梗死面积,增加MVD以及VEGF、SDF-1、CXCR4等蛋白的表达(P0.05,P0.01),其中DSS和HSYA合用组作用最为显著。结论 DSS、HSYA均能减轻大鼠心肌梗死损伤,二者配伍后作用增强;机制可能与其上调VEGF、SDF-1、CXCR4蛋白表达,促进血管新生有关。     

益气活血组方对急性心梗模型大鼠SDF-1、CXCR4、VEGF变化的影响

目的观察益气活血组方对AMI大鼠缺血区心肌组织SDF-1、CXCR4、VEGF含量变化的影响。方法 80只SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、模型组、麝香保心丸组和益气活血组方组,每组20只。根据处死时间再将各组分为3 d,7 d,14 d 3个时相组;药物干预后通过聚合酶链式反应(PCR)检测大鼠心肌组织SDF-1、CXCR4、VEGFmRNA的表达;Western-blot法检测大鼠心肌组织SDF-1、CXCR4、VEGF蛋白的表达。结果麝香保心丸和益气活血组方表达SDF-1/CXCR4 mRNA水平均与假手术组、对照组比较差异有统计学意义(P0.05),麝香保心丸与益气活血方比较,其表达SDF-1/CXCR4 mRNA水平差别不大(P0.05)。麝香保心丸组表达CXCR4 mRNA水平高于益气活血组方组(P0.05)。益气活血组方组、麝香保心丸干预组较假手术组和模型组的CXCR4和SDF-1蛋白表达量明显增高(P0.05)。结论益气活血组方对急性心肌梗死模型大鼠有较好的治疗作用,其作用机理可能是通过增加VEGF和CXCR4、SDF-1来发挥促进毛细血管新生、EPCs动员和趋化的作用。     

芎归六君子汤对心肌梗死大鼠PI3K/Akt信号转导通路的影响

目的:探讨芎归六君子汤对心肌梗死大鼠左室微血管新生和心肌组织Akt蛋白、mRNA表达的影响。方法:将大鼠随机分为假手术组、模型对照组、消心痛组、复方丹参滴丸组和芎归六君子汤组。采用左冠状动脉前降支结扎法复制心肌梗死模型,假手术组只穿线不结扎。造模结束后,分别给予生理盐水及对应药物灌胃,每日1次,连续28天,检测心功能;取梗死边缘心肌,检测微血管新生数量、心肌组织Akt蛋白和mRNA的表达。结果:各给药组心功能明显改善,微血管数量显著增多,Akt蛋白和mRNA表达明显升高,与模型对照组相比差异显著,且芎归六君子汤组优于丹参滴丸和消心痛组(P0.05)。结论:芎归六君子汤能够提高心肌梗死大鼠Akt蛋白和mRNA表达,促进梗死心肌微血管再生,改善心功能,提示从脾胃论治心肌梗死具有重要应用价值。     

舒脉胶囊对大鼠缺血心肌促血管新生的影响

目的观察舒脉胶囊对缺血心肌血管新生和相关因子表达的影响。方法复制大鼠心肌缺血模型,分别给予舒脉胶囊（舒脉组）、贝复济＋肝素（阳性药组）、生理盐水（模型组）,另设假手术组,给予生理盐水;给药不同时间（1、2、4周）后,用免疫组织化学法测定缺血心肌血管性血友病因子（vwF）、血管内皮细胞生长因子（VEGF）的蛋白表达;图像分析系统计算缺血心肌新生血管数;实时定量PCR检测VEGF的基因表达水平。结果与假手术组、模型组比较,舒脉组和阳性药组3个时间段新生微血管数显著增加（P〈0．01）,两用药组比较,差异无统计学意义;与假手术组、模型组比较,舒脉组和阳性药组3个时间段VEGF基因及蛋白表达增加（P〈0．01）,两用药组比较,差异无统计学意义。结论舒脉胶囊能促进实验性大鼠缺血心肌微血管生成,对VEGF基因及蛋白表达的上调可能是其促血管新生的作用机制之一。     

益气活血方对心梗后大鼠缺血心肌血管新生及PDGF—B蛋白表达的影响

目的：探讨益气活血方对心梗后大鼠缺血心肌局部血管新生的影响及其分子学机制.方法：建立心梗模型并分为5组（益气活血方大剂量组、益气活血方小剂量组、麝香保心丸组、假手术组、模型组）,灌胃6周后把存活的大鼠处死,免疫组化法测定心梗边缘区新生血管数及微血管面密度;检测缺血心肌血小板源性生长因子-B（PDGF-B）蛋白的表达.结果：与假手术组相比,模型组大鼠心梗边缘区新生血管数、微血管面密度及PDGF-B蛋白表达明显升高（P＜0.05）;大剂量组和麝香保心丸组的新生血管数、微血管面密度及PDGF-B蛋白表达均有明显的升高,与模型组比较均有显著差异（P＜0.05）,小剂量组也有不同程度表达.PDGF-B蛋白表达与微血管数增多呈一致性.结论：益气活血方能够促进心梗后大鼠缺血心肌局部血管新生,对缺血心肌具有保护作用,上调心肌局部PDGF-B蛋白表达可能是其作用机制之一.     

缺氧预处理MSCs移植对脑缺血再灌注损伤大鼠SDF-1/CXCR4表达的影响及清热化瘀方的干预作用

目的：观察缺氧预处理骨髓间充质干细胞（MSCs）移植对脑缺血再灌注损伤大鼠SDF-1/CXCR4 mRNA和蛋白表达的影响及清热化瘀方的干预作用。方法：采用线栓法制备局灶性脑缺血大鼠（MCAO）模型，将216只SD大鼠随机分为6组：假手术组（SO）、模型组（MCAO）、MSCs移植对照组(N-MSCs)、经HP处理后的MSCs移植组(HP-MSCs)、MSCs移植联合清热化瘀方组(MSCs QRHY)、HP-MSCs移植联合清热化瘀方组(HP QRHY)。每组大鼠36只，每组根据取材时间点7d、14d、28d又可分为每组3个亚组，每个亚组12只大鼠。采用qRT-PCR和Western blot观察3个时间点SDF-1/CXCR4 mRNA及其蛋白的表达变化，并以TUNEL法检测神经细胞凋亡。结果：各组缺血半暗带SDF-1/CXCR4 mRNA及其蛋白的表达均于7d达到高峰，14d，28d表达逐渐下降。其中7d、14d同一时间点组间比较，HP-MSCs组、MSCs QRHY组及HP QRHY组二者的表达均明显优于N-MSCs组（P＜0.01或P＜0.05），而以HP QRHY组增高最为明显（P＜0.05或P＜0.01），28d后，各移植组的表达趋势趋同，但仍高于模型组（P＜0.05）。结论：缺氧预处理MSCs移植能够显著提高脑缺血再灌注损伤大鼠SDF-1/CXCR4的表达，清热化瘀方能够进一步上调SDF/1CXCR4的表达，减少细胞凋亡。     

电针联合脂肪源性干细胞移植对脑缺血/再灌注大鼠SDF-1和CXCR4表达的影响

目的 探讨电针联合脂肪源性干细胞（ADSC）移植对大鼠缺血/再灌注损伤后趋化因子SDF-1及其受体CXCR4的影响.方法 成年大鼠随机分为模型组、电针组、ADSC移植组、电针＋ADSC组.线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血（MCAO）2 h再灌注模型,电针组取大椎穴和内关穴行电针治疗.ADSC组尾静脉注射PKH26标记的ADSC细胞悬液,电针＋ADSC组联合电针和ADSC移植治疗.缺血7 d后行神经功能损害评分（NSS）,采用Western bolt法及实时荧光定量PCR检测海马区SDF-1、CXCR4蛋白和mRNA表达.结果 电针＋ADSC组海马区PKH-26标记的细胞个数高于ADSC组（P＜0.05）.与模型组比较,电针组、ADSC组和电针＋ADSC组NSS评分均显著降低,海马区SDF-1、CXCR4蛋白和mRNA表达增加（P＜0.05）.其中电针＋ADSC组较电针组和ADSC组NSS评分显著降低,而SDF-1、CXCR4蛋白和mRNA表达显著增加（P＜0.05）.结论 电针联合脂肪源性干细胞移植促进脑缺血再灌注大鼠神经功能恢复作用优于单独治疗组,其机制可能与电针上调脑海马区SDF-1和CXCR4表达,促进移植的ADSC迁移和存活有关.     

益气活血组方对大鼠缺血心肌血管新生作用及对血管内皮生长因子和碱性成纤维生长因子的影响

目的：探讨益气活血组方对急性心肌梗死后大鼠缺血心肌组织血管新生作用和对血管内皮生长因子（VEGF）和碱性成纤维生长因子（bFGF）表达的影响。方法：建立心梗模型后,将40只雄性SD大鼠,采用随机数字表法分为4组：模型组、假手术组、麝香保心丸、益气活血组方。运用免疫组化法检测梗死心肌边缘区微血管计数（MVC）和微血管密度（MVD）及VEGF和bFGF表达;同时应用Western blot技术检测各组大鼠缺血心肌VEGF和bFGF蛋白质水平表达变化。结果：益气活血组方和麝香保心丸组分别与模型组比较,梗死心肌边缘区微血管计数和微血管密度都显著高于后者(P<0.01）。益气活血组方、麝香保心丸组中缺血心肌VEGF和bFGF表达以及其蛋白表达水平较其余组显著升高（P<0.01）。结论：益气活血组方能明显促进心梗后大鼠缺血心肌血管新生,上调心肌VEGF和bFGF蛋白表达可能是其中一个重要的作用机制。     

活血益气方及其拆方对大鼠心肌梗死边缘区Spred1及血管新生的影响

目的观察活血益气方及其拆方对心肌梗死后大鼠梗死边缘区心肌组织血管新生负性调控因子Spred1及血管新生的影响,探讨活血益气方促血管新生的可能作用机制及配伍规律。方法健康雄性SD大鼠30只,随机分为假手术组6只与手术组24只,手术组行左冠状动脉前降支结扎术制备急性心肌梗死模型,随机分为模型组、活血益气方组、益气方组、活血方组。假手术组只穿线不结扎。连续给予相应药物4周后,处死大鼠,取梗死边缘区心肌组织进行指标检测。采用免疫组织化学法观察微血管密度(microvasculardensity,MVD)、微血管平均直径(mean microvascular diameter,MMVD);采用实时荧光定量PCR法检测Spred1 mRNA的表达;采用Western Blot法检测Spred1蛋白的表达。结果 (1)模型组MVD高于假手术组,MMVD小于假手术组(P0.01);活血益气方组、益气方组、活血方组MVD高于模型组(P0.01或P0.05),其中以活血益气方组最为明显,MMVD大于模型组,仅活血益气方组与之比较具有统计学差异(P0.01);益气方组、活血方组MMVD小于活血益气方组,分别与之比较,均具有统计学差异(P0.01)。(2)模型组梗死边缘区心肌组织Spred1 mRNA表达高于假手术组(P0.05);活血益气方组、益气方组、活血方组Spred1mRNA表达高于模型组,差异具有统计学意义(P0.01或P0.05);益气方组、活血方组Spred1mRNA表达均高于活血益气方组,仅活血方组与之比较具有统计学差异(P0.01)。(3)模型组梗死边缘区心肌组织Spred1表达高于假手术组,两者比较未见统计学差异(P0.05);活血益气方组、益气方组、活血方组Spred1表达均低于模型组,比较差异具有统计学意义(P0.05);益气方组Spred1表达低于活血益气方组,活血方组Spred1表达高于活血益气方组,分别与之比较,均未见统计学差异(P0.05)。结论活血益气方及其拆方具有不同程度促进心肌梗死模型大鼠梗死边缘区血管新生的作用,以活血益气方作用最为显著,益气方、活血方在其中起协同作用,其作用机制可能与下调Spred1、上调其mRNA的表达有关。在Spred1 mRNA上调的情况下,Spred1表达降低,提示Spred1 mRNA可能存在转录后调节因子,其具体作用机制尚需进一步研究。     

益气活血药对心梗后心功能不全大鼠心肌细胞RYR2、SERCA2a及PLB mRNA表达的影响

目的:探讨党参、黄芪、丹参等益气活血药对心梗后心功能不全大鼠心肌细胞RYR2,SERCA2a,PLB mRNA表达的干预作用。方法:SD大鼠42只,冠状动脉前降支结扎术后随机分成3组:假手术组(对照组)、模型组、中药组。模型组和对照组给予生理盐水灌服。中药组给予益气活血中药浸膏灌胃,治疗4周和8周后分别杀死一半大鼠,取出心脏PCR检测RYR2、SERCA2a及PLB mRNA。结果:各组心衰大鼠RYR2、SERCA2a及PLB mRNA的表达较对照组下降,但中药干预4周后中药组RYR2、SERCA2a及PLB mRNA表达较模型组都有明显增高(P<0.05)。中药干预8周后,RYR2、SERCA2a mRNA仍然高于模型组(P<0.05)。结论:党参、黄芪等中药能抑制心梗后心衰大鼠RYR2、SERCA2a及PLB mRNA下降的作用,但缺乏特异性,可能与益气活血药能促进心肌细胞的能量代谢,防止心衰后心肌细胞的凋亡,心室重构有关。     

益气逐瘀方对急性心肌梗死大鼠miR-24表达及心肌细胞凋亡的影响

目的:观察益气逐瘀方参元丹对急性心肌梗死大鼠miR-24表达及心肌细胞凋亡的影响。方法:50只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、参元丹高、中、低剂量组,每组10只,采用左冠状动脉前降支结扎法复制心肌梗死模型,参元丹高、中、低剂量组从术后第2天开始给予参元丹药液灌胃,假手术组和模型组给予等剂量生理盐水灌胃,共给药2周。治疗结束后检测大鼠血清CK、LDH水平及心肌组织miR-24基因表达情况,TUNEL法检测心肌细胞凋亡。结果:实验结束时,与模型组相比,参元丹高、中、低剂量组均能显著降低血清CK、LDH水平(P0.05,P0.01),升高心肌组织miR-24 mRNA表达(P0.05,P0.01),同时降低心肌细胞凋亡指数(P0.05,P0.01)。结论:益气逐瘀方参元丹能够减轻心肌梗死大鼠心肌损伤及细胞凋亡,其作用机制可能与上调心梗大鼠缺血心肌组织miR-24基因表达有关。     

电针对急性心肌梗死小鼠心肌组织炎症反应、趋化因子及心肌细胞凋亡水平的影响

目的 观察电针对急性心肌梗死小鼠心肌组织炎症反应、趋化因子及心肌细胞凋亡水平的影响,探讨其保护心肌的作用机制.方法 结扎左冠状动脉前降支,构建小鼠急性心肌梗死模型.实验小鼠随机分为对照组、模型组和电针组,电针治疗3、7d后,取心脏组织,分别用于制备冰冻切片和提取总RNA.免疫荧光染色检测梗死及周边区CD1lb表达,RT...     

中药红景天对大鼠缺血心肌Flt-1、KDR及Tie-2表达的影响

目的观察中药红景天对大鼠心肌梗死后心肌内血管内皮生长因子(VEGF)各受体表达的影响。方法在确定造模成功的基础上将大鼠随机分为4组：模型组、红景天组、阳性对照组及假手术组。饲养6周后处死动物,摘取心脏制作石蜡切片,进行标准免疫组化染色操作。染色后切片在IMS细胞图像分析系统中用免疫组化定量软件进行定量分析。计算阳性面积(area)和平均光密度值(OD)。观察缺血心肌VEGF受体：Fit-1、KDR及血管生成素(angiopoietin)的受体Tie-2的表达情况。结果中药红景天可提高红景天组大鼠心肌Fit-1与Tie-2的表达,与阳性对照组、模型组比较差异有显著性(P<0．05);红景天组心肌局部KDR的表达较假手术组和未干预组增加(P<0．05),但与阳性对照组、模型组比较,差异无显著性。结论中药红景天可能通过改变缺血心肌Fit-1及Tie-2的表达,达到促进血管新生,改善心肌缺血的作用。     

苏木乙酸乙酯提取物对大鼠同种异位心脏移植急性排斥反应心肌GrB mRNA表达的影响

目的 观察苏木乙酸乙酯提取物对同种异位心脏移植大鼠移植心肌GrB mRNA表达的影响,探讨苏木免疫活性部位抗排斥反应作用机理。方法 以Wistar大鼠为供体,以SD大鼠为受体,建立大鼠腹腔异位心脏移植模型, 将手术成功鼠随机分为模型组、苏木组、环孢素A（CsA）组,采用RT-PCR法检测GrB mRNA表达。常规方法观察心肌病理形态学。 结果 (1) 病理组织学分级:与模型组（积分31）比较,CsA组（积分14）和苏木组（积分23）均能减轻移植心肌病理损伤（P<0.05,P<0.01）。(2) 移植心肌组织GrB mRNA的表达：与模型组（1.3000±0.1207）比较,CsA组（0.6700±0.0997）和苏木组（0.7070±0.1215）能明显下调GrB mRNA表达（P<0.01）,CsA组与苏木组比较,差异无统计学意义（P>0.05）。结论 苏木乙酸乙酯提取物能够减轻移植心脏心肌的病理损伤,能够下调大鼠移植心脏心肌GrB的基因表达,这可能是抗急性排斥反应因素之一。     

黄芪注射液对大鼠左室重构及凋亡基因Caspase-3的影响

目的观察黄芪注射液对大鼠心肌梗死后左室重构及凋亡基因Caspase-3的影响。方法制作心肌梗死大鼠模型,实验分为4组,Ⅰ组(假手术组)、Ⅱ组(假手术+黄芪组)、Ⅲ组(模型组)和Ⅳ组(模型+黄芪组)。Ⅱ和Ⅳ组大鼠术后每日腹腔注射黄芪注射液2ml,工组和Ⅲ组大鼠给等体积生理盐水,连续用药4周后,观察左室结构变化,心肌羟脯氨酸含量及用免疫组化检测Caspase-3表达。结果与Ⅲ组比较,Ⅳ组心肌超微结构和左室重构指标改善,羟脯氨酸含量减少(P<0．05),Caspase-3阳性细胞明显减少,Caspase-3 mRNA表达明显下调(P<0．05)。结论黄芪注射液能改善大鼠心肌梗死后左室重构,并下调凋亡基因Caspase-3表达,抑制凋亡。