原因不明复发性流产与CD56CD16NK细胞的相关性研究

目的:探讨原因不明复发性流产(URSA)与外周血和蜕膜组织中CD56+CD16-、CD56+CD16+NK细胞水平及CD56+CD16-/CD56+CD16+平衡的相关性。方法:选取30例早孕原因不明复发流产患者为试验组,20例正常早孕人流妇女为对照组,采集两组病例的蜕膜组织及外周血标本,分离淋巴细胞,用流式细胞技术检测各组标本中CD56+CD16-、CD56+CD16-NK细胞的数量,计算ED56+ED16-/CD56+ED16+平衡偏移。结果:两组外周血中CD56+CD16-细胞和CD56+CD16+NK细胞水平以及CD56+CD16-/CD56+CD16+比值差异均无统计学意义(P>0.05);两组蜕膜组织中,URSA组CD56+CD16+NK细胞水平升高,ED56+CD16-/ED56+CD16+比值降低,差异均有统计学意义(P<0.05),CD56+CD16-细胞与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);对照组蜕膜组织中CD56+CD16-NK细胞数及CD56+CD16-/CD56+CD16+比值均高于其外周血相应值,差异有统计学意义(P<0.05),CD56+CD16+NK细胞数在两组间差异无统计学意义(P>0.05);在URSA组中,蜕膜组织中的CD56+CD16-和CD56+CD16+NK细胞数均显著高于其外周血,差异均有统计学意义(P<0.05),CD56+CD16-/CD56+CD16+比值蜕膜组织中虽高于外周血,但无统计学意义(P>0.05)。结论:蜕膜组织中CD56+CD16+NK细胞水平升高以及由此引起的CD56+CD16-/CD56+CD16+比值的变化可能是原因不明复发性流产发生的一个主要因素。     

足月妊娠分娩发动前后孕妇蜕膜中NK细胞及CD4~+CD25~+T细胞的变化

目的:检测足月妊娠分娩发动前后孕妇蜕膜中NK细胞及CD4+CD25+T细胞的变化情况,探讨它们与分娩发动的关系。方法:对40例健康足月孕妇按临产情况分为足月未临产组和足月临产组,收集孕妇蜕膜组织,密度梯度离心法分离出淋巴细胞,流式细胞术(FCM)检测两组中NK细胞、CD4+CD25+T细胞含量。结果:足月临产组的蜕膜NK细胞占蜕膜淋巴细胞的(36.3±6.5)%,足月未临产组蜕膜NK细胞占蜕膜淋巴细胞的(33.9±3.0)%,差异无统计学意义;足月临产组的蜕膜NK细胞表面CDl6的表达明显高于足月未临产组,两者分别为(8.9±1.1)%与(4.6±0.9)%(P<0.05);足月临产组的蜕膜CD4+CD25+T细胞含量明显小于足月未临产组CD4+CD25+T细胞的含量,两者分别为(4.5±0.7)%与(9.1±1.0)%(P<0.05)。结论:足月妊娠分娩发动前、后蜕膜中的NK细胞及CD4+CD25+T细胞发生变化,推测NK细胞与CD4+CD25+T细胞可能参与了分娩发动。     

香烟提取物对人体NK细胞和LAK细胞活性影响

目的　了解烟雾对人类自然杀伤细胞 (NK)和杀伤细胞 (LAK)活性的影响。方法　抽取 4 0名不吸烟的健康自愿者外周血分离单个核细胞 (PBMC) ,将每名自愿者的PBMC分为A、B、C、D 4份 ,A、B用于检测NK细胞 ,C、D用于检测LAK细胞 ,其中B、D不加香烟提取物作为正常对照 ,A、C加入香烟提取物一起培养 ,以K5 6 2 (NK敏感细胞 )为靶细胞经噻唑蓝 (MTT)法检测NK细胞活性 ,以HL 6 0为靶细胞 (NK耐受细胞 )检测LAK细胞活性。观察香烟提取物对NK细胞和LAK细胞的影响。结果　A组NK细胞平均活性为 (43 95± 5 5 7) %,B组为 (45 84±5 6 1 ) %,二者差异无统计学意义 (P >0 0 5 ) ,两组NK细胞活性段位分布比较差异有统计学意义 (P <0 0 5 ) ,C组LAK细胞平均活性为 (2 0 0 7± 1 78) %,D组为 (2 4 5 0± 2 1 7) %,二者差异有统计学意义 (P <0 0 5 )。结论　香烟提取物可影响LAK细胞活性和少数个体NK细胞活性。降低机体免疫监视功能和对癌变细胞清除的能力 ,可能是吸烟者癌症高发的主要原因之一。     

CD4+T细胞、CD8+T细胞、CD57+NK细胞和Vimentin在外阴硬化性苔藓中表达及临床意义

目的:探讨外阴硬化性苔藓中CD4+、CD8+T细胞及CD57+ NK细胞和Vimentin的表达.方法:采用免疫组化S-P法分别检测CD4+T细胞、CD8+T细胞、CD57+NK细胞和VIM阳性细胞在外阴正常皮肤(15例)、外阴硬化性苔藓早期(15例)及进展期(15例)病变中的浸润及表达.结果:CD4+T细胞在外阴硬化性苔藓早期中浸润明显高于正常皮肤,CD8+T细胞在外阴硬化性苔藓早期浅层及进展期深层病变组织中浸润均高于正常皮肤,CD57+ NK细胞在外阴硬化性苔藓早期中浸润明显高于正常皮肤,Vimentin标记的成纤维细胞在外阴硬化性苔藓早期浅层及进展期深层病变中表达明显高于正常皮肤,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论:外阴硬化性苔藓中淋巴细胞的浸润与成纤维细胞增殖有一定相关性.     

麻疹患儿外周血T淋巴细胞及杀伤细胞分析

目的 探讨麻疹患儿外周血T淋巴细胞和自然杀伤(NK)细胞的变化。方法 收集麻疹患儿174例作为病例组,以门诊健康体检婴幼儿作为对照组;采集外周血细胞,用标记荧光的抗体进行染色,流式细胞仪分析麻疹患儿T淋巴细胞和NK细胞的变化。结果 麻疹患儿CD₈细胞百分率为(24.98±8.24)%,NK细胞百分率为(13.14±6.49)%,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);2组间CD₃、CD₄细胞百分率及CD₄/CD₈比值差异无统计学意义(P>0.05);麻疹患儿中,麻疹病毒高活性组CD₃细胞为(2586.54±1635.90)个/μL,CD₄细胞为(1450.06±849.06)个/μL,均低于麻疹病毒低活性组(分别为(3527.36±1912.88),(2046.43±900.92)个/μL),差异均有统计学意义(P<0.05);2组间CD₈细胞和NK细胞差异无统计学意义(P>0.05)。结论 测定麻疹患儿外周血T淋巴细胞和NK细胞变化有助于评价麻疹患儿感染早期的免疫状况,而且对判断病毒复制的活跃程度具有重要价值。     

慢性乙型肝炎患者外周血NK细胞表达研究

目的分析慢性乙型肝炎患者体内NK细胞的表达情况。方法采集慢性乙型肝炎患者33例及健康对照者35例,分离外周血单个核细胞,采用流式细胞仪测定NI（细胞表型及TMIL（TNF相关凋亡诱导配体）表达水平。结果慢性乙型肝炎患者与健康对照者相比较,外周血总的Ni（细胞频率显著降低;CD56^bright（亚群明显上升,而CD56^dimNK亚群明显下降。且NK细胞表达TRAIL比健康对照者明显增高（P〈0．05）。结论高表达TRAIL的NI（细胞可能与慢性乙型肝炎患者肝损伤机制相关。     

HIV感染者抗病毒治疗前后CD3+CD4+T及NK/NKT细胞变化的临床意义

目的 了解HIV感染者抗病毒治疗前后不同时期CD3+CD4+T和NK/NKT细胞的变化,探讨CD3+CD4+T、NK/NKT细胞作为抗病毒治疗后评价免疫状况指标的临床意义。方法 采用重复测量资料方差分析对40个HIV 感染者抗病毒治疗前、治疗后6个月和12个月的CD3+CD4+T、NK、NKT细胞绝对计数差异进行比较,分析治疗前后CD3+CD4+T细胞计数与NK、NKT细胞计数的相关性。结果 感染者不同时间测得的CD3+CD4+T细胞数量差异有统计学意义（F =68.16,P <0.001）,两两比较差异均有统计学意义（P <0.001）。NK和NKT细胞计数三次测量结果差异有统计学意义（F =10.701,P <0.001;F =44.177,P <0.001）,两两比较发现治疗前分别和治疗后6个月、12个月的绝对计数差异有统计学意义（P <0.001）;CD3+CD4+T与NK、NKT细胞绝对计数的相关性不具有统计学意义。结论 经过1年抗病毒治疗后,CD3+CD4+T淋巴细胞有明显的提高,提示患者免疫状况显著改善。NK和NKT细胞在前6个月增加明显,6个月到12个月期间无明显增加,说明NK和NKT细胞在早期抗病毒中同样发挥了重要作用。NK/NKT细胞的变化可以评价患者治疗后天然免疫状况,但与获得性免疫的CD3+CD4+T淋巴细胞变化没有相关性。     

孕期母胎界面及母血中T、NK细胞研究进展

胚胎对于母体来说是半异己的同种移植物,母体免疫系统中的免疫细胞能否识别并耐受胚胎抗原,直接影响妊娠的建立与维持.所以研究孕期母胎界面及母血系统免疫中T细胞和NK细胞免疫状态可以帮助了解妊娠免疫耐受的机制,也可以认识一些严重影响妊娠结局的病理妊娠的发病机制.该文主要对孕期母胎界面及母血系统免疫中T细胞表面标记、辅助细胞1/辅助细胞2模式、自然杀伤细胞分泌细胞因子及自然杀伤细胞表面标记与杀伤活性的变化的研究进展作以综述.     

CRACC-targeting Fc-fusion protein induces activation of NK cells and DCs and improves T cell immune responses to antigenic targets

The CD2-like receptor activating cytotoxic cell (CRACC) receptor is a member of the SLAM family of receptors that are found on several types of immune cells. We previously demonstrated that increasing the abundance of the adaptor protein EAT-2 during vaccination enhanced innate and adaptive immune responses to vaccine antigens. Engagement of the CRACC receptor in the presence of the EAT-2 adaptor generally results in immune cell activation, while activating CRACC signaling in cells that lack EAT-2 adaptor inhibits their effector and regulatory functions. As EAT-2 is the only SAP adaptor that interacts with the CRACC receptor, we hypothesized that technologies that specifically modulate CRACC signaling during vaccination may also improve antigen specific adaptive immune responses. To test this hypothesis, we constructed a CRACC-targeting Fc fusion protein and included it in vaccination attempts. Indeed, mice co-vaccinated with the CRACC-Fc fusion protein and an adenovirus vaccine expressing the HIV-Gag protein had improved Gag-specific T cell responses, as compared to control mice. These responses are characterized by increased numbers of Gag-specific tetramer+ CD8+ T cells and increases in production of IFNγ, TNFα, and IL2, by Gag-specific CD8+ T cells. Moreover, our results revealed that use of the CRACC-Fc fusion protein enhances vaccine-elicited innate immune responses, as characterized by increased dendritic cells (DCs) maturation and IFNγ production from NK cells. This study highlights the importance of CRACC signaling during the induction of an immune response generally, and during vaccinations specifically, and also lends insight into the mechanisms underlying our prior results noting EAT-2-dependent improvements in vaccine efficacy.     

Altering the specificity of NK:target cell interactions by genetic manipulation of NK receptor expression on primary mouse NK cells

A balance of signals generated via stimulatory and inhibitory NK receptors determines both target cell specificity and the outcome of NK–target cell interactions. The feasibility of introducing naturally occurring or genetically engineered chimeric NK receptors at the effector cell level may prove useful in NK cell-based immunotherapies. Here, we utilized a previously established lentiviral transduction system to over-express a model NKR-P1B inhibitory receptor on primary mouse NK cells. These genetically engineered NK cells became more sensitive to inhibitory signals delivered by target cells expressing the cognate NKR-P1B ligand, Ocil/Clr-b. This study demonstrated the utility of lentiviral vectors as a means to stably manipulate the target cell specificity of primary NK cells.     

NK细胞活性改变及化疗对肺癌患者的影响

目的:通过检测外周血NK细胞活性来探讨肺癌患者在化疗前后机体免疫功能的改变、化疗疗效及预后的关系.方法:采用3H-TdR掺入法,检测38例肺癌患者化疗前后NK细胞活性.结果:肺癌患者化疗前NK细胞活性(21.56%±7.38%)明显低于正常对照组(34.28%±5.62%)(P<0.01),化疗后有效组22例,NK细胞活性(26.34%±3.88%)明显高于无效组16例(18.78%±6.34%)(P<0.05).结论:化疗三个月后有效组患者机体的免疫功能明显改善,NK细胞活性上升明显高于无效组.因此对肺癌患者随时监测NK细胞活性对判断患者的免疫功能及疗效有很高的临床应用价值.     

不孕妇女生殖道支原体感染对NK细胞水平的影响

目的:通过检测不孕妇女外周血NK细胞的水平,探讨NK细胞水平与不孕妇女支原体感染是否存在一定的相关性。方法:根据支原体培养结果,将病例分为支原体阳性组(44例)与支原体阴性组(41例),采用流式细胞仪分别检测两组外周血NK细胞的水平。结果:支原体阳性组与支原体阴性组比较,NK细胞的表达有统计学差异(P=0.001;OR=1.106)。结论:生殖道支原体感染可引起外周血NK细胞水平的提高。     

重症手足口病患儿T淋巴细胞亚群、NK细胞及细胞因子水平变化

目的　分析重症手足口病患儿外周血T淋巴细胞亚群、NK细胞及细胞因子水平变化及临床指导意义。方法　分析2018年1月—2020年4月在我院诊治的97例手足口病患儿资料,按病情分为重症组（25例）,轻症组（72例）;纳入同期50例健康体检儿童为对照组。检测T淋巴细胞亚群（CD3+ T细胞、CD4+ T细胞、CD8+ T细胞）、NK细胞及细胞因子（TNF-α、IL-23、IL-22、IL-17）水平。对比上述指标在对照组、轻症组、重症组之间,重症组不同感染类型（Cox A16型、EV 71型、其他型）组间,重症组急性期组与恢复期组间及重症组预后不良组和预后良好组间的差异。分析4项细胞因子预测患儿预后的效能。结果　CD3+ T细胞、CD4+ T细胞、NK细胞水平从高到低均依次为对照组、轻症组、重症组,CD8+ T细胞水平从低到高依次为对照组、轻症组、重症组;血清TNF-α、IL-23、IL-22、IL-17水平从低到高均依次为对照组、轻症组、重症组。组间上述指标比较差异均具有统计学意义（P均＜0.05）。重症组不同感染类型组间T淋巴细胞亚群、NK细胞和细胞因子水平比较,差异均无统计学意义（P均＞0.05）。与恢复期组相比,急性期组CD3+ T细胞、CD4+ T细胞、NK细胞水平更低,CD8+ T细胞、TNF-α、IL-23、IL-22、IL-17水平更高,差异均具有统计学意义（P均＜0.05）。与预后良好组相比,预后不良组CD3+ T细胞、CD4+ T细胞、NK细胞水平更低,CD8+ T细胞、TNF-α、IL-23、IL-22、IL-17水平更高,差异均具有统计学意义（P均＜0.05）。4项细胞因子联合预测不良预后敏感度为83.33%,准确度为71.43%。结论　检测外周血T淋巴细胞亚群、NK细胞和细胞因子水平有助于手足口病病情判断,可对重症手足口病患儿进行预后预测。     

CD56在肾细胞癌中的表达及其意义

目的研究CD56与肾细胞癌的细胞类型、肿瘤分级、临床分期及预后的关系。方法采用免疫组织化学二步法检测CD56在120例肾细胞癌中的表达，并对肾细胞癌组织进行系统的病理检查和分析。结果CD56的表达与肾细胞癌的病理分级和临床分期均呈正相关。CD56表达者与未表达者术后5年生存率分别为23．8％和92．5％，差异有统计学意义（P〈0.5）结论CD56的表达与肾细胞癌的病理分级和临床分期呈正相关，CD56与临床分期结合能更好地判断肾细胞癌的预后。CD56表达者易发生转移且预后差。     

CD56在肾细胞癌中的表达及其意义

目的研究CD56与肾细胞癌的细胞类型、肿瘤分级、临床分期及预后的关系。方法采用免疫组织化学二步法检测CD56在120例肾细胞癌中的表达,并对肾细胞癌组织进行系统的病理检查和分析。结果CD56的表达与肾细胞癌的病理分级和临床分期均呈正相关。CD56表达者与未表达者术后5年生存率分别为23.8%和92.5%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论CD56的表达与肾细胞癌的病理分级和临床分期呈正相关,CD56与临床分期结合能更好地判断肾细胞癌的预后,CD56表达者易发生转移且预后差。     

富硒乳酸菌对镉暴露机体自然杀伤细胞活性调节

目的探讨镉暴露机体脾脏自然杀伤(NK)细胞活性变化及富硒乳酸菌对其的调节作用。方法72只健康成年雌性SD大鼠，随机分成4组，即对照组(C组)、低剂量镉染毒组(L-CA组)、中剂量镉染毒组(M-Cd组)、高剂量镉染毒组(H-Cd组)，C、L-CA、M-CA、H-CA组分别饲喂含镉0，2，5，10mg／kg饲料的全价饲料进行镉暴露实验，连续9周。另选择48只健康成年雄性小鼠，随机分成C组、Cd组、镉染毒 中剂量富硒乳酸菌制剂保护组(Cd-MSe组)、镉染毒 高剂量富硒乳酸菌制剂保护组(Cd-HSe组)，CA、CA-MSe、CA-HSe组小鼠每天分别按含镉0．5mg／kg体重腹腔注射CdCl2溶液进行镉暴露，C组注射与Cd组同等剂量的生理盐水。连续12d。结果在整个实验期内，慢性镉暴露各组大鼠脾脏NK细胞活性均下降，且呈明显剂量-时间-反应关系；急性镉暴露小鼠NK细胞活性明显低于C组，而Cd-MSe组高于或显著高于Cd组，与C组接近，CA-HSe组虽高于CA组但低于C组和Cd-MSe组。结论急、慢性镉暴露均引起NK细胞活性下调，富硒乳酸菌能有效地对镉造成的机体损伤有保护作用，调节和改善NK细胞活性。     

胶束增敏荧光法测定银杏叶片剂中总黄酮醇苷

以槲皮素为对照品用荧光法测定药物银杏叶片制剂中总黄酮醇苷的含量。实验表明：Al（Ⅲ）与槲皮素作用可产生强的荧光,加入十二烷基硫酸钠（SDS）后,荧光强度进一步增强。槲皮素在0.068～6.76μg/ml范围内与其荧光强度呈良好的线性关系,其线性回归方程为Y=5.8658X＋5.3925,相关系数r=0.9936,检出限为0.036μg/ml。本方法用于银杏叶片制剂中总黄酮醇苷含量的测定,其回收率为99.2%～100.8%,结果较为理想。     

Anticancer activities of pomegranate extracts and genistein in human breast cancer cells

Previous studies have demonstrated the anticarcinogenic activity of pomegranate extracts and genistein in a series of human cancer cells. In the present study, the potential anticancer effects of pomegranate extracts and genistein on inhibition of cell proliferation and induction of apoptosis in human breast cancer cells was investigated. Human breast cancer cells (MCF-7) were cultured as monolayers in complete RPMI 1640 medium. The cells were cultured for 48 hours to allow growth and achieve about 80% confluence in 48-well culture plates, and then exposed to the agents for 24 hours in single and combination treatments. Post-treatment growth rate and apoptosis induction were assessed by the use of a series of bioassays-lactate dehydrogenase and 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium (inner salt) for viability and cytotoxicity; acridine orange-ethidium bromide and terminal deoxyribonucleotidyl transferase-mediated dUTP nick-end labeling assays for induction of apoptosis. Both pomegranate extracts and genistein had significant (dose- and time-dependent) cytotoxic and growth inhibition effects on MCF-7 cancer cells. Both growth inhibition and cytotoxicity were significantly higher (P < .01) in the combination treatments than in the single treatments with either agent. The data revealed that both drugs in single and in combination treatments induced apoptosis in MCF-7 cells. Apoptotic induction in the combination treatments was significantly higher (P < .01) than in single treatments. Both pomegranate extracts and genistein inhibit the growth of MCF-7 breast cancer cells through induction of apoptosis, with combination treatment being more efficacious than single treatments.     

乳腺癌患者外周血T细胞亚群与NK、NKT细胞检测的临床意义

目的:检测乳腺癌患者外周血T淋巴细胞亚群及NK、NKT细胞表达率的变化,探讨乳腺癌患者免疫状况与肿瘤分期的关系以及免疫指标变化在治疗前后的临床价值。方法 :采用荧光标记法与多参数流式细胞仪检测40例正常女性和120例乳腺癌患者的总T淋巴细胞(CD3+)、T辅助/T诱导细胞(CD3+CD4+)、T抑制/细胞毒细胞(CD3+CD8+)、自然杀伤细胞(NK)、NK样T细胞(NKT)的表达率,并进行统计学分析。结果:无淋巴结转移组乳腺癌患者治疗前CD3+、CD3+CD4、CD3+CD8+、CD4+/CD8+与对照组比较无统计学意义,NK、NKT显著低于对照组(P<0.05)。淋巴结转移组乳腺癌患者CD3+、CD3+CD4、CD3+CD8+、NK、NKT表达率均明显低于对照组(P<0.05)。经过综合治疗后乳腺癌组各项免疫指标均恢复到正常值。结论:外周血T细胞亚群的检测对判断乳腺癌患者的病情、临床分期有一定意义;经过治疗后能够有效地改善乳腺癌患者的免疫状态。