胃癌组织中hTERT mRNA表达的定量研究

目的 测定人端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA在胃癌组织中的表达水平并探讨其临床生物学意义.方法 应用实时荧光定量RT-PCR分析了96例手术切除的新鲜胃癌组织、癌旁正常胃黏膜组织及50例胃溃疡组织中hTERT mRNA的表达水平.结果 胃癌组织hTERT mRNA表达水平(17.38±1.28)copies/ml显著高于癌旁正常胃黏膜组织(0.24±0.10)copies/ml,(P<0.001)和良性胃溃疡组(1.04±0.28)copies/ml,(P<0.001).多变量分析表明,hTERT mRNA表达水平分别与患者性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤生长方式、肿瘤分化程度、淋巴管侵犯及静脉侵犯均无显著性差异(P>0.05),而分别与浸润深度、淋巴结转移、远处转移、pTNM分期及CEA有显著性差异(P<0.05).结论 hTERT高水平表达常意味着胃癌恶性程度较高且病期较晚,测定胃癌组织中hTERT的水平对判断胃癌浸润、转移及病期进展情况有一定诊断价值.     

食管癌中环氧化酶-2和人端粒酶逆转录酶mRNA的表达

目的 研究环氧化酶-2(COX-2)和人端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA在食管癌组织中的表达及意义.方法 采用RT-PCR检测46例食管癌组织及其对应的癌旁食管组织(距离肿瘤至少5 cm)和65例正常食管黏膜组织中COX-2和hTERT mRNA的表达.结果 COX-2和hTERT mRNA在食管癌组织和癌旁组织中表达的阳性率明显高于正常食管黏膜组织(P<0.05),而在食管癌组织中表达的阳性率与癌旁组织差异无统计学意义(P>0.05);COX-2和hTERT mRNA在食管癌组织中的表达与患者年龄、分化程度、浸润程度、淋巴转移和临床分期无关(P>0.05),而两者表达具有关联性(P=0.015).结论 COX-2和hTERT mRNA在食管癌组织中的表达可能均是早期事件,联合检测这两个基因可能对食管癌的早期诊断及相关治疗具有重要的意义.     

hTERT mRNA在食管癌组织中的表达及意义

目的 研究凋亡调控基因hTERT mRNA在食管癌癌组织中的表达及意义.方法 采用RT-PCR检测52例食管癌组织、30例癌旁食管组织（距离肿瘤至少5 cm）和7例非食管癌黏膜组织中hTERT mRNA的表达情况.结果 hTERT mRNA在食管癌组织和癌旁食管组织中表达的阳性率明显高于非食管癌组织（P＜0.05）,食管癌组织中的表达阳性率与癌旁食管组织的表达阳性率差异无统计学意义（P＞0.05）;hTERT mRNA在食管癌组织中的表达与患者年龄、病理类型、分化程度、浸润程度、淋巴转移和临床分期无相关性（P＞0.05）.结论 hTERT mRNA在食管癌组织中的表达可能是早期事件,检测hTERT mRNA的表达可能对食管癌的早期诊断及治疗具有指导意义.     

端粒酶hTERT mRNA在乳腺癌中的表达及与c-myc相关性分析

目的 探讨人乳腺癌中原癌基因c-myc与hTERT mRNA表达的关系.方法 收集癌旁正常乳腺组织、导管原位癌、浸润性导管癌各12、18和25例,用原位杂交法检测hTERT mRNA表达,并用免疫组织化学法检测乳腺导管癌c-myc表达.结果 ①hTERT mRNA在癌旁正常乳腺组织中未见表达,在导管原位癌、浸润癌中的阳性率分别为83.33%和88.00%,后两组hTERT mRNA表达明显高于正常组;②hTERT mRNA表达与浸润性导管癌肿块大小及淋巴结转移与否无相关性（P＞0.05）;③43例乳腺导管癌中hTERT mRNA与c-myc表达呈正相关（γ=0.388 4,P＜0.05）.结论 端粒酶hTERT的表达可能在乳腺导管癌的组织发生中起关键作用,c-myc的过度表达可能与乳腺导管癌hTERT基因转录激活有关.     

纺锤体检测点蛋白BUB1B在胃癌组织中的表达及意义

目的 检测胃癌组织中纺锤体检测点蛋白BUB1B的表达,探究BUB1B在胃癌发生中的重要意义.方法 采用荧光实时定量PCR检测30例胃癌组织及17例癌旁正常组织中BUB1B mRNA水平表达;免疫组织化学检测BUB1B在胃癌组织及癌旁组织中BUB1B蛋白的表达情况.结果 在mRNA水平,BUB1B在胃癌组织中的表达明显高于癌旁正常组织,近(8.875±1.08)倍;免疫组织化学结果显示,胃癌组织中BUB1B的表达明显高于癌旁正常组织.按照评分标准统计显示,癌旁组织BUB1B表达均值为(92.12±12.99),胃癌组织表达均值为(133.39±8.49),两者之间存在明显差异(P＜0.05).且BUB1B表达与TNM分期相关,但与淋巴结转移,年龄,肿瘤大小及有无家族史无明显相关.结论 BUB1B的过表达在胃癌发生发展中起重要作用,为探索肿瘤发生机制及寻找更为有效的治疗提供新的思路.     

基底细胞癌、鳞状细胞癌组织中PinX1、hTERT的表达及意义

目的 分析基底细胞癌、鳞状细胞癌组织中PinX1及hTERT的表达,探讨PinX1、hTERT在基底细胞癌、鳞状细胞癌发生、发展中的作用.方法 应用实时定量PCR检测13例基底细胞癌、22例鳞状细胞癌组织中PinX1、hTERT mRNA表达水平,应用免疫组化SP法检测PinX1蛋白和hTERT蛋白在30例基底细胞癌、46例鳞状细胞癌组织中的表达.结果 基底细胞癌、鳞状细胞癌组织中PinX1 mRNA表达水平均低于正常组,基底细胞癌、鳞状细胞癌组织中hTERT mRNA表达水平均明显高于正常组,PinX1蛋白在基底细胞癌、鳞状细胞癌组织中的阳性表达率明显低于正常组,hTERT蛋白在基底细胞癌、鳞状细胞癌组织中的阳性表达率明显高于正常组,差异均有统计学意义（P＜0.05）;基底细胞癌、鳞状细胞癌组织中PinX1蛋白和hTERT蛋白的阳性表达呈负相关（r=-0.460,P＜0.05）.结论 PinX1和hTERT参与了基底细胞癌、鳞状细胞癌的发生、发展,二者在基底细胞癌、鳞状细胞癌细胞凋亡方面可能存在拮抗作用.     

血清外泌体MT1-MMP mRNA在胃癌患者中的表达及其与预后的关系

探讨血清外泌体膜1型基质金属蛋白酶(MT1-MMP)mRNA在胃癌患者中的表达及其与预后的关系。方法 选取2016年3月—2018年7月我院行胃癌切除术的98例患者为研究对象。采用实时荧光定量PCR（RT-PCR）测定患者癌组织、癌旁正常组织中MT1-MMP mRNA表达量,分析患者临床病理参数与胃癌组织中MT1-MMP mRNA表达量的关系;对98例患者进行随访,统计术后3年内存活率,比较存活亚组(n=62)与死亡亚组(n=36)患者入组时的胃癌组织与癌旁组织中MT1-MMP mRNA表达水平,运用受试者工作曲线(ROC)分析MT1-MMP mRNA表达水平对术后3年内生存状态的预测效能。结果 98例患者胃癌组织中MT1-MMP mRNA表达水平(0.96±0.12)显著高于癌旁组织(0.80±0.09)(P＜0.05);患者胃癌组织中MT1-MMP mRNA表达量与淋巴结转移、浸润程度、TNM分期有关(P＜0.05),与性别、年龄、肿瘤位置、肿瘤直径大小及分化程度无关(P＞0.05);98例患者术后3年存活亚组入组时的胃癌组织及癌旁组织中MT1-MMP mRNA表达水平显著高于死亡亚组(P＜0.05);ROC曲线分析显示,胃癌组织、癌旁组织MT1-MMP mRNA表达水平对患者术后3年生存状态的预测效能有一定局限性(AUC=0.760、0.691),胃癌组织与癌旁组织联合检验的预测效能明显高于单一检测(AUC=0.813)。结论 胃癌组织中MT1-MMP mRNA表达与肿瘤的淋巴转移、TNM分期及浸润程度相关,可一定程度上指导预后     

死亡相关蛋白激酶基因在胃癌组织中的表达

目的:研究死亡相关蛋白激酶(DAPk)基因在原发性胃癌组织中的表达,探讨其在胃癌发生发展中可能的作用。方法:收集62例原发性胃癌及相对应的癌旁正常组织。应用RT-PCR检测DAPk mRNA表达,免疫组化方法检测DAPk蛋白表达。结果:RT-PCR方法显示DAPk mRNA表达水平在胃癌组织中明显低于癌旁正常组织(OD值为0.2863±0.2027比0.5736±0.1968,P<0.0001)。免疫组化分析显示,DAPk在所有癌旁正常组织中表达均为阳性,积分范围为2-12,平均8.61±2.89;而在胃癌组织中表达则明显减弱或缺失,积分范围为0-9,平均2.90±3.38。DAPk在癌旁正常组织中的表达水平显著高于胃癌组织(P<0.0001)。结论:在原发性胃癌组织中,DAPk mRNA和蛋白表达明显缺失或低下。     

HSP90α、HSP90β在人胃癌组织中的表达

目的 探讨HSP90α、HSP90β蛋白与mRNA在人胃癌组织中的表达及其与胃癌生物学行为的关系.方法 采用免疫组化SP法检测两者蛋白在胃癌组织及癌旁正常组织的表达.采用RT-PCR法检测两者的mRNA在胃癌组织及癌旁正常组织的表达.结果 HSP90α、HSP90β主要定位于细胞质,其阳性率分别为82.9％和80.0％ (P ＜0.01),与胃癌分化、浸润、分期、转移相关.HSP90α、HSP90β mRNA在胃癌中的表达明显高于癌旁正常组织(P＜0.01),并与胃癌的分化、分期、淋巴结的转移相关.结论 HSP90α、HSP90β蛋白在胃癌组织中的阳性表达以及其与胃癌生物学行为的关系提示HSP90α、HSP90β可能作为判断胃癌恶性程度的重要指标.HSP90α、HSP90β mRNA的高表达,且两者均与胃癌的发生、发展关系密切,可能与胃癌组织中的转录调控相关.     

胃癌组织Wnt10b的表达及意义

目的：检测胃癌及癌旁组织中 Wnt10b 的表达,探讨其与临床病理参数的关系。方法收集25例胃癌患者手术切除的癌组织及对应的癌旁组织,用实时荧光定量 PCR检测 Wnt10b mRNA的表达,Western-blot技术检测 Wnt10b蛋白的表达,分析 Wnt10b mRNA在胃癌组织中的表达与临床病理参数的关系。结果胃癌组织中 Wnt10b mRNA和蛋白表达水平明显高于癌旁组织（P〈0.001）,胃癌组织中 Wnt10b mRNA 表达阳性率与肿瘤远处转移相关（P〈0.05）,但与年龄、性别、肿瘤大小、TNM分期、分化程度和浸润深度无关。结论 Wnt10b在胃癌组织中呈活化状态,可能参与胃癌的发生发展。     

FAK和MMP-9蛋白在胃癌组织中的表达及相关性研究

目的 检测基质金属蛋白酶9(MMP-9)和黏着斑激酶(FAK)在胃癌中的表达,并探讨其相关性.方法 采用免疫组织化学方法,观察60例胃癌及肿瘤与正常组织交界处FAK和MMP-9的表达情况.结果 60例胃癌组织中FAK阳性及强阳性表达率为73.3%(44/60)、56.7%(34/60),MMP-9的阳性表达率为85%(51/60);60例相应交界组织中,FAK阳性及强阳性表达率为56.7%(34/60)、26.7%(16/60),MMP-9阳性表达率为56.7%(34/60).MMP-9和FAK阳性表达率和阳性强度均以胃癌中为高.在癌组织中,MMP-9和FAK在低分化组中的表达高于高、中分化组,在淋巴结转移组中较无淋巴转移组表达高,浸润程度越深表达越高.MMP-9阳性表达强度与FAK的阳性表达强度之间呈显著正相关(P＜0.05).结论 胃癌中FAK与MMP-9的表达密切相关,可作为胃癌生物学行为预测的辅助指标.     

胃癌中管家基因表达的恒定性研究

目的观察胃癌中管家基因的表达是否恒定。方法通过分析胃癌基因表达序列分析数据库(SAGE),观察胃癌中管家基因的表达是否恒定。同时运用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)分别测定胃癌组织、正常组织中管家基因GAPDH、β-actin mRNA的表达情况,并进行半定量灰度分析,对结果进行验证。结果通过分析胃癌SAGE数据库中管家基因的拷贝数,发现在不同病变组织以及病变组织与正常组织间多数管家基因的表达是不恒定的。GAPDH、β-ac-tin在胃癌中的表达发生明显改变,与正常组织比较,差别均有统计学意义(P<0.01)。结论胃癌中管家基因表达的不恒定性普遍存在。由于管家基因在胃癌中的表达不恒定,在运用RT-PCR技术对胃癌基因表达进行定量分析时,应选择适当的2种或2种以上的内参基因,以减少检测标本间的差异。     

Siva-1 在胃癌组织中的表达及其临床意义*

目的 探讨Siva-1在胃癌组织中的表达及其与细胞凋亡的关系。方法 选取2016年1月—2018年 12月广西壮族自治区人民医院经手术切除的胃癌组织及癌旁组织各54例。采用qRT-PCR和SP法检测Siva-1 mRNA及蛋白的表达水平，分析Siva-1在胃癌组织中的表达及与临床病理特征的关系。结果 胃癌组织中Siva-1 阳性表达率较低（P <0.05），Siva-1 mRNA相对表达量较低（P <0.05）。不同肿瘤直径、肿瘤分期患者Siva-1阳 性表达率比较，差异有统计学意义（P <0.05）。经Pearson相关性分析，Siva-1 mRNA表达量与肿瘤直径呈负相 关（r =-0.376，P <0.05）。结论 Siva-1在胃癌组织中低表达，且与肿瘤的发生、发展有关，可作为诊断胃癌的 潜在标志物。     

长链非编码RNA aHIF和ANRIL在胃癌中的表达

［摘要］目的: 探讨长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)中的反义缺氧诱导因子(antisense hypoxia inducible factor,aHIF)和位于细胞周期激酶抑制因子4(INK4)基因座中反义非编码RNA(antisense noncoding RNA in the INK4 locus,ANRIL)在胃癌组织与血浆中的表达。方法: 收集20例胃癌患者癌组织及对应的癌旁组织、33例胃癌患者和20例健康者血浆,采用实时荧光定量PCR测定胃癌组织和血浆中lncRNA aHIF和ANRIL的表达水平,分析lncRNA aHIF、ANRIL在血浆中的表达与胃癌组织表达的相关性。结果： 胃癌组织中lncRNA aHIF和ANRIL的表达水平均明显高于癌旁组织(t分别为-4.463,-4.886,P均<0.01);胃癌患者血浆中lncRNA aHIF和ANRIL的表达水平均明显高于健康者(t分别为-4.232,-4.450,P<0.01),且与胃癌组织中的表达水平呈正相关(r分别为0.536,0.524,P<0.05)。结论： lncRNA aHIF和ANRIL在胃癌组织和患者血浆中均高表达,且血浆与组织中的表达水平呈正相关。     

胃腺癌组织MTDH的表达与临床病理特征

目的 检测和分析异黏蛋白（metadherin,MTDH）在人胃腺癌组织和癌旁正常胃黏膜组织中蛋白和mRNA表达情况,探讨MTDH的表达与临床病理特征的关系.方法 选取169例胃腺癌组织（胃腺癌组）和110例癌旁正常组织（正常组）,采用免疫组化法检测两组MTDH蛋白表达,RT-PCR法检测MTDH mRNA相对表达量,并分析MTDH蛋白、mRNA表达与胃腺癌临床病理特征的相关性.结果 胃腺癌组及正常组MTDH蛋白表达阳性率及mRNA的相对表达量分别为85.2％、22.7％和0.86±0.05、0.30±0.04,两组MTDH蛋白和mRNA表达有显著差异（P＜O.05）.不同的病理分级分期的胃腺癌MTDH蛋白和mRNA表达有显著差异（P＜0.05）,而不同的性别、年龄的胃腺癌MTDH蛋白、mRNA表达无显著差异（P＞0.05）.Sperman等级相关分析法分析显示MTDH蛋白和mRNA表达呈正相关.结论 胃腺癌组织中MTDH较癌旁正常组织中高表达;分期越高分化程度越低及发生淋巴结转移的胃腺癌组织中MTDH的表达越高.提示MTDH和胃腺癌的恶性程度和转移密切相关.     

MACC1和CIP2A蛋白表达的相关性及其与胃癌预后的关系

目的  检测结肠癌转移相关基因1（MACC1）蛋白在胃癌病变组织及癌旁正常组织中的表达,以及与胃癌各临床病理特征的关系,进一步分析MACC1与蛋白磷酸酶2A的癌性抑制因子（CIP2A）蛋白表达是否具有相关性,评估胃癌预后,并为治疗提供思路。方法  应用逆转录聚合酶链反应检测胃癌组织和癌旁正常组织中MACC1蛋白的表达,分析其表达差异性。免疫组织化学法测定30例胃癌组织和癌旁正常组织中MACC1和CIP2A蛋白的表达,分析MACC1蛋白与胃癌临床不同病理特征的关系,同时分析MACC1和CIP2A蛋白的相关性。结果  MACC1蛋白在癌旁正常组织和胃癌组织中的阳性表达率分别为16.7%和76.7%,差异有统计学意义。CIP2A蛋白在癌旁正常组织和胃癌组织中的阳性表达率分别为23.3%和73.3%,差异有统计学意义。不同性别、年龄、组织类型的MACC1蛋白阳性表达率比较,差异无统计学意义;不同组织分化程度、肿瘤侵润程度、淋巴结转移程度、临床分期的的MACC1蛋白阳性表达率比较,差异有统计学意义;MACC1与CIP2A蛋白表达呈正相关。结论  MACC1与CIP2A蛋白呈正相关,两者联合检测可以判断患者的预后。

     

XAB2基因表达下调与胃癌发生的关系

目的观察胃癌组织XAB2基因及蛋白表达的变化,探讨其与胃癌发生发展的可能关系。方法选取34例胃癌患者的肿瘤组织及癌旁正常组织,采用real-time RT-PCR技术检测XAB2 mRNA的表达;采用免疫组化方法检测胃癌组织、癌旁正常组织、胃炎组织XAB2蛋白的表达;分析不同临床病理指标下胃癌组织XAB2蛋白的表达差异。结果胃癌组织XAB2 mRNA表达显著低于癌旁正常组织(P<0.01),且在胃癌进展早期(Ⅰ+Ⅱ期)即明显下降。免疫组化检测显示:胃癌组织中XAB2蛋白表达的阳性率为50.0%(17/34),明显低于配对癌旁正常组织82.4%(28/34)和胃炎组织91.1%(31/34),差异具有统计学意义(P<0.01),而后二者间无统计学差异。胃癌组织XAB2蛋白表达与胃癌分化程度正相关(P=0.041),与肿瘤浸润深度、肿瘤大小负相关(P=0.019、0.027);在不同性别、年龄、肿瘤部位、有无淋巴结转移、TNM分期间无统计学差异。结论XAB2低表达可能与胃癌发生、进展密切相关,值得深入研究以利于临床胃癌诊治。     

FMNL2在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的:研究在胃癌组织中形成素样蛋白2（FMNL2）的表达及临床意义。方法:收集普外科30例胃癌组织标本及其对应的远癌组织,利用免疫组化法及实时定量PCR法检测胃癌中FMNL2蛋白及mRNA的表达情况,并分析其蛋白表达与临床病理因素之间的关系,运用数据库Kaplan-Meier分析胃癌的生存状况。结果:胃癌组织中FMNL2蛋白及mRNA的表达均明显高于对应的远癌组织（均P < 0.05）;FMNL2蛋白表达与胃癌的淋巴结转移、TNM分期密切相关（均P < 0.05）,而与患者的年龄、性别、浸润深度、分化程度以及远处转移之间没有显著相关性（均P>0.05）;K-M生存曲线显示FMNL2表达水平与胃癌生存预后明显相关（均P < 0.05）。结论:FMNL2在胃癌组织中高表达,且与肿瘤的一些临床病理因素特别是淋巴结转移密切相关。FMNL2可能作为肿瘤转移、判断预后的标志基因。