PTD4-GFP-Apoptin 融合蛋白对白血病细胞增殖与凋亡的影响

目的：研究 PTD4-GFP-Apoptin 融合蛋白对不同类型白血病细胞的增殖抑制及诱导凋亡效应。方法用基因工程技术构建含有 PTD4-GFP-Apoptin 目的基因的重组载体,表达 PTD4-GFP-Apoptin融合蛋白,用四甲基偶氮唑盐比色法（MTT）检测其对白血病细胞增殖的影响,用流式细胞术（FCM）检测其对白血病细胞凋亡的影响。结果 PTD4-GFP-Apoptin 对不同类型的白血病细胞都有不同程度的增殖抑制效应,且抑制效应与作用的时间和浓度呈正相关;PTD4-GFP-Apoptin 对急性髓系白血病细胞株HL-60有诱导凋亡作用,其凋亡率与 PBS 对照组细胞相比差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 PTD4能够携带大分子蛋白质穿过细胞膜,PTD4-GFP-Apoptin 在体外对多种白血病细胞有抑制增殖的作用;Apoptin 可诱导白血病细胞凋亡,而正常细胞不受影响,可能成为临床治疗白血病的新型药物。     

重组复制缺陷型腺病毒Ad-p53AIP1的抗肿瘤效应及其作用机制

目的：探讨外源性p53AIP1（p53-regulated apoptosis—inducing protein1）基因抗肿瘤效应及其作用机制，以评估声3A，H基因在肿瘤基因治疗中应用的可行性。方法：构建携带p53AIP1基因的重组复制缺陷型腺病毒Ad—p53AIP1，感染人肝癌细胞HepG2，应用MTT比色法、Westernblotting、流式细胞术、罗丹明染色以及电镜等观察外源性p53AIP1基因表达对肿瘤细胞的作用及其相关机制。小鼠皮下接种感染Ad—p53AIPl的小鼠乳腺癌4T1细胞，观察Ad—p53AIP1对肿瘤细胞体内成瘤性的影响；建立4T1细胞皮下移植瘤小鼠模型，直接瘤内多点注射重组腺病毒，观察Ad—p53AIP1的抗肿瘤疗效。结果：感染Ad—p53AIP1的HepG2细胞能够高效表达p53AIP1蛋白。MTT检测显示Ad—p53AIP1对人肝癌细胞HepG2的生长抑制率达50％以上；流式细胞术分析证实p53AIP1使肿瘤细胞周期阻滞于G2／M期；罗丹明染色、电镜观察以及凋亡相关蛋白PARP表达的检测均证实p53AIP1能诱导肿瘤细胞发生明显凋亡。感染Ad—p53AIPl的肿瘤细胞体内成瘤受到非常明显的抑制（P〈0．01），Ad—p53AIP1瘤体注射对移植瘤生长也有明显的抑制作用（P〈0．05）。Western blotting以及RT—PCR检测证实Ad—p53AIP1对声3mRNA表达无影响，能下调mdm2基因的表达；p53AIP1能上调P53蛋白的表达、下调MDM2蛋白的表达水平，同时还影响P21等细胞周期相关蛋白和凋亡相关蛋白的表达。结论：p53AIP1有明显的体内外抗肿瘤作用，其作用机制与其反向调控P53蛋白、调控多种细胞周期和细胞凋亡相关蛋白、诱导细胞周期阻滞和细胞凋亡有关，该基因在肿瘤基因治疗中具有潜在的应用前景。     

Tat-p53融合蛋白在乳腺癌细胞的表达、纯化及其转导活性

目的:研究Tat-p53融合蛋白在乳腺癌细胞的表达、纯化及其转导活性,探讨蛋白转导方法在乳腺癌治疗中应用的可能性。方法:利用RT-PCR方法从A549细胞系中分离野生型p53基因,将该基因克隆入pTAT-HA原核表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)LysS内诱导表达并进行纯化。将Tat-p53融合蛋白加入MCF-7人乳腺癌细胞培养上清,检测Tat-p53融合蛋白导入MCF-7人乳腺癌细胞的情况。结果:成功地构建了含有野生型p53基因的原核表达载体,表达纯化了Tat-p53融合蛋白,证实Tat-p53可以高效转入MCF-7人乳腺癌细胞内。结论:TatPTD可以发挥高效的蛋白转导特性将p53导入人乳腺癌细胞,p53在细胞核内可以发挥生物学活性,抑制肿瘤细胞生长并诱导其发生凋亡。     

融合蛋白Kininogen D560-148 TRAIL114-281的表达及其抑制血管新生和诱导细胞凋亡的作用

目的:采用原核表达系统表达人Kininogen D560-148-TRAIL114-281融合蛋白,并对其生物学活性进行研究.方法:PCR技术扩增Kininogen D560-148和TRAIL114-281的编码序列,分别构建原核表达载体pMAL-Kininogen D560-148(pMAL-KD5)、pMAL-TRAIL114-281(pMAL-TRAIL)和pMAL-Kininogen D560-148-TRAIL114-281(pMAL-KT),重组质粒分别转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达融合蛋白MBP-KD5、MBP-TRAIL和MBP-KT,并经亲和层析纯化.MTT法检测细胞的增殖,管状形成实验检测内皮细胞血管形成,流式细胞仪和电镜检测细胞凋亡.结果:成功构建原核表达载体pMAL-KD5、pMAL-TRAIL和pMAL-KT,并获得纯化的融合蛋白MBP-KD5、MBP-TRAIL和MBP-KT.融合蛋白MBP-KT与MBP-KD5、MBP-TRAIL相比可显著抑制内皮细胞ECV304和胰腺癌细胞SW 1990的增殖、明显抑制ECV304细胞体外管腔的形成,同时,MBP-KT剂量依赖性地诱导SW1990细胞凋亡.结论:融合蛋白Kininogen D560-148-TRAIL114-281既能诱导肿瘤细胞凋亡又能抑制血管生成,为进一步开发靶向性抗肿瘤药物奠定了基础.     

重组复制缺陷型腺病毒Ad p53AIP1的抗肿瘤效应及其作用机制

目的:探讨外源性p53AIP1（p53regulated apoptosisinducing protein 1）基因抗肿瘤效应及其作用机制，以评估p53AIP1基因在肿瘤基因治疗中应用的可行性。方法：构建携带p53AIP1基因的重组复制缺陷型腺病毒Adp53AIP1，感染人肝癌细胞HepG2，应用MTT比色法、Western blotting、流式细胞术、罗丹明染色以及电镜等观察外源性p53AIP1基因表达对肿瘤细胞的作用及其相关机制。小鼠皮下接种感染Adp53AIP1的小鼠乳腺癌4T1细胞，观察Adp53AIP1对肿瘤细胞体内成瘤性的影响;建立4T1细胞皮下移植瘤小鼠模型, 直接瘤内多点注射重组腺病毒，观察Adp53AIP1的抗肿瘤疗效。结果：感染Adp53AIP1的HepG2细胞能够高效表达P53AIP1蛋白。MTT检测显示Adp53AIP1对人肝癌细胞HepG2的生长抑制率达50％以上；流式细胞术分析证实p53AIP1使肿瘤细胞周期阻滞于G2/M期；罗丹明染色、电镜观察以及凋亡相关蛋白PARP表达的检测均证实p53AIP1 能诱导肿瘤细胞发生明显凋亡。感染Adp53AIP1的肿瘤细胞体内成瘤受到非常明显的抑制（P<001）, Adp53AIP1瘤体注射对移植瘤生长也有明显的抑制作用（P<0.05）。Western blotting以及RTPCR检测证实Adp53AIP1对p53mRNA表达无影响，能下调mdm2 基因的表达；p53AIP1能上调P53蛋白的表达、下调MDM2蛋白的表达水平，同时还影响P21等细胞周期相关蛋白和凋亡相关蛋白的表达。结论：p53AIP1有明显的体内外抗肿瘤作用，其作用机制与其反向调控P53蛋白、调控多种细胞周期和细胞凋亡相关蛋白、诱导细胞周期阻滞和细胞凋亡有关，该基因在肿瘤基因治疗中具有潜在的应用前景。     

Livin靶向siRNA对大肠癌细胞凋亡的诱导作用

目的:构建Livin靶向小干扰RNA(siRNA)重组表达载体,观察其诱导大肠癌细胞的凋亡效应.方法:构建Livin靶向siRNA重组表达栽体并转染结肠癌细胞,RT-PCR和蛋白质印迹法检测Livin的表达,MTT法检测siRNA对细胞增殖的抑制作用,流式细胞仪检测细胞的凋亡效应.结果:经酶切鉴定和测序结果证实,Livin靶向sirNA重组表达载体构建成功,它对大肠癌细胞Livin mRNA和蛋白的表达抑制率分别为30.18%和28.88%,P<0.05,肿瘤细胞的生长受到明显抑制,细胞凋亡率为(13.36±1.45)%,P<0.05.结论:Livin靶向siR-NA重组表达载体构建成功,能有效抑制Livin基因表达并能显著诱导肿瘤细胞凋亡.     

基因转染LL-37/hCAP-18对人乳腺癌细胞凋亡的影响

目的：探讨基因转染人源抗菌肽LL-37/hCAP-18对人乳腺癌细胞MCF-7增殖、凋亡的影响。方法：将含人LL-37/hCAP-18的真核表达质粒瞬时转染人MCF-7细胞,48h后,MTT比色检测MCF-7细胞的增殖,流式细胞术检测MCF-7细胞周期及凋亡,细胞免疫组化染色检测MCF-7细胞中Bax、Bcl-2的表达。结果：重组基因瞬时转染MCF-7细胞48h后,与各对照组相比,肿瘤细胞的生长增殖受到显著抑制（P〈0.05）;转染重组基因组肿瘤细胞凋亡率显著高于各对照组（P〈0.05）,但细胞周期无明显变化;与对照组相比,转染重组基因pEGFP-c1-LL-37的MCF-7细胞中Bcl-2表达显著下降（P〈0.05）,Bax由阴性表达转为表达明显升高。结论：LL-37/hCAP-18可以通过上调促凋亡因子Bax、下调抗凋亡因子Bcl-2诱导肿瘤细胞凋亡,从而抑制乳腺癌细胞MCF-7的增殖。     

粉防已碱对人卵巢癌细胞株A2780增殖与凋亡的影响

目的：通过观察粉防已碱对人卵巢癌A2780细胞增殖与凋亡的影响，初步探讨粉防已碱对卵巢癌的体外抗肿瘤效应。方法：采用MTT试验观察粉防已碱对A2780细胞的增殖抑制效应，利用细胞DNA琼脂糖凝胶电泳检测粉防已碱诱导肿瘤细胞凋亡的作用，通过流式细胞术观察粉防已碱对人卵巢癌A2780细胞周期的影响以及诱导凋亡的作用，以免疫印迹检测粉防已碱对p53、p21及Bax表达水平的影响。结果：MTT试验显示粉防已碱对人卵巢癌A2780细胞增殖有抑制作用，其抑制效应具有时间及浓度依赖的特点，琼脂糖凝胶电泳及流式细胞术表明粉防已碱可诱导A2780细胞凋亡，并引起G0／G1期阻滞，免疫印迹检测显示粉防已碱上调p53、p21及Bax蛋白表达。结论：粉防已碱对人卵巢癌A2780细胞增殖的抑制效应具有时间及浓度依赖性，并可诱导细胞凋亡，其抗肿瘤效应可能与上调p53、p21及Bax蛋白表达有关。     

突变p53基因的反义拯救研究

目的研究p53基因的个体性反义RNA联合野生型p53（wt-p53）对乳腺癌细胞的增殖抑制作用，探讨体外双重基因治疗的意义。方法将wt-p53重组质粒pC53-SN3转染人乳腺癌MDA—MB-231细胞，G418筛选稳定表达wt—p53的细胞克隆（WTp53—231细胞）；体外构建针对MDA—MB-231细胞p53基因突变外显子8（exon8）的反义表达载体[pGEM3zf（＋／-）p53exon8]，并制备其反义RNA（ASp53exon8＇RNA）；以MDA—MB-231细胞为对照，阳离子脂质体介导下ASp53exon8’RNA转染wTp53—231细胞；转染48h后，用MTT法检测细胞生长活性，TUNEL法检测细胞凋亡情况，免疫细胞化学LSAB染色法检测p53蛋白的表达。结果ASp53exon8’RNA转染wTp53—231细胞与ASp53exon8’RNA转染MDA—MB-231细胞比较，前者可进一步抑制肿瘤细胞增殖和诱导凋亡。结论p53基因的个体性反义RNA联合wt—p53共转染可协同抑制乳腺癌细胞增殖，达到“反义拯救”基因治疗目的。     

融合蛋白Kininogen D5_（60-148）-TRAIL_（114-281）的表达及其抑制血管新生和诱导细胞凋亡的作用

目的：采用原核表达系统表达人Kininogen D560148TRAIL114281融合蛋白,并对其生物学活性进行研究。方法：PCR技术扩增Kininogen D560148和TRAIL114281的编码序列,分别构建原核表达载体pMALKininogen D560148（pMALKD5）、pMALTRAIL114281（pMALTRAIL）和pMALKininogen D560148 TRAIL114281（pMALKT）,重组质粒分别转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达融合蛋白MBPKD5、MBPTRAIL和MBPKT,并经亲和层析纯化。MTT法检测细胞的增殖,管状形成实验检测内皮细胞血管形成,流式细胞仪和电镜检测细胞凋亡。结果：成功构建原核表达载体pMALKD5、pMALTRAIL和pMALKT,并获得纯化的融合蛋白MBPKD5、MBPTRAIL和MBPKT。融合蛋白MBPKT与MBPKD5、MBPTRAIL相比可显著抑制内皮细胞ECV304和胰腺癌细胞SW1990的增殖、明显抑制ECV304细胞体外管腔的形成,同时,MBPKT剂量依赖性地诱导SW1990细胞凋亡。结论：融合蛋白Kininogen D560148 TRAIL114281既能诱导肿瘤细胞凋亡又能抑制血管生成,为进一步开发靶向性抗肿瘤药物奠定了基础     

氧化铁磁性纳米颗粒介导wt-p53基因对肺腺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的：探讨氧化铁磁性纳米颗粒介导野生型p53基因（wild type p53,wt-p53）对耐顺铂人肺腺癌细胞A549/DDP增殖抑制和凋亡诱导的作用。方法：氧化铁磁性纳米颗粒介导wt-p53转染肺腺癌细胞A549/DDP作为实验组,以纳米颗粒介导空载体pcDNA3转染作为阴性对照组,脂质体介导wt-p53转染作阳性对照组。MTT法和绘制生长曲线观察基因转染对A549/DDP细胞增殖抑制作用,荧光显微镜、流式细胞术观察其对A549/DDP细胞诱导凋亡作用,RT-PCR检测其对A549/DDP细胞Bax mRNA表达的影响。结果：氧化铁磁性纳米颗粒介导wt-p53对人肺腺癌细胞A549/DDP增殖有持续的抑制作用,而以脂质体介导wt-p53对增殖抑制作用持续时间短暂;纳米颗粒介导wt-p53对人肺腺癌细胞A549/DDP诱导凋亡作用明显强于以脂质体载体;同时介导wt-p53上调Bax mRNA表达水平的作用也明显强于以脂质体载体。结论：氧化铁磁性纳米颗粒介导wt-p53转染对人肺腺癌细胞A549/DDP有持续的增殖抑制和诱导凋亡的作用。     

c-myc反义寡核苷酸对表达FHIT基因的结肠癌细胞增殖及凋亡作用的影响

目的：观察脂质体介导的c—myc反义寡核苷酸对表达FHIT基因的结肠癌细胞增殖及凋亡作用的影响。方法：用脂质体法将重组FHIT基因的PRC／CMV质粒和空载体质转染到人结肠细胞株SW480，随后分别转染c—myc反义寡核苷酸。Western blot法检测细胞FHIT和c—myc的表达；MTF法检测细胞的增殖；AO／EB染色法和流式细胞分析技术检测细胞的凋亡。结果：转染FHIT基因后，SW480细胞有明显的FHIT蛋白表达而转染空载体的细胞未检测到FHIT蛋白表达。C—myc反义寡核苷酸转染后，对SW480细胞c—myc的表达有明显的抑制作用（P〈0．01）；对FHIT＋／-SW480细胞的增殖均有明显的抑制作用（P〈0．01），且对FHIT＋SW480细胞的抑制作用明显强于FHIT—SW480细胞（P〈0．05）。同时，c-myc反义寡核苷酸对FHIT＋／-SW480细胞的凋亡均有明显的促进作用，对FHIT＋SW480细胞凋亡的促进作用明显强于FHIT—SW480细胞（P〈0．05）。结论：FHIT基因的表达和癌基因c—myc的表达抑制共同作用可以发挥较强的抗肿瘤细胞的效果，为多基因联合干预治疗肿瘤奠定了理论基础。     

癌-睾丸抗原GAGE-1基因的重组、表达及纯化

目的 为进一步研究临床应用癌-睾丸抗原GAGE-1诱导特异性抗肿瘤免疫反应,对GAGE-1基因进行克隆、体外原核重组表达及蛋白分离纯化。方法 运用RT-PCR技术从人QGY-7701肝癌细胞株中扩增GAGE-1基因片段,插入原核表达载体pGEX-6p-1中,构建重组表达质粒pGEX-6p-1-GAGE-1,并导入大肠杆菌BL21,IPTG诱导目的蛋白表达;经包涵体透析复性及GST柱亲和层析纯化目的蛋白,SDS-PAGE电泳分析鉴定。结果 扩增得到GAGE-1基因5’端251 bp片段,与GeneBank公布的序列一致,构建的PGEX-6p-1-GAGE-1原核表达质粒经IPTG诱导,在大肠杆菌中表达分子量约35.7 kD的GST-GAGE-1融合蛋白,纯化后蛋白纯度为90%以上。结论 成功构建PGEX-6p-1-GAGE-1重组表达质粒,并成功表达纯化了GST-GAGE-1融合蛋白,为进一步深入研究GAGE蛋白奠定了基础。     

乏氧对多柔比星诱导肺腺癌A549细胞凋亡的影响

背景与目的：乏氧是恶性肿瘤中常见的现象。乏氧时肿瘤细胞对化疗抗拒，细胞凋亡减少：本实验通过研究乏氧对肺腺癌A549细胞（野生型P53）多药耐药蛋白表达及细胞凋亡的影响，探讨乏氧在多柔比旱诱导细胞凋亡巾的作用。方法：乏氧条件下（2％O，）人肺腺癌细胞株A549体外培养24h，免疫组化法榆测乏氧诱导因子-1d（HIF-1α）、P-糖蛋白（P-gP）和P53蛋白的表达；MTT法检测乏氧条件下A549细胞在多柔比星作用下的存活率；应用流式细胞仪检测细胞凋亡i结果：①乏氧条件下A549中HIF-1α、P-gp和P53蛋白的表达明显较正常氧浓度下增高，HIF-1α蛋白的表达与P-gP和P53蛋白的表达存在明显的相关性、名乏氧条件下A549细胞对多柔比星的耐药性明显增强，多柔比旱诱导细胞凋亡率明显减低：结论：乏氰情况下，A549细胞能够通过HIF-1仅上调P-gp和P53蛋白的表达；A549细胞住乏氧条件下多柔比星诱导细胞凋亡存在非P53依赖途径？     

改良型TAT-凋亡素体外抗人膀胱肿瘤活性的研究

目的:探讨改良型TAT-凋亡素(TAT-VP3)融合基因在不同人膀胱癌细胞中的表达及诱导凋亡的效应.方法:利用改良型TAT-VP3原核表达载体pGEX-6p-1-TAT-VP3构建真核表达载体PcDNA3-TAT-VP3,经BamHⅠ/XhoⅠ双酶切鉴定和基因测序无误后采用脂质体介导的基因转染法转染人膀胱癌BIU-87及EJ细胞,利用RT-PCR技术检测改良型TAT-VP3基因在细胞中的表达状况.通过透射电镜扫描观察转染后不同时段肿瘤细胞的超微结构变化,MTT法检测转染重组质粒后对人膀胱癌细胞的增殖活性的影响,流式细胞术TUNAL法检测转染重组质粒24、48、72h后BIU-87及EJ细胞的凋亡率,对实验结果进行统计学分析.结果:成功构建重组质粒PcDNA3-TAT-VP3并经测序无误,转染人膀胱癌细胞后的RT-PCR结果证实改良型TAT-VP3基因在人膀胱癌细胞中获得表达.透射电镜观察到BIU-87及EJ细胞凋亡早期染色质聚集,线粒体固缩,凋亡中晚期核固缩及凋亡小体等超微形态学改变.MTT法检测结果显示转染重组质粒PcDNA3-TAT-VP3后的BIU-87及EJ细胞增殖活性明显下降(P<0.01).流式细胞术TUNAL法检测显示BIU-87及EJ细胞发生早期凋亡,其凋亡率随时间的推移呈逐渐上升趋势,转染72 h后BIU-87和EJ细胞的凋亡率分别为(30.44±1.47)%、(42.27±2.66)%,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01).结论:改良型TAT-VP3基因的表达能早期、高效地诱导不同人膀胱癌细胞发生凋亡,为纯化改良型TAT-VP3融合蛋白以及将其应用于膀胱灌注治疗膀胱转移肿瘤的研究奠定实验基础.     

反义c-myc寡核苷酸对骨肉瘤MG-63细胞增殖和凋亡的影响

目的研究反义c-myc寡核苷酸（c-mycASODN）对人骨肉瘤MG-63细胞增殖和凋亡的影响。方法设计c—mycASODN片段，转染入人骨肉瘤MG-63细胞，通过MTT检测、HE染色光镜观察、透射电镜超微结构及流式细胞仪（FCM）分析，观察和分析其对瘤细胞体外增殖、凋亡、细胞周期及c-myc基因蛋白的影响。结果MTT示c—mycASODN可抑制人骨肉瘤MG-63细胞的体外增殖，10．0μmol／L、作用48h效果最明显，形态学观察到典型瘤细胞凋亡特征，流式细胞仪分析证实反义c—myc寡核苷酸主要阻止瘤细胞进入S期，出现明显的凋亡峰，凋亡率达36.82％，并可抑制c-myc基因蛋白的表达。结论反义c-myc寡核苷酸可诱导人骨肉瘤MG-63细胞的凋亡，对瘤细胞的增殖有抑制作用。     

单抗导向超抗原对人大肠癌细胞的抑制作用研究

[目的]研究单抗导向超抗原对人大肠癌细胞的抑制作用。[方法]MTT法观察融合蛋白对Colo205细胞的体外抑制效应;DNA电泳法和电子显微镜法检测融合蛋白处理后肿瘤细胞的凋亡。[结果]在效应细胞介导下,肿瘤细胞的生长抑制率与随融合蛋白作用浓度的增加而逐渐增大;DNA电泳法和电子显微镜法显示被融合蛋白活化的免疫效应细胞攻击后的肿瘤细胞表现出典型的凋亡特征性变化。[结论]在效应细胞介导下,融合蛋白能对表达相应抗原的肿瘤细胞显示出有效的抑制作用;在融合蛋白介导的肿瘤细胞体外生长抑制过程中伴随有靶细胞的凋亡。     

冬凌草甲素抑制人肝癌SMMC．7721细胞增殖及诱导细胞凋亡的机制研究

目的研究冬凌草甲素对人肝癌细胞株SMMC-7721细胞的抑制作用及诱导凋亡机制。方法采用不同浓度的冬凌草甲素作用于人肝癌SMMC-7721细胞,以四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞抑制率,倒置显微镜观察不同浓度组的细胞形态,RT—PCR法检测细胞Survivin、Bcl-2、BaxmRNA的表达,WesternBlot法检测细胞Survivin、Bcl-2、Bax的蛋白表达。结果MTT比色法显示不同浓度的冬凌草甲素可抑制人肝癌SMMC．7721细胞的增殖,抑制作用呈时间和剂量依赖性。冬凌草甲素作用48h后细胞表现出特异性凋亡。RT—PCR法和WesternBlot法显示,人肝癌SMMC-7721细胞的BaxmRNA和Bax蛋白随冬凌草甲素浓度增加而表达增加,Bcl-2、SurvivinmRNA和Bcl-2、Survivin蛋白随药物浓度增加而表达下降。结论冬凌草甲素能抑制人肝癌SMMC-7721细胞的生长及诱导细胞发生凋亡,降低Sur—vivin、Bcl-2表达和上调Bax表达可能是诱导细胞发生凋亡的机制。     

鳞盖肉齿菌的抗肿瘤细胞增殖活性及其机制的研究

背景与目的：从鳞盖肉齿菌（Sarcodon scabrosus karst）的二氯甲烷提取物中分离纯化得到Sarcodonin G,对Sarcodonin G进行抗肿瘤细,胞增殖活性及其机制的研究。材料与方法：利用四唑盐（MTT）比色法测定Sarcodonin G对HeLa细胞增殖的抑制率;利用流式细胞术检测Sarcodonin G对HeLa细胞的凋亡和P53基因蛋白表达的影响;利用电镜技术观察Sarcodonin G对HeLa细胞形态学改变。结果：Sarcodonin G对体外培养的HeLa细胞的增殖具有明显地抑制作用,其半数抑瘤率（IC50）为7.19mol/L,并有较好量效关系;流式细胞学检查发现Sarcodonin G处理后的HeLa细胞出现凋亡现象、对P53基因蛋白表达影响与对照组比较有统计学意义（P＜0.01）;超微结构发现Sarcodonin G处理后的HeLa细胞的胞核染色质浓缩,边集,核固缩及形成新月体,线粒体肿胀,空泡样变,胞浆出现大量空泡等凋亡的形态学改变。结论：鳞盖肉齿菌的纯化物Sarcodonin G能抑制体外培养的HeLa细胞的增殖,可能是通过调节HeLa细胞P53蛋白表达,诱导HeLa细胞的凋亡来实现其抗肿瘤增殖作用的。     

ω-3脂肪酸对人胃癌细胞凋亡信号传导的影响

目的：观察EPA和DHA对人胃癌BGC-823细胞凋亡信号传导的影响。方法：采用MTT法测定肿瘤细胞抑制率，流式细胞检测肿瘤细胞凋亡率和bcl-2、Gα、PKCβⅡ基因蛋白的表达。结果：45μg／ml和48h时间点的EPA或DHA可显著抑制肿瘤细胞的生长（P〈0．001），凋亡率明显升高（P〈0．001），bcl-2基因蛋白表达下降（P〈0．05），Gd和PKCβⅡ基因蛋白表达明显下降（P〈0．001）。结论：ω-3脂肪酸可诱导人胃癌BGC-823细胞发生凋亡，信号传导途径Gα—PKCβⅡ的改变在细胞凋亡中起到重要的作用。