白花蛇舌草对白血病CEM细胞的抑制作用及诱导其凋亡的研究

目的 研究白花蛇舌草对白血病CEM细胞的抑制作用及其机制.方法 采用MTT比色实验检测白花蛇舌草对CEM细胞的抑制率;光镜、电镜技术观察细胞凋亡形态结构的改变;流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡率.结果 白花蛇舌草能明显抑制CEM细胞的生长,药物浓度在0.025 6 μg/ml即具有显著的抑制作用,抑制率呈剂量和时间依赖性,半数抑制浓度(IC50)约为0.128 μg/ml;光镜、电镜下见细胞体积缩小,细胞膜皱缩,染色质明显浓缩,核聚集,边聚于核膜下呈新月形等典型的凋亡特征;流式细胞术证实白花蛇舌草能诱导CEM细胞凋亡,凋亡率也呈剂量和时间依赖性.结论 白花蛇舌草对白血病CEM细胞的生长具有明显的抑制作用,诱导细胞凋亡是其机制之一.     

肿节风对白血病CEM细胞的抑制作用

目的:研究肿节风水提物对白血病CEM细胞的抑制作用及其机制。方法:以白血病CEM细胞作为研究对象,采用MTT比色试验检测肿节风水提物对CEM细胞的抑制率;光镜、电镜技术观察肿节风水提物作用CEM细胞后其形态的改变;DNA琼脂糖凝胶电泳检测肿节风水提取物对白血病CEM细胞的凋亡作用。结果:肿节风水提物能明显抑制CEM细胞的生长,生药浓度在1.79mg/ml作用24h后,即具有显著的抑制作用,抑制率随剂量的加大和时间的延长而增强,作用48h的半数抑制生药浓度(IC50)约为24.2mg/ml;与对照组相比,实验组光镜、电镜下可见细胞体积缩小,胞浆浓缩、细胞膜皱缩,核解聚、染色质明显浓缩、聚集,边聚于核膜下,甚至形成凋亡小体;琼脂糖凝胶电泳结果显示实验组出现明显的DNA梯形凋亡带,而对照组没有出现梯形条带。结论:肿节风水提物对白血病CEM细胞的生长具有明显的抑制作用,诱导细胞凋亡可能是其抑制白血病CEM细胞生长的机制之一。     

白花蛇舌草水提物对白血病CEM细胞抑制作用及机制研究

目的研究白花蛇舌草对CEM细胞抑制作用及机制。方法以不同浓度的白花蛇舌草水提物作用CEM细胞24,48,72h后,通过MTT比色试验,检测其对CEM细胞的抑制率;用浓度分别为166μg/ml、33.2μg/ml、6.64μg/ml的白花蛇舌草水提物作用于CEM细胞24,48,72h后,通过逆转录PCR(RT-PCR)检测P53基因的表达,探索白花蛇舌草抑制CEM细胞的可能机制。结果白花蛇舌草水提物能够抑制CEM细胞的生长;白花蛇舌草能促进CEM细胞的P53基因表达,且随用药浓度的升高及作用时间的延长,其抑制作用逐渐增强、P53基因表达也逐渐增强。结论白花蛇舌草水提物能抑制白血病CEM细胞的生长,其作用强度与时间、浓度呈正相关,其抑制机制可能与上调P53基因的表达有较大关联。     

蟾酥注射液抑制白血病HL-60细胞增殖及诱导其凋亡实验研究

目的 :探讨蟾酥注射液 (CHS)体外抑制白血病 HL- 6 0细胞增殖的机制。方法 :采用 MTT法检测 CHS对白血病 HL- 6 0细胞增殖的影响 ;采用 Giemsa染色和透射电镜技术观察 CHS处理的 HL- 6 0细胞形态学和超微结构变化 ;采用琼脂糖凝胶电泳检测 CHS处理的 HL- 6 0细胞的 DNA片段化。结果 :CHS2 4h对白血病细胞增殖出现抑制 (P<0 .0 5 )。 CHS处理的 HL- 6 0细胞光镜和电镜出现核着边、核碎片和凋亡小体 ;CHS处理的 HL- 6 0细胞 DNA电泳出现 DNA梯状图谱。 2 .2 5× 10 - 1 μg/ m l CHS作用 2 4,48,72 h后凋亡指数 (A1)高于阴性对照组 (P均 <0 .0 5 )。 2 .2 5 ,2 .2 5× 10 - 1 ,2 .2 5× 10 - 2 μg/ m1作用 48h的 HL- 6 0细胞 AI高于阴性对照组 (均 P<0 .0 5 )。结论 :CHS体外抑制白血病 HL- 6 0细胞增殖 ,并且诱导其凋亡。诱导凋亡可能是 CHS抑制白血病细胞增殖的机制     

六神丸诱导白血病细胞株HL-60细胞凋亡的实验研究

目的从诱导细胞凋亡角度探讨六神丸治疗白血病的机理.方法选择HL-60细胞为实验对象,以六神丸及其主要成分之一的蟾酥进行该实验.以台盼蓝染色作为细胞的活力指标,采用显微镜和流氏细胞仪检测方法来观察细胞凋亡.结果显示六神丸、蟾酥在较高的浓度时表现为细胞毒作用,在较低浓度时则有诱导细胞凋亡作用.其效果与药物浓度及作用时间密切相关.结论这可能是六神丸治疗白血病的机制之一.     

山豆根水提物对白血病CEM细胞生长抑制及其机制研究

目的 研究山豆根水提物对白血病CEM细胞的生长抑制及其可能机制.方法 以人类T淋巴细胞白血病CEM细胞作为研究对象,采用MTT实验检测山豆根对CEM细胞的抑制率;光镜、电镜技术观察CEM细胞形态结构的改变;琼脂糖凝胶电泳检测山豆根水提取物对CEM细胞的诱导凋亡作用.结果 山豆根水提物能明显抑制CEM细胞的生长,药物浓度在0.019 mg/ml作用48 h后,即具有显著的抑制作用,抑制率呈剂量和时间依赖性,半数抑制浓度(IC50)约为9.728mg/m];光镜、电镜下见细胞体积缩小,细胞膜皱缩,染色质明显浓缩、聚集,边聚于核膜下呈典型的凋亡特征;琼脂糖凝胶电泳结果显示实验组出现明显的DNA梯形凋亡带,而对照组没有出现梯形条带.结论 山豆根水提物对白血病CEM细胞的生长具有明显的抑制作用,抑制白血病CEM细胞生长的机制之一是诱导CEM细胞凋亡.     

六神丸诱导白血病细胞凋亡及调控凋亡相关基因的实验研究

目的 :从细胞凋亡角度研究六神丸及蟾酥、雄黄治疗白血病的机制。方法 :MTT法观察六神丸对HL 6 0白血病细胞的生长抑制、用荧光、瑞士 吉姆萨染色法观察细胞凋亡的形态学变化 ,RT PCR方法检测相关基因Bcl 2、C myc、BaxmRNA表达。结果 :六神丸及蟾酥水溶液有明显促进白血病细胞HL 6 0凋亡的作用 ,而含同样剂量雄黄的水溶液未见明显促凋亡作用 ,珍珠、牛黄、麝香、冰片混合物的水溶液也无明显促凋亡作用。六神丸能下调凋亡相关基因Bcl 2、C myc、mRNA表达水平 ,上调BaxmRNA表达水平。结论 :六神丸可诱导白血病细胞凋亡 ,是治疗白血病的有效复方     

蟾酥注射液抑制淋巴瘤U937细胞增殖和诱导其凋亡的研究

目的揭示蟾酥注射液(Chansu Injection,CHS)体外抑制淋巴瘤U937细胞增殖的机制.方法采用MTT法检测CHS对淋巴瘤U937细胞增殖的影响;采用Giemsa染色和透射电镜技术观察CHS处理的U937细胞形态学和超微结构变化;采用琼脂糖凝胶电泳检测CHS处理的U937细胞的DNA片段化.结果CHS 24h对淋巴瘤U937细胞增殖出现抑制(P＜0.05).CHS处理的U937细胞光镜和电镜出现核着边、核碎片和凋亡小体;CHS处理的U937细胞DNA电泳出现DNA梯状图谱.与对照组比,2.25×10-1μg·mL-1CHS作用,24,48,72h后凋亡指数(AI)升高(P＜0.05),2.25,2.25×10-1,2.25×10-2μg·mL-1CHS作用48h的U937细胞AI升高(P＜0.05).结论CHS蟾酥注射液体外抑制淋巴瘤U937细胞增殖,并且诱导其凋亡.诱导凋亡可能是CHS抑制淋巴瘤细胞增殖的机制.     

白花蛇舌草水提取物对白血病K562细胞的抑制作用及诱导其凋亡的研究

目的研究白花蛇舌草水提取物对K562细胞的抑制作用及其机制。方法采用MTT比色试验检测白花蛇舌草水提取物对K562细胞的抑制率;光镜、电镜技术观察细胞凋亡形态结构的改变;琼脂糖凝胶电泳法检测白花蛇舌草水提取物对K562细胞的诱导凋亡作用。结果白花蛇舌草水提取物能明显抑制K562细胞的生长,药物浓度在0.005μg/ml作用于48 h后,即具有显著的抑制作用,抑制率呈剂量和时间依赖性,半数抑制浓度(IC50)约为5μg/ml;光镜、电镜下见细胞体积缩小,细胞膜皱缩,染色质明显浓缩,核聚集,边聚于核膜下呈新月形等典型的凋亡特征;琼脂糖凝胶电泳结果显示实验组出现明显的DNA梯形凋亡带,而对照组没有出现梯形条带。结论白花蛇舌草水提取物对白血病K562细胞的生长具有明显的抑制作用,诱导肿瘤细胞凋亡是其机制之一。     

中医药诱导分化白血病细胞凋亡研究探讨

１引言白血病是人类造血系统的恶性增殖性肿瘤疾病。联合化疗是目前最常用的手段,其作用是全身性的,它既作用于白血病细胞,又作用于正常细胞,毒副作用较大,且无限制增加剂量和强烈程度,仍不能消灭微量残留白血病细胞（ＭＲＬＣ）,仍有复发。现代医学研究证实,许多...     

白花蛇舌草水提物抗白血病CEM细胞的增殖作用及机制

目的 观察白花蛇舌草水提物对CEM细胞增殖影响及其机制.方法 对CEM细胞进行细胞培养.采用台盼蓝拒染法,镜下计数活细胞数,绘制生长曲线,检测白花蛇舌草水提物对CEM细胞的生长抑制作用;琼脂糖凝胶电泳法检测白花蛇舌草水提物对CEM细胞的诱导凋亡作用.结果 白花蛇舌草水提物终浓度0.64,3.2,16μg/ml均显著抑制CEM细胞的生长,且呈剂量和时间依赖性.琼脂糖凝胶电泳结果显示实验组出现明显的DNA梯形凋亡条带,而空白对照组没有出现梯形条带.结论 白花蛇舌草水提物对CEM细胞生长具有显著抑制作用,诱导肿瘤细胞凋亡可能是其主要机制之一.     

蟾酥对可移植性小鼠淋巴细胞白血病疗效的研究

目的探讨蟾酥对L615白血病的疗效及其可能机制,并对其临床应用提供参考。方法对小鼠行L615白血病造模。造模成功后,蟾酥溶液分别按低、中、高剂量进行腹腔注射给药,1次/d,连续10d,观测小鼠体重变化,生存时间,外周血白细胞计数、分类及血小板计数,肝脾指数,肝、脾、骨髓涂片及骨髓白细胞分类,流式细胞术测定细胞凋亡率。结果L615模型组体重明显减轻,蟾酥低、中、高剂量组体重无明显变化;蟾酥低、中、高剂量组小鼠生存时间比L615模型组长,且中、高剂量具有显著差异(P<0.05或P<0.01);外周血象,同组不同病程,白细胞、血小板计数与实验前比较有显著差异(P<0.05或P<0.01),濒死期各组与L615模型组比较,白细胞、血小板计数,L615白血病细胞百分比有显著差异(P<0.05或P<0.01);白血病死亡小鼠蟾酥各组脾脏指数均低于L615模型组,且有差异(P<0.05);流式细胞术证实,蟾酥能诱导L615白血病细胞凋亡,凋亡率呈剂量依赖性。结论蟾酥对L615白血病具有一定的疗效,其机制之一是诱导白血病细胞凋亡,其次蟾酥能抑制L615白血病细胞对免疫系统的浸润。     

苦参碱抑制JM细胞株增殖和诱导凋亡的研究

目的 :观察苦参碱对T细胞白血病细胞株JM的作用。方法 :Wright Giemsa染色及Hoechst 332 5 8荧光染色观察苦参碱作用JM细胞株前后形态学变化 ,电镜观察超微结构的改变 ;流式细胞仪分析不同剂量加药组第4天及 0.8g·L^-1加药组 1～4d细胞周期的改变 ;DNA琼脂糖凝胶电泳检测“梯状”DNA。结果 :第 3天起各加药组细胞形态学观察见典型凋亡特征改变 ,随时间延长更加明显 ;流式细胞仪检测第 4天各组均可见亚二倍体峰。0.1,0.2,0.4,0.6,0.8g·L^-1各处理组凋亡细胞比率分别为 3.1% ,2.5 % ,13.3% ,40.4 % ,48.6 % ,对照组为1.4 % ;各处理组S期细胞比率分别为 28.9% ,26.1% ,27.7% ,20.9% ,14.2% ,对照组为 30.4% ;各处理组G1期细胞比率分别为 63.2% ,67.5% ,68.1% ,75.2% ,83.6% ,对照组为 41.8%。 0 .8g·L^-1加药组 1～4d ,G1期细胞比率分别为 45.5% ,77.3% ,77.2% ,83.6% ;S期细胞比率分别为 28.6 % ,17.5 % ,19.1% ,14.2% ;凋亡细胞比率分别为 3.0% ,3.7% ,9.1% ,48.6%。DNA电泳 :0.4,0 .6 ,0.8g·L^-1组见DNA“梯形”图谱 ,0.1,0.2g·L^-1及对照组未见。结论 :苦参碱可以抑制JM细胞的DNA合成 ,造成G1期阻滞 ,从而抑制了细胞的增殖。同时 ,该生物碱还可诱导。     

白藜芦醇抑制胆囊癌细胞生长与诱导细胞凋亡的实验研究

目的:探讨白藜芦醇(Res)对胆囊癌细胞(GBC)和正常成纤维细胞(3T3)体外增殖的影响,进而观察Res对GBC和3T3细胞凋亡的影响.方法:MTT法测定肿瘤细胞生长抑制率;流式细胞术分析细胞周期,检测细胞凋亡;SABC法检测细胞bcl-2、c-myc、p53蛋白表达.结果:Res呈浓度依赖性抑制GBC细胞的生长与增殖(P＜0.01),抑制率最高可达54%.Res能明显诱导GBC细胞凋亡,凋亡率最高为30.52%;处理组较对照组G1期细胞由34.88%上升至55.47±3.95%,S期细胞减少8.41%～17.54%,呈明显的G0/G1期阻滞现象.GBC细胞的bcl-2、c-myc基因蛋白表达降低,而p53基因蛋白表达增强.结论:Res能通过诱导GBC细胞凋亡而抑制其生长与增殖,但对3T3细胞无此作用.     

虫草素抑制Ras蛋白表达并诱导非小细胞肺癌H358细胞凋亡研究

目的:研究虫草素在体外对K-Ras突变型非小细胞肺癌H358细胞的抑制作用及其相关机制。方法:用MTT法检测虫草素对H358细胞增殖的影响;以流式细胞术检测虫草素诱导H358细胞凋亡情况和对细胞周期的影响;用活性检测试剂盒检测Caspase3、8、9的活性变化;采用Western Blot方法检测K-Ras蛋白的表达情况。结果:不同浓度的虫草素对于H358细胞增殖均有一定的抑制作用,并以浓度依赖的方式诱导H358细胞凋亡和引起G1期周期阻滞;Caspase3、8、9均被不同程度激活;虫草素能够抑制H358细胞K-Ras的表达。结论:虫草素能够在体外有效诱导H358细胞凋亡并抑制H358细胞增殖,为进一步应用于临床治疗K-Ras突变型非小细胞肺癌等肿瘤疾病奠定了实验基础。     

蟾酥注射液治疗晚期卵巢癌临床研究

目的:观察蟾酥注射液治疗晚期卵巢癌的临床疗效。方法:将78例晚期卵巢癌患者随机分为观察组和对照组,每组各39例。所有患者给予TP方案(紫杉醇+顺铂)进行新辅助化疗,化疗结束后进行肿瘤细胞减灭术,观察组在对照组的基础上给予蟾酥注射液进行治疗。比较两组患者的临床疗效,观察两组患者治疗前后生存质量评分变化情况,检测两组患者治疗前后CA125含量。结果:观察组有效率为82.1%,对照组有效率为66.7%,两组患者临床疗效比较,差异具有统计学意义(P0.05)。两组患者治疗后血清CA125含量明显低于治疗前,且观察组低于对照组,差异具有统计学意义(P0.05);两组患者治疗后生活质量评分显著高于治疗前,且观察组高于对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。观察组各项毒副作用发生率均明显低于对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:蟾酥注射液治疗晚期卵巢癌疗效确切,安全性较高。     

中药雄黄诱导白血病细胞凋亡的研究

目的 探讨雄黄对白血病细胞凋亡及Bcl-2表达水平的影响.方法 分别设雄黄治疗组和阿霉素(ADR)对照组,测定药物作用下细胞株的细胞活力(OD值)及观察凋亡细胞的形态学改变和测定药物作用下细胞株Bcl-2蛋白阳性表达率的变化.结果 雄黄治疗组较ADR对照组的OD值和Bcl-2阳性表达率低(P＜0.05)、凋亡率高(P＜0.05).结论 雄黄可诱导白血病细胞凋亡.     

白头翁素诱导KB细胞凋亡的机制研究

目的：研究棉团铁线莲中的单体成分白头翁素诱导肿瘤细胞凋亡的机制。方法：细胞生长抑制试验测定白头翁素对KB细胞的IC50值;以DIOC6（3）为荧光探针,流式细胞术测定KB细胞的线粒体膜电位;以Caspse-9、-3酶活性检测试剂盒测定KB细胞中Caspse-9、-3的活性。结果：白头翁素对KB细胞生长抑制的IC50值为41.63±5.84μM,白头翁素可浓度依赖性地降低KB细胞的线粒体膜电位,白头翁素可时间依赖性地增强KB细胞的Caspse-9、-3活性。结论：白头翁素可诱导KB细胞发生线粒体途径的凋亡,这可能是其抗肿瘤作用机制之一。     

紫草素对DNA拓扑异构酶Ⅰ活性的抑制作用和诱导人白血病K562细胞的凋亡

目的：研究紫草素对DNA拓扑异构酶I催化活性和K562白血病细胞凋亡的影响。方法：从K562白血病细胞提取拓扑异构酶I，通过DNA解螺旋试验评价该药对拓扑异构酶I催化活性的抑制作用。用MTT法测定了该药对K562白血病细胞增殖的抑制作用。应用流式细胞术和琼脂糖凝胶电泳观察了该药对细胞凋亡的诱导作用。结果：紫草素可显著抑制拓扑异构酶I的解螺旋活性(IC50=75．Oμmol/L)。该药能显著抑制K562的细胞增殖，并随剂量增大而抑制作用增强。紫草素O．3～3μmol/L对K562细胞作用24h后，其凋亡率为20％～70％。琼脂糖凝胶电泳出现典型的DNA“lad-der”。结论：紫草素显著抑制拓扑异构酶I的催化活性，并能诱导K562白血病细胞凋亡。     

熊果酸诱导人食管癌细胞Eca-109凋亡的作用及机制

目的研究熊果酸(Ursolicacid,UA)抑制人食管癌Eca-109细胞增殖、诱导细胞凋亡的作用及机制。方法MTT比色法检测熊果酸对Eca-109细胞的增殖抑制作用;透射电镜观察经熊果酸处理后Eca-109细胞超微结构的改变;流式细胞术检测细胞周期变化及细胞凋亡率;Westernblot法检测P27kip1蛋白、凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达。结果20～50μmol/L熊果酸对Eca-109细胞具有显著的抑制作用(P<0.01);电镜下,18.32～36.65μmol/L熊果酸处理过的Eca-109细胞可见典型的凋亡形态及坏死形态;流式细胞检测显示细胞凋亡率及G0/G1期细胞随着熊果酸浓度的增加而增多,S期细胞逐渐减少;Westernblot检测结果提示熊果酸能使Bcl-2表达下降而Bax、P27kip1增加。结论熊果酸对人食管癌细胞系Eca-109具有显著的增殖抑制、诱导细胞凋亡作用。其作用与提高P27kip1蛋白的表达,将细胞阻滞在G0/G1期,下调Bcl-2的表达和增加Bax的表达有关。