蚁龙通痹汤对兔膝骨关节炎软骨细胞凋亡调控基因表达的影响

目的:观察蚁龙通痹汤对兔膝骨关节炎病理形态及软骨细胞凋亡和凋亡调控基因Bcl-2及其抑制基因Bax的影响,探讨其治疗骨关节炎可能的作用机制.方法:将40只日本雄性大耳白兔按体重分为4组,即正常组,模型组、蚁龙通痹汤组、葡立胶囊组,每组10只.除正常组外,其余各组均行右侧膝关节前交叉韧带切断建立骨关节炎病变模型.造模后第2天开始给药(葡立胶囊0.1g·kg-1· d-1,蚁龙通痹汤生药0.6 g·kg-1.d-1,溶于10 mL生理盐水中灌胃,每日1次),连续4周.观察各组兔膝关节软骨及滑膜组织病理形态学改变,测定关节液中肿瘤坏死因子(TNF)-α和白介素(IL)-1β含量,并用TUNEL法检测软骨细胞凋亡,分析软骨中凋亡调控基因Bcl-2及其抑制基因Bax表达情况.结果:与正常组比较,模型组动物关节液IL-1β和TNF-α含量、软骨细胞凋亡率、Bcl-2、Bax及Bcl-2/Bax、关节外在表现和软骨病理组织学均出现明显变化;与模型组比较,蚁龙通痹汤组、葡立胶囊组各项指标均有明显改善,差异有统计学意义(P＜0.05).蚁龙通痹汤组、葡立胶囊组组间差异有统计学意义(P＜0.05).结论:蚁龙通痹汤能够减少兔膝骨关节炎关节液IL-1β和TNF-α的分泌,显著降低软骨细胞凋亡率,提高Bcl-2/Bax而达到对软骨组织保护的作用.     

骨痹汤对膝骨关节炎患者滑液中MMP-13、IL-1、TNF-α、TIMP-1的影响

目的:观察"骨痹汤"对膝骨关节炎(OA)滑液中基质金属蛋白酶-13(Matrix Metalloproteinase-13,MMP-13)、白介素-1(Interleukin-1,IL-1)、肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α)、组织型金属蛋白酶抑制剂-1(Tissue Inhibitor of Metalloproteinase-1,TIMP-1)水平的影响,探讨"骨痹汤"分子药理机制与临床疗效水平。方法:90例膝骨关节炎患者(119膝)随机分为骨痹汤治疗组、仙灵骨葆治疗组和对照组(口服硫酸氨基葡萄糖),于治疗前和治疗后8周抽取关节液标本,采用双抗体夹心酶联免疫吸附法测定MMP-13、IL-1、TNF-α、TIMP-1水平。结果:与治疗前比较,各组患者治疗8周后关节液中MMP-13、IL-1、TNF-α均明显降低(P<0.05);TIMP-1水平较治疗前明显升高(P<0.05);骨痹汤治疗组关节液中MMP-13、IL-1、TNF-α下降幅度较其余2组大(P<0.05),TIMP-1水平升高显著高于仙灵骨葆治疗组和对照组(P<0.05)。结论:骨痹汤可能通过降低关节炎液中MMP-13、IL-1、TNF-α水平,提高TIMP-1水平起到保护关节软骨的作用。骨痹汤治疗骨关节炎短期疗效较仙灵骨葆和硫酸氨基葡萄糖好。     

太白通络凝胶膏对兔膝骨关节炎炎性因子及关节软骨的影响

目的:分析太白通络凝胶膏对膝骨关节炎兔软骨细胞凋亡的抑制作用及炎性因子表达水平的影响,并探讨其作用机理。方法:采用改良Hulth法制备膝骨关节炎兔模型,ELISA检测兔关节液IL-6、IL-1β、TNF-α含量变化情况;免疫组化检测关节软骨中MMP-13、TGF-β1、Col-Ⅱ表达水平;取兔膝关节软骨制作石蜡切片,并用苏木精-伊红(HE)染色、甲苯胺蓝(TB)染色,用改良Mankins标准进行评分。结果:太白通络凝胶膏可降低兔膝关节液中炎症因子IL-6、IL-1β、TNF-α表达水平,差异有统计学意义(P0.05)。太白通络凝胶膏可提高兔膝关节软骨组织中TGF-β1、Col-Ⅱ的表达水平,降低MMP-13表达水平,差异有统计学意义(P0.05)。结论:太白通络凝胶膏能降低兔膝关节液及关节软骨中IL-6、IL-1β、TNF-α、MMP-13的表达,促进TGF-β1、Col-Ⅱ的表达,缓解膝关节软骨细胞的凋亡,从而对关节软骨起到保护及修复的作用。     

南星骨痛凝胶贴膏对兔膝骨关节炎关节形态及血清IL-1、TNF-α、MMP-13、TIMP-1表达的影响

目的观察南星骨痛凝胶贴膏对兔膝骨关节炎关节形态及血清IL-1、TNF-α、MMP-13、TIMP-1表达的影响,探讨南星骨痛凝胶贴膏治疗兔膝骨关节炎可能的作用机制。方法 18只健康6月龄新西兰兔随机分成3组:空白组(A组)、模型组(B组)、骨痛膏治疗组(C组). BC组用3%木瓜蛋白酶关节腔内注射造模后C组给予南星骨痛凝胶贴膏外敷,给药4周后,用Aloka Latheta LCT-200观察兔膝骨关节影像学改变、用ELISA法检测血清IL-1、TNF-α、MMP-13、TIMP-1含量。结果 C组兔膝关节病变程度较B组轻,C组兔血清中IL-1、TNF-α、MMP-13含量较B组降低(P<0. 05),TIMP-1含量较B组升高(P <0. 05)。结论南星骨痛凝胶贴膏能减轻兔膝关节骨关节炎病变程度,对关节软骨有保护作用,其作用机制可能与抑制炎症因子IL-1、TNF-α及MMP-13表达,增加TIMP-1表达有关。     

鹿角壮骨胶囊联合盐酸氨基葡萄糖片治疗早中期膝骨性关节炎临床观察

目的:探讨鹿角壮骨胶囊联合盐酸氨基葡萄糖片治疗早中期膝骨性关节炎的临床疗效及安全性。方法:100例膝骨性关节炎随机分为对照组及观察组。对照组口服盐酸氨基葡萄糖片,480 mg/d,3次/d。连用8周。观察组在对照组治疗的基础上给予口服鹿角壮骨胶囊,3粒/次,3次/d,连用8周。观察两组治疗前后膝关节疼痛评分、肿胀评分、功能评分、骨关节炎指数评分、膝关节液IL-1β、TNF-α、MMP-3、TIMP-1表达水平,记录不良反应发生情况。结果:治疗后,两组患者膝关节疼痛、肿胀、功能及骨关节炎指数评分、膝关节液IL-1β、TNF-α、MMP-3表达水平均显著低于治疗前,且观察组低于对照组(P0.01);两组患者膝关节液TIMP-1表达水平显著高于治疗前,且观察组高于对照组(P0.01)。两组不良反应发生率比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:鹿角壮骨胶囊联合盐酸氨基葡萄糖片治疗早中期膝骨性关节炎疗效和安全性均好。可降低膝关节液IL-1β、TNF-α和MMP-3表达水平,提高TIMP-1的表达,有效保护关节组织。     

痹胶囊对实验性骨关节炎大鼠MMP-3和TIMP-1的影响

[目的]观察痹褀胶囊对实验性骨关节炎(OA)大鼠软骨、关节液及血清基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、基质金属蛋白抑制酶-1(TIMP-1)的影响,探讨痹褀胶囊保护关节软骨的作用机制。[方法]选Wistar大鼠,木瓜蛋白酶膝关节注射造模,痹祺胶囊灌胃治疗8周,酶联免疫吸附(ELISA)法检测软骨、关节液及血清MMP-3、TIMP-1的活性。[结果]痹祺胶囊能提高模鼠软骨TIMP-1的活性(P<0.01),降低关节液MMP-3的活性,使软骨、关节液MMP-3/TIMP-1的比值均降低(P<0.01);对血清MMP-3、TIMP-1及MMP-3/TIMP-1比值无明显影响(P>0.05)。[结论]痹褀胶囊保护关节软骨的作用可能是通过提高软骨TIMP-1的活性,降低关节液MMP-3的活性,使软骨、关节液MMP-3/TIMP-1的比值减小,从而抑制MMP-3对关节软骨基质蛋白多糖的裂解活性而起保护作用的。     

基于Wnt/β-catenin信号通路探讨阳和汤对兔膝骨关节炎的影响

目的基于Wnt/β-catenin信号通路探讨阳和汤对兔膝骨关节炎模型的作用机制。方法将4～6月龄新西兰兔随机分为空白组、模型组、西乐葆组和阳和汤组,每组6只。除空白组外,其余各组膝关节腔内注射木瓜蛋白酶造模。造模成功后,阳和汤组予阳和汤灌胃,西乐葆组予西乐葆灌胃,空白组和模型组予生理盐水灌胃,每日1次,连续给药2周。灌胃前后分别测量4组兔膝关节皮温、周径,进行膝关节Lequesne MG评分。停药1周后采集标本,ELISA法检测关节液中IL-1β、TNF-α、MMP-13含量;光镜下观察关节软骨病理改变并进行Mankin's评分;免疫组化检测软骨组织Wnt4、β-catenin表达情况。结果与空白组比较,模型组膝关节皮温、周径和Lequesne MG评分,关节软骨病理切片Mankin's评分及Wnt4、β-catenin表达,关节液IL-1β、TNF-α、MMP-13含量均明显升高(P0.05);与模型组比较,阳和汤组膝关节周径、Lequesne MG评分,软骨病理切片Mankin's评分及Wnt4、β-catenin表达,关节液IL-1β、TNF-α、MMP-13含量均明显降低(P0.05)。结论阳和汤能抑制骨关节炎炎症反应,修复软骨损伤,其机制可能与降低炎症因子TNF-α和IL-1β的表达,抑制Wnt/β-catenin信号通路和改善MMP-13有关。     

麝香乌龙丸对兔膝骨关节炎软骨组织病理形态学及MMP-1、TIMP-1表达的影响

目的:观察麝香乌龙丸对兔膝骨关节炎软骨组织病理形态学、基质金属蛋白酶1(MMP-1)及其抑制剂(TIMP-1)的影响,探讨麝香鸟龙丸对关节软骨的保护作用是否与调节MMP-1及TIMP-1的表达有关.方法:30只日本大耳白兔随机分为3组:A正常对照组,B模型对照组,C麝香乌龙九组.用1.6%木瓜蛋白酶膝关节腔内注射,建立兔膝骨关节炎模型,C组灌胃给药4用后,观察软骨组织形态学的变化及软骨中MMP-1、TIMP-1的表达.结果:C组软骨病理损害程度轻于B组(P＜0.05),MMP-1表达明显低于B组(P＜0.01),TIMP-1表达高于B组(P＜0.01).结论:麝香乌龙丸能减轻膝骨关节炎关节软骨退行性改变,其对关节软骨的保护作用可能与调节MP-1及TIMP-1的表达有关.     

六味骨痹汤对兔骨关节炎软骨的修复作用及其机制初探

目的:观察六味骨痹汤对兔骨关节炎模型关节软骨形态、Ⅱ型胶原蛋白表达及体液中胶原酶3(MMP-13)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、软骨寡聚基质蛋白(COMP)的影响,探讨其对骨关节炎(OA)软骨的修复作用及其可能机制。方法:取2~3月龄清洁级新西兰兔32只,体质量(2.42±0.23)kg,采用木瓜蛋白酶关节注射法建立兔OA模型,随机区组法分为六味骨痹汤组、硫酸氨基葡萄糖(GS)组和模型组,另设正常组。前两组分别予六味骨痹汤3.83g/(kg·d)、硫酸氨基葡萄糖胶囊77mg/(kg·d)溶于生理盐水10mL灌胃,模型组和正常组均予生理盐水(10mL/d)灌胃。6周后采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清及关节液中MMP-13,TNF-α及COMP的含量;处死实验兔,按Pelletier原则对关节软骨大体形态评分;取软骨病理标本,部分予苏木精-伊红染色后用改良Mankin's法予组织形态学观察评分,其他标本免疫组化染色后对其Ⅱ型胶原蛋白表达情况进行观察评分。结果:与模型组相比,六味骨痹汤组血清和关节液中MMP-13,TNF-α及COMP的含量降低,差异有统计学意义(P<0.05);关节软骨Pelletier评分和改良Mankin's评分显著降低,差异有统计学意义(P<0.05);Ⅱ型胶原蛋白表达有所增加,差异有统计学意义(P<0.05).与GS组相比,上述指标差异均无统计学意义(P>0.05).结论:六味骨痹汤可促进兔OA模型软骨修复,其机制可能是通过降低兔血清和关节液中MMP-13,TNF-α等因子的含量抑制软骨破坏,从而提高Ⅱ型胶原蛋白的表达来发挥作用。     

参威骨痹片对骨关节炎模型兔膝关节液IL-1β、TNF-α的影响

目的:观察参威骨痹片对骨关节炎模型兔膝关节液内白细胞介素1β(l L-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平的影响。方法:选择40只健康新西兰兔,随机分为4组:分别为正常组、模型组、中药组、阳性药物组。用Hulth方法复制兔膝骨关节炎模型。术后4周,阳性药物组用双醋瑞因(5.45 mg/kg)灌胃、中药组用参威骨痹片(10.464 g/kg)灌胃,给药4周。正常饲养1周后,ELISA测定各组兔关节液IL-1β、TNF-α含量。结果:与正常组比较,模型组兔关节液IL-1β、TNF-α含量升高(P0.05);与模型组比较,阳性药物组和参威骨痹片组兔关节液TNF-α含量下降(P0.05),但仍高于正常组(P0.05);阳性药物组IL-1β含量低于模型组(P0.05),参威骨痹片组IL-1β含量有所降低,但数据处理无统计学意义。结论:参威骨痹片能够降低膝骨关节炎兔关节液TNF-α含量,抑制炎症反应,是其治疗KOA的作用机制之一。     

灌胃凤凰衣水解物对膝骨关节炎模型大鼠影响的实验研究

目的：观察灌胃凤凰衣水解物对膝骨关节炎大鼠膝关节的影响,进而考察凤凰衣用于防治OA的合理性及可行性。方法：灌胃凤凰衣水解物及奥泰灵胶囊干预膝骨关节炎大鼠,观察软骨形态及软骨中Collagen-Ⅱ、MMP-β及蛋白多糖的指标变化,以及血清和关节液中IL-6,IL—1β,TNF-α的指标变化。结果：1．各用药组对降低膝骨关节炎大鼠血清IL10、IL-6、TNF-a表达,关节液中TNF-a的表达以及软骨中MMP-3表达,升高Collagen-Ⅱ的表达看,两用药组未见明显差异（P〉0．05）,但均优于模型组（P〈0．01）;2．在提高蛋白多糖含量及降低关节液中IL-6的表达方面,灌胃凤凰衣组优于灌胃奥泰灵组（Pd0．01）;3．在降低关节液中IL-1β的表达方面,灌胃奥泰灵组优于灌胃凤凰衣组（P（0．01）。结论：1．灌胃凤凰衣水解物能降低膝骨关节炎大鼠的炎症因子表达,提高关节软骨中蛋白多糖和Collagen-Ⅱ含量;2．凤凰衣中含有丰富的可以合成软骨基质中蛋白多糖的前体物质,是其改善0A指标的机制之一。     

壮元扶骨逍遥汤对家兔膝骨关节炎血清SOD和关节液IL-1含量的影响

目的 观察壮元扶骨逍遥汤对家兔膝骨关节炎模型血清超氧化物歧化酶(SOD)和关节液中白细胞介素-1(IL-1)含量的影响,并探讨其作用机制.方法 将新西兰白兔36只,雌雄不分,随机分成4组,即正常组(N组)、模型对照组(M组)、壮元扶骨逍遥汤组(F组)、布洛芬组(P组),各8只,于相同温度、湿度下分别单笼喂养,在治疗前、中、后分别提取家兔的血清和关节液,采用免疫组织化学法检测血清SOD和关节液IL-1的含量.结果 治疗前比较,M、F、P组SOD水平明显降低(P＜0.05),IL-1水平明显升高(P＜0.05);治疗中、后期比较,F组SOD水平明显升高(P＜0.05),P组无明显变化(P＞0.05),F、P组IL-1水平明显降低(P＜0.05).结论 壮元扶骨逍遥汤可提高血清SOD水平,保护关节软骨,提高软骨细胞功能,促进软骨修复;降低关节液IL-1水平,减轻炎症对关节软骨的破坏及所产生的疼痛.     

抗骨增生片对兔膝骨关节炎软骨组织病理形态及MMP-1、TIMP-1的影响

目的:观察抗骨增生片对兔膝骨关节炎软骨组织病理形态、基质金属蛋白酶-1(MMP-1)及其抑制剂(TIMP-1)的影响,探讨抗骨增生片是否能调节关节软骨MMP-1及TIMP-1的表达而起到对软骨的保护作用.方法:30只日本大耳白兔随机分为3组:正常对照组(A),模型对照组(B),抗骨增生片组(C).用1.6%木瓜蛋白酶膝...     

养元柔肝汤对兔膝骨性关节炎模型滑液中TNF-α、HA的影响

目的探讨养元柔肝汤对实验性兔膝骨性关节炎模型滑液中肿瘤坏死因子α（TNF-α）、透明质酸（HA）的影响,并探讨其作用机制。方法将32只新西兰白兔随机分为4组,即正常对照组、模型对照组、养元柔肝汤组和葡立胶囊组各8只。兔膝骨性关节炎模型采用兔膝关节腔内注入木瓜蛋白酶的造模方法。养元柔肝汤组经胃管灌入兔胃养元柔肝汤药液,每次100 mL,每日2次。葡立胶囊组将葡立胶囊溶入水中经胃管灌胃,每次0.3 g,每日2次。正常对照组和模型对照组正常喂养。给药30 d。于治疗前、后分别提取兔膝关节滑液,分别采用酶联免疫吸附测定法和放射免疫法检测关节滑液中TNF-α、HA含量。结果养元柔肝汤组、葡立胶囊组治疗后较治疗前TNF-α水平均明显降低（P〈0.05）,HA水平均明显升高（P〈0.05）;养元柔肝汤组治疗后较葡立胶囊组TNF-α水平降低（P〈0.05）,HA水平升高（P〈0.05）。结论养元柔肝汤可提高关节滑液HA水平,保护关节软骨,提高软骨细胞功能,促进软骨修复;降低关节滑液TNF-α水平,减轻炎症对关节软骨的破坏及所产生的疼痛。     

甘草附子汤对大鼠骨关节炎及关节软骨蛋白质组学的影响

采用碘乙酸钠膝关节腔注射复制大鼠骨关节炎模型,探究甘草附子汤对大鼠骨关节炎防治作用及关节软骨蛋白质组的影响。将60只体质量230~250 g的SD大鼠随机分为正常组、模型组、硫酸氨基葡萄糖组以及甘草附子汤高、中、低剂量组。除正常组外其余各组均进行碘乙酸钠(每侧腿给药3 mg)膝关节腔注射诱导骨关节炎模型。造模后,各给药组灌胃1个月,给药期间每周进行关节疼痛测试、关节宽度测量,观察大鼠自主行为。应用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测大鼠关节灌洗液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、基质金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP-1)的含量;应用苏木精-伊红(HE)染色法观察骨关节形态;应用Nano-LC-LTQ-Orbitrap系统检测关节软骨蛋白。结果显示,与模型组比较,甘草附子汤能显著改善骨关节炎大鼠的关节疼痛和关节肿胀;显著降低关节腔灌洗液中TNF-α,IL-1β,MMP-3的含量,升高TIMP-1的含量;减轻关节腔间隙变大、软骨边缘破裂粗糙、软骨层厚薄不一、软骨细胞排列紊乱等炎性病变;各组之间的蛋白进行比较后筛选出差异蛋白273个,KEGG分析发现上述差异蛋白共涉及systemic lupus erythematosus等43条信号通路,其中与骨关节炎相关的信号通路有11条。以上结果表明,甘草附子汤对骨关节炎有防治作用,其作用机制可能是通过调节骨关节炎相关信号通路的蛋白表达来完成的。     

含磷脂酰胆碱的玻璃酸钠制剂对兔骨关节炎的影响

 目的研究含磷脂酰胆碱的玻璃酸钠制剂(PSH注射液)对兔骨关节炎(OA)的作用。方法以木瓜蛋白酶诱导兔OA模型,以2种剂量PSH注射液兔膝关节腔内注射,另设对照组。给药5周后,运用酶联免疫吸附测定法检测关节滑液中2种炎性细胞因子白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量;用天青A法检测关节软骨中糖胺聚糖(GAG)总量,用放射免疫法测定其中玻璃酸(HA)的含量。结果本模型可提高滑液中IL-1β和TNF-α的含量,使关节软骨中GAG的总量和HA的含量均减少,而PSH注射液关节内注射可以降低此两种细胞因子的含量,同时使病变关节软骨中蛋白聚糖(PG)和HA的含量增加。结论PSH注射液可以降低IL-1β和TNF-α的表达,保护关节软骨,对OA治疗有一定作用。     

滑膜炎胶囊对兔膝骨性关节炎组织病理学及NO、SOD、COMP等的影响

目的观察滑膜炎胶囊对模型兔膝骨性关节炎关节软骨的病理及一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)、软骨寡聚基质蛋白(COMP)、关节软骨转化生长因子β1(TGF-β1)等的影响。方法健康新西兰白兔35只,随机分为空白组、滑膜炎胶囊组、玻璃酸钠组和模型组。以改良Hulth法实施手术造模,造模成功后,各组分别按照设计程序予以处理。动物处死后分别采集血液与关节液,检测一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)、软骨寡聚基质蛋白(COMP)等指标,并行关节软骨大体观察、组织病理形态学观察,及免疫组化染色法检测关节软骨转化生长因子-β1(TGF-β1)。结果与模型组比较,滑膜炎胶囊可以明显降低关节炎模型兔血清及关节液NO含量,降低血清COMP含量,提高关节软骨中TGF-β1表达,差异均有统计学意义(P0.01);滑膜炎胶囊组在减少组织病理学评分方面也明显优于模型组(P0.01)。滑膜炎胶囊组与玻璃酸钠组各指标差异无统计学意义(P0.05)。结论从关节软骨的大体观察及HE染色、SO染色组织病理学光镜观察,兔膝骨性关节炎的造模成功;滑膜炎胶囊可有效延缓关节炎模型兔软骨退化。     

参麦注射液关节腔注射对兔骨关节炎细胞因子影响的实验研究

目的:研究参麦注射液关节腔注射对兔骨关节炎作用的机理。方法:将30只雄性清洁级新西兰白兔随机分为空白组、治疗组及对照组,治疗组及对照组予改良Hulth法造模,造模成功后,治疗组予参麦注射液关节腔注射,对照组予生理盐水注射,8周后抽取3组关节液,用Elisa法检测TNF-α、IL-1β、MMP-3。结果:对照组的IL-1β、TNF-α、MMP-3水平与空白组比较均偏高,差异有统计学意义(P0.01)。治疗组IL-1β、TNF-α、MMP-3水平高于空白组,但低于对照组,2组比较差异有统计学意义(P0.01)。结论:参麦注射液关节腔注射可通过降低关节液中的TNF-α、IL-1β、MMP-3来缓解骨性关节炎症状。