热休克蛋白70对脑出血大鼠神经细胞Bcl-2、Bax蛋白表达的影响

目的 探讨热休克蛋白70(HSP70)对大鼠脑出血神经细胞凋亡相关基因Bcl-2、Bax蛋白表达的影响。方法 将60只SD大鼠分为假手术组,脑出血组各30只,每组又分为6h、12h、1d、2d、3d、7d 6个亚组。假手术组向尾状核注射生理盐水2μL,脑出血组向大鼠尾状核注射2μL Ⅳ胶原酶,分别于各时间点处死大鼠取脑组织,采用免疫组织化学染色,检测各组大鼠脑出血周围HSP70、Bax、Bcl-2蛋白的表达并进行统计学处理。结果 HSP70、Bcl-2、Bax含量脑出血组较假手术组均明显增高(P<0．01)。HSP70表达在6h出现,3d达高峰,7d表达减少。Bc-2的表达在6h出现,在1d时达高峰,第2天维持在高表达状态,随后表达逐渐减少。Bax的表达分别在12h和3d达高峰,在1d时表达呈下降趋势,第7天表达逐渐减少。结论 HSP70高表达对出血脑组织具有明显的保护效应,其促进脑组织抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,减少促凋亡蛋白Bax表达,增加Bcl-2／Bax比率,以此抑制脑组织细胞凋亡,从而发挥其对神经细胞的保护作用。     

热休克蛋白70,p53,Bcl-2在宫颈癌组织中的表达及相关性研究

目的探讨宫颈癌组织中热休克蛋白70(HSP70),p53,Bcl-2的表达及相关性研究。方法采用免疫组织化学SP法对46例宫颈癌组织和26例正常组织进行HSP70,p53和Bcl-2基因蛋白检测。结果HSP70,p53和Bcl-2基因蛋白在宫颈癌组织中的表达率显著高于正常对照组(P<0.01);HSP70和p53在宫颈癌组织中的表达呈显著正相关(rS=0.659,P=0.000);HSP70和Bcl-2及p53和Bcl-2在宫颈癌中的表达显著无相关(rS=0.100,P=0.508;rS=0.184,P=0.221)。结论HSP70,p53和Bcl-2的表达与宫颈癌的发病有密切关系,HSP70蛋白和p53蛋白与宫颈癌生物学行为有关,具有显著的相互协同作用。     

凋亡素与热休克蛋白70启动子区热休克元件特异结合诱导HepG2细胞凋亡

目的 探讨凋亡素下调HepG2细胞热休克蛋白70 (HSP70)的分子机制.分析凋亡素与HSP70启动子区热休克元件(HSE)的相互结合作用.方法 应用凝胶电泳迁移率分析(EMSA)法检测凋亡素与HSE的结合;荧光素酶报告基因实验进一步分析凋亡素在细胞内与HSE的结合能力.结果 EMSA结果表明凋亡素在体外和细胞水平可以直接与HSP70启动子区的HSE结合,凋亡素浓度越高,与HSE结合能力越强;Luciferase报告基因结果显示凋亡素对HSE具有专一的结合能力,揭示在与HSE结合上,凋亡素与HSF1间存在竞争关系.结论 凋亡素与HSP70启动子区HSE序列结合,抑制HSP70转录的起始,显著下调HSP70的表达,解除HSP70对肿瘤细胞的保护作用,诱导肿瘤细胞的凋亡.     

热休克蛋白70和热休克蛋白27在宫颈鳞癌中的表达及其意义

目的探讨热休克蛋白70(HSP70)和热休克蛋白27(HSP27)在宫颈鳞癌中的表达及其相关性。方法应用免疫组织化学方法检测HSP70、HSP27在60例宫颈鳞癌,18例宫颈上皮内瘤变(C IN),7例正常宫颈组织中的表达。结果宫颈鳞癌组织中HSP70,HSP27阳性表达率与正常宫颈组织相比差异有统计学意义(P<0.05);宫颈鳞癌中HSP70的阳性表达与病理分级、临床分期、淋巴结转移密切相关(P<0.05),HSP27的阳性表达与病理分级密切相关(P<0.05);HSP70与HSP27在宫颈鳞癌中的表达无相关关系(P>0.05)。结论HSP70、HSP27均在宫颈鳞癌发生和发展中起重要作用,HSP70可能作为判断宫颈癌预后的重要指标。     

肝细胞肝癌中HSP70和Bcl-2的表达及意义

目的:初步研究热休克蛋白70(HSP70)及抗凋亡蛋白Bcl-2在肝细胞肝癌(HCC)中的表达及其与HCC凋亡的关系。方法:145例HCC、78例肝硬化标本经病理复查后制成组织芯片,免疫组织化学方法检测HSP70和Bcl-2的表达情况。结果:HCC组HSP70表达指数高于肝硬化组(P<0.01);HCC组Bcl-2表达指数低于肝硬化组(P<0.01);HSP70阳性表达指数与Bcl-2阳性表达指数呈负相关(P<0.05)。结论:HSP70可能作为主要的抑制凋亡蛋白参与HCC的凋亡调控,Bcl-2在HCC中凋亡抑制作用可能减弱。     

慢性高原病骨髓细胞环氧化酶2和热休克蛋白70表达及细胞凋亡研究

目的 研究慢性高原病（chronic mountain sickness,CMS）患者骨髓单个核细胞环氧化酶-2（cyclooxygenase-2,COX-2）和热休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP70)的表达及骨髓细胞凋亡变化,探讨它们在CMS发生发展过程中的作用。方法 20例CMS患者（CMS组）按照《慢性高原病青海诊断标准》（西宁,2004年8月）确诊,采集CMS患者骨髓标本,用淋巴细胞分离液分离出单个核细胞,采用RT-PCR方法半定量检测CMS患者骨髓单个核细胞表面COX-2 mRNA和HSP70 mRNA的表达,同时用TUNEL技术定量研究CMS患者骨髓单个核细胞凋亡指数,并与20名健康成人（对照组）骨髓标本研究结果比较分析。结果CMS组骨髓单个核细胞COX-2 mRNA表达量（0.97±0.45）明显高于对照组（0.32±0.15）（P＜0.05）。CMS组骨髓单个核细胞HSP70 mRNA表达量为0.60±0.19,而在对照组中无表达。TUNEL技术研究发现CMS组骨髓单个核细胞凋亡指数（10.41%±3.78%）明显低于对照组 （21.12%±8.16%）,差异有统计学意义（P＜0.05）。CMS组中,COX-2 mRNA、HSP70 mRNA表达量分别与血红蛋白浓度间呈正相关（r值分别为0.51及0.58, 均P＜0.05）,COX-2 mRNA与HSP70 mRNA间呈显著正相关（r=0.81, P＜0.05）,而在对照组中COX-2 mRNA表达量与血红蛋白浓度间无明显相关性（P＞0.05）。在CMS组和对照组中,骨髓单个核细胞凋亡指数与COX-2 mRNA及HSP70 mRNA表达量之间均未发现明显相关性（均为P＞0.05）。结论 CMS患者骨髓细胞COX-2和HSP70表达升高,而骨髓细胞凋亡减少,可能在慢性高原病发病过程中发挥着一定的作用。     

氯胺酮对感染性休克大鼠脑组织中热休克蛋白70的影响

目的观察氯胺酮对感染性休克大鼠血流动力学、7d生存率以及脑组织中热休克蛋白70的影响。方法取健康成年雄性（SD）大鼠60只,随机分为对照组、CLP组和氯胺酮组,各组20只。采用盲肠结扎穿孔（CLP）法复制感染性休克模型（CLP组）,氯胺酮组于制模前腹腔给予80mg/kg。采用颈总动脉穿刺置管,持续监测平均动脉压（MAP）;观察各组大鼠7d存活时间及存活率;用免疫组化法测定脑组织热休克蛋白70（HSP70）阳性表达。结果对照组各时间点的MAP趋于稳定,CLP组术后MAP进行性下降,氯胺酮处理能逆转MAP下降;CLP组大鼠存活率（0）显著低于对照组（100%）及氯胺酮组（40%）,差异均有显著性（P〈0.05）;CLP组HSP70阳性产物灰度值显著低于对照组,但显著高于氯胺酮组（P〈0.01）。结论氯胺酮可以提高大鼠7d生存率具有抗感染性休克作用,可能与增加脑组织中热休克蛋白70的表达有关。     

热休克蛋白和细胞凋亡

热休克蛋白 (ＨＳＰ)是普遍存在于生物体细胞中的一个蛋白质家族 ,是在热休克状态下启动一系列特殊基因编码合成的蛋白质。ＨＳＰ能保护细胞并促进细胞从各种刺激所造成的损伤中自身修复 ,具有多种生物学功能。如帮助蛋白折叠、装配、向内质网易位及分解错装的蛋白等分子伴娘功能[1 ,2 ] 、参与抗原提呈[3] 、免疫调控[4] 、预防和控制感染[5] 、抗肿瘤[6] 及参与自身免疫病的发生[1 ,7] 等生理和病理作用。ＨＳＰ和细胞凋亡均为目前国际上研究的热点 ,但有关二者的相关性报道甚少 ,本文就近年来的研究进展情况介绍如下。1　ＨＳＰ家族及其…     

次声作用后大鼠脑中热休克蛋白70的表达和分布

观察次声作用后大鼠脑中热休克蛋白ＨＳＰ７０的表达和分布。方法：ＳＤ大鼠接受频率为８Ｈｚ和１６Ｈｚ,声压为９０ｄＢ和１２０ｄＢ次分别作用１,３,７,１４,２１ｄ后,采用免疫组织化学方法观察大鼠脑中ＨＳＰ７０的表达和分布。结果：各参数次声作一定时间后,ＨＳＰ７０阳性神经元主要布在下丘脑,边缘系统,听觉中枢,皮质,海马等脑区,各脑区出现阳性反应的时间不同,且随次声频率增高、声压增强及作用次数增加,ＨＳＰ     

抑制热休克蛋白70表达对人脑胶质瘤细胞生长的影响

目的：探讨抑制热休克蛋白７０（ＨＳＰ７０）表达对脑胶质瘤细胞增殖及凋亡的影响。方法利用细胞培养,电子显微镜及流式细胞仪的方法,观察民ＨＳＰ７０表达后对细胞生长的影响。结果体外培养脑胶质细胞株,经不同浓度槲皮素作用不同时间后,碘化丙碇染色荧光显微镜观察发现细胞核固缩、致密和碎裂现象;流式细胞检测发现亚二倍体峰,提示出现细胞凋亡。分析细胞周期,发现凋亡细胞主要出现在Ｇ０－Ｇ１期,随药物浓度的增加而增加     

热休克蛋白70-Ⅱ型单纯疱疹病毒糖蛋白D DNA疫苗的构建及表达

目的：针对Ⅱ型单纯疱疹病毒（HSV-2）包膜糖蛋白D（gD）,以热休克蛋白70（Hsp70）为载体,构建pVAX-Hsp70-HSV2gD DNA疫苗。方法：将Hsp70和HSV-2gD蛋白的基因分别克隆至真核表达载体pVAX,构建成重组质粒pVAX-Hsp70-gD并测序鉴定。重组质粒pVAX-Hsp70-gD转染COS-7细胞,用免疫组化、SDS-PAGE和West-ern blotting方法鉴定重组质粒的表达情况。结果：测序证实重组质粒序列正确,表达产物的SDS-PAGE分析发现,在相对分子量为92 000处有外源蛋白表达,与预期蛋白带一致。免疫组化方法和Western blotting也证明,构建的重组质粒能在COS-7细胞内表达。pVAX-Hsp70-HSV2gD组核酸疫苗免疫的小鼠,其脾淋巴细胞培养上清中γ-干扰素的水平高于其他组（P〈0.05）。结论：成功构建了pVAX-Hsp70-HSV2gD DNA疫苗,为其进一步的研究打下了基础。     

热休克蛋白70在鼠脑缺血/再灌注损伤的表达

目的:为了加深了解热休克蛋白70(HSP70)与脑缺血/再灌注损伤的关系,探讨HSP70的表达与细胞形态学变化。方法:24只SD大鼠通过左颈总动脉灌注生理盐水形成轻度左侧脑缺血。其中12只大鼠为单纯缺血组,另12只为缺血30分钟后再灌注30分钟组。两组切片分别进行免疫细胞化学和病理组织学观察。结果:我们发现脑缺血30分钟HSP70在顶叶皮层表达,分布在细胞膜,轴突和树突中。再灌注30分钟无HSP70表达。结论:局灶性脑缺血可诱导HSP70表达,恢复血循环无HSP70表达。     

人急性白血病淋巴细胞HSP70及 HSP70 mRNA的表达研究

目的：检测急性白血病病人血淋巴细胞热休克蛋白70（HSP70）及其mRNA的表达。方法：ELISA法检测HSP70,RT－PCR法检测HSP70 mRNA。结果：化疗前急性白血病病人淋巴细胞HSP70及mRNA明显低于正常人;而化疗后,急性白血病病人淋巴细胞HSP70及mRNA明显高于正常人（P＜0．01）,结论：HSP70与急性白血病癌细胞关系密切,对癌细胞起保护作用。     

康复训练对大鼠脑梗死后Fos和Hsp70表达的影响

目的：研究康复训练对脑梗死大鼠大脑皮质Fos,Hsp70表达的影响,方法：采用60只SD大鼠制作脑梗死模型,1d后随面分为康复组和制动组,康复组每天给予平衡,抓握,旋转,行走等训练,制动组置于网状笼风固定,各组在1,7,14,21和28d检测Fos,Hsp70蛋白表达,结果,康复组和制动组大鼠大脑皮质出现Fos和Hsp阳性反应神经元,康复组反应明显较制动组强,对侧较梗死侧多,结论：康复训练可激活脑梗死大鼠大脑梗死灶周围和对侧向相应皮质神经元功能,促进运行功能恢复。     

温热对BGC—823细胞抑制作用及Hsp70、Bcl—2、Bax表达的影响

目的 观测温热对人胃癌细胞BGC－823的抑制作用及Hsp70、Bcl-2、Bax表达的影响。方法 通过MTT法，测定41℃100min、42℃100min对BGC－823细胞的抑制作用；运用免疫组化ABC法染色，观察42℃100min作用后0、8、16、32h，BGC－823细胞Hsp70、Bcl-2、Bax的表达。结果（1）BGC－823细胞在41℃及42℃温热作用后，均受到一定抑制；42℃温热比41℃对细胞的抑制作用较强且持久（P＜0．01）；（2）42℃温热作用后细胞Hsp70、Bcl－2表达均明显增加，16h表达达到高峰，且主要分布于核区；Bax表达也增加，但低于Bcl－2。结论 温热对BGC－823细胞有一定抑制作用，Hsp70、Bcl-2表达增加可能与细胞自身修复或自身保护有关，Bcl-2的胞核分布与温热对细胞的抑制有关。     

汉坦病毒诱导非洲绿猴肾上皮细胞热休克蛋白70的表达规律及意义

目的 :旨在研究汉坦病毒 (Hantavirus,HTV)感染非洲绿猴肾上皮 (Vero E6 )细胞后应激反应的规律及意义。　方法 :采用免疫细胞化学染色法、免疫荧光激光共聚焦及RT PCR方法观察热体克蛋白 (HSP) 70的表达规律。　结果 :HTV感染Vero E6细胞后 ,免疫细胞化学染色法可检出HSP 70阳性信号。感染后不同时间点 ,免疫荧光激光共聚焦显微镜及RT PCR观察结果表明 ,HSP 70及HSP 70mRNA的水平在感染后迅速升高 ,并持续高表达 (P <0 .0 5 )。　结论 :HTV可诱导Vero E6细胞HSP 70高表达 ;HSP 70可能具有抑制病毒复制和保护细胞的作用     

Bcl-2 loop domain在Bcl-2蛋白结构中的作用初探

目的探讨B细胞淋巴瘤／白血病基因2（Bcl-2） Loop domain结构域在Bcl-2蛋白结构中的作用。方法应用PCR及Western blot方法检测Bcl-2 Loop domain结构域突变前后Bcl-2蛋白的表达情况。结果Bcl-2 Loop domain结构域突变后Bcl-2蛋白只在沉淀中检测到,在上清中未检测到。结论Bcl-2 Loop domain结构域被突变后,Bcl-2蛋白空间结构发生改变,推测Bcl-2 Loop domain结构域在Bcl-2蛋白结构中起到重要作用。     

不同切肝量对大鼠肝脏HSP 70表达的影响

目的探讨大鼠肝脏HSP70在评价手术创伤程度中的意义。方法建立不同肝切量的大鼠创伤模型,160只健康雄性SD大鼠随机分成正常对照组及轻度、中度、重度创伤组,采用western blotting方法,动态观察各创伤组术后2、8、12、24、48 h肝组织中HSP70的表达情况。结果各创伤组伤后HSP70的表达迅速增加,8 h达到峰值后逐渐下降,48 h降至正常水平,随着肝切量的增多这种变化更加明显。结论手术创伤后肝组织HSP70表达升高,于8 h达到峰值,提示HSP70可能是创伤后早期参与肝细胞损伤机制启动的一个重要因素。随着肝切量的增加,HSP70的表达增高,提示HSP70的表达可作为判断肝脏手术创伤程度的一个指标。     

瘢痕疙瘩不同部位Bcl-2的表达及其意义

目的分析瘢痕疙瘩浸润部、增生部和老化部凋亡蛋白Bcl-2表达差异以探讨瘢痕疙瘩呈浸润性生长的机制。方法取手术切除的瘢痕疙瘩组织反正常皮肤各12例为标本，对12例瘢痕疙瘩组织和正常皮肤行白细胞介素2免疫组织化学染色，比较瘢痕疙瘩不同病理部位和正常皮肤Bcl-2差异。结果瘢痕疙瘩浸润部Bcl-2明显高于增生部、老化部和正常皮肤，差异有显著性（q=4．29，P〈0．05），瘢痕疙瘩增生部Bcl-2明显高于老化部和正常皮肤，差异有显著性（q=4．20，P〈0．05），而后两者间差异无显著性（P〉0．05）。结论瘢痕疙瘩不同部位Bcl-2的表达差异可能是导致瘢痕疙瘩呈浸润性生长的机制之一。     

88例脑梗死急性期患者的TCD结果分析

目的探讨脑梗死急性期的经颅超声多普勒(TCD)的特点。方法选取88例脑梗死急性期的患者作为病例组,均进行TCD检查,将其结果进行分析比较。结果脑梗死急性期TCD频谱图改变79例(89.77%),与梗死灶相对应的动脉血流速度增加19例(21.59%),减慢或频谱信号消失64例(72.73%),脉动指数增高51例(57.95%)。结论 TCD可检测脑梗死急性期的血流动力学异常,反映血管功能状况,可为脑梗死的诊断提供更全面的依据。