酒蒸黄连总生物碱抗糖尿病认知功能障碍作用研究

目的:研究酒蒸黄连总生物碱对实验性糖尿病认知功能障碍动物模型的影响,并初步探讨其机制,为酒蒸黄连总生物碱防治"消渴呆"提供依据。方法:建立四氧嘧啶+东莨菪碱小鼠糖尿病复合认知障碍模型,分别观察药物对小鼠认知功能及糖代谢的影响,初步从抗脂质过氧化的途径探讨其作用机制。结果:酒蒸黄连总生物碱在75~300mg/kg剂量范围内,能明显或部分降低糖尿病小鼠FBG的含量,升高血清Ins的含量,降低HOMA-IR抵抗指数,增加胰岛β细胞FBCI功能指数和胰岛素IAI敏感指数,改善胰岛素抵抗;同时,该药能明显或部分缩短Morris水迷宫实验小鼠的游出时间,延长小鼠避暗实验的潜伏期,减少进入暗室的错误次数,显示出明显的改善认知功能,增强学习记忆能力的作用。上述作用可能与药物降低小鼠脑组织LPO和MDA的含量,升高SOD的活力,抑制脂质过氧化物产生,提高机体对自由基损伤的清除作用有关。结论:酒蒸黄连总生物碱具有抗糖尿病认知功能障碍作用。     

基于网络药理学和分子对接探讨川芎-石菖蒲药治疗血管性认知功能障碍的作用机制

目的：基于网络药理学方法研究川芎-石菖蒲药对治疗血管性认知功能障碍（Vascular Cognitive Impairment,VCI的关键靶点及其作用机制。方法：使用中药系统药理学数据库与分析平台（TCMSP）查找川芎-石菖蒲药对的活性成分并预测作用靶点,利用Uniprot数据库整理靶点蛋白的基因信息,并与Gene Cards、OMIM数据库中有关VCI的相关基因进行交集合并。通过STRING在线数据库将疾病与药物交集靶点进行蛋白质相互作用分析,利用Metascape在线平台对核心靶点进行基因本体论（GO）分析和京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析,预测其作用机制。结果：从TCMSP数据库检索到川芎-石菖蒲药对11个化合物成分以及对应的86个药物靶点,与VCI的1 075个靶点取交集后得到36个共同基因,其中丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1、肿瘤坏死因子、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3、前列腺素氧化环化酶2、JUN原癌基因为关键靶点。GO分析结果涉及的生物过程集中在炎症反应、氧化应激、神经元死亡调节,KEGG分析主要代谢通路包括磷脂酰肌醇-3-激酶-丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶信号通路、丝裂...     

黄连解毒汤对糖尿病认知功能障碍大鼠海马JNK胰岛素信号通路关键蛋白及其磷酸化的影响及机制研究

目的:探讨黄连解毒汤对糖尿病认知功能障碍(CID)大鼠海马JNK胰岛素信号通路关键蛋白及其磷酸化的影响及其机制.方法:健康雄性Wistar大鼠100只,随机分为5组,分别为模型组、罗格列酮组、黄连解毒汤低、中、高剂量组,20只雄性SD大鼠为空白对照组,制备2型糖尿病(T2DM)大鼠模型.观察黄连解毒汤对T2DM大鼠水迷...     

石菖蒲-熟地黄对认知功能障碍模型大鼠的网络药理学作用机制及实验研究

目的：探究石菖蒲-熟地黄对认知功能障碍模型大鼠学习记忆力的影响及作用机制,并进行实验验证。方法：在中药系统药理学数据库与分析平台（TCMSP）、人类基因数据库（GeneCards）、在线人类孟德尔遗传数据库（OMIM）中获取石菖蒲-熟地黄药对治疗认知功能障碍的潜在作用靶点,并构建蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络,在生物学信息注释库（DAVID）分析平台中对共同靶点进行基因本体（GO）和京都基因和基因组百科全书（KEGG）通路富集分析。基于网络药理学预测结果,用动物实验进行验证。采用双侧脑室注射脂多糖（LPS）的方法模拟中枢神经炎症损伤引起的认知障碍模型,连续灌胃给药8周,假手术组予以注射等量生理盐水。Morris水迷宫观察各组大鼠空间学习记忆力的变化情况;酶联免疫吸附试验（ELISA）检测大鼠血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量;蛋白质印迹法（Western Blotting）检测Toll样受体4/核因子κB（TLR4/NF-κB）通路相关蛋白含量。结果：从石菖蒲-熟地黄药对中筛选到26个有效成分,疾病相关靶点64个,涉及晚期糖基化终末产物-晚期糖基化终末产物受体（AGE-RAGE）信号通路、TNF信号通路、白细胞介素17（IL-17）信号通路、Toll样受体通路、NF-κB信号通路等5条主要信号通路。动物实验结果显示,石菖蒲-熟地黄中、高剂量组大鼠逃避潜伏期明显缩短（P<0.05）,在目标象限停留时间明显延长（P<0.05）,TNF-α的表达水平明显降低（P<0.05）;石菖蒲-熟地黄低、中、高剂量组能显著降低TLR4、p-NF-κB p65/NF-κB p65、IL-6的表达（P<0.05）。结论：石菖蒲-熟地黄可能通过TLR4/NF-κB通路减少炎症介质释放,抑制神经炎症来干预认知功能障碍的发生发展,为该药对抗认知功能障碍有效成分的开发和运用提供了方向。     

黄连-葛根药对治疗2型糖尿病的网络药理学研究

目的:运用网络药理学研究方法对黄连-葛根药对治疗2型糖尿病(T2 DM)的作用机制进行分析.方法:采用中药系统药理学分析平台(Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform,TCMSP)筛选出黄连-葛根(C...     

基于网络药理学的人参、黄连“药对”治疗2型糖尿病作用机制研究

目的筛选人参、黄连药对主要活性成分,预测其活性成分的作用靶点,建立药物—活性成分—作用靶点网络,探讨人参、黄连药对治疗2型糖尿病(diabetes mellitus type 2,T2DM)的作用机制。方法使用TCMID、TCMSP平台筛选人参、黄连药对化学成分,并应用STITCH及DrugBank数据库检索活性成分靶点。应用TTD、DrugBank、GAD和DisGeNET数据库,筛选T2DM相关靶点。采用Cytoscape软件构建药对活性成分—作用靶点网络,通过David数据库对靶点进行生物学功能及通路富集分析。结果筛选得到人参、黄连药对潜在活性成分46个,人参相关靶点144个,黄连相关靶点246个,收集到350个T2DM相关靶点。相匹配后,得到42个人参、黄连药对治疗T2DM潜在靶点,其中,槲皮素(quercetin)、黄连素(berberine)、山奈酚(kaempferol)、花生四烯酸(arachidonate acid)、阿魏酸(ferulic acid)、豆甾醇(Stigmasterol)等6个成分能与3个及以上的关键靶点基因相连,可能是人参、黄连中治疗2型糖尿病的重要成分。结论人参、黄连药对靶点和药物代谢、胰岛素抵抗、炎症反应相关,并且参与了AMPK信号通路、NF-κB信号通路、TNF信号通路以及胰高血糖素信号通路,这些生物过程和信号通路可能是人参、黄连药对治疗T2DM的潜在机制。     

基于“玄府-络脉”新视角阐析糖尿病认知功能障碍

糖尿病认知功能障碍属于“消渴呆病”范畴,其病机本虚标实,以脏腑亏虚为本,痰瘀糖毒阻络为标。玄府、络脉是人体普遍存在的一种微观结构,具有维系周身气血津液运行的功能,玄府闭塞、络脉阻滞是多种疾病发生的病理基础。基于“玄府-络脉”的新视角,分析其与糖尿病认知功能障碍发病的关联性。玄府闭塞,脑络不通,神机失用是糖尿病认知功能障碍的病机,治宜以通为用,临证组方借虫类风药开玄通络,共增药效,为糖尿病认知功能障碍的临床治疗提供思路。     

丹参治疗微循环障碍作用机制的“成分-靶点-通路”多层次互作网络模型研究

目的基于网络药理学分析丹参治疗微循环障碍的分子生物学机制。方法借助TCMSP、PubChem Search、Genecards数据库和Swiss target prediction在线工具得到丹参的活性成分治疗微循环障碍的作用靶标,利用Cytoscape 3.3.0软件构建丹参活性成分-微循环障碍作用靶标网络,通过STRING数据库构建靶蛋白相互作用(PPI)网络,通过生物学信息注释数据库(DAVID)进行基因本体(GO)生物学过程和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。结果从丹参中共筛选出治疗微循环障碍的65个相关活性成分,并发现微循环障碍相关的9个关键靶点。GO和KEGG通路富集分析发现,丹参治疗微循环障碍可能与氧化还原、钙离子稳态等生物过程有关,能够调节血管内皮生长因子信号通路、神经突触信号传导、催产素信号通路、醛固酮-调节钠重吸收等信号通路。结论丹参治疗微循环障碍体现了多成分、多靶点、多途径的作用特点,为进一步开展丹参治疗微循环障碍作用机制研究提供了新的思路和方法。     

基于网络药理学的“槟榔-草果-厚朴”配伍治疗糖尿病肾病作用机制探讨

目的:通过网络药理学的方法分析南征教授运用达原饮中"槟榔-草果-厚朴"三味药物治疗糖尿病肾病的主要成分、作用靶点及相关机制。方法:收集槟榔、草果、厚朴三味药的药物成分,并进行成分相关靶点检索;收集本病相关靶点;取药物和疾病的交集靶点进行蛋白质-蛋白质相互作用分析;对"药物-疾病-靶点"的生物过程和通路进行富集分析,并进行可视化。结果:槟榔-草果-厚朴的核心成分为槲皮素(quercetin)、和厚朴酚(honokiol)、厚朴酚(Magnolol)、(+)-表儿茶素(ent-Epicatechin)、原花青素B1(Procyanidin B1)等。槟榔-草果-厚朴治疗本病的关键靶点为AKT1(丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶)、MAPK1(丝裂原活化蛋白激酶1)、TP53(细胞肿瘤抗原p53)、IL6(白介素6)、VEGFA(血管内皮生长因子A)等。其发挥作用的生物学通路主要是PI3K-Akt、HIF-1、MAPK、FoxO等信号通路。结论:本研究初步分析了槟榔、草果、厚朴三药治疗糖尿病肾病的相关作用机制,为导师南征教授"调散膏、达膜原"之法治疗本病提供相关药理佐证。     

金线莲干预2型糖尿病的“关键成分-潜在靶标-核心通路”网络挖掘及实验验证

目的 运用网络药理学和动物实验相结合的方法,多维度挖掘金线莲Anoectochilus roxburghii治疗2型糖尿病的作用机制,为金线莲的开发利用提供依据。方法 通过文献检索建立金线莲化合物数据库,检索Swiss Target Prediction数据库和Similarity ensemble approach数据库获取金线莲化合物的作用靶标,检索Disgenet和GeneCards数据库获得2型糖尿病的相关靶标。利用软件Venny 2.1筛选出金线莲与2型糖尿病的共有靶标。运用String数据库构建共有靶标的蛋白相互作用（protein-protein interaction,PPI）网络,通过NetworkAnalyzer工具和MCODE插件进行拓扑分析、基因簇分析及核心靶标的筛选。通过基因注释工具DAVID对核心靶标进行基因本体（gene ontology,GO）和京都基因与基因组百科全书（Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG）富集分析。采用高糖、高脂饲料诱导结合小剂量链脲佐菌素（40 mg/kg）一次性ip构建2型糖尿病...     

基于网络药理学的“人参-黄连-三七”药串治疗2型糖尿病胰岛素抵抗合并非酒精性脂肪肝的机制

目的:应用网络药理学的研究方法筛选“人参-黄连-三七”药串治疗2型糖尿病胰岛素抵抗合并非酒精性脂肪肝的作用靶点及相关信号通路,通过动物实验明确其疗效与作用机制。方法:通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)检索获取“人参-黄连-三七”的主要化学成分以及相关作用靶点;使用DisGeNET筛选胰岛素抵抗与非酒精性脂肪肝的相关靶标基因;通过韦恩软件筛选出药物与疾病的共同作用靶点;构建“疾病-靶点-成分-药物”网络、蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络;通过基因本体(GO)富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析对有效作用靶点进行分析;以db/db小鼠作为动物模型,检测小鼠血糖、胰岛素水平,并通过肝脏HE染色及免疫组织化学法进行进一步的实验验证。结果:通过筛选得到“人参-黄连-三七”药串有效成分39种,有效作用靶点125个,其中作用于胰岛素抵抗与非酒精性脂肪肝的相关靶点27个;分子功能共富集211个条目,生物过程共富集2317个条目,细胞组分共富集105个条目;KEGG通路富集共富集到119条信号通路,其中包括AGE-RAGE信号通路、HIF-1信号通路、PPAR信号通路、PI3K/AKT信号通路等。通过动物实验验证“人参-黄连-三七”药串水煎剂能够有效降低db/db小鼠血糖,改善胰岛素抵抗,减轻肝脏脂肪变性。与模型组比较,中药组小鼠血糖、胰岛素抵抗指数下降(P<0.05),肝脏NAS评分较模型组明显下降(P<0.05),免疫组织化学染色结果显示,中药组小鼠肝脏PI3K、p-AKT表达水平较模型组明显上升(P<0.05)。结论:“人参-黄连-三七”药串能够有效改善db/db小鼠胰岛素抵抗并减轻非酒精性脂肪肝病变,其作用机制可能与调控PI3K/AKT信号通路有关。     

基于网络药理学和分子对接技术探讨黄连-葛根药对“异病同治”糖尿病视网膜病变和糖尿病肾病作用机制

目的运用网络药理学方法探究黄连-葛根药对治疗糖尿病视网膜病变(DR)和DN的作用机制。方法应用TCMSP、UniProt数据库检索黄连-葛根活性成分及对应靶点, 应用GeneCards、OMIM数据库检索DR和DN靶点基因, 运用在线工具Venny获得交集靶点, 利用Cytoscape 3.8.2软件构建"成分-靶点"网络, 采用STRING数据库构建PPI网络, 并通过DAVID数据库进行GO功能及KEGG通路富集分析, 并进行分子对接验证。结果获得黄连-葛根药对活性成分18个, 疾病-药物交集靶点74个。GO功能富集分析发现, 交集靶点主要富集于炎症反应及凋亡等生物过程, 涉及到细胞外间隙、质膜、细胞质等细胞组分, 且与蛋白质结合、ATP结合、酶结合等分子功能有关。KEGG通路富集分析发现, 交集靶点可能与TNF信号通路、Toll样受体信号通路、PI3K-Akt信号通路等机制相关。分子对接结果显示, 核心成分与核心靶点具有较好的结合能。结论黄连-葛根可能通过TNF、IL6、TP53等靶点, 调控TNF信号通路、Toll样受体信号通路和PI3K/Akt信号通路, 发挥抑制细胞凋亡、氧...     

知母-黄柏药对有效部位群改善2型糖尿病大鼠认知功能障碍的药效及机制研究

目的研究知母-黄柏药对有效部位群通过磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(PKB/Akt)通路改善2型糖尿病模型大鼠认知功能障碍的药效及作用机制。方法 50只雄性SD大鼠随机分为5组,每组10只,分别为对照组、模型组、知母-黄柏药对有效部位群高剂量(ZBH,2.0 g/kg)和低剂量(ZBL,1.0 g/kg)组、盐酸美金刚(MHT,1.0 mg/kg)组;采用ip链脲佐菌素(STZ)联合喂食高脂饲料的方法制备2型糖尿病大鼠模型;造模成功后各组大鼠开始ig给药,连续给药20周,分别在给药8、16周时测定大鼠血浆中β淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)水平,并结合Barnes迷宫、Morris水迷宫法检测大鼠的认知能力;给药20周后,取大鼠胰腺、海马组织进行形态学观察;q RT-PCR检测PI3K、Akt、Bcl-2基因在大鼠脑组织中的表达。结果给药8、16周时,与对照组相比,模型组大鼠血浆中Aβ1-42蛋白水平显著升高(P0.05、0.01),与模型组相比,MHT、ZBH组Aβ1-42蛋白水平均降低(P0.05);行为学检测结果显示,与模型组相比,各给药组均能不同程度改善大鼠记忆能力(P0.05、0.01);给药20周,大鼠海马CA1区病理结果显示,对照组大鼠海马区神经元排列整齐、形态规则、着色均匀。模型组大鼠大量神经元细胞核深染、固缩,神经元细胞排列紊乱,部分细胞被小胶质细胞代替。与模型组相比,ZBH、ZBL可有效改善大鼠海马组织神经元形态及细胞排列形态,修复神经损伤;q RT-PCR结果显示,与对照组相比,模型组大鼠脑组织PI3K、Akt mRNA表达有一定程度的降低,抗凋亡基因Bcl-2 mRNA表达减弱(P0.05),MHT、ZBH均能不同程度上调PI3K、Akt、Bcl-2 mRNA的表达(P0.05、0.01)。结论知母-黄柏药对有效部位群能明显降低Aβ1-42蛋白水平,上调PI3K、Akt mRNA的水平,对海马神经元具有修复和保护作用,说明知母-黄柏药对有效部位群可能通过调节PI3K/Akt通路而实现对2型糖尿病大鼠认知功能障碍的改善。     

基于“活性成分-靶点-通路”网络药理学，探讨蒙药四味石榴散治疗高脂血症的作用机制＊

目的 利用网络药理学手段预测四味石榴散作用靶点，探索其治疗高脂血症的作用机制。方法 以口服生物利用度 > 30%及类药性 > 0.10为建立筛选标准，利用TCMSP数据库和化学专业数据库筛选出四味石榴散符合标准的主要活性成分；利用Swiss Target Prediction预测活性成分的潜在靶点，并于OMIM、DisGeNET、DiGSeE和GeneCard四个疾病靶点数据进行比对，获得四味石榴散治疗高血脂的潜在靶点；结合String分析靶点蛋白交互关系，采用Matascape平台对潜在靶点的GO注释和KEGG Pathway富集分析。利用Cytoscape软件构建四味石榴在降高血脂功效的“活性成分-作用靶点-通路”网络结构图。结果 从蒙药四味石榴散中共筛选出16个高活性化合物，预测分析到35个与降高血脂相关作用靶点，主要参与了脂质合成、转运、排泄及激素水平调节等多种降血脂的生物过程，富集到31条KEGG相关通路，涉及了脂质合成及代谢通路，Th17细胞分化等免疫通路，花生四烯酸代谢等炎症通路，体现其多成分-多靶点-多通路治疗高脂血症的作用机制。结论 蒙药四味石榴散可通过干预脂肪酸代谢，激素调节，免疫稳态等相关通路，起到祛巴达干赫依的作用来治疗高脂血症。     

基于“关键成分-效应靶点-核心通路”关联网络分析的三妙丸治疗类风湿性关节炎分子机制研究

目的：采用“关键成分-效应靶点-核心通路”关联网络分析方法探索三妙丸治疗类风湿性关节炎（RA）的潜在作用机制。方法：基于中药数据库分析方法,以口服生物利用度（OB）≥30%、类药性（DL）≥0.18作为筛选条件,寻找三妙丸主要活性成分和相关作用靶点。用CTD网络分析平台及人类基因和基因表型综合数据库获得RA作用靶点,利用Cytoscape 3.7.1软件中的Merge功能筛选交集共有靶点。将共有靶点输入STRING系统构建靶点蛋白相互作用（PPI）网络,通过聚类分析筛选效应靶点,采用WebGestalt富集分析靶点功能及信号通路,并构建“关键成分-效应靶点-核心通路”关联网络。结果：筛选得到三妙丸中60个化学成分,作用于RA的59个靶点,其中效应关键靶点共15个,包括前列腺素G/H合成酶2（PTGS2）、髓过氧化物酶（MPO）、肿瘤坏死因子（TNF）等,与炎症反应、防御反应及细胞因子调节等生物过程紧密相关,可通过调节细胞因子与受体的相互作用、白细胞介素-17（IL-17）信号通路、T细胞受体信号等通路发挥其治疗RA的作用。结论：三妙丸能通过多成分、多靶点、多通路起到治疗RA的作用,为三妙丸的有效性评价、效应机制研究提供参考。     

基于“味性化味-网络药理-分子对接”的藏药四味姜黄汤防治糖尿病肾病的作用机制预测

目的探究藏药四味姜黄汤防治糖尿病肾病的作用机制。方法基于藏药"味性化味"、网络靶点预测以及TCMSP、DAVID、String 11.0、Cytoscape 3.7.1等数据库和可视化方法分析藏药四味姜黄汤防治糖尿病肾病的药性和作用机制。结果根据320例临床医案信息,藏药四味姜黄汤主治疾病中,藏医"京尼萨库"病(糖尿病)的频次最高(84次)、其次为腰椎增生(29次)和藏医"查隆"症(24次)。方剂药性分析发现,四味姜黄汤的药性以甘和涩味为主,味以苦化味为主,效以凉、钝、重和润为主,主要针对"赤巴"的热、锐和"隆"的轻、硬、细等特性,主治藏医"赤巴"和"隆"病。网络靶点分析中共筛选得到22个活性分子,与糖尿病肾病匹配后得到68个共同靶点,富集到48个生物功能,注释通路共有45条,其中PI3K-Akt、MAPK、P53等为主要信号通路。分子对接结果显示活性成分谷甾醇、豆甾醇、余甘根苷A与VEGFA、CASP3核心蛋白之间以氢键和π-H共轭键等相连接。结论藏药四味姜黄汤通过苦和甘味以及苦化味特有的凉、钝、重、润等药效,以消除热症、调和"隆"因、调节微管和辅助肾功等方式作用于藏医"京尼萨库"病,从而起到治疗"赤巴型京尼萨库"病的目的,其机制可能与调控VEGFA、CASP3、HSP90AA1、ESR1等关键靶点,干预PI3K-Akt、MAPK、AGE-RAGE信号通路有关。味性化味-网络药理-分子对接结果相互吻合,即以清热消炎、改善循环和增强肾功能为治疗糖尿病肾病的主线。本研究为四味姜黄汤的临床用药和防治糖尿病肾病的作用机制研究提供了参考。