反义bcl—2RNA促进HL—60细胞的凋亡

目的：分析反义ｂｃｌ－２对ＨＬ－６０细胞凋亡的作用，为进一步研究凋亡机制打基础，方法：我们用ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ将插有反义ｂｃｌ－２基因片段的重组逆转病毒载体ｐＤＯＲ－ＡＢ转染ＨＬ－６０细胞，用核酸打点杂交方法检测转染效果和载体表达效果，用流式细胞仪检测ｂｃｌ－２的改变及细胞周期的变化，用光镜和电镜观察转染细胞的形态学改变，并用转染的细胞对足叶乙甙敏感性的变化间接证明反义ｂｃｌ－２的作用，结果：ｐ     

反义bcl─2RNA促进HL─60细胞的凋亡

目的：分析反义ｂｃｌ－２对ＨＬ－６０细胞凋亡的作用，为进一步研究凋亡机制打基础．方法：我们用ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ将插有反义ｂｃｌ－２基因片段的重组逆转病毒载体ｐＤＯＲ－ＡＢ转染ＨＬ－６０细胞，用核酸打点杂交方法检测转染效果和载体表达效果，用流式细胞仪检测ｂｃｌ－２的改变及细胞周期的变化，用光镜和电镜观察转染细胞的形态学改变，并用转染的细胞对足叶乙甙敏感性的变化间接证明反义ｂｃｌ－２的作用．结果：ｐＤＯＲ－ＡＢ转入ＨＬ－６０细胞并表达ｂｃｌ－２反义ＲＮＡ；细胞内Ｂｃｌ－２蛋白含量明显下降；细胞周期分析可见凋亡峰；电镜下可见凋亡细胞；ＤＮＡ凝胶电泳出现梯状电泳带．结论：反义ｂｃｌ－２瞬时表达可促进ＨＬ－６０细胞的凋亡，ｂｃｌ－２在ＨＬ－６０细胞凋亡的调节中起重要作用     

bcl—2反义寡核苷酸诱导小细胞肺癌细胞凋亡

ｂｃｌ２是一类与细胞凋亡相关的癌基因，其过度表达所致细胞凋亡受抑制是肿瘤发生的重要基础，并增加肿瘤细胞对放疗和化疗的抵抗性。本试验以脂质体为载体，对ｂｃｌ２ｍＲＮＡ翻译起始部位的反义寡核苷酸导入小细胞肺癌（ＳＣＬＣ）细胞，探讨其对ＳＣＬＣ细胞ｂｃ...     

Bcl-2反义RNA对人多发性骨髓瘤凋亡影响的研究

目的　探讨 bcl- 2反义 RNA对人多发性骨髓瘤内源性Bcl- 2蛋白水平及细胞调亡的影响 ,以期为转基因治疗人多发性骨髓瘤提供实验依据。　方法　利用 DNA重组技术 ,构建反义 bcl- 2逆转录病毒表达载体 ,并将其导入人多发性骨髓瘤细胞株 U2 6 6细胞。通过 RT- PCR检测 bcl- 2反义RNA是否导入了细胞 ,应用 Western Blot检测内源性 Bcl- 2蛋白表达的改变 ,应用形态学、流式细胞术、片段化 DNA电泳及定量分析和 TUNEL 法检测靶细胞的凋亡。　结果　(1)成功地构建了反义 bcl- 2逆转录病毒载体 ,获得的重组病毒上清滴度为 4.5 X10 5 CF…     

细胞凋亡与bcl—2基因

细胞凋亡(apoptosis)是机体为了维持自身稳定所采取的一种主动、积极的死亡方式.     

转染pcDNA3-hCEA的人树突状细胞对MGC803细胞的作用

目的：观察转染含人癌胚抗原（CEA）真核表达质粒pcDNA3-hCEA的人树突状细胞（DC）对胃癌细胞MGC803的抑制作用.方法：采用细胞因子rhIL-4和rhGM-CSF诱导培养法制备人外周血DC并用Lipofectamine向人DC转染pcDNA3-hCEA.RT-PCR检测转染细胞hCEA的表达,观察DC-hCEA细胞诱导的致敏的T淋巴细胞（CTL）对胃癌细胞MGC803的杀伤效应.结果：DC-hCEA诱导的CTL对胃癌细胞MGC803的杀伤效应强于DC（P＜0.05）.结论：编码CEA基因的真核表达质粒转染的人DC能够诱导较强的特异性抗肿瘤免疫效应.     

抗凋亡基因bcl—2在早期胃癌和癌前病变中的表达

应用免疫组化ＳＰ法对３２例早期胃癌及癌旁粘膜和２４例慢性萎缩性胃炎中ｂｃｌ－２的表达同时进行检测，结果癌旁和慢性萎缩性胃炎中不典型增生、单纯增生、腺体扩张和癌旁肠化均显示ｂｃｌ－２高这，与癌无显著差异，应视作癌前病变。     

bcl—2 mRNA反义寡核苷酸对胃癌SGC—7901细胞端粒酶活性的影响

目的 探讨bcl-2反义寡核苷酸（antisense phosphorothioate oligodeoxynucleotide,ASODN)对胃癌SGC－7901细胞端粒酶活性的影响。方法 应用脂质体瞬时转染法介导bcl-2反义寡核苷酸,处理人胃癌细胞系SGC－7901后,分别采用Northern blot、Western blot检测bcl-2 mRNA、蛋白表达,用端粒微孔板杂交法检测端粒酶活性。结果 bcl-2 ASODN处理的胃癌SGC－7901细胞端粒酶活性明显受到抑制,并与ASODN的浓度和处理时间有关。结论 bcl-2反义寡核苷酸可抑制胃癌细胞端粒酶活性。     

三氧化二砷诱导人胃癌细胞株MGC—803细胞凋亡的研究

为探讨三氧化二砷对胃癌细胞的作用及可能的机制。用不同浓度的Ａｓ２Ｏ３作用于增减的胃癌细胞株ＭＧＣ－８０３细胞。噻唑蓝细胞活力测定显示Ａｓ２Ｏ３能明显抑制ＭＧＣ－８０３细胞生长；     

儿茶素单体EGCG体外诱导胃癌MGC—803细胞凋亡的研究

目的：探讨表没食子儿茶素酸酯（Epigallatechin—3—gallate,EGCG）体外诱导胃癌MGC—803细胞凋亡作用。方法：以不同浓度EGCG分别处理MGC—803细胞,用琼脂糖凝胶电泳、荧光显微镜、MTT法观察MGC—803细胞DNA带型、形态和抑制率的变化。结果：琼脂糖凝胶电泳呈典型的DNA“梯状带”,高浓度EGCG（1×10-3M）作用33小时后DNA呈弥散的“膜状带”。荧光显微镜下可见细胞出现染色质浓缩、胞膜吐泡等凋亡现象。MTT法测定不同浓度EGCG对MGC—803细胞生长有明显抑制。结论：EGCG有明显的诱导胃癌MGC—803细胞凋亡作用,高浓度EGCG直接导致细胞坏死。     

Bcl－2和反义bcl－2逆转录病毒表达载体的构建与鉴定

Ｂｃｌ－２和反义ｂｃｌ－２逆转录病毒表达载体的构建与鉴定朱峰，金明，惠宏襄，赵永同，王成济（生物化学及分子生物学教研室西安７１００３３）关键词细胞凋亡；ｂｃｌ－２基因；逆转录病毒载体中图号Ｒ７５３为了研究ｂｃｌ－２与肿瘤细胞的关系，我们构建了正义和反...     

抗细胞凋亡基因bcl—2及其在肿瘤研究中的应用

ｂｃｌ－２（Ｂｃｅｌｌｙｍｐｈｏｍａ－２，ｂｃｌ－２）基因是从滤泡性淋巴瘤相关的ｔ（１４；１８）染色体易位的断裂点部位克隆出的一种原癌基因〔１〕。随着对ｂｃｌ－２基因的深入研究，人们发现ｂｃｌ－２并没有促进细胞增殖的能力，但它却能阻止细胞的凋亡，同时...     

bcl—2反义RNA对白血病细胞株程序化死亡的调变

探讨内源性ｂｃｌ－２蛋白水平降低对白血病细胞程序化死亡的调变。方法采用基因转染技术，观察ｂｃｌ－２反义ＲＮＡ介导的靶基因抑制，对足叶乙甙诱发人Ｔ淋巴细胞白血病细胞株程序化死亡的影响。     

大鼠胃黏膜癌变过程细胞凋亡及相关癌基因bcl—2、c—myc的动态表达

目的：探讨大鼠胃黏膜癌变发生发展过程中细胞凋亡及其相关基因的关系。方法：采用MNNG,10％NaCl及酒精灌胃建立了大鼠胃黏膜癌变模型,设立正常空白组,模型组,分别用TUNEL,原位杂交技术及免疫组化大鼠检测胃黏膜细胞凋亡指数,bcl-2,c-myc基因表达。结果：本造模方法成功率较高。从正常胃黏膜到胃癌,细胞凋亡指数逐渐下降,bcl-2,c-myc基因表达逐渐增高,大鼠胃黏膜细胞凋亡受到抑制与bcl-2,c-myc基因高表达具有高度的一致性,结论：细胞凋亡失控是胃黏膜癌变发生发展的机制之一,bcl-2,c-myc基因可能参与了对大鼠胃黏膜癌变细胞凋亡的调控。     

逆转录病毒载体介导的bcl-2反义RNA促进胃癌MGC-803细胞凋亡

bcl-2是Tsujimoto在Ⅱ型B细胞淋巴瘤中发现的一种基因,其过度表达能抑制撤退生长因子、射线、热休克、化疗药物、病毒及促凋亡基因等多种因素诱导的细胞凋亡 .bcl-2蛋白高表达赋予肿瘤细胞对多种化疗药物的抗性,导致化疗失败或复发.逆转bcl -2的表达可能提高化疗效果.我们将bcl-2的编码序列反向插入逆转录病毒表达载体中并转导实体瘤胃癌细胞株MGC-803,观察bcl-2反义序列对实体瘤肿瘤细胞的作用.     

TGF—β1在肾癌中的表达及与细胞凋亡和凋亡抑制基因bcl—2 …

目的：阐明ＴＧＦ－β１在肾癌中的作用机理。方法：应用免疫组化结合微波抗原修复和流式细胞技术，对５２例肾癌及１４例癌旁正常组织的凋亡率及ＴＧＦ－β１，ｂｃｌ－２的表达进行了定性，定量的测定，并就它们的相关性进行了分析。     

足叶乙甙诱导HL—60细胞凋亡及其bcl—2基因表达

目的：研究ＨＬ－６０细胞在足叶乙甙诱导的细胞凋亡中ｂｃｌ－２基因表达，以说明药物致凋亡的分子机制。方法：采用细胞存活率，形态改变，ＤＮＡ梯形片段分析和原位缺口标记法，分析药物引起的细胞凋亡，以细胞原位杂交和免疫组化分析ｂｃｌ－２ ｍＲＮＡ及其蛋白的表达水平。