胰岛电镜取材定位的新方法

本文介绍一种定位准确的胰岛电镜取材新方法，我们选用双硫腙溶液灌注后取材，可准确无误的取到胰岛，从而解决了取材的问题，对观察胰岛细胞的超微结构研究提供了一种可靠方法与技术。     

骨髓间充质干细胞移植治疗糖尿病的研究进展

骨髓间充质干细胞是一种特殊的干细胞,来源广泛,取材方便,能够逃避免疫排斥反应,在体内外能够向胰岛样细胞分化,并能够降低糖尿病受体的血糖水平,是一种理想的种子细胞,是近年研究的热点．本文详述了近年来骨髓间充质干细胞移植治疗糖尿病的研究情况,希望能够解决胰岛移植所面临的供体短缺和免疫排斥问题,给糖尿病的治疗带来新的突破．     

连结于蛋白质转换功能区的蛋白质有效地转导胰岛

埃德蒙顿实验——一种获得巨大成功的新型免疫抑制疗法证实：胰岛细胞移植术使糖尿病的治疗成为现实。然而，在埃德蒙顿实验中，单一供体不提供足够的胰岛以获得不依赖移植接受者的胰岛素。这一局限主要是由分离过程中激活了的胰岛凋亡所造成的。在本研究中，我们描述了一种暂时将抗凋亡蛋白转移至胰岛的高效能系统，从而开创了一个令人振奋的新的治疗时机以改善可移植胰岛的生存能力。我们将β-半乳糖苷酶与11-氨基酸残基融合，     

急性吗啡染毒大鼠体内吗啡的定位研究

用免疫组织化学法对经腹腔注射吗啡大鼠体内吗啡的分布进行定位观察。结果表明，吗啡分布在心脏、肝脏、脾脏、肾脏、肾上腺、胃、小肠、胰岛、颌下腺和舌下腺中，腹腔注射吗啡１０分钟后，吗啡即在心脏、肝脏、脾脏、胰岛、小肠粘膜中出现；１６０分钟后，心脏和胃可观察到吗啡存在。该研究提供了给药后不同时间吗啡在体内的分布情况，可为吸毒致死后尸检取材提供参考依据。     

应用淋巴细胞分离液纯化大鼠胰岛的实验研究

目的：建立一种简便、易行和高效的胰岛分离纯化方法，以减少对胰岛细胞的损伤，获得高质量的胰岛组织。方法：选用SD大鼠经胆总管原位灌注胶原酶液，分离消化胰腺组织，用淋巴细胞分离液(histopaque-1077)纯化胰岛细胞。结果：可收获大量的高纯度胰岛，纯度达95％以上，体外葡萄糖刺激实验表明胰岛对刺激反应良好，将胰岛移植于糖尿病小鼠体内可短期纠正其高血糖状态。结论：应用单一密度淋巴细胞分离液纯化大鼠胰岛的方法是一种操作简单、价格低廉、重复性好的大鼠胰岛纯化方法。     

从大鼠胰腺分离完整的胰岛

用改良胶原酶消化技术,聚蔗糖密度梯度离心及手法挑拾方法从大鼠胰腺成功地分离出完整的胰岛。每只大鼠胰腺可分得胰岛150～250个。经聚蔗糖密度梯度离心,80％以上胰岛分布在23％与20％聚蔗糖层之间,另20％分布在20％与11％层之间。所得胰岛在显微镜下形态完整、结构良好,体外培养证实具有分泌胰岛素功能。本文还对胰腺取材方法、消化时间等作了讨论。     

人胰岛微血管构筑的研究

为研究急性坏死性胰腺炎的发病机理，采用墨汁灌注光镜观察法、微血管铸型扫描电镜观察法，研究了成人胰腺胰岛的微血管构筑。结果表明：成人胰腺内绝大多数胰岛由小叶内动脉直接分支供应；胰岛内微循环流向可分为三种类型，即中央型、周围型和混合型；胰岛输出血管——胰岛－腺泡门脉血管可分为聚合型和连续型两种类型；少数小胰岛无小叶内动脉分支直接供应，而由附近较大胰岛的输出血管供给，这种连接大、小胰岛之间的血管称为胰岛－胰岛门脉血管。     

胰腺移植相关研究进展

整器官移植和胰岛移植治疗1型糖尿病各有千秋 美国研究人员比较了整器官移植和单纯胰岛移植治疗1型糖尿病的有效性，风险和费用。结果显示，尽管分离胰岛移植技术发展迅速，但整器官移植能更持久，可靠地控制血糖；而且由于胰岛移植往往要从多个供体获得足够的量，费用更高。因此，研究人员认为，应将胰岛移植作为整器官移植的一种补充(Ann Surg．2004，240：631～640；discussion 640-643)。     

人胰岛微血管构筑的研究

为研究急性坏死性胰腺炎的发病机理，采用墨汗灌注光镜观察法、微血管铸型扫描电镜观察法，研究了成人胰腺胰岛的微血构筑。结果表明：成人胰腺内绝大多数胰岛由小叶内动脉直接分支供应；胰岛内微循环流向可分为三种类型，即中央型、周围型和混合型；胰岛输出血管——胰岛－腺泡门脉血可分为聚合型和连续型两种类型；少数小胰岛无小叶内动脉分支直接供应，而由附近较大胰岛的输出血管供给，这种连接大、小胰岛之间的血管称为胰岛－胰     

干细胞向胰岛细胞的诱导分化及其在实验性糖尿病治疗中的应用

胰岛移植是治疗糖尿病的一种有效方法，然而，供体的缺乏极大地限制了胰岛移植的临床应用。如何解决胰岛移植所需的细胞来源是当今医学研究的一个重要问题。虽然异种胰岛移植是一种可能的解决途径，但它所伴随的免疫排斥和病毒感染等问题至今还没有得到解决。干细胞具有自我增生的能力和分化成为各种组织细胞的潜能。通过体外培养干细胞并将其诱导分化成为胰岛的内分泌细胞，将有可能解决糖尿病治疗所需要的细胞来源。干细胞由于组织起源的不同在增生和分化能力上存在很大差别。将干细胞诱导分化成为胰岛的内分泌细胞并形成适合于细胞移植的胰岛样结构涉及到许多关键技术。虽然，国际上已经在此研究领域取得了一些令人鼓舞的研究结果，但将干细胞技术应用于糖尿病的治疗还有许多问题有待解决。本文就这方面的研究进展及有待解决的问题作一扼要的综述。     

一种改良的大鼠胰岛分离方法

目的 寻找并建立一种改良的、实用可靠的大鼠胰岛制备和培养方法。方法 采用胰管内顺行灌注胶原酶溶液，静态消化，Ficoll不连续密度梯度离心纯化胰岛，手挑法捡出全部胰岛。分离后胰岛在37℃、体积浓度95％O2和5％CO2下培养1周，通过测量培养液的胰岛素含量观察胰岛功能变化。结果 355～875个胰岛／胰腺，捡出后胰岛纯度可达：100％，活率≥95％。本方法制备胰岛体外培养后可以测出功能良好。结论 本法胰岛制备技术已趋于完善，效果满意，获得的胰岛体外培养后实验证明其功能良好。     

翻白草对糖尿病大鼠胰岛形态结构的影响

目的研究翻白草对糖屎病大鼠胰岛B细胞的作用。方法采用四氧嘧啶建立糖尿病大鼠模型,自造模成功后,灌胃给予翻白草水煎液,连续给药4周,常规取材、固定、切片,采用醛品红法染色,镜下观察。结果翻白草组大鼠胰岛边界清楚,B细胞数量较正常对照组咯有减少。但较模型对照组密度高,细胞结构完整,无肿胀坏死现象。结论翻白草能有效保护胰岛B细胞。     

人胎胰岛冷冻保存的实验研究

报告了一种在无速率冷冻装置条件下获得保持较高成活率和功能的胰岛冻存方法。冻存胰岛复苏后活性测定结果表明，（１）胰岛成活率为８５％～９０％；（２）保持了胰岛素的分泌功能和对葡萄糖的反应力；（３）β细胞可进行旺盛的胰岛素生物合成；（４）仍保持完整的细胞结构和分泌结构。提示人胚胎胰岛在冻存后仍有与新鲜胰岛相似的功能和活性。     

胎儿胰岛的电镜观察

采用电镜观察不同胎龄鹇胎儿的胰岛起微结构。结果发现：（1）在第15周胎龄胰岛细胞中出现特征性分泌颗粒，由此可识别A、B、D三种细胞；（2）第16周A、B细胞出现分泌活动，主要以胞吐方式进行；（3）整个胎儿时期胰岛中可见一种无颗粒，细胞器少的细胞存在于内、外分泌部。（4）内外分泌细胞夹杂存在。并结合胰岛移植的应用作了讨论。     

移植胰岛血管内皮细胞GIPR表达的实验研究

目的:研究葡萄糖依赖性胰岛素刺激多肽受体(Glucose-dependent insulinotmpic polypeptide receptor,GIPR)在移植胰岛血管内皮细胞的表达情况.方法:用胰管内灌注、V型胶原酶消化,Ficoll-400梯度离心纯化的方法,获取较纯胰岛后通过门静脉途径移植到糖尿病大鼠肝脏,术后每天给于免疫抑制剂他可莫斯(Taerolimus,FK506)和氯芬酸酯(Mycophenolate mofetil,MMF)灌胃.移植模型分别饲养7、14、40、60d后取材,用免疫组化方法研究GIPR在胰岛血管的表达.结果:移植胰岛内部分血管内皮细胞表达GIPR.结论:GIPR阳性内皮细胞参与了移植物血管重建;新生的胰岛血管具备肝脏血管某些特征,能够被GIP影响.     

体外胰腺导管上皮细胞与胰腺腺体培养对比分析

目的:比较以胰腺导管上皮和腺细胞培养获取胰岛细胞的差别,以探寻获取胰岛细胞的可靠途径.方法:用胶原酶消化法,获取胰腺导管上皮细胞和胰岛细胞,进行体外培养,观察其细胞形态、细胞纯度和胰岛素分泌量,比较两种细胞来源获取胰岛细胞的差异性.结果:在光镜下见胰腺导管上皮细胞组(Ⅱ组)具有较强的增殖能力,能够产生胰岛样细胞团;硫腙(DTZ)染色阳性细胞团纯度记数高于腺体细胞组(Ⅰ组)(87.6%/73.7%);胰岛素分泌量明显高于后者(237.23±52.41/566.07±55.66;162.87±38.17/431.22±57.59;105.89±31.47/359.68±62.27;P<0.01),但组内则无统计学意义的差别(P>0.05),Ⅰ、Ⅱ组胰岛素分泌量随时间延长而衰减,其第4、6天分泌量分别为第2天的68%、44%和75%、63%.结论:胰腺导管上皮细胞具有较强的转分化为胰岛细胞的能力,在胰岛细胞培养取材过程中,不能忽视或丢弃,它可能是可转分化为胰岛细胞的胰腺干细胞之一.     

LADA患者自身抗体检测的临床意义

糖尿病（diabetes mellitus）是以高血糖为特征、以糖代谢紊乱为主要表现的慢性复杂的代谢性疾病。1型糖尿病（type 1diabetes mellitus，T1DM）具有胰岛B细胞产生胰岛素功能受损的特征，是一种免疫介导的疾病。成人迟发性自身免疫性糖尿病（LA—DA）是一种特殊类型的1型糖尿病（T1DM），其临床表现与2型糖尿病（T2DM）相似，但发病机制却是由于免疫介导的胰岛细胞炎性破坏，可导致胰岛功能迅速恶化，     

骨髓间充质干细胞诱导分化为胰岛细胞的研究进展

最近研究表明，无论同种异体还是自体胰岛细胞移植，均是治疗糖尿病（包括1型和部分2型）的一种有效方法。通过干细胞定向诱导分化，产生大量有功能的胰岛细胞，然后进行自体移植，这种方法已经成为临床研究治疗糖尿病的焦点。     

大鼠胃窦十二指肠粘膜胰岛淀粉样多肽免疫反应细胞的定位研究

大鼠胃窦十二指肠粘膜胰岛淀粉样多肽免疫反应细胞的定位研究北京医科大学组织学胚胎学系梁文妹，李占淳，黄岩，石爱荣胰岛淀粉样多肽（ＩｓｌｅｔＡｍｙｌｏｉｄＰｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ，Ｉ－ＡＰＰ）是Ｗｅｓｔｅｒｍａｒｋ等于１９８６～１９８７年分离提纯的一种新的...     

Graves''''病糖代谢改变的临床观察

Graves’病(GD)是一种自身免疫性疾病，常合并不同程度的糖代谢紊乱和胰岛β细胞功能紊乱。胰岛素的测定作为了解胰岛β细胞功能的指标已广泛应用于临床，其测定多采用放免法，此方法不能排除胰岛素原(PI)的影响，因此不能真实反映胰岛β细胞功能。本研究详细分析了，GD患者的糖代谢改变并采用化学发光法分析GD患者的血清胰岛素水平，此方法测定的是真胰岛素水平，能排除PI的影响。