加速康复外科对腹腔镜胃癌根治术患者肿瘤细胞免疫、炎症因子及应激激素的影响

背景与目的 加速康复外科（ERAS）对外科手术患者的益处已被证实,但是,ERAS对胃癌根治术患者细胞免疫功能及应激反应在分子水平上的影响仍鲜见报道。本研究探讨ERAS理念和措施对腹腔镜胃癌根治术患者肿瘤细胞免疫、炎症因子及应激激素的影响。方法 纳入2018年1月—2020年12月行腹腔镜胃癌根治术胃癌患者90例,分为ERAS组（43例）和对照组（47例）。ERAS组患者接受ERAS理念行围手术期管理,对照组患者行传统围手术期管理。比较两组在一般资料（性别、年龄、BMI、ASA体格情况评估分级、TNM分期、肿瘤大小）,手术相关指标（手术方式、吻合方式、手术时间、术中出血量、淋巴结清扫数）及术后指标（术后下床活动时间、术后肛门首次排气时间、住院时间及术后并发症）的差异。比较两组患者术后1 d及术后7 d两组患者外周血中肿瘤正向免疫调控细胞（CD3⁺CD4⁺T细胞、CD3⁺CD8⁺T细胞、CD16⁺CD56⁺NK细胞）;负向免疫调控细胞［中性粒细胞型骨髓源性抑制细胞（G-MDSC）、单核细胞型骨髓源性抑制细胞（M-MDSC）、T-调节细胞（Treg）］及调节性B细胞（Breg）细胞数量百分比,以及两组患者术前及术后24 h应激指标皮质醇（COR）、促肾上腺皮质激素（ACTH）、肾上腺素（EPI）及炎症因子C反应蛋白（CRP）、白细胞介素6（IL-6）水平的差异。结果 ERAS组与对照组在性别、年龄、BMI、ASA分级、TNM分期、肿瘤大小、手术方式、吻合方式、手术时间、术中出血量及淋巴结清扫数方面差异均无统计学意义（均P>0.05）。ERAS组术后下床活动时间和术后肛门首次排气时间均早于对照组（25.01 h vs. 37.01 h,P=0.000;74.51 h vs. 135.31 h,P=0.000）,ERAS组住院时间短于对照组（7.01 d vs. 9.81 d,P=0.000）。ERAS组总术后并发症率小于对照组（9.3% vs. 19.1%,P=0.027）。在术后1 d及7 d,ERAS组CD3⁺CD4⁺T细胞、CD3⁺CD8⁺T细胞、CD16⁺CD56⁺NK细胞所占百分比高于对照组,而G-MDSC、M-MDSC和Treg细胞及Breg细胞所占百分比均低于对照组（均P<0.05）。两组术前COR、ACTH、EPI以及CRP、IL-6水平差异均无统计学意义（均P>0.05）,术后24 h,ERAS组以上指标的水平均低于对照组（均P<0.05）。结论 围手术期采用ERAS理念行腹腔镜下胃癌根治术可降低手术创伤对机体细胞免疫的干扰,促进肿瘤正向免疫调节同时抑制负向免疫调控,减轻炎症和应激反应。     

氩氦刀冷冻消融与微波消融治疗原发性肝细胞癌近期疗效及对免疫功能的影响

目的 对比CT引导下氩氦刀冷冻消融与微波消融治疗原发性肝细胞癌（pHCC）近期疗效及对患者免疫功能的影响。方法 回顾性分析52例原发性pHCC患者,其中24例接受CT引导下氩氦刀冷冻消融（冷冻组）、28例接受CT引导下微波消融（微波组）,比较2组消融后1个月疗效,分析组间及组内消融前1日与消融后4周外周血CD4⁺、CD8⁺ T淋巴细胞占比及CD4⁺/CD8⁺的差异。结果 消融后1个月,冷冻组客观缓解率（87.50%）与微波组（85.71%）差异无统计学意义（P=0.833）。消融前1日,组间外周血CD4⁺、CD8⁺ T淋巴细胞占比及CD4⁺/CD8⁺差异均无统计学意义（P均>0.05）;消融后4周,组间外周血CD4⁺、CD8⁺ T淋巴细胞占比及CD4⁺/CD8⁺差异均有统计学意义（P均<0.05）,外周血CD4⁺ T淋巴细胞占比及CD4⁺/CD8⁺均较消融前1日升高（P均<0.001）、CD8⁺ T淋巴细胞占比较消融前1日降低（P均<0.001）。结论 氩氦刀冷冻消融与微波消融治疗pHCC近期疗效确切且相当,前者增强免疫功能的效果更佳。     

胸腰筋膜平面阻滞对老年患者椎体后突成形术后镇痛及免疫功能的影响

目的 探讨超声引导下胸腰筋膜平面（TLIP）阻滞在老年患者椎体后突成形术后镇痛中的作用及对免疫功能的影响。
方法 择期行经皮后入路脊柱后突成形术老年患者100例,男41例,女59例,年龄70～90岁,ASA Ⅱ或Ⅲ级,采用随机数字表法分为两组：TLIP阻滞组（P组）和对照组（L组）,每组50例。P组在超声引导下进行双侧TLIP阻滞,分别在两侧最长肌和髂肋肌之间注射0.375%罗哌卡因15 ml;L组不进行神经阻滞操作。记录麻醉诱导前、术后4、24、48 h T淋巴细胞亚群（CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺）含量,计算CD4⁺/CD8⁺比值;记录术后4、12、24、48 h静息和运动时VAS疼痛评分。记录术中及术毕麻醉穿刺相关不良反应,如穿刺部位感染、血肿,局麻药中毒、神经损伤等。
结果 与麻醉前比较,术后4、24、48 h两组CD3⁺、CD4⁺含量和CD4⁺/CD8⁺比值明显升高（P<0.05）。与L组比较,术后4、24、48 h P组CD3⁺、CD4⁺含量明显升高,术后24、48 h P组CD4⁺/CD8⁺比值明显升高,术后4、12、24、48 h P组静息和运动时VAS疼痛评分明显降低（P<0.05）。两组均未见相关不良反应。
结论 在老年患者经皮后入路椎体后突成形术中,超声引导下胸腰筋膜平面阻滞可减轻术后疼痛并改善细胞免疫功能。     

Bcl-2转录抑制因子1在胃癌中的表达及其生物学功能

背景与目的 失巢凋亡效应分子Bcl-2转录抑制因子1（Bit1）在胃癌组织中存在异常表达,Bit1在胃癌中功能及作用机制如何值得研究。本研究旨在进一步观察Bit1在胃癌组织中的表达,并初步分析其对胃癌细胞生物学行为的影响。方法 用Western blot检测20例原发性胃癌患者癌组织及癌旁组织手术标本中Bit1蛋白的表达;将胃癌BGC-803细胞分别转染Bit1 shRNA慢病毒载体或空病毒载体后,以无处理的野生型BGC-803细胞为空白对照,用细胞免疫荧光实验验证转染效率与Bit1沉默效果,并分别用细胞划痕实验、Transwell侵袭实验、细胞增殖实验及TUNEL实验检测细胞侵袭、迁移、增殖及凋亡情况。结果 Western blot结果显示,与对应癌旁组织比较,Bit1在胃癌组织中蛋白表达水平明显上调（P<0.01）。免疫荧光结果显示,转染成功且Bit1被有效沉默。细胞行为学实验显示,与空白对照细胞比较,转染Bit1 shRNA后的BGC-803细胞的划痕愈合率明显降低、侵袭细胞数量明显减少、细胞增殖活性明显减弱、晚期凋亡细胞数明显增加（均P<0.05）;转染空载体的BGC-803细胞以上细胞行为学指标与空白对照细胞间的差异均无统计学意义（均P>0.05）。结论 Bit1在胃癌中表达上调,并与胃癌细胞的恶性生物学行为密切相关,其有可能是与胃癌发生、发展、预后相关联的生物标志物及潜在治疗靶点。     

Ezrin/YAP信号轴促进胃癌细胞增殖的作用研究

背景与目的 笔者前期研究发现埃兹蛋白（Ezrin）与YAP蛋白在胃癌组织中表达升高，且与患者不良预后密切相关。因此，本研究在胃癌细胞中进一步分析两者的关系与作用。方法 将胃癌细胞分别用Ezrin特异性siRNA序列（si-Ezrin）转染、YAP激动剂（HY-101299B组）处理、si-Ezrin转染+HY-101299B处理，以转染无关siRNA序列的胃癌细胞为阴性对照。随后分别用CCK-8法及平板克隆实验检测细胞的增殖活力、Transwell实验检测细胞的侵袭能力，并用qPCR和Western blot检测各组细胞中YAP及其下游靶分子的mRNA及蛋白的表达。结果 与阴性对照组比较，转染si-Ezrin的胃癌细胞的增殖能力明显减弱，细胞中YAP及其下游分子（Mst、WW45、Lats1、Lats2、TEAD）的mRNA与蛋白水平表达明显下调，而HY-101299B处理的胃癌细胞上述指标均呈反向变化（均P<0.05）；转染si-Ezrin同时加HY-101299B处理，两者的上述作用部分相互抵消。转染si-Ezrin与HY-101299B对胃癌的侵袭能力均无明显影响（均P>0.05）。结论 Ezrin在胃癌中起了致癌因子的作用，机制可能与其激活YAP通路促进胃癌细胞的增殖有关。     

LBH与肝纤维化进展及肝内免疫细胞分布的关联研究

背景与目的 研究发现,肝内免疫调节与肝纤维化发生发展密切相关。然而,在肝纤维化中与免疫细胞相关联的关键基因目前仍不清楚。因此,本研究探讨肝纤维化中的关键基因与疾病进展以及肝内免疫细胞分布的关联。方法 基于公共数据库中的不同肝纤维化程度的肝组织（GSE162694和GSE49541）,对转录组测序RNA-seq测序数据进行差异表达比较,以正常肝样本作为对照;通过相对表达丰度排秩（REO）算法结果获得相关逆转稳定基因对;分析与肝纤维化相关的关键基因。构建CCl₄诱导的肝纤维化小鼠模型,Masson染色鉴定病理组织学改变,qRT-PCR和Western blot方法检测关键基因的mRNA与蛋白表达;xCell工具分析关键基因与免疫细胞、肝纤维化进展的关系。结果 分析测序数据获得两个肝纤维化相关的交叠的逆转基因对（THBS2>RHDE及LBH>LRRC19）;其中THBS2、LBH均在肝纤维化组织中差异上调,并且LBH表达与肝纤维化分级、组织学评分和炎症评分明显相关（均P<0.05）。与对照组比较,模型组小鼠肝脏中LBH mRNA及蛋白水平均明显上调（均P<0.05）。基于LBH表达中位值,将肝纤维化芯片GSE162694、GSE49541中的样本分为LBH高表达组与LBH低表达组,xCell分析显示,CD4⁺记忆T细胞、中央记忆CD8⁺T细胞、树突状细胞、aDC、cDC等免疫细胞富集水平及免疫细胞评分在LBH高表达组中均明显上调（均P<0.05）。结论 转录辅助因子LBH可能参与调节肝内免疫细胞分布并促进肝纤维化的进展。     

ATP结合盒转运蛋白A5在胰腺癌中的预后意义的生物信息学分析与验证

背景与目的 ATP结合盒（ABC）转运蛋白家族的成员ABCA5在多种肿瘤中发挥着重要的作用。然而，ABCA5在胰腺癌中的研究尚不清楚。因此，本研究通过生物信息学分析及临床样本验证，探讨ABCA5在胰腺癌中的表达及与患者预后的关系，同时对ABCA5在胰腺癌中的可能作用机制进行分析。方法 使用TCGA和GEO数据库，分析ABCA5在胰腺癌组织及正常组织中的表达情况，并用Kaplan-Meier方法绘制生存曲线，Cox比例风险模型进行单因素与多因素分析。采用免疫组织化学法检测65例胰腺癌组织和癌旁组织中ABCA5的表达，并分析其与预后及胰腺癌临床病理特征的关系。使用TIMER、STRING和Gene MANIA数据库对ABCA5与免疫细胞浸润、蛋白互相作用网络（PPI）和基因-基因互作网络进行分析。利用基因富集分析（GSEA）和相关性分析对ABCA5在胰腺癌中可能参与的信号通路及其可能的作用机制进行探索。通过癌症药物敏感性基因组学（GDSC）分析ABCA5与治疗药物敏感性的关系。结果 在TCGA和GEO数据集中，ABCA5在胰腺癌组织中的表达明显低于正常组织（均P<0.05）。在TCGA和GSE62452数据集中，ABCA5低表达的患者生存时间明显缩短（均P<0.05）；ABCA5的表达是胰腺癌患者预后的独立影响因素（HR=0.458，P=0.001；HR=0.439，P=0.017）。65例临床病例分析显示，ABCA5在癌组织与癌旁组织相比处于低表达水平，且ABCA5低表达患者的预后更差（均P<0.05），单因素与多因素Cox回归分析表明ABCA5的表达是胰腺癌患者预后的独立影响因素（HR=0.327，P=0.032）。TIMER数据库结果显示，ABCA5表达与免疫浸润密切相关。PPI蛋白互作网络显示，有14个与ABCA5相关的互作蛋白；基因-基因互作关系网络图得到20个与ABCA5相关的互作基因。基因富集分析与相关性分析结果显示，ABCA5在胰腺癌中可能与细胞周期和铁死亡有关。ABCA5高表达患者对5种治疗药物的IC₅₀明显低于ABCA5低表达患者（均P<0.05）。结论 ABCA5在胰腺癌组织中低表达并与患者不良预后相关，其表达水平是胰腺癌患者预后的独立影响因素，ABCA5在胰腺癌中的作用机制可能与细胞周期、免疫调节和铁死亡有关。     

125I粒子抑制裸鼠T24移形细胞癌效果

目的 观察不同活度¹²⁵I粒子抑制裸鼠T24移形细胞癌的效果。方法 将40只接种T24人移形细胞癌株荷瘤裸鼠均分为高、中、低活度组和对照组,每组10只,分别于肿瘤中心植入1枚活度0.9 mCi（33.3 MBq）、0.6 mCi（22.2 MBq）、0.3 mCi（11.1 MBq）和0 mCi（粒子不含核素）的¹²⁵I粒子。检测并对比各组植入10、20天后90%肿瘤组织吸收剂量（D₉₀）、抑瘤率（IR）、HE染色放射治疗反应分级（RRG）、凋亡指数及B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）蛋白表达。结果 ¹²⁵I粒子植入后10、20天,各组D₉₀及IR均逐渐降低（P均<0.05）,¹²⁵I粒子周围5 mm以内肿瘤组织均见明显坏死,粒子活度越高、时间越长,坏死范围越大;同期各组凋亡指数均逐渐降低,Bcl-2蛋白表达逐渐增加（P均<0.05）。结论 ¹²⁵I粒子能明显抑制裸鼠T24移形细胞癌生长,促进肿瘤细胞凋亡是其作用机制之一。     

基于机器学习的结直肠癌微卫星不稳定基因挖掘及其应用价值分析

背景与目的 结直肠癌（CRC）是全球第三大最常诊断的恶性肿瘤和第二大癌症死亡原因。最新指南推荐所有的CRC患者需要进行微卫星不稳定（MSI）的检测。MSI患者往往具有错配修复蛋白缺失（dMMR）。MSI/dMMR状态已被用作生物标志物预测对免疫治疗的有利反应和预后。然而MSI特征基因及其与肿瘤浸润的免疫细胞的关系未进行阐述。因此本研究通过使用机器学习的方式发掘CRC中新型的MSI特征基因,并且验证其的诊断价值及其与免疫细胞浸润的关系。方法 按照纳入排除标准,将GEO数据库中GSE39582数据集作为训练集,将TCGA数据库中COAD数据集作为外部验证集。使用机器学习的方法（LASSO回归、SVM-RFE算法）,在GSE39582结直肠癌数据集中筛选MSI特征基因,并在TCGA结直肠癌数据中进行验证。采用受试者工作特征（ROC）曲线和曲线下面积（AUC）评价基因对MSI的诊断效能。CIBERSORT算法评估肿瘤样本浸润的免疫细胞成分,Spearman相关性分析验证MSI特征基因和免疫细胞的关系。结果 训练集共纳入536例CRC患者,其中高频MSI（MSI-H）77例（14.37%）。在验证集中,共计389例CRC患者,其中MSI-H 67例（17.22%）。基线资料分析显示,MSI-H/dMMR CRC的TNM分期存活率优于低频MSI（MSI-L）或微卫星稳定（MSS）/错配蛋白完整（pMMR）CRC（P<0.05）。在GSE39582数据集中,LASSO回归筛选MSI特征基因21个,SVM-RFE算法筛选基因6个,结合两种算法确定MSI特征基因为EIF5A、CXCL13、HNRNPL、HOXC6、RPL22L1、Y16709。在TCGA数据库中进一步验证MSI特征基因的诊断效能,研究发现EIF5A的诊断效能最高。在训练集和验证集中,EIF5A的AUC值分别为0.922和0.805。同时,Spearman相关性分析发现,EIF5A主要与CD8⁺T细胞,活化的树突状细胞,辅助性T细胞,M1型巨噬细胞,γδT细胞,中性粒细胞成正相关;与CD4⁺记忆性T细胞,M2型巨噬细胞,静止树突状细胞,嗜酸性粒细胞,调节性T细胞呈负相关。结论 CRC的新型MSI特征基因分析结果表明,EIF5A对CRC MSI的诊断具有较好的诊断作用和临床价值,同时提示EIF5A与免疫细胞及免疫微环境相关。因此,EIF5A可能成为免疫检查点治疗的新型标志物。     

杜仲多糖通过抑制NF-κB通路减轻IL-1β诱导的软骨细胞损伤

目的:探讨杜仲多糖对白细胞介素1β（interleukin-1β，IL-1β）诱导的软骨细胞损伤的影响及可能机制。方法：体外培养小鼠软骨细胞ATDC5，用含10μg/ml IL-1β处理ATDC5制作骨关节炎软骨细胞炎症模型，随机分为空白组、模型组、模型+杜仲多糖低浓度组、模型+杜仲多糖中浓度组和模型+杜仲多糖高浓度组。其中空白组细胞用常规培养基培养，模型组细胞用含10μg/ml IL-1β的培养基培养，模型+杜仲多糖低浓度组、模型+杜仲多糖中浓度组和模型+杜仲多糖高浓度组细胞分别用含100、200、400 μg/ml杜仲多糖与10μg/ml IL-1β的培养基共同培养。分别培养24、48、72 h后，CCK-8法检测细胞活力。培养48 h后，流式细胞术和DAPI染色检测细胞凋亡，ELISA法检测细胞培养上清液中肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-α，TNF-α），一氧化氮（netric oxide，NO），γ干扰素（interfero-γ，IFN-γ）和白细胞介素6（interleukin-6，IL-6）的表达，DCFH-DA法检测细胞中活性氧含量，Western-blot法检测金属蛋白酶组织抑制因子1（tissue inhibrtor of metalloproteinase，TIMP-1），基质金属蛋白酶13（mitochondrial membrane protential，MMP-13）及NF-κB信号通路相关P65，磷酸化P65（p-P65）的蛋白表达，免疫荧光染色观察NF-κB P65细胞定位。结果：与空白组比较，模型组ATDC5细胞活力及TIMP-1蛋白表达降低（P<0.05），细胞凋亡率，TNF-α、NO、IFN-γ和IL-6水平，活性氧（reactive oxygen species，ROS）含量，MMP-13和p-P65的蛋白表达及细胞核内P65⁺数量均升高（P<0.05）。与模型组比较，模型+杜仲多糖低浓度组、模型+杜仲多糖中浓度组和模型+杜仲多糖高浓度组ATDC5细胞活力及TIMP-1蛋白表达升高（P<0.05），而细胞凋亡率、TNF-α、NO、IFN-γ和IL-6水平、ROS含量、MMP-13和p-P65的蛋白表达及细胞核内P65⁺数量均降低（P<0.05）。结论：杜仲多糖可促进白细胞介素1β诱导的软骨细胞ATDC5增殖，并抑制其凋亡、炎症反应和基质降解，其作用机制可能与抑制NF-κB通路的激活有关。     

YTH基因家族在肝癌中的表达和预后价值

背景与目的:YTH基因家族的所有成员都属于m6A阅读蛋白,负责参与肿瘤发生发展过程中的甲基化调控.然而,YTH基因家族在肝癌中的表达情况和具体作用仍有待进一步阐明.本文旨在通过生物信息学方法探究YTH家族成员在肝癌中的表达与预后价值,及其与免疫浸润及相关功能的关系.方法:用UALCAN数据库分析YTH基因家族在肝癌及其...     

Effect of myeloid ecotropic viral integration site (MEIS) family genes on tumor microenvironment remodeling and its potential therapeutic effect

BackgroundThe myeloid ecotropic viral integration site (MEIS) family of genes is related to the occurrence, development, and outcome of many cancers. However, its role in the immune and tumor microenvironment (TME) is unclear. This study explored the relationship between the expression of MEIS genes and patient survival, immune subtypes, TME, tumor stem cell correlation, and drug sensitivity in cancer.MethodsWe used The Cancer Genome Atlas pan-cancer data to analyze the expression of the MEIS family genes. Kaplan-Meier analysis and univariate Cox proportional hazard regression model were used to detect the relationship between gene expression and overall survival. Analysis of variance was used to explore the relationship between the MEIS family and the immune components in the tumor, and the ESTIMATE algorithm was used to calculate the proportion and level of tumor-infiltrating immune cells. Spearman and Pearson’s correlation tests were carried out to detect the relationship between MEIS and the characteristics of tumor stem cells and drug sensitivity.ResultsThe MEIS family of genes shows different expression profiles in different cancers, with substantial inter- and intra-cancer heterogeneity. Among them, MEIS3 was upregulated in most cancers, whereas MEIS2 was downregulated. The change in MEIS gene expression was usually related to overall survival, but whether a member of the MEIS family was a risk factor or a protective factor was cancer-dependent. Immune component analysis suggested that the role of MEIS genes in promoting or inhibiting cancer may be related to different degrees of immune silencing. Further, there were varying degrees of correlation between MEIS gene expression and cancer cell stemness characteristics. It was also found that MEIS genes, especially MEIS1 and MEIS2, may be related to chemotherapy resistance.ConclusionsWe explored the expression, prognostic relationship, molecular characteristics, and effects on immunity and TME of the MEIS gene family in cancer. Our results suggest that MEIS members should be studied as independent entities in different types of cancer. The MEIS gene family may be a potential target for cancer therapy, but further experiments are needed to confirm this.     

MicroRNA-200a and -200b Mediated Hepatocellular Carcinoma Cell Migration Through the Epithelial to Mesenchymal Transition Markers

Background

MicroRNAs (miRNAs) play an essential role in mediating gene expression in both normal and malignant cells. However, little is known about specific miRNAs during the development of hepatocellular carcinoma (HCC) from well-differentiated to poorly differentiated cells.

Methods

We performed miRNA array analysis of three different HCC cell lines: HepG2, HepJ5, and skHep-1. The expression patterns of miR-200 family members were confirmed by real-time polymerase chain reaction (PCR). We overexpressed miR-200 family members by using a lentivirus system and selected for stably transduced cells using antibiotics. The migration ability of the cells was tested using the Transwell migration assay system.

Results

Our miRNA array and real-time PCR results indicated a decrease in the expression of miR-200 family members in poorly differentiated skHep-1 cells compared with well-differentiated HepG2 cells. We overexpressed miR-200a and miR-200b in both HepJ5 and skHep-1 cells and found that the overexpression of the miR-200 family members did not influence proliferation, although migration was decreased in these cells. We found that overexpression of miR-200 family members led to an upregulation of E-cadherin expression in both HepJ5 and skHep-1 cells. Furthermore, we silenced E-cadherin expression by shRNA in miR200a-HepJ5 cells and found that the migratory ability of these cells was enhanced upon the decrease in E-cadherin expression.

Conclusions

Members of the miR-200 family (miR-200a and miR-200b) play important roles in HCC migration by regulating E-cadherin expression.

     

FBXO43在胃癌中的表达及其生物学功能与作用机制

背景与目的：F-BOX蛋白（FBP）家族成员F-box only protein 43 (FBXO43）在肝癌和结直肠癌等消化系统肿瘤中高表达,促进肿瘤恶性进展,且研究显示,FBXO43促进p53降解,发挥促瘤功能。为此本研究进一步探讨FBXO43在胃癌中的表达及其在胃癌恶性进展中的功能与相关机制。方法：基于TCGA、GTEx和Kaplan-Meier Plotter等在线数据库,分析FBXO43在胃癌组织中的表达及其与胃癌患者预后的相关性。用Western blot和qPCR检测FBXO43在胃癌细胞与正常胃黏膜上皮细胞中的表达水平;用免疫组化检测在胃癌组织与癌旁组织中FBXO43的蛋白水平。利用脂质体转染特异性靶向FBXO43和p53的小分子干扰RNA分子（siFBXO43和sip53）,分别或同时敲低HGC27和MGC803细胞中的FBXO43和p53的表达,利用CCK8、平板克隆形成、Transwell侵袭和迁移等实验,检测细胞生长、增殖、迁移和侵袭能力的影响;利用免疫共沉淀（Co-IP）检测FBXO43和p53的相互作用情况,以及敲低FBXO43后,p53的总泛素化水平。结果...     

Genomic and epigenetic profiles of gastric cancer: Potential diagnostic and therapeutic applications

Knowledge about the molecular profile of tumor tissues is crucial to effectively target cancer cells, because cancer is a genetic disease that involves multiple genetic and epigenetic alterations. Prominent aberrations include gene mutation, amplification, loss or deletion, as well as epigenetic alterations of the promoter DNA CpG islands. All of these aberrations can lead to dynamic changes in cancer cells, as demonstrated using resected tumor samples. There are two distinct pathological types of gastric cancer: the diffuse type and the intestinal type of gastric cancer. Diffuse type gastric cancer harbors aberrations in the FGFR2/ErbB3/PI3 kinase pathway, while intestinal type gastric cancer has an activated ErbB2 oncogenic pathway. On the other hand, the prometastatic oncogene PRL-3 is commonly activated in both types of advanced gastric cancer, and might represent a relevant therapeutic target for gastric cancer with lymph node metastasis or peritoneal dissemination. Numerous tumor suppressor genes can inhibit such oncogenic pathways, and DNA methylation in CpG islands of gene promoters is frequently found to suppress the expression of such genes in gastric cancer. Helicobacter pylori infection in normal gastric mucosa may cause p53 mutations through activation of activation-induced cytidine deaminase (AID) and/or promoter DNA methylation of E-cadherin, an initiator of gastric cancer, and such abnormalities are found even in the precancerous stage of gastric carcinogenesis. In addition, it has been demonstrated that there are highly relevant methylation genes involved in cancer (HRMGs) that exhibit very frequent cancer-specific methylation in gastric cancer. Such genes are potential targets for cancer treatment, and might also serve as biomarkers of gastric cancer for either the diagnosis or for determining the prognosis or the response to treatment.     

Family history as a marker of risk for colorectal cancer: Austrian experience

p ≤ 0.0001), particularly in the case of a young index patient ( p ≤ 0.011) or if two or more family members were affected ( p ≤ 0.001). In addition, the risk for gastric cancer in relatives was increased almost fourfold ( p ≤ 0.0001). We have confirmed for Austria that a positive family history of colorectal cancer is a strong risk factor, and that this risk is comparable to that in other Western countries. We have shown that relatives are also at increased risk for gastric cancer.     

NNK Enhances Cell Migration through α7-nicotinic Acetylcholine Receptor Accompanied by Increased of Fibronectin Expression in Gastric Cancer

Background

In this study, we intended to dissect the mechanism of 4-(Methylnitrosamino)-1-(3-pyridyl)-1-butanone (NNK)-enhanced migration of gastric cancer. Smoking has been defined as a risk factor for gastric cancer. Tobacco-specific carcinogen, NNK, was reported to enhance cancer progression in gastric cancer. Currently, metastasis is the major issue for clinical cancer therapy, but the influence of NNK on the migration of gastric cancer remains to be determined.

Methods

The expression of nicotinic receptor in gastric cancer cells was identified by real-time polymerase chain reaction and Western blotting. The influence of NNK on migration of gastric cancer cells was evaluated by the transwell migration assay system. Receptor-mediated migration was studied by both inhibitor and small interfering RNA.

Results

Alpha7 nicotinic acetylcholine receptor, alpha7-nicotinic acetylcholine receptor (nAChR), was identified higher than alpha9-nAChR in gastric cancer cell lines, AGS cells. NNK enhanced significantly gastric cancer cell migration in transwell assay. We used inhibitor and siRNA to demonstrate that alpha7-nAChR mediated NNK-enhanced gastric cancer cell migration and upregulation of fibronectin were involved in NNK-enhanced migration of gastric cancer cells. Finally, we found that silenced fibronectin expression level inhibited the migratory ability in AGS cells.

Conclusions

NNK enhanced gastric cancer metastasis through alpha7-nAChR and fibronectin—one of the hallmarks of epithelial mesenchymal transition.