维拉帕米对米托蒽醌抗肿瘤活性的增效作用

本文利用人唾腺腺样囊性癌ACC-2细胞在体内外研究了钙拮抗剂维拉帕米对米托蒽醌抗癌作用的增效作用。体外实验表明,无毒剂量的维拉帕米与米托蒽醌合用可显著增强对ACC-2细胞的杀伤力,合并用药效果大于二者单用之和,表现为协同作用。~3H—TdR掺入抑制实验发现,米托蒽醌佐以维拉帕米可增强对ACC-2细胞DMA合成的抑制,降低肿瘤细胞的增殖速度。裸鼠体内抑癌实验亦证实了体外实验结果,两药合用明显提高对ACC-2种植瘤的抑瘤率。结果提示有可能将维拉帕米作为米托蒽醌抗癌的增效剂应用于延腺癌的临床化疗。     

米托蒽醌与维拉帕米合用对人Acc—2细胞DNA和蛋白质合成的影响

本实验用同位素掺入法研究了抗癌新药米托蒽醌与钙拮抗剂维拉帕米合用对人腺样囊性癌Acc-2细胞DNA及蛋白质合成的影响。发现无毒剂量的维拉帕米可以增强米托蒽醌对Acc-2细胞DNA和蛋白质合成的抑制作用,使米托蒽醌对Acc-2细胞DNA及蛋白质合成的IG_(50)值降低,合并用药后,米托蒽醌对Acc-2细胞DNA及蛋白质合成的IC_(50)值分别下降了69.8％和65.3％。表明米托蒽醌与维拉帕米合用可使前者显示出更强的抗癌活性。同时,本研究还发现,米托蒽醌佐以维拉帕米可增强对Acc—2细胞DNA复制模板的损伤。本实验从细胞大分子水平说明,有可能将钙拮抗剂维拉帕米作为米托蒽醌的增效剂应用于临床化疗,以提高疗效。     

维拉帕米增强米托蒽醌对腺样囊性癌抑癌效应的实验研究

本研究首次在体内外观察了钙拮抗剂维拉帕米（ＶＰ）与抗癌新药米托蒽醌（ＤＨＡＤ）合用，对人腺样囊性癌ＡＣＣ－２细胞的作用。发现：无毒剂量的ＶＰ可显著增强ＤＨＡＤ对ＡＣＣ－２细胞增殖的抑制，两药合用对ＡＣＣ－０２细胞的细胞毒有协同效应。￣３Ｈ－ＴｄＲ掺入试验表明，ＶＰ可增强ＤＨＡＤ对ＡＣＣ－２细胞ＤＮＡ合成的抑制作用。两药合用后，ＤＨＡＤ对ＡＣＣ－２细胞ＤＮＡ合成的ＩＣ＿（５０）值下降３．３２倍。流式细胞仪分析显示，ＤＨＡＤ佐以ＶＰ明显增强对ＡＣＣ－２细胞Ｇ＿２Ｍ期的阻断作用。裸鼠体内抑瘤实验证实，ＶＰ（５０ｍｇ／ｋｇ）明显增强ＤＨＡＤ（２ｍｇ／ｋｇ）对ＡＣＣ－２种植瘤生长的抑制作用，抑瘤率由单用ＤＨＡＤ的５７．９％提高到８８．４％。结果提示，可以将ＶＰ作为ＤＨＡＤ的增效剂用于涎腺癌临床化疗，以提高治疗效果。     

维拉帕米增强米托蒽醌对ACC-2细胞杀伤作用的研究

本实验用体外培养的人唾腺腺样囊性癌ACC—2细胞研究了钙拮抗剂维拉帕米(VP)对米托蒽醌(DHAD)细胞毒性的增效作用。发现无毒剂量的VP能够显著增强DHAD对ACC-2细胞增殖及其集落形成的抑制。实验结果,按两药合用效应评价方法判断,显示两药合用时的细胞存活分数SF值为0.179,明显小于两药单用时的细胞存活分数SF值乘积0.3l,表明两药合用对ACC—2细胞的细胞毒有协同效应。     

维拉帕米增强米托蒽醌对裸鼠ACC—2细胞种植瘤抑制作用的研究

本实验通过将体外培养的人唾液腺腺样囊性癌 ACC—2细胞接种于24只裸小鼠皮下,造成种植瘤模型。观察了钙桔抗剂维拉帕米(VP)与杭癌药米托蒽醌(DHAD)合用对 ACC—2细胞种植瘤的抑瘤效果。结果表明,VP(50mg/kg)明显增强 DHAD(2mg/kg)对ACC—2细胞种植瘤生长的抑制作用,抑瘤率由单用 DHAD 的57.9%提高到88.4%。对用药后种植瘤组织的病理学观察也证实 VP 确实能增强 DHAD 对 ACC—2细胞种植瘤的杀伤力。VP 与 DHAD 合用对裸小鼠心、肝、肾等脏器无明显毒性作用。     

紫杉醇诱导ACC细胞凋亡及与G2/M期阻滞关系研究

目的 研究紫杉醇能否诱导ACC－2细胞凋亡,以及凋亡诱导与G2／M期的关系。方法 紫杉醇不同浓度、不同作用时间分别处理ACC－2细胞,通过流式细胞仪、荧光显微镜、透射电镜和DNA凝胶电泳,研究紫醇诱导ACC－2细胞的凋亡及其与G2／M期阻滞的关系。结果 荧光染色观察到凋亡细胞形态,电镜观察到不同时期凋亡超微结构的典型形态。流式细胞仪DNA含量：紫杉醇在50mmol/L作用48h,72h,亚G1峰分别是17．13％、16．26％。延长药物作用时间、增加药物浓度均会增强细胞G2／M期阻滞,但只有出现G2／M期明显阻滞后,经过一定时间才出现凋亡。结论 紫杉醇能够诱导ACC－2细胞产生凋亡;G2／M期阻滞能诱导ACC－2细胞凋亡。     

中药黄芩有效成分黄芩苷对IL—1β人牙周膜细胞产生PGE2的影响

目的 :探讨不同浓度黄芩苷对白细胞介素 - 1 β(Interleukin - 1 β,IL - 1 β)刺激人牙周膜细胞(periodontalligamentcells,PDLC)产生前列腺素E2 (prostaglandinE2 ,PGE2 )的影响。方法 :运用细胞培养技术和酶联免疫检测方法 ,观察IL - 1 β刺激PDLC分泌PGE2 的量以及不同浓度的黄芩苷对其产生PGE2 量的影响。结果 :在 1ng/mLIL - 1 β的刺激下 ,PDLC产生PGE2 的量随时间的延长而增加。 0 .0 1～ 1 0 μg/mL的黄芩苷均能显著抑制 1ng/mLIL - 1 β对PDLC的刺激作用 (P <0 .0 1 ) ,而不同浓度组之间比较 ,抑制作用无显著性差异。结论 :①PDLC具有合成和分泌PGE2 的功能 ,IL - 1 β能有效刺激PDLC产生PGE2 。②黄芩苷对IL - 1 β刺激PDLC合成和分泌PGE2 有显著抑制作用     

人牙乳头细胞内Smad2在TGF—β1信号转导中的作用的研究

目的 观察体外原代培养的人牙乳头细胞内Sad2蛋白的表达,以及Smad2蛋白在转化生长因子-β1信号转导中的作用,探讨Smad2信号途径在TGF-β1调控牙乳头细胞向成牙本质细胞分化过程中的作用机制。方法 原代培养人牙乳头细胞,Western blot杂交方法检测内源性Smad2的表达和TGF-β1调控下的表达变化,用免疫组化方法观察Smad2细胞内定位变化。结果培养的人牙乳头细胞表达Ｓmad2蛋白,ＴＧＦ－β１能引起Ｓmad2从蛋白表达水平未见明显的改变。结论 人牙乳头细胞内存在Ｓmad2基因的表达,Ｓmad2能被ＴＧＦ－β１能引起Smad2从胞浆转位至核内聚集,而BMP-2无此功能;TGF-β或BMP-2刺激作用6h、12h24h和48h,牙乳头细胞内Smad2蛋白表达水平未见明显的改变。结论 人牙乳头细胞内存在Smad2基因的表达,Smad2能被TGF-β1活化后转位至核内发挥作用,但Smad2基因的表达无明显变化,提示TGF-β1在调控牙乳头细胞向成牙本质细胞分化的过程中,Smad2信号途径可能发挥一定的作用。     

rhbFGF、rhTGF-β、rhBMP-2对骨髓基质细胞体外培养增殖的影响

目的 :探讨重组人骨形成蛋白 (rhBMP 2 )、重组人转化生长因子 beta(rhTGF β1)、重组人碱性成纤维细胞生长因子 (rhbFGF)单独或联合应用对骨髓基质细胞体外培养生物特性的影响。方法 :体外培养大鼠骨髓基质细胞 ,分别用特定浓度的rhBMP 2 (2 0 0 μg/L ,简称b )、rhTGF β1(5 μg/L ,简称t)和rhbFGF(1μg/L ,简称f)单独或联合作用 ,观察它们对骨髓基质细胞增殖的影响 ,进行细胞计数测定细胞生长曲线 ,计算细胞倍增时间 ,用四唑盐比色法 (MTT)法测定细胞增殖情况。结果 :细胞计数测定显示所有各组在第 3天细胞数增加 ,对照组、t组、f组、f +t组和f +t +b组第 4天进入平顶期 ,而b组和f +b组细胞仍保持较高的增殖活性 ,细胞倍增时间f +b组最短为 3 2h ,MTT法测定结果与细胞计数法相似 ,b组和f +b组与对照组相比细胞增殖有显著差异 (P <0 .0 5 )。结论 :生长因子rhbFGF(1μg/L)和rhBMP 2 (2 0 0 μg/L)结合使用可以促进骨髓基质细胞的增殖 ,可以作为体外培养骨髓基质细胞扩增的最佳培养条件     

骨形成蛋白-2对人牙乳头细胞内Smad1蛋白表达量的影响

目的：观察人牙乳头细胞内Smad1蛋白的表达及骨形成蛋白－2（bone morphogenetic protein-2,BMP2)对人牙乳头细胞内Smad1蛋白表达量影响，方法：原代培养的人牙乳头细胞用BMP2处理6h,12h,24h,48h后，提取总蛋白质，采用Western Bolt法，从翻译水平观察Smad1基因的表达变化。结果：从翻译水平观察到Smad1基因在人牙乳头细胞内的表达，但在BMP2作用48h内，Smad1蛋白表达量无显著变化，结论：人牙乳头细胞内存在Smad1信号转导途径，牙乳头细胞内Smad1蛋白表达量不受MBP2影响。     

六亚甲基二乙酰胺对MEC—1细胞凋亡及bcl—2基因表达的影响

目的：研究分化诱导剂六亚甲基二乙酰胺（hexamethylene bisacetamide,HMBA)诱导人粘液表皮样癌细胞系MEC－1细胞凋亡及凋亡相关基因bcl-2表达的影响。方法：用2mmol/LHMBA和1mg/L5-FU对培养的MEC－1细胞进行体外诱导72h后,分别采用光镜。TUNEL染色、免疫组化,原位杂交、图像分析等方法进行凋亡指数、bcl-2蛋白及mRNA表达水平的检测。结果：HMBA诱导的MEC－1细胞凋亡指数为68．5％,明显高于对照组和5－FU组（P＜0．01）;bcl-2蛋白及mRNA的表 度均显著高于其它组（P＜0．01）。结论：HMBA对人粘液表皮样癌MEC－1细胞具有明显的诱导凋亡作用,其作用机制可能与减弱了凋亡相关基因bcl-2的负调控作用有关。     

rhBMP2和rhTGF—β1联合应用对人牙髓细胞碱性磷酸酶？…

目的：探讨ｒｈＢＭＰ２和ｒｈＴＧＦ－β１联合应用对人牙髓细胞ＡＬＰａｓｅ活性的影响。方法：采用酶动力学的方法,比较不同浓度ｒｈＢＭＰ２和ｒｈＴＧＦ－β１单独或联合应用对人牙髓细胞的ＡＬＰａｓｅ活性的影响。结果：ｒｈＢＭＰ２对人牙髓细胞的ＡＬＰａｓｅ活性呈浓度依赖性增强,ｒｈＴＧＦ－β１对人牙髓细胞的ＡＬＰａｓｅ活性的影响与其本身浓度有关。当ｒｈＴＧＦ－β１浓度为１μｇ／Ｌ与ｒｈＢＭＰ２联合应用时,     

固位钉对All—Bond 2粘结程度的影响

目的 探讨固位钉对All-Bond2粘结强度的影响。方法 应用All-Bond2为粘结剂,将15个离体牙随机分为3组,测试加金属固位钉前后光敏复合树脂粘结离体牙表面的剪切粘结力,分析固位钉的作用。结果 实验I组（不加固位钉）的剪切粘结力为25．87＋5．10Kgf;实验II组和实验III组是将固位钉攻入牙本质内,深度分别为2mm和3mm,其剪切粘结力分别为：25．77＋3．72Kgf及26．26＋3．14kgf。经统计学处理,三组间无显著性差异。结论 复合树脂与牙齿间的粘结强度与加或不加固位钉无相关性。且与固位钉攻入牙齿的深度无关。     

TGF—β对人牙乳头间充质细胞增殖和细胞周期的影响

目的： 探讨ＴＧＦ－ β对人牙乳头间充质细胞增殖和细胞周期的影响。方法：采用ＭＴＴ法和流式细胞仪观察ＴＧＦ－β对人牙乳头细胞增殖和细胞周期的影响。结果：５０μｇ／Ｌ 组显著刺激人牙乳头细胞增殖（Ｐ＜ ０．０５）,Ｇ１ ％ 显著降低,Ｓ％ 明显升高（Ｐ＜ ０ ．０１）,反映细胞增殖活力的增殖指数ＰｒⅠ值（Ｓ＋ Ｇ２ Ｍ） 也明显增高（ Ｐ＜０ ．０１）。结论：ＴＧＦ－β可能通过促进人牙乳头细胞增殖参与牙胚发育和牙髓损伤修复。     

补血活血法对口腔扁平苔藓患者ＴＮＦ—α、ＩＬ—８及sIL—2R水平的调节作用

目的：探讨补血活血中药对口腔扁平苔藓（ＯＬＰ）患者ＴＮＦ－α、IL０８及sＩＬ－２Ｒ水平调节作用,为临床用药提供依据。方法：４０例ＯＬＰ患者随机分为两组,分别给予补血活血中药和雷公藤总甙片进行治疗,采用双抗体夹心法检测治疗前后ＩＮＦ－α、ＩＬ－Ｉ及sIL-2R水平的变化,结果：治疗２个月后补血活血中药对口腔扁平苔藓（ＯＬＰ）患者的粘膜斑纹改善方面和ＴＮＦ－α、ＩＬ－８及sIL-2R水平调节作用明显优于雷公藤总甙片,还显示患者粘膜充血及白色斑纹程度越重,ＴＮＦ－α、ＩＬ－Ｉ及sIL-2R的水平就越高。结论：口腔扁平苔藓患者因病情不同免疫平衡失调的严重程度也不同,补血活血中药是治疗ＯＬＰ有效的并具有调节免疫功能的药物,值得临床推广应用。     

三羟基异黄酮对ACC2及ACCM细胞株侵袭能力的影响

目的:观察4,5,7-三羟基异黄酮(Genistein)对腺样囊性癌细胞株(ACC2)及腺样囊性癌肺转移株(ACCM)的侵袭能力,和对两细胞株金属基质蛋白酶-2(MMP-2)蛋白表达的影响。方法:采用细胞划痕实验及Transwell小室侵袭实验,检测Genistein对ACC2和ACCM细胞侵袭能力的影响;采用明胶酶谱法及流式细胞术分别检测Genistein对两种细胞株MMP-2蛋白胞外分泌及胞内表达的影响。结果:Genistein能显著抑制ACC2及ACCM两种细胞株的侵袭能力(P<0.01),但两细胞株之间不存在差异(P>0.05)。同时,Genistein可使两细胞株细胞外分泌MMP-2蛋白的水平下调,及胞内MMP-2蛋白的表达降低(P<0.05)。结论:Genistein可对ACC2及ACCM的侵袭产生明显的抑制作用,该作用可能与诱导胞内外侵袭相关蛋白MMP-2的表达降低有关。     

bcl—2蛋白，LMP—1表达与恶性淋巴上皮病关系的研究

目的：观察涎腺恶性淋巴上皮病中bcl-2蛋白和EB病毒潜在膜蛋白（LMP－1）表达与恶性淋巴上皮病的关系。方法：用免疫组化Envison法检测10例恶性淋巴上皮病中bcl-1蛋白和LMP－1的表达。结果：LMP－1阳性表达率为80％（8／10）,bcl-2蛋白的阳性表达率为70％（7／10）,两种指标的表达率在恶性淋巴上皮病中无明显判别,结论：EB病毒感染和bcl-2蛋白阳性表达与恶性淋巴上皮病有关,EB病毒感染是否是恶性淋巴上皮病的病因有待进一步阐明。     

尼古丁对L-929细胞凋亡与细胞调控蛋白bcl-2和BAX表达的影响

目的探讨尼古丁诱导L-929细胞凋亡及细胞调控蛋白bcl-2和BAX的表达。方法①用不同浓度的尼古丁（1000μg/ml、10μg/ml和0.1μg/ml）作用L-929细胞48h后,采用流式细胞术检测活细胞凋亡率;②不同浓度的尼古丁（10μg/ml、1μg/ml和0.1μg/ml）刺激L-929细胞24h后,逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）测定Bcl-2和BAX的活性。结果①与对照组相比,尼古丁实验组诱导L-929细胞凋亡。浓度越大时,则凋亡率越高。②尼古丁与L-929细胞共同作用后,BAX的活性与正常对照组相比表达上调,而Bcl-2的活性表达下降。结论 bcl-2和BAX参与了尼古丁诱导的L-929细胞凋亡。