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1.
目的了解耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌(CRE)感染状况及其产酶类型。方法采用最低抑菌浓度(MIC)法分析肠杆菌科细菌的耐药情况。采用厄他培南纸片扩散法初筛产碳青霉烯酶菌株,对初筛阳性菌株分别采用改良Hodge试验、加硼酸或苯唑西林的改良Hodge试验、EDTA亚胺培南复合纸片法进行表型确证。结果肠杆菌科细菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为2.7%、2.3%。厄他培南纸片扩散法初筛阳性菌株11株,其中改良Hodge确证试验阳性(或弱阳性)菌株3株,包括产金属酶菌株1株,产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)或AmpC酶菌株2株。2株改良Hodge确证试验弱阳性菌中未检出碳青霉烯酶基因,但检出AmpC、TEM、CTX-M基因,改良Hodge试验阳性菌中检出blaIMP基因。结论改良Hodge试验、加硼酸或苯唑西林改良Hodge试验及EDTA亚胺培南复合纸片法相结合进行碳青霉烯酶检测,在暂无条件开展基因分型的医院具有很好的应用前景。  相似文献   

2.
目的评估Vitek 2 compact专家系统(AES)对肠杆菌科细菌破青霉烯酶耐药表型的提示和分析的准确性,探讨弥补其不足的检测方法。方法收集用Vitek 2 compact检测亚胺培南非耐药,而专家系统提示其产碳青霉烯酶的肠杆菌科细菌28株。纸片扩散法检测亚胺培南药物的敏感度;改良Hodge试验(MHT)筛查产碳青霉烯酶菌株;EDTA双纸片协同试验检测金属β-内酰胺酶;PCR检测细菌超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和碳青霉烯酶相关耐药基因。结果 28株菌中,均扩增出ESBLs相关耐药基因,其中16株扩增出KPC基因。金属酶表型皆为阴性。以碳青霉烯酶基因检测为金标准,AES的符合率为57.12%;纸片扩散法检测亚胺培南的符合率为100%;MHT的符合率为100%。PCR与纸片扩散法及MHT对碳青霉烯酶检测的结果一致,与AES有差异(X~2=10.08,P0.05)。结论 AES对肠杆菌科细菌产碳青霉烯酶提示不一定全部准确,存在一定的假阳性,可以采用其他方法,如简便易行的纸片扩散法或改良Hodge试验予以复检,以提高药敏结果的可靠性。  相似文献   

3.
目的 了解某医院产KPC酶肺炎克雷伯菌中产ESBL的情况,并建立一种有效的ESBL表型检测方法.方法 收集82株产KPC酶的肺炎克雷伯菌,纸片扩散法进行药物敏感试验;PCR和DNA测序鉴定超广谱β内酰胺酶基因型;脉冲场凝胶电泳进行同源性分析;CLSI推荐的ESBL表型确证试验、利用3-氨基苯酚硼酸的改良ESBL表型确证试验和改良Hodge试验进行表型试验.结果 含blaESBL的产KPC菌株对β-内酰胺类药物耐药率普遍高于单产KPC菌株.ES-BL基因检出率为79.3%,基因型以SHV型和CTX-M型为主.PFGE显示菌株间的相似性系数≥94%.改良Hodge试验均为阳性结果.ESBL表型确证试验检出率低,改良ESBL表型确证试验的检出率与PCR结果相符.结论 大多数产KPC菌株含ESBL基因,因此对β内酰胺类药物具备了更强的耐药性.利用3-氨基苯酚硼酸的改良ESBL表型确证试验能有效地检测合并产KPC菌株中ESBL的表型.  相似文献   

4.
目的 分析临床分离的可疑产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌所携带的耐药基因.方法 采用全自动细菌鉴定仪进行药敏试验,用改良Hodge试验进行碳青霉烯酶筛选,用纸片扩散试验进行ESBLs表型检查,用头孢西丁三维试验进行AmpC β-内酰胺酶的表型检查,用聚合酶链反应检测β内酰胺酶基因、外膜蛋白(OmpK35和OmpK36)编码基因、转座子tpuA和tpuU基因,并进行产物测序.结果 ①62株可疑产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌对厄他培南和氨苄西林100%耐药,对氨苄西林/舒巴坦、头孢唑啉、头孢他啶、头孢曲松、氨曲南的耐药率达87%以上,对亚胺培南、美洛培南、丁胺卡那霉素耐药率为35%以下;②β内酰胺酶的总检出率为75.81%,主要由同时产ESBLs和AmpC引起,检出率为33.87%,其次为单产ESBLs引起,检出率为30.65%;③检出KPC,DHA,CIT,TEM,CTX M,SHV和NDM1β内酰胺酶基因的阳性率分别为8.06%,14.51%,24.19%,25.81%,27.42%,40.32%和6.45%; Ompk35,Ompk36基因缺失率为38.70%和62.90%;tnpA和tnpU检出率分别为11.29%和32.25%.结论 产碳青霉烯酶并非菌株耐碳青霉烯类药物的主要原因,可能由产ESBLs或AmpC酶引起,合并外膜蛋白缺失,尚存在其它降低碳青霉烯类敏感性的耐药机制.  相似文献   

5.
目的分析产酸克雷伯菌耐碳青霉烯类抗生素的分子机制。方法收集福建医科大学附属协和医院2011年8月~2012年8月临床分离非重复耐碳青霉烯类抗生素的产酸克雷伯菌菌株5株,检测厄他培南(ETP)、亚胺培南(IPM)及美罗培南(MEM)的最低抑菌浓度(MIC)筛查菌株;采用改良Hodge试验进行碳青霉烯酶表型鉴定、琼脂稀释法测其药敏;聚合酶链反应(PCR)扩增超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)、碳青霉烯酶耐药基因;对检出碳青霉烯类基因的产酸克雷伯菌进行接合试验。结果 5株产酸克雷伯菌对17种抗菌药物中耐药率≥80%的有9种,分别为头孢西丁、头孢他啶、头孢噻肟、头孢吡肟、厄他培南、亚胺培南、庆大霉素、头孢哌酮/舒巴坦、氨曲南。对替加环素、美罗培南、多黏菌素B和哌拉西林/他唑巴坦的耐药性较低。改良Hodge试验检出4例产碳青霉烯酶。2株携带碳青霉烯类耐药基因(1株仅IMP-4阳性,1株KPC-2和IMP-8同时阳性),3株检出β-内酰胺酶基因。结论福建医科大学附属协和医院产酸克雷伯菌耐碳青霉烯类抗生素耐药机制可能为携带IMP及KPC基因,并且发现了产酸克雷伯菌同时携带两种碳青霉烯类耐药基因的现象。  相似文献   

6.
目的分析碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)的荚膜血清型和携带毒力基因的情况,以探究其耐药机制。方法采用Vitek-2Compact全自动微生物鉴定仪对分离菌株进行体外药物敏感试验;利用黏液丝试验筛选高黏液阳性菌株;使用改良Hodge试验及碳青霉烯酶抑制试验(CIM)对碳青霉烯酶表型进行检测;利用PCR法检测常见荚膜基因型、碳青霉烯酶耐药基因、β-内酰胺酶基因、膜孔蛋白基因、毒力基因。结果本研究共分离出CRKP 126株[39.87%(126/316)],CRKP菌株中对头孢菌素类、酶抑制剂类、碳青霉烯类、单环类药物耐药率最高,且耐药率显著高于non-CRKP菌株(P<0.05),替加环素类耐药率最低,与non-CRKP菌株差异无统计学意义(P>0.05);改良Hodge试验阳性106株,CIM试验阳性117株;检测出A类碳青霉烯酶KPC基因最多,共117株;β-内酰胺酶基因TEM基因53株,SHV基因100株,CTX-M基因112株,膜孔蛋白Ompk35基因缺失50株,Ompk36基因缺失94株;126株CRKP中携带4种不同耐药基因的菌株数目最多。结论本研究分离获得的CRKP大部分荚膜血清分型尚不清楚,其主要耐药机制为产生碳青霉烯酶,部分菌株合并有膜孔蛋白基因缺失。  相似文献   

7.
目的探讨我院产肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶(KPC)肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类药物耐药率升高的原因。方法对2009—2011年我院各类临床标本中分离的肺炎克雷伯菌进行统计及药敏结果分析。对2010年1月—2011年12月间分离的耐碳青霉烯类药物的肺炎克雷伯菌做改良Hodge试验和金属β-内酰胺酶检测,阳性菌株筛查KPC酶及耐药细菌(NDM-1)基因。结果 2009、2010年肺炎克雷伯菌对亚胺培南仍保持高敏感性,对2010年分离的8株耐亚胺培南的肺炎克雷伯菌做改良Hodge试验均为阴性(2009年菌株未保留)。2011年肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类药物的耐药性显著升高,47株耐碳青霉烯类药物的肺炎克雷伯菌改良Hodge试验阳性,KPC酶阳性;2株耐碳青霉烯类药物的肺炎克雷伯菌金属β-内酰胺酶阳性;所有菌株NDM-1基因检测均为阴性。结论由KPC酶介导的耐碳青霉烯类药物的肺炎克雷伯菌在临床分离菌株中显著增加。KPC酶基因的出现是碳青霉烯类抗菌药物广泛应用引起的耐药基因突变,携带KPC酶的质粒存在不同种属细菌间进行转移的可能性,临床应加强监控,防止产碳青霉烯酶菌株在医院环境中暴发和流行。  相似文献   

8.
目的对临床分离自同一患者不同部位的3株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌进行耐药机制研究及同源性分析。方法对某严重烧伤患者的股静脉导管尖端、创面分泌物及痰液标本中分离到的3株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌,采用改良Hodge试验检测碳青霉烯酶,双纸片协同及增效试验检测金属β-内酰胺酶;PCR筛查耐药基因;肠杆菌科基因间重复序列-聚合酶链反应(ERIC-PCR)进行同源性分析,多位点序列分型技术(MLST)对肺炎克雷伯菌进行分子生物学分型。结果 3株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的改良Hodge试验均为阴性,双纸片协同及增效试验均为阳性;3株菌均检出blaNDM-1基因,而未检出bla_(KPC)、bla_(GES)、bla_(IMP)、bla_(SPM)、bla_(VIM)、bla_(GIM)及bla_(OXA-48)等耐药基因;ERIC-PCR显示3株菌为同一型别,MLST分型结果显示3株菌均属于ST17型。结论 3株肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗生素耐药的主要机制为携带bla_(NDM-1)基因,且这3株菌为同一克隆。  相似文献   

9.
目的:了解临床分离碳青霉烯类表型敏感的肠杆菌科细菌碳青霉烯酶耐药基因携带情况。方法:VITEK-2系统进行药物的最低抑菌浓度(MIC)检测;改良Hodge试验(MHT)筛查低产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌;EDTA双纸片增效法检测金属β-内酰胺酶(MBL);PCR法检测相关耐药基因。结果:115株实验菌有12株MHT阳性;12株阳性菌中,3株EDTA双纸片增效试验阴性,9株阳性,这9株菌除阿米卡星、多粘菌素B敏感外,其他抗菌药物均呈耐药,含I类整合子,且检出IMP-4(blaIMP-4)和IMP-1(blaIMP-1)型的MBL基因,未检出KPC型碳青霉烯酶基因及其他MBL基因。结论:厄他培南对肠杆科细菌产碳青霉烯酶的筛选比亚胺培南、美洛培南敏感;经MHT筛选阳性的,潜在产碳青霉烯酶的肠杆科细菌,应进一步用基因检测法确认。  相似文献   

10.
目的分析临床分离碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌耐药基因携带情况。方法收集2012-2014年临床分离碳青霉烯类药物耐药肠杆菌科菌株37株,采用改良Hodge试验和EDTA双纸片协同试验筛查碳青霉烯酶及金属酶表型,采用PCR法及基因测序方法调查耐药基因携带情况。结果 37株碳青霉烯类耐药肠杆菌科菌株包括肺炎克雷伯菌16株(43.2%)、大肠埃希菌6株(16.2%)、黏质沙雷菌6株(16.2%)、阴沟肠杆菌4株(10.8%)和弗劳地枸橼酸杆菌、阿斯肠杆菌、产酸克雷伯菌、成团泛菌、芳香沙雷菌各1株(各2.7%);耐药表型显示33株改良Hodge试验阳性,8株金属酶表型阳性;其中35株检出耐药基因,包括bla_(KPC)(21株)、bla_(IMP)(6株)、blaOXA-48(3株)、bla_(NDM-1)(3株)和bla_(VIM)(2株)。结论本院临床分离碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌以bla_(KPC)为主要耐药基因,其次为bla_(IMP)基因。  相似文献   

11.
摘要:目的:探讨碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌产β-内酰胺酶情况和β-内酰胺酶基因分型研究。 方法:用Vitek-Ⅱ全自动微生物分析仪对本院临床标本中分离的对碳青霉烯类耐药的肺炎克雷伯菌进行菌种鉴定和药物敏感试验;用冻融法提取β-内酰胺酶,三维试验检测β-内酰胺酶[AmpC酶、超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)、金属酶;改良Hodge试验检测KPC酶;用PCR扩增TEM、SHV、CTX-M、PER、VEB、DHA、MIR/ACT、KPC、IMP、VIM、SPM、GIM和NDM-1基因,并对阳性基因进行测序分析确定其基因型;REP-PCR检测分析其同源性。 结果: 4株对碳青霉烯类抗生素耐药肺炎克雷伯菌均表现为多重耐药,其中2株菌对所有测试的抗菌药物均耐药;1株菌产金属酶,由IMP-4型金属酶基因编码;4株菌均产生DHA型AmpC酶,2株菌产CTX-M-14型ESBLs;1株菌产TEM-71型ESBLs,均经测序证实;未检测出SHV、PER、VEB、MIR/ACT、KPC、VIM、SPM、GIM和NDM-1基因型。REP-PCR显示4株菌属于3个不同的克隆型。 结论:本院出现碳青霉烯类耐药的肺炎克雷伯菌,属于不同克隆型,产多种β-内酰胺酶(AmpC酶、ESBLs、金属酶),基因型为DHA、IMP-4、CTX-M-14、TEM-71。  相似文献   

12.
目的调查分析院内产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌临床分布及耐药情况。方法收集浏阳市中医医院2007年1月至2010年1月临床分离到的大肠埃希菌401株和肺炎克雷伯菌319株,采用纸片扩散法(K-B)对分离株进行抗菌药物敏感试验和ESBLs筛选和确证试验,并对其临床分布及耐药情况进行统计分析。结果 720株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中,产超广谱β-内酰胺酶阳性率为37.9%;其中大肠埃希菌阳性率为42.1%;肺炎克雷伯菌阳性率为32.6%。产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌均对第3代头孢菌素和单环β-酰胺类抗菌药物呈现高度耐药性,对氨基糖苷类、氟喹诺酮类、磺胺类抗菌药物也存在较高耐药性,但是对亚胺培南敏感。结论该院大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs的检出率高并呈多重耐药性,这些产ESBLs菌分布在不同病区的各种标本中,临床应及时掌握它们的临床分布及耐药特点,合理的应用抗菌药物、控制ESBLs菌株的传播和流行。  相似文献   

13.
目的研究本院碳青霉烯类耐药的肺炎克雷伯菌的表型和基因型。方法用纸片扩散法进行药物敏感试验,改良Hodge试验和EDTA协同试验检测耐药表型,设计通用引物行PCR检测KPC、IMP、VIM、NDM-1和OXA-23耐药基因,并测序分析。结果 14株肺炎克雷伯菌呈现高度耐药性,有13株携带KPC-2基因,1株携带IMP-4基因,未检测出VIM、NDM-1和OXA-23基因。结论本院产碳青霉烯酶的肺炎克雷伯菌主要为KPC-2和IMP-4基因型。  相似文献   

14.
目的对医院ICU(重症监护病房)两种常见产超广谱B-内酰胺酶(ESBLs)细菌的检出率及耐药性进行动态观察,为指导临床合理使用抗生素提供依据。方法对我室2006至2009年从ICU标本分离的479株肺炎克雷伯菌和491株大肠埃希菌采用纸片协同试验和双纸片确证试验检测其ESBLs,并用纸片扩散法进行药敏试验。结果四年来大肠埃希菌产ESBLs阳性率从41.6%上升至58.4%;肺炎克雷伯菌产ESBLs阳性率从29.0%上升至35.3%。产ESBLs株对常用抗菌药物的耐药率明显高于非产ESBLs株,但对碳青霉烯类抗菌药物都敏感。结论 4年来,大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌中ESBLs阳性率逐年升高,对产ESBLs菌株的治疗应首选含酶抑制剂的抗生素、非B内酰胺类敏感的抗生素或碳青霉烯类抗菌药物。  相似文献   

15.
目的 分析医院感染肺炎克雷伯杆菌的临床分布及耐药情况,为减少院内肺炎克雷伯菌感染提供理论依据.方法 对2011年3月至2012年2月我院临床分离的101株肺炎克雷伯杆菌标本来源临床科室分布及对17种常用抗菌药物的耐药率进行统计;并对菌株进行超广谱β内酰胺酶检测;运用PCR法检测KPC、IMP、VIM及NDM-1耐药基因并测序.结果 101株肺炎克雷伯杆菌标本,来自痰87株,占86.14%;临床科室分布以高干科、神经内科为主各40株,各占39.60%;药敏结果显示我院肺炎克雷伯杆菌对亚胺培南最敏感,敏感率为92.08%;其次是头孢替坦和头孢吡肟,敏感率分别为85.15%及80.20%;产超广谱β内酰胺酶的肺炎克雷伯杆菌70株,检出率为69.31%;耐碳青霉烯类肺炎克雷伯杆菌6株,其中4株检出KPC-2基因,未检出IMP、VIM及NDM-1耐药基因型.结论 在我院,产超广谱β内酰胺酶的肺炎克雷伯杆菌检出率较高;肺炎克雷伯杆菌耐碳青霉烯类抗生素可能与携带KPC-2有关,合理使用抗菌药物,以减少耐药菌株的产生.  相似文献   

16.
金保富  林平 《疾病监测》2011,26(5):380-382
目的 了解浙江省台州地区肺炎克雷伯菌ESBLs和AmpC -内酰胺酶产生情况及AmpC酶的耐药基因型别特征。 方法 采用VITEK-AMS60全自动细菌鉴定仪鉴定细菌,按CLSI推荐的确证试验检测ESBLs,采用头孢西丁纸片扩散法筛选疑产AmpC酶阳性菌株,通过酶粗提物三维试验确证产AmpC酶,并经PCR测序等实验分析该菌株的基因型。 结果 在对头孢西丁不敏感的86株肺炎克雷伯菌中,ESBLs和AmpC酶检出率分别为88.37%和77.91%;以同产ESBLs和AmpC酶为主要形式,占47.67%,单产ESBLs和单产AmpC酶分别占40.70%和30.23%;AmpC酶阳性菌株的耐药基因型:62株为DHA-1型、5株为ACT-1型。 结论 台州地区肺炎克雷伯菌产ESBLs和AmpC酶检出率较高,AmpC酶以DHA-1型为主。  相似文献   

17.
目的 探讨临床分离肺炎克雷伯菌的分布、耐药性及生物被膜形成能力.方法 分离临床送检标本的肺炎克雷伯菌,采用VITEK 2 COMPACT全自动微生物鉴定/药敏分析仪进行细菌鉴定及微生物敏感性试验,采用半定量结晶紫染色法检测菌株的生物被膜形成能力.结果 共检出肺炎克雷伯菌329株,其分布前3位的科室分别为呼吸科(33.13%)、神经外科(12.16%)和普外科(9.73%),在痰液和血液中的构成比最高.329株肺炎克雷伯菌菌株中,产超广谱β-内酰胺酶(ESBL)菌株81株(24.62%),ESBL阴性菌株248株(75.38%),对3类以上抗菌药物耐药157株(47.72%).65.05%的肺炎克雷伯菌株具有生物被膜形成能力,临床分离的各类标本中肺炎克雷伯菌的生物被膜形成能力比较,差异无统计学意义(P〉0.05).结论 临床分离的肺炎克雷伯菌具有较强的耐药性及生物被膜形成能力.  相似文献   

18.
肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌AmpC β内酰胺酶的表型检测   总被引:15,自引:0,他引:15  
目的 比较研究临床实验室对AmpCβ内酰胺酶(AmpC酶)的表型检测方法,了解对头孢西丁不敏感的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌中产生hmpC酶和超广谱β内酰胺酶(ESBLs)的分布情况。方法 利用加与不加3-氨基苯酚硼酸(APB)的头孢他啶、头孢噻肟和头孢西丁纸片进行APB纸片增强试验检测肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的AmpC酶,并与Tris-EDTA纸片试验检测AmpC酶的结果进行比较。用CLSI纸片确认实验检测肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌产生的ESBLs。结果 APB纸片增强试验与Tris-EDTA纸片法检测结果完全一致。对头孢西丁不敏感的62株肺炎克雷伯菌和74株大肠埃希菌中,分别检测到产AmpC酶41株(66.1%)和33株(45.0%)。AmpC酶和ESBLs同时存在的肺炎克雷伯菌占51.6%,单产AmpC酶和单产ESBLs的肺炎克雷伯菌分别为14.5%和21.0%;而大肠埃希菌则以单产ESBLs为主,占40.5%,单产AmpC酶及同时产生AmpC酶与ESBLs的分别占20.3%和24.3%。结论 APB纸片增强试验和Tris-EDTA纸片试验操作简单,应用方便,成本低廉,均可用于临床实验室检测产AmpC酶的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌。  相似文献   

19.
目的评估利用硼酸的纸片扩散试验检测肺炎克雷伯菌中肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶(KPC)的效能。方法收集经基因鉴定非重复的36株产KPC肺炎克雷伯菌株;采用琼脂稀释法测定所有菌株对亚胺培南、美罗培南和厄他培南的最低抑菌浓度(MIC)值;聚合酶链反应(PCR)和DNA测序鉴定β-内酰胺酶基因型;使用标准和超过标准的2种测试菌量进行改良Hodge试验(MHT)以检测碳青霉烯酶表型;利用8种抗菌药物纸片含或不含硼酸抑制剂的纸片扩散试验检测KPC表型,以两者抑菌圈直径差值≥5 mm判定阳性结果。结果所有36株产KPC菌株至少对1种碳青霉烯类药物耐药。MHT检测碳青霉烯酶的敏感性和特异性为97.2%和91.0%,增加菌量后的敏感性和特异性为100.0%和87.0%。利用硼酸联合头孢吡肟、亚胺培南或美罗培南的纸片扩散试验检测肺炎克雷伯菌产KPC表型,敏感性和特异性均达到100.0%。结论硼酸联合头孢吡肟、亚胺培南或美罗培南的纸片扩散试验能检测出KPC表型,而且该方法操作简单、结果易读。  相似文献   

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