人疱疹病毒8型K12基因在大肠杆菌中的克隆和表达

目的：将人疱疹病毒8型（HHV－8）K12基因在大肠杆菌中进行融合表达。方法：设计一对PCR引物，在引物的5'端分别引入EcoRI和XhoI酶切位点，用此引物从质粒pCR-K12中扩增出HHV－8的K12基因，PCR产物经双酶切后按正确阅读框连接到原核表达载体pGEX-6p-1上相应酶切位点，并转化BL21感受态细胞。结果：重组菌经异丙基硫代－β-D-半乳糖芏（IPTG）诱导后，菌体SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）显示有一个大小为33ku的融合表达蛋白产生。结论：初步表明K12基因在大肠杆菌中获得正确表达。     

含绿色荧光蛋白基因与人疱疹病毒8型K12基因重组真核表达载体的构建

目的：构建含绿色荧光蛋白（GFP）基因与人疱疹病毒8型K12基因重组真核表达载体。方法：将人疱疹病毒8型（HHV－8）K12基因插入到真核表达质粒pCR3.1的EcoRI和XhoI位点，构建重组质粒pCR-K12；PCR扩增GFP基因，将GFP基因插入到重组质粒pCR-K12中K12上游的KpnI和EcoRI位点中，获得重组表达质粒pCR-GFP-K12。结果：重组表达质粒pCR-GFP-K12的酶切鉴定符合预期结果，此重组质粒中的K12与GFP融合表达并受上游启动子pCMV控制。结论：重组表达质粒pCR-GFP-K12已构建成功，为研究K12的生物学活性及春作用机制打下基础。     

益阳市汉族人群ABO、RH（D）血型分布及临床意义

目的了解益阳市汉族人群ABO、RH血型分布规律，指导血站采供血工作。方法采用ABO血型正反定型，RH（D）血型鉴定方法鉴定血型，计算出各血型的分布比例，并与临近地区血型分布进行比较。结果益阳市汉族人群ABO血型比例分别为A（33．86％）、B（21．92％）、O（36．23％）、AB（7．99％），RH（D）阴性的比例为0.25％，RH（D）阴性比例分别为A（0．31％）、B（0．10％）、O（0．32％）、AB（0．09％），均呈现出O〉A〉B〉AB的分布规律，但B型、AB型RH（D）阴性更少见。结论可利用血型分布规律，科学调配血源，缓解用血偏型矛盾，指导临床对RH（D）阴性紧急输血患者，可用O型RH（D）阴性洗涤红细胞输注，争取时间、抢救患者。     

PCR—SSP检测人胰腺癌细胞株PC—2 K—ras基因点突变及其方式

目的 检测人胰腺癌细胞株PC－2 K－ras基因点突变及其突变方式，明确基因治疗靶点的碱基序列。方法 针对K－ras基因第12位密码子点突变方式（CGT，CAT，GTT）设计顺序特异性引物（SSP），对人胰腺癌细胞株PC－2进行聚合酶链反应（PCR），扩增产物借助聚丙烯酰胺凝胶电泳判定该细胞株有无K－ras基因点突变及其突变方式。结果 人胰腺癌细胞株PC－2存在K－ras基因点突变，突变方式为CGT。结论 PCR－SSP法简便快速，特异性高，本研究结果为胰腺癌的下一步基因治疗奠定了基础。     

杉木根皮中的二萜类成分研究

从杉科植物杉木Cunninghamialanceolata的根皮中分得3种半日花烷型（Labdan）二萜类成分。经理化常数和波谱分析，分别鉴定为12，13E－biformen（Ⅰ），12，13E－ozicacid（Ⅱ）和12，13E－methylozate（Ⅲ），均为首次从该植物中分得。     

冬虫夏草降压作用实验研究

目的：观察冬早夏草对肾性高血压大鼠血压的影响。方法：体重为160－180g健康雄性Wistar大鼠随机分成三组：高血压（RH）组、高血压＋冬虫夏草（RH＋S）组及对照（C）组。RH组用经典的Goldblatt氏法复制。术后10天，RH＋S组用12．5％冬虫夏煎剂，按生药1g/kg,bid灌胃。20天后，用颈动脉直接插管法测定大鼠血压的变化并取出心脏称重。结果：冬虫夏草能明显降低肾性高血压大鼠的血压，并能逆转肾性高血压压时所发生的心肌肥大。结论：冬虫复草具有降低、逆转心肌肥大的作用。     

检测胰液和粪便中K-ras和p53基因突变对胰腺癌早期诊断的价值

目的 通过检测胰液、粪便癌基因K－ras和抑癌基因p53的突变,探索早期诊断胰腺癌的手段。方法 1994年至2000年5月住院和门诊患者共201例,正常对照60例,通过聚合酶链反应－限制片段长度多态性（PCR－RFLP）方法检测胰液、粪便K－ras突变,PCR－SSCP方法检测p53突变。结果 胰腺癌患者胰液K－ras突变率为87．8％（36／41）,胰腺良性病变为23．5％（4／17）。粪便K－ras扩增成功率为90．0％（235／261）。胰腺癌患者粪便K－ras突变率为88．0％（66／75）,胰腺良性病变为51．1％（24／47）,正常人粪便K－ras突变率为19．6％（9／46）。胰腺癌胰液细胞p53突变率47．4％（18／38）,胰腺良性疾病为12．5％（2／16）。胰腺癌粪便p53突变率为37．1％（23／62）,慢性胰腺炎为19．1％（4／21）。结论 胰腺癌患者胰液K－ras突变的敏感性、特异性高,可以作为胰腺癌诊断的辅助手段。粪便K－ras结合p53检测可以提高敏感性,在胰腺癌筛选中有潜在的价值,联合血清CA19－9等肿瘤标记物检测有助于提高胰腺癌早期诊断率。     

正确使用IL-501Na~+/K~+分析仪

IL-501Na＋／K＋分析仪是利用离子选择电极测量全血、血浆、血清和尿（稀释）中钾、钢高于浓度的分析仪。该仪器由美国IL公司生产，南京分析仪器厂组装。设备简单、轻便、易操作而快速。正确使用能提高该仪器的准确性和可靠性。1IL－501Na＋／K＋分析仪的主要技术多数有：可测全血、血浆、血清和尿（稀释）等标本，标本体积为lin…（尿500…），环境温度12－37〔，读数装置为3位LED数字显示器。血液标本CV％（变异系数）Na’1％、K“2％；尿液标本：Na”2％、K“2％监测范围：Na”7O。～18Omrnoles／I。，K”2—Icmmoles／I，。…     

Ⅲ型复合换能仪对脑梗塞病人的治疗效果

脑血管疾病是危害老年人健康的主要疾病之一，目前对脑血管病的治疗和早期康复方法很多，但疗效不尽人意。１９９６年４～５月，我们采用Ⅲ型复合换能仪（由光能ＫＸ－２８０－２Ａ和声能ＣＷ型超声发生器复合而成）对我院住院３０例脑梗塞病人进行了治疗观察，现将结果报...     

高温高湿环境下战创伤创面模型的建立

目的建立高温高湿环境下猪战伤后创面的动物模型,以供对爆炸伤引起的战伤慢性创面病理生理以及修复治疗进行研究。方法选用藏香猪8头,采用KTY-08型瞬发纸质雷管的爆炸源模拟爆炸冲击波,制作猪的两侧臀部战创伤创面,共计16个创面。致伤后随机分为两组,即常温常湿组（对照组）：气温（Ta）（22．0±0．5）℃,相对湿度（RH）50％;高温高湿组：Ta（39．0±0．5）℃,RH8I）％～85％。每组4只,观察伤后不同时间段创面的大体、病理切片变化及创面愈合时间。结果创面大小平均为（6．0±0．9）cmX（6．5±1．2）cm×（1．5±0．3）cm,12h后高温高湿组较常温常湿组创面明显扩大,有感染征象,第21天时创面愈合率为0,第28天时愈合率为12．5％（1／8）。常温常湿组24h后出现明显感染,第21天后创面完全愈合,愈合率100％。结论藏香猪臀部战创伤创面模型创面面积大,未伤及骨组织,动物可长期存活,且皮肤结构及创面愈合与人类相似,是高温高湿环境下良好的战创伤创面动物模型。     

枸橼酸钠抗凝引起交叉配血不相容1例

患者女性，42岁，孕3产1，由于外伤骨折而来我院。血常规检查：血红蛋白48g／L，共输A型RH（D）阳性去白细胞悬浮红细胞6U，无输血不良反应。而在本次择期手术时备血8U，血型确实为A型RH（D）阳性，不规则抗体筛查阴性，当第二天手术做交叉配血时出现了不同程度的凝集。     

原位逆转录PCR检测干细胞因子mRNA在白血病细胞的表达

目的：探索应用原位逆转录PCR（RT－PCR）检测低拷贝的干细胞因子mRNA在白血病细胞表达的可行性。方法：在普通的PE480型PCR仪进行原位RT－PCR，检测干细胞因子mRNA在K562、HL－60和慢性粒细胞性白血病细胞的表达。结果：直接法和间接法原位RT－PCR法可以检测到干细胞因子mRNA在K562、HL-60和慢性粒细胞性白血病细胞表达，而常规的原位杂交则为阴性。结论：（1）干细胞因子在K562、HL－60和慢性粒细胞性白血病细胞均有表达，但是表达量较低，应用原位RT－PCR可进行检测；（2）在普通的PE480型PCR仪上可以进行原位PCR。     

含煤燃料对家庭妇女尿中1－羟基芘排泄的影响

作者对上海市接触燃煤及燃煤气两组家庭妇女尿中１－羟基芘进行了检测。结果表明，接触燃煤污染物家庭妇女尿中１－羟基芘的含量显著高于燃煤气组（Ｐ＜０．００１），使用煤制品作燃料造成的室内多环芳烃污染大于燃煤气组，并提示，尿中１－羟基芘含量可以作为评价接触空气中多环芳烃污染水平的有效指标。     

细胞因子IL-12与支气管哮喘

支气管哮喘是儿科的常见病。过去认为是IgE介导的Ⅰ型变态反应性疾病。近年来，普遍认为是一种气道变应性炎症（AAI）。随着基础研究的深入，特别是对细胞因子生物学功能的阐明，使我们对哮喘慢性变应性炎症的形成机制有了进一步的认识。本文就白细胞介素一12（IL－12）与哮喘的关系作一综述。IIL－12的生物学特点1．IIL－12的结构1989年，Wisbar研究所及遗传研究所人员和Hoffman分别发现一种二聚体细胞因子（CK）并分别将其命名为NK刺激因子（NKSF）及细胞毒细胞成熟因干（CLMF），他们通过提供这种天然蛋白并克隆其mRNAs，发…     

暗紫贝母化学成分研究（I）

从百合科（Liliaceae)植物暗紫贝母（Fritillaria unibracterta Haiao et K.C.Hsia)的干燥鳞茎中分到2个化合物，经化学及光谱方法分别鉴定为22，26－imino-17,23-α－oxido-5a-jerv-12-en-11-oxo-3β－ol（晶J）和蔗糖（晶II），其中晶I为百合科植物中新的白藜芦碱（Jervine)类异甾体生物碱，命名为松贝辛（Songbeisine).     

不同粘合剂对维生素C含片稳定性的影响

本研究用甘露醇、糊精及适宜的矫味剂、稳定剂等为辅料，制成维生素C含片。考察不同湿润剂或粘合剂（Ⅰ：50％乙醇；Ⅱ：5．6％Ⅱ号肠溶性丙烯酸树脂醇溶液；Ⅲ：重量各半的羟丙基甲基纤维素的2％水溶液和16％的淀粉浆）对制剂稳定性的影响。结果显示，在高温（80℃、60℃）、高湿（RH925％、RH75％）条件下，使用粘合剂Ⅲ，可以增加制剂的稳定性。     

慢性阻塞性肺疾病肺通气与血浆TXB_2、6-K-PGF_(1a)及免疫状态的关系

对85例慢性阻塞性肺疾病（COPD）患者进行了1s率（FEV1％），最大呼气中期流速（MMEF），血栓素B2（TXB2），6－酮－前列腺素F1a（6K－K－PGF1a），T淋巴细胞总数（T3）及亚群（T4，T8），IgA、G、M测定。结果：FEV1％降低，血浆中TXB2浓度升高，TXB2／6－K－PGF1a比值增大，外周血中T4减少，T8增多，T4／T8比值下降。MMEF重度降低时，TXB2和TXB2／6K－K－PGF1a升高，IgG改变显著，T4减少，T4／T8比值降低。T4／T8比值降低患者，血浆中TXB2浓度升高，TXB2／6－K－PGF1a比值增大，差异显著。结果提示：COPD患者可能有TXB2／6－K－PGF1a平衡紊乱，免疫功能改变，T4／T8比值改变可能影响TXB2／6－K－PGF1a平衡。大气道和小气道发生和发展机制不完全相同。     

PC-1基因多态性对2型糖尿病患者胰岛素抵抗的影响

目的 探讨PC－1基因（K121Q）多态性对2型糖尿病患者胰岛素抵抗的影响。方法 采用PCR－RFLP技术分析PC－1基因多态性，采用放射免疫法检测2型糖尿病患者空腹血浆胰岛素。结果 2型糖尿病患者中Q等位基因携带者胰岛素抵抗指数（IR）明显高于KK基因型（P＜0.01）。结论 PC－1基因是一个影响2型糖尿病胰岛素抵抗的重要因素。     

裸鼠高致瘤性人白血病细胞系肿瘤相关基因的表达

目的：探索K562和K562－n细胞在裸鼠体内致瘤性不同的分子生物学机制。方法：应用基因芯片技术，检测K562细胞和K562－n细胞的差异表达基因。结果：K562－n细胞中表达上调的与白血病及其他肿瘤发生、发展相关的基因包括加dek基因和DP1基因（结肠直肠多发性息肉病位点基因）。许多肿瘤抑制基因或包含潜在的肿瘤抑制基因的序列在K562－n细胞中表达下降，如染色体12p13序列（U47924）.锌指蛋白127－Xp基因和锌指蛋白198基因,prohibitin基因、DNF15s2基因、hMSH2基因（遗传性非息肉性结肠癌基因，为碱基错配修复基因）、环孢素受体基因。结论：K562－n细胞的裸鼠高致瘤特性与一系列癌基因的表达上调和抑癌基因的表达下调有关。     

采用涂有荧光粉的紫外线灯诊断大肠癌

大肠癌的早期诊断是治愈这种疾病的前提，本文介绍一种新型大肠癌早期诊断仪器。根据文中提出的理论，以（470士1）urn及（644．3土5．7）urn处荧光波峰强度差异，分辨大肠癌组织与正常大肠组织，建立了一种大肠癌检验仪器。该仪器主要由两部分构成：荧光发生器；荧光探测器。荧光发生器是此仪器的主体，由高频交流电压逆变器驱动特制荧光灯，发射相应波长的激发光，用此波长的激发光照射待检验的大肠组织。荧光发生器主体采用M0torolaSG3525集成电路芯片，即脉冲波型调切器（PulseWaveModiffca－tionPWM）为核。乙，构成高频逆变电路，…