新诊断2型糖尿病患者血清硫氧还蛋白、硫氧还蛋白相互作用蛋白与颈动脉粥样硬化的相关性

目的  探讨新诊断2型糖尿病（T2DM）患者血清硫氧还蛋白（Trx）、硫氧还蛋白相互作用蛋白（TXNIP）水平与颈动脉粥样硬化（CAS）的相关性。方法  选取2014年2月-2015年11月于河北省唐山市工人医院内分泌科就诊的新诊断T2DM患者160例作为病例组。根据颈动脉超声检查结果将患者分为T2DM伴CAS组（CAS组,n=65例）和T2DM不伴CAS组（NCAS组,n=95例）。同时从医院健康体检中心选取非糖尿病健康人群140例作为正常组。记录其年龄、性别、体重指数（BMI）、收缩压（SBP）、舒张压（DBP）,收集其临床检验结果,包括空腹血糖（FPG）、空腹胰岛素（FINS）、糖化血红蛋白（HbA1C）、总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、高密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白（LDL）、同型半胱氨酸（Hcy）,计算胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）。采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清Trx、TXNIP含量,采用胰岛素还原法检测血清Trx活性。结果  与正常组比较,T2DM患者FPG、HbA1c、HOMA-IR、Trx、TXNIP水平升高,Trx活性下降（均P <0.05）;T2DM患者CAS组较NCAS组年龄较大,FPG、HbA1c、SBP、Trx、TXNIP水平较高,Trx活性下降（均P <0.05）;在T2DM患者中,Trx与HbA1c呈正相关,TXNIP与HbA1c、HOMA-IR呈正相关,Trx活性与TXNIP呈负相关（均P <0.05）;在T2DM患者中,年龄、HbA1c、Trx、TXNIP及Trx活性为合并CAS的影响因素,其中年龄（■=1.134,P =0.032）、HbA1c（■=1.275,P =0.021）、Trx（■=1.532,P =0.015）、TXNIP（■=1.731,P = 0.005）为CAS发生的危险因素,而Trx活性（■=0.507,P =0.002）为CAS发生的保护因素。结论  新诊断T2DM患者血清Trx、TXNIP、Trx活性与其CAS相关,提示Trx系统可能参与了CAS的发生及发展。

     

硫氧还蛋白在宫颈癌中的表达及作用机制

目的 研究硫氧还蛋白（Trx1）在宫颈癌中的表达水平及其作用机制。方法 在3对宫颈癌和癌旁组织中,采用蛋白质免疫印迹法（Western Blot）检测Trx1蛋白的表达水平;同时在3对宫颈癌和癌旁组织中,通过逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）检测与宫颈癌密切相关的SND1分子的表达水平;用免疫组织化学(IHC)检测宫颈癌组织中Trx1蛋白的表达水平以及亚细胞定位;用免疫荧光（IF）实验检测蛋白Trx1和HLA-DR在宫颈癌细胞中的表达水平以及通过不同的荧光标记后分析两种蛋白的荧光共定位情况。结果 Trx1蛋白在宫颈癌组织中显著高表达;SND1分子在宫颈癌组织中显著高表达;免疫组化显示Trx1在主要定位于宫颈癌细胞的细胞质中并且表达显著增加;细胞内绿色荧光标记的Trx1和红色荧光标记的HLA-DR在荧光显微镜下存在共定位现象（均P＜0.05）。结论 Trx1蛋白在宫颈癌组织中显著高表达,并且与HLA-DR共定位于细胞质中。     

急性坏死性胰腺炎大鼠硫氧还蛋白-1表达及清胰Ⅱ号颗粒剂对肾脏损伤保护作用的实验研究

目的：检测内源性硫氧还蛋白‐1（thioredoxin‐1,Trx‐1）在急性坏死性胰腺炎（acute necrotizing pancreatitis ,ANP）大鼠模型血液、胰腺和肾组织的表达;并观察中药清胰Ⅱ号颗粒剂对ANP胰腺和肾脏的保护作用以及对肾脏组织Trx‐1表达的影响。方法将96只SD大鼠随机分为正常组（A组,n＝24）、假手术组（B组,n＝24）、ANP组（C组,n＝24）及治疗组（D组, n＝24）。在制模后1小时治疗组给予250 g／l清胰Ⅱ号颗粒剂灌胃（10 ml／kg）,6 h 1次,共3次,正常组、假手术组、ANP组三组给予等量生理盐水灌胃。于制模后6 h、12 h、24 h测定各组血清中T rx‐1的水平;制模后24小时处死大鼠,应用免疫组织化方法对胰腺以及肾脏中Trx‐1的表达情况进行测定。结果24小时内正常组、假手术组血清中 Trx‐1的表达较稳定,ANP组呈现一个持续升高的趋势,而治疗组T rx‐1的表达则呈现一个先上升后下降的趋势,12 h治疗组T rx‐1的表达较其它三组明显升高（P＜0.05）,24 h ANP组血清中Trx‐1的表达较假手术组明显升高（P＜0.05）,而24 h治疗组血清中Trx‐1的表达又较ANP组降低（P＜0.05）,但仍高于正常组和假手术组（P＜0.05）;病理结果显示ANP组胰腺及肾脏组织损伤明显,Trx‐1的表达呈阳性,较正常组、假手术组、治疗组比较有统计学意义（P＜0.05）。结论 Trx‐1在ANP模型大鼠肾损伤中可能具有重要作用,中药清胰Ⅱ号颗粒可提前促进胰腺、肾脏组织Trx‐1的表达,减轻ANP时胰腺和肾脏损害,对其有保护作用。     

硫氧还蛋白在凋亡途径中的作用机制

硫氧还蛋白(Trx)是体内广泛存在的氧化还原蛋白,其家族中两种重要的硫氧还蛋白:硫氧还蛋白1(thioredoxin1,Trx1)和硫氧还蛋白2(thioredoxin2,Trx2)都含有保守的-Cys-Gly-Pro-Cys-还原序列。由于Trx具有调节细胞生长增殖和抗凋亡的作用,因此Trx在凋亡途径中的作用机制就成为了对抗肿瘤的研究热点。     

硫氧还蛋白的调节变化对大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的：探讨血管紧张素Ⅱ受体1（AT1）和一氧化氮合酶（NOS）对硫氧还蛋白（Trx）表达及细胞凋亡的影响。方法：SD大鼠30只,完全随机分组：假手术组（sham）、急性心肌梗死组（AMI）、氯沙坦组（LOS）、氯沙坦＋硝基左旋精氨酸组（LOS＋L—NNA）、硝基左旋精氨酸组（L—NNA）。用结扎冠状动脉左前降支法制备AMI模型。L—NNA抑制一氧化氮合酶,LOS阻断AT1受体。RT—PCR半定量检测心肌Trx、Bcl-2、Bax mRNA表达,Western blotting检测Trx蛋白表达。结果：AMI组与假手术组相比较,Trx mRNA及蛋白表达增加,Bax mRNA表达增强,Bcl-2 mRNA表达降低（P〈0．05）。LOS组与AMI组相比较Bcl-2 mRNA,TrX蛋白表达增加（P〈0．05）。L—NNA组与AMI组相比较,Trx mRNA及蛋白表达降低,Bcl-2 mRNA表达增加（P〈0．05）。LOS＋L—NNA组与LOS组相比较Bax mRNA、Bcl-2 mRNA、Trx mRNA及蛋白表达均降低（P〈0．05）。L—NNA组与LOS＋L—NNA组相比较,Baxm RNA、Bcl-2 mRNA、Trx mRNA及蛋白表达差异无统计学意义。结论：Trx在心肌梗死大鼠中通过拮抗心肌细胞凋亡而对心肌起保护作用。大鼠急性心肌梗死过程中NOS和AngⅡ受体信号转导通路对Trx表达及细胞凋亡有重要的调节作用。     

硫氧还蛋白结合蛋白与肺部疾病的研究进展

硫氧还原蛋白相互作蛋白(TXNIP)是硫氧还蛋白(Trx)的内源性抑制剂,它通过与Trx活性部位结合而抑制其活性,破坏细胞内氧化还原平衡,促进氧化应激,最终可诱导炎症或细胞凋亡。TXNIP作为机体内主要的氧化应激相关因子,有可能成为干预治疗的靶点,在肺部疾病中发挥了一定作用,本文对TXNIP在肺部疾病中的表达与哮喘、慢性阻塞性肺疾病、急性肺损伤、肺癌的关系进行简述。     

硫氧环蛋白相互作用蛋白与糖尿病关系的研究

目的 研究高糖环境下INS-1细胞中硫氧环蛋白相互作用蛋白(thioredoxin interacting protein,TXNIP)的表达对胰岛素分泌的影响以及N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)、艾塞那肽(Exenatide,Ex-4)的保护作用.方法 以含11.1 mmol/L葡萄糖的RPMI 1640培养液培养INS-1细胞,当细胞生长至80%融合时,分别转入含有4.0 mmol/L葡萄糖(NG组)、16.7 mmol/L葡萄糖(HG组)及16.7 mmol/L葡萄糖+10 mmol/L NAC(HG+N组)、16.7 mmol/L葡萄糖+100 nmol/L Ex-4(HG+E组)的RPMI 1640培养液中继续培养48 h;采用real-time PCR法检测TXNIP、胰岛素基因及胰岛素转录因子MafA的mRNA水平.结果 HG组与NG组比较,TXNIP mRNA的表达明显上升,胰岛素mRNA、MafA mRNA的表达均明显下降,差异均有统计学意义(均P<0.01).HG+N组、HG+E组与HG组比较,TXNIP mRNA的表达均明显下降,胰岛素mRNA、MafA mRNA的表达均明显提高,差异均有统计学意义(均P<0.01).结论 高浓度葡萄糖可通过介导TXNIP的过度表达而导致胰岛素基因及MafA表达下降;特异性地抑制高糖下TXNIP的过度表达可以恢复胰岛素基因及MafA的表达.     

金雀异黄酮对糖尿病大鼠心肌损伤的保护作用

目的 观察金雀异黄酮（genistein, Gen）对糖尿病大鼠心肌损伤的保护作用,并探讨其机制。 方法 雄性SD大鼠随机分为正常（N）组、糖尿病（D）组、Gen 5 mg/kg治疗（L）组和Gen 25 mg/kg治疗（H）组,每组8只。采用链脲佐菌素55 mg/kg腹腔注射诱导1型糖尿病大鼠模型。造模成功4周后,L组和H组大鼠开始分别灌胃给予Gen溶液5 mg/kg和25 mg/kg。干预4周后,测定各组大鼠血流动力学指标和空腹血糖（FBG）;通过HE染色和透射电镜下分别观察大鼠心肌病理形态结构和超微结构改变;测定心肌组织肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-1β（IL-1β）、白介素-6（IL-6）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽（GSH）含量和Caspase-3活性;RT-PCR检测心肌组织Bcl-2和BaxmRNA表达;Western blot检测心肌硫氧还蛋白（Trx）、Trx相互作用蛋白（TXNIP）和凋亡信号调节激酶1（ASK1）的蛋白表达。 结果 与N组比较,D组FBG、TNF-α、IL-1β、IL-6、MDA含量和Caspase-3活性增高（P＜0.01）,血流动力学指标和GSH含量下降（P＜0.01）;心肌病理形态结构和超微结构明显损伤,心肌Bcl-2 mRNA和Trx蛋白表达下降（P＜0.01）,BaxmRNA、TXNIP和ASK1蛋白表达增高（P＜0.01）。与D组比较,L和H组中,FBG差异无统计学意义,TNF-α、IL-1β、IL-6、MDA含量和Caspase-3活性下降（P＜0.05,P＜0.01）,血流动力学指标和GSH含量增高（P＜0.05,P＜0.01）;心肌病理形态结构和超微结构明显改善;心肌Bcl-2 mRNA和Trx蛋白表达增加（P＜0.05,P＜0.01）,Bax mRNA、TXNIP和ASK1蛋白表达下降（P＜0.05,P＜0.01）。 结论 金雀异黄酮对糖尿病大鼠心肌损伤具有保护作用,其机制可能与减轻心肌炎症反应,调节Trx系统表达,抑制氧化应激和细胞凋亡相关。     

CyclinE mRNA及蛋白的异常表达与结肠癌生物学行为的关系

目的:探讨CyclinE在结肠癌组织中的表达情况及其与结肠癌发生、发展的关系。方法：采用原位杂交方法和免疫组化S P法对40例结肠癌、10例结肠腺瘤和10例结肠正常粘膜组织进行CyclinE mRNA和CyclinE蛋白的检测，同时结合临床病理资料进行分析。结果：正常结肠组织无CyclinE mRNA及蛋白的表达，结肠癌组织中CyclinE mRNA和CyclinE蛋白的阳性表达率分别为62.5%和57.5%，显著高于结肠腺瘤和结肠正常组织（P＜0.05）。CyclinE mRNA与肿瘤的浸润深度、有无淋巴结转移密切相关（P＜0.05），但与肿瘤的分化程度、有无肝转移不相关（P＞0.05）。CyclinE蛋白在结肠癌的表达与CyclinE mRNA的表达基本一致，但CyclinE蛋白的阳性表达率在肝转移组高于无肝转移组（P＜0.05）。结论：CyclinE mRNA及蛋白在结肠癌组织中表达显著上调，并与结肠癌生物学行为关系密切，提示CyclinE过表达与结肠癌的发生、发展有关，CyclinE可作为结肠癌早期诊断和判断预后的辅助指标。     

硫氧还蛋白与阿尔茨海默病的研究进展

硫氧还蛋白（Thioredoxin,Trx）是一种高度保守且广泛表达的小分子蛋白,具有维持体内细胞内外氧还原平衡、清除自由基、抑制细胞凋亡以及调节转录因子活性等功能,在细胞信号转导中也发挥重要的作用。阿尔茨海默病（Alzheimer’sdisease,AD）发病机理与体内自由基清除能力下降、神经元的丢失与凋亡有紧密的联系,近年来有关Trx与AD的发病机理的研究日渐增多。本文拟对Trx与AD的关系进行综述,理清Trx在AD中的作用,旨在为AD的治疗挖掘新途径。     

硫氧还蛋白相互作用蛋白在大鼠急性肾损伤中的作用

目的 探讨硫氧还蛋白相互作用蛋白（TXNIP）在大鼠急性肾损伤中的作用。方法 16 只雄性Sprague Dawley 大鼠随机分为假手术组（S）,缺血再灌注组（IR）,每组8 只。采用夹闭双侧肾蒂25 min,再灌注48 h 复制大鼠急性肾损伤模型。取大鼠肾脏HE 染色观察病理学结果,血标本测定血尿素氮（BUN）和血肌酐（Scr）水平,比色法测定超氧化物歧化酶（SOD）活性及丙二醛（MDA）含量,末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP 缺口末端标记法检测细胞凋亡指数,Western blot 检测TXNIP 和炎性体3 蛋白（NLRP3）的表达,酶联免疫吸附测定法检测白细胞介素1β（IL-1β）。结果 与S 组比较,IR 组肾小管肿胀,间质水肿,刷状缘丢失,空泡变性坏死;与S 组比较,IR 组BUN,Scr,MDA,TXNIP,NLRP3 及IL-1β 表达增高（P <0.05）,凋亡指数增高（P <0.05）,SOD 活性降低（P <0.05）。结论 TXNIP 可能通过激活NLRP3/IL-1β 炎症通路参与大鼠急性肾损伤。     

维拉帕米通过下调硫氧还蛋白互作蛋白的表达抑制丙型肝炎病毒感染

目的 探讨抗高血压药维拉帕米是否可通过下调宿主硫氧还蛋白互作蛋白(TXNIP)的表达而抑制丙型肝炎病毒(HCV)的感染.方法 用不同浓度梯度的维拉帕米处理人肝癌细胞系Huh7.5.1,用qPCR和蛋白质印迹法检测TXNIP的表达.用维拉帕米处理Huh7.5.1细胞,同时加入细胞培养产生的HCV (HCVcc),48 h后检测HCVcc感染情况.用TXNIP siRNA转染Huh7.5.1细胞,检测下调TXNIP表达后,维拉帕米对HCVcc感染的影响;用TXNIP启动子调控的增强型绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因表达质粒(pTXNIP-EGFP)转染Huh7.5.1细胞,分析维拉帕米对TXNIP启动子转录活性的影响.结果 与对照孔相比,维拉帕米(100、200、400 μmol/L)可下调Huh7.5.1细胞中TXNIP的表达,并呈现浓度依赖性(P＜0.05);并可抑制HCVcc对Huh7.5.1细胞的感染,且浓度越高抑制作用越明显(P＜0.05).进一步研究结果显示,与对照组相比,维拉帕米能够抑制pTXNIP-EGFP转染细胞中EGFP的表达水平(P＜0.05).结论 维拉帕米可下调TXNIP的表达从而抑制HCV感染,这可能是通过抑制TXNIP启动子的转录活性来实现的.     

硫氧还蛋白互作蛋白在乳腺癌中的研究进展

硫氧还蛋白互作蛋白(TXNIP)可以与硫氧还蛋白(TRX)直接结合,作为其内源性抑制蛋白,参与调节细胞内氧化应激水平。TXNIP作为一种抑癌蛋白,在人乳腺癌组织细胞中处于低表达状态,并且与细胞增殖、凋亡、患者预后等相关。本文就乳腺癌中TXNIP的结构、调节氧化应激的功能及抑癌机制做一综述,以证明TXNIP作为乳腺癌分子治疗的新靶点具有潜在价值。     

硫氧还原蛋白与氧化应激在胃癌中表达水平和意义

目的探讨氧化应激和抗氧化蛋白-硫氧还原蛋白(Trx)在胃癌发生发展中的作用。方法采用紫外分光光度法测定胃癌患者(n=48)和健康自愿者(n=30)血浆中腺苷脱氨酶(ADA)、谷胱苷肽过氧化物酶(GPX)、超氧化物歧化酶(SOD)、晚期蛋白氧化产物(AOPP)的表达水平,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定硫氧还原蛋白的表达水平;采用荧光定量RT-PCR法测定胃癌组织(n=68)和其癌周正常组织中Trx mRNA的表达水平。结果胃癌组血浆ADA、AOPP的表达水平高于对照组(P<0.05),GPX表达明显低于对照组(P<0.05),SOD在两组间未见明显差异。胃癌组血浆Trx表达水平明显高于健康对照组(P<0.05),Trx表达水平与远处转移有关(P<0.05)。胃癌与正常胃组织Trx mRNA水平比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论胃癌患者存在过高的氧化应激水平,胃癌组织Trx mRNA相对表达值高,血浆硫氧还原蛋白高表达且与肿瘤远处转移有关。     

硫氧还蛋白相互作用蛋白与多囊卵巢综合征代谢紊乱的研究进展

多囊卵巢综合征(PCOS)是一种复杂的生殖内分泌疾病,主要特征为月经稀发或闭经、高雄激素血症、卵巢多囊样改变以及代谢紊乱。其中,胰岛素抵抗在PCOS患者中很常见。高糖通过糖类反应元件增加了血清硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)的表达,导致胰岛素抵抗,从而加强了氧化应激,引起β细胞凋亡。由于PCOS妇女血清TXNIP水平较正常妇女明显偏高,因此通过探究TXNIP与PCOS的相关性,可以为寻找PCOS代谢紊乱治疗靶点提供新的依据与线索。     

硫氧还蛋白2的研究进展

硫氧还蛋白2(Trx2)是特异位于线粒体的小分子蛋白,它在抗氧化应激、阻止线粒体介导的细胞死亡、调节某些基因的表达等方面起着关键作用。最新研究表明,Trx2还可促进血管再生、减少高血压病理生理改变,抑制神经退行性变、保护脑细胞,且高表达Trx2的细胞对致癌剂有更强的抵抗力。因此,Trx2与心血管、神经系统、肿瘤等疾病的发病机制密切相关。现综述Trx2的结构、生物学功能和有关机制,以及该蛋白在相关疾病中的基础研究。     

线粒体硫氧还蛋白对于神经退行性病变干预机制研究进展

线粒体硫氧还蛋白(thioredoxin2,Trx2)是存在于线粒体的一种硫氧还蛋白家族的小分子蛋白质,广泛参与了细胞内抗氧化应激、核酸代谢、细胞生长与凋亡等多种生物学过程。目前研究表明,Trx2可能通过抗氧化或与其他蛋白质相互作用的方式参与多种神经退行性病变如阿尔茨海默病、帕金森病等的发生、发展过程。本文就Trx2在线粒体中的功能及线粒体互作网络参与神经退行性疾病的作用机制进行介绍。     

硫氧还蛋白对缺氧/复氧大鼠海马神经元caspase-3活性的影响

目的：探讨硫氧还蛋白（Trx)和caspase-3在鼠海马神经元缺氧／复氧损伤中的作用。方法：原代培养10d的新生鼠海马神经元缺氧3h复氧12h,24h和48h，分为正常对照组、缺氧／复氧组和Trx组，用MTT比色法测定各时点的神经元存活率；底物裂解法检测caspase-3活性。结果：缺氧／复氧组海马神经元复氧12－48h，海马神经元caspase-3样蛋白酶活性明显增高，以复氧24h为最高，而存活率进行性下降；Trx组caspase-3样蛋白酶活性曲线与缺氧／复氧组相似，但明显下降，细胞存活率较缺氧／复氧组明显提高。结论：海马神经元缺氧／复氧后，caspase-3样蛋白酶被激活，参与神经元损伤过程；Trx对神经元有保护作用。     

硫氧还蛋白还原酶在肺结核与肺癌患者血浆中表达的对比分析

目的：探索异常增生标志物硫氧还蛋白还原酶（ TR）在肺结核与肺癌患者血浆中的表达水平及其临床意义。方法采用分光光度法检测肺癌、肺结核和健康对照各100例志愿者血浆中异常增生标志物TR的表达水平,并进行对比分析。结果 TR的表达水平肺癌组明显高于肺结核组（P＜0．01）,肺结核组明显高于健康组（ P＜0．01）。结论 TR对肺结核病人罹患肺癌具有预警意义,在肺结核患者的治疗过程中具有指导意义。     

硫氧还蛋白还原酶在不同类型及分期的肺癌中表达的相关分析

目的：比较不同病理类型及分期肺癌患者中硫氧还蛋白还原酶（ TrxR）活性的表达水平。方法以健康成年人为对照,通过测定肺癌患者（不同类型及分期）空腹血清TrxR活性表达的水平。结果肺癌血清中TrxR活性表达水平明显高于正常人群,小细胞肺癌与鳞癌、腺癌血清中TrxR活性表达水平比较差异均非常显著,而鳞癌及腺癌组之间相比差异无统计学意义,Ⅲ～Ⅵ期肺癌血清TrxR活性表达水平显著高于Ⅰ～Ⅱ期肺癌,肺癌伴有淋巴结及远处浸润转移者TrxR活性表达水平明显高于无淋巴结及远处浸润转移者。结论 TrxR活性表达水平与肺癌的病理类型、临床分期、有无淋巴及远处转移有关,尤其是小细胞肺癌伴有淋巴结及远处浸润转移中过度表达TrxR,提示其活性表达水平与肿瘤细胞的恶性程度、增殖力及转移力有着密切的关系,可作为辅助判断肺癌进程或治疗效果评价的指标。