LC-MS测定大鼠血浆中五味子的3个木脂素成分及其药动学研究

目的 建立测定大鼠血浆中五味子醇甲、五味子甲素与五味子乙素浓度的LC-MS法,并探讨其在大鼠体内的药代动力学过程.方法 SD大鼠6只,按5 mg·g-1剂量ig给予五味子醇提液,以睾丸酮为内标,血浆样品经甲醇沉淀蛋白后,采用LC-MS法测定不同时间点大鼠血浆中的五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素的浓度,对其血药浓度-时间采用DAS 1.0软件拟合,计算其药动学参数.结果 大鼠血浆样品中,五味子醇甲、五味子甲素与五味子乙素的线性范围分别为0.114～3.66 mg·L-1 (r=0.9994)、0.0299～0.995 mg·L-1 (r=0.9992)和0.0251～0.803 mg·L-1 (r=0.9991),提取回收率为83.12%～103.48%,日内与日间精密度均≤14.00%,Cmax分别为(0.54±0.07)、(0.23±0.07)和(0.40±0.04) mg·L-1,Tmax分别为(4.67±0.26)、(4.33±0.26)和(4.08±0.20) h,T12分别为(1.95±0.26)、(8.30±3.36)和(6.46±3.82) h.结论 本法专属性强,灵敏度高,快速准确,可作为大鼠血浆中五味子醇甲、五味子甲素与五味子乙素的同时检测及其药动学研究.     

LC-ESI-MS法测定人血浆中紫杉醇的浓度及其在药代动力学中的应用(英文)

建立了一种灵敏度高、特异性好的高效液相色谱-电喷雾质谱法 (LC-ESI-MS) 测定人血浆中紫杉醇浓度的方法。采用一步液液萃取法进行血浆样品预处理, 提取液为甲基叔丁基醚, 内标选用炔诺酮。色谱柱为Zorbax SB-C18 柱 (100 mm×2.1 mm, 3.5 μm, Agilent), 流动相为甲醇-0.2 mmol/L甲酸铵缓冲盐溶液 (包含0.1%甲酸), 采用梯度洗脱。选择离子监测 (SIM) 的目标离子为紫杉醇的[M+Na]+ m/z 876.5和内标的[M+H]+ m/z 299.4。方法学验证表明线性范围是1.0-400 ng/mL (r>0.998), 最低定量限为1.0 ng/mL, 方法的批内和批间精密度都小于9.0%, 准确度在6.8%以内。此方法已成功应用于紫杉醇脂质体注射液在患者体内的药动学研究。     

HPLC-MS/MS法考察水黄皮素在SD大鼠体内的药代动力学特征

目的：建立大鼠血浆中水黄皮素的定量分析方法,并对其药代动力学进行研究。方法：通过灌胃给予SD大鼠水黄皮素(10 mg·kg^-1),血浆样品经蛋白沉淀法处理后进行HPLC-MS/MS定量分析,以五味子醇甲为内标,采用Agilent Poroshell 120 EC-C₁₈(50 mm×3.0 mm,2.7μm)色谱柱,乙腈(A)-0.1%甲酸溶液(B)为流动相,流速0.3 mL·min^-1,梯度洗脱;采用电喷雾离子源(ESI),正离子多反应监测模式(MRM)扫描,水黄皮素[M+H]⁺m/z 293.1→277.0,五味子醇甲[M+H]⁺m/z433.2→384.2;使用DAS软件计算相关药代动力学参数。结果：在1.5625～1600 ng·mL^-1浓度范围内,水黄皮素线性关系良好(r=0.9997),定量下限为1.5625 ng·mL^-1,精密度RSD和准确度RE均小于20%;低、中、高质控样品精密度RSD和准确度RE均小于15%,提取...     

人参五味子颗粒与五味子稠膏中五味子醇甲在大鼠体内的药动学研究

目的建立高效液相色谱法测定大鼠血浆中的五味子醇甲,考察人参五味子颗粒与五味子稠膏中的五味子醇甲在大鼠体内的药动学差别。方法大鼠分别灌胃给予相当于五味子醇甲49．6mg／kg的五味子稠膏和人参五味子颗粒,血样用HPLC分析。采用C18色谱柱,甲醇-水（67：33）为流动相,检测波长250nm。结果五味子醇甲血浆浓度在0．22～27．00μg／mL之间线性关系良好,低、中、高浓度样品回收率分别为64．3％,70．2％和68．7％。大鼠灌胃五味子稠膏和人参五味子颗粒后的主要药动学参数分别为AUCo-t（26．67）和（30．77）mg／（h·L）,AUCo-∞（29．44）和（41．64）mg／（h·L）,tmax（0．86）和（0．83）,Cmax（11．19）和（12．94）,药一时曲线均符合二房室模型。结论五味子醇甲在大鼠体内药动学的研对中药复方制剂的药物动力学研究探索有一定进展。     

LC-IT-MS/MS法测定大鼠体内商陆皂苷甲浓度及其药动学研究

目的:建立测定SD大鼠体内商陆皂苷甲(EsA)血药浓度的高效液相-离子阱串联质谱方法;研究EsA在SD大鼠体内的药动学特征。方法:采用Diamonsil C18色谱柱(50 mm×2.1 mm,3μm),流动相为甲醇-水(含0.1%冰醋酸)(70∶30),流速为0.2 mL.min-1,采用ESI源,正离子检测模式,以人参皂苷Rg1为内标,血浆样品经正丁醇液液萃取后进样分析,测定大鼠血浆中EsA浓度,BAPP软件计算主要药动学参数。结果:在选定的色谱条件下,EsA和内标分离良好,没有内源性物质干扰。EsA在5～500 ng.mL-1范围内线性良好(r=0.998 3),最低定量限为5 ng.mL-1,提取回收率大于70%,日内和日间精密度小于10%。SD大鼠灌胃给予EsA 15 mg.kg-1后,其主要药动学参数AUC0～24 h为(1 013.85±82.73)ng.h.mL-1,AUC0-∞为(1 076.31±92.70)ng.h.mL-1,t1/2为(6.16±0.63)h,Cmax为(218.80±38.33)ng.mL-1,Tmax为(0.8±0.1)h。结论:本方法简便快捷、灵敏准确;本研究所获得的EsA在SD大鼠体内的药动学参数为EsA的临床应用提供了依据。     

HPLC-MS/MS法测定人体血浆中吲哒帕胺的浓度

目的:建立一种简便、灵敏的测定人体血浆中吲哒帕胺浓度的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)方法。方法:以瑞格列奈钙为内标,采用乙腈:0.1%甲酸水溶液=90∶10为流动相,以Agilent-ZORBAX-C18柱(2.1mm×150mm,5.0m)色谱柱为分析柱,通过电喷雾离子源(ESI),以正离子多反应监测(MRM)方式进行进样检测。检测离子为[M+H]+m/z 364.1m/z 188.8(吲哒帕胺)和[M+H]+m/z 451.1m/z 134.8(瑞格列奈钙,内标)。结果:吲哒帕胺线性范围为0.5～50ng/mL,定量下限为0.5ng/mL,线性关系良好;高、中、低三个浓度的日内、日间的RSD均<15%,平均回收率为94.60%～110.33%。结论:本方法专属性强,操作简便,灵敏度高,适用于吲哒帕胺制剂的临床药动学研究。     

HPLC-ESI-MS联用法测定大鼠血浆中KJY-01浓度及其药动学研究

目的 建立测定KJY-01大鼠血浆中药物浓度的高效液相色谱-电喷雾离子化-质谱(HPLC-ESI-MS)联用的分析方法,对其进行大鼠体内的药动学研究.方法 取大鼠血浆50μL,加入内标酮康唑,用甲醇提取后取上清液吹干,用80%甲醇100μL溶解,取2μL进行HPLC-MS测定.色谱柱为Agilent ZORBAX Eclipse plus C18(150mm×2.1mm,5μm),流动相为20mmol醋酸铵(甲酸调节PH为3.75):甲醇(含1‰的甲酸)=22:78,流速为0.25mL/min,采用选择离子检测(SIM)法检测SQ109(m/z=331.3),KJY-01(m/z=475.4),酮康唑(内标,m/z=531.2).结果 SQ109的血药浓度在10～5000ng/mL范围内线性关系良好,最低检测限为10ng/mL,以质控样品计算,在各浓度水平下,此法的回收率均大于80%,日间和日内精密度小于20%,符合生物样品分析要求.结论 该方法操作简便、快速、灵敏、专属性强,可用于KJY-01的大鼠体内大批量样品定量分析及早期药动学研究.     

高效液相色谱法测定人参蜂王浆口服液中五味子木脂素成分的含量

目的建立人参蜂王浆口服液中五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素三种五味子木脂素成分含量测定的高效液相色谱法。方法样品超声提取后,滤过,取续滤液,采用高效液相色谱法测定。色谱柱为依利特Hy-persi ODS2(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-水为流动相进行梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,检测波长为254 nm。结果五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素分别在0.045 4～11.35,0.049 3～12.33,0.055 3～13.82μg/mL浓度范围内与峰面积呈良好线性关系;平均加样回收率依次为96.4%,100.1%和106.1%;RSD(n=9)依次为3.7%,2.7%和2.3%。精密度和重复性良好。结论所建立的方法准确、简便,适用于人参蜂王浆口服液中五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素的含量测定。     

大鼠血浆五味子甲素、乙素、醇甲和酯甲高效液相色谱串联质谱测定方法的建立

目的：建立大鼠血浆中五味子甲素、乙素、醇甲和酯甲的高效液相色谱串联质谱（LC-MS／MS）分析方法，为五味子提取物中四种主要成分的药代动力学研究提供理想的测定手段。方法：采用高效液相色谱串联线性离子阱质谱同时检测五味子提取物中四种主要成分，采用电喷雾（ESI）离子源，多反应监测模式（MRM）进行检测。色谱柱为ZORBAX SB-C18（2．1×100mm，3．5μm），流动相为甲醇-水（75：25，0．1％甲酸），流速为0．2mL／min。双环醇（BY）为内标（IS），血浆样品经甲醇沉淀、高速离心后进样分析，各成分监测离子分别为：甲素m／z 439→393，乙素m／z 423→377，醇甲m／z 455→409，酯甲m／z 559→437，BYm／z 413→399。结果：五味子甲素、醇甲、乙素、酯甲在0．01～2．0μg／mL的浓度范围内线性关系良好，，最低定量限为0．01～0．02／mL，R2〉0．99。五味子四种成分的日内和日间精密度RSD均〈15％，绝对回收率〉80％。结论：本研究成功建立了大鼠血浆中五味子甲素、乙素、醇甲和酯甲的高效液相色谱串联质谱定量方法，该方法专属性强、快速、灵敏、可靠，可满足五味子提取物中四种主要成分药代动力学研究的要求。     

液质联用方法对海狗油大鼠药物动力学的初步研究

目的:应用LC/APCI-MS法检测大鼠血浆中海狗油的二十碳五烯酸(EPA)、二十二碳六烯酸(DHA)、二十二碳五烯酸(DPA)3个主要成分,为其药动学研究提供灵敏、准确和实用的方法。方法:取血浆样品0.1 mL经甲醇-正己烷(1∶1)沉淀蛋白并萃取后,氮气吹干后进行柱前转酯化衍生,采用Waters C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm)分离,以乙腈-水(9∶1)为流动相,流速0.3 mL·min-1,检测波长210 nm,柱温40℃。通过大气压化学电离四极杆质谱,以选择离子监测(SIM)方式进行检测。用于定量分析的EPA甲酯(EPAM)、DHA甲酯(DHAM)、DPA甲酯(DPAM)、十九碳二烯酸甲酯(内标物)的m/z分别为317.30[M+H]+、343.30[M+H]+、345.30[M+H]+、309.20[M+H]+。结果:EPAM、DHAM和DPAM的线性范围均为50～10000 ng.mL-1,定量限为50 ng.mL-1,日内、日间RSD均小于6.6%。对海狗油的大鼠药物动力学初步研究结果表明,EPA、DHA和DPA在连续给药第10 d达到稳态浓度,且时间与给药剂量之间没有关联性;大鼠血浆中EPA、DHA和DPA稳态浓度的高低与给药剂量正相关。结论:该法快速灵敏,准确度高,适用于大鼠体内EPA、DHA、DPA的药动学研究。     

HPLC—MS／MS测定人体血浆和尿液中帕洛诺司琼的浓度

目的建立一种简便、灵敏的测定人体血浆和尿液中帕洛诺司琼浓度的高效液相色谱一串联质谱（HPLC-MS／MS）方法。方法血浆、尿液样品分别采用甲醇沉淀处理后,选样分析。采用Agilent-ZORBAX-C18色谱柱（2．1mm×50mm,5fμm）．以乙腈-0．1％甲酸溶液为流动相,采用正离子,多反应监测方式测定样品浓度。用于定量分析的检测离子质荷电（m／z）297．2→m/z110．1（帕洛诺司琼）和DI／Z285．0→M／z193．0（内标）。结果帕洛诺司琼血浆样品在0．02～10ng·mL^-1与峰面积线性关系良好（r=0．9975）;定量下限（LLOQ）为0．02ng·L^-1;日内与日间RSD均〈10％;回收率在89．6％～114．0％。尿样在2．5～100ng·mL^-1与峰面积线性关系良好,7—0．9974;定量下限（LLOQ）为2．5ng·mL^-1;日内与日间RSD均〈10％;回收率在96．4％～113．4％。结论本方法简便快速、灵敏准确,适用于帕洛诺司琼在人体体内的药物动力学研究。     

HPLC-MS/MS法测定人血浆中雷喏嗪的质量浓度

目的建立HPLC-MS/MS法测定人血浆中雷喏嗪的质量浓度。方法以伏立康唑为内标,采用乙腈-体积分数0.1%甲酸水溶液(90∶10)为流动相,以Agilent-ZORBAX-C18柱(150 mm×2.1 mm,5.0μm)色谱柱为分析柱,通过电喷雾离子源(ESI),以正离子多反应监测(MRM)方式进行检测。雷喏嗪和伏立康唑用于定量分析的离子对分别为[M+H]+m/z428.5→m/z279.3和[M+H]+m/z350.2→m/z281.3。结果雷喏嗪线性范围为20~5 000 ng·mL-1,定量下限为20 ng·mL-1。日内和日间的RSD均小于15%,平均回收率大于75%。结论该方法专属性强,样品处理方便,灵敏度高,适用于雷喏嗪的临床药动学研究。     

HPLC-MS/MS同时测定人血浆中对乙酰氨基酚和咖啡因含量的方法学研究

目的建立同时测定人血浆中对乙酰氨基酚和咖啡因浓度的HPLC-MS/MS法。方法以茶碱为内标,血浆样品用甲醇沉淀蛋白后直接进样。用Waters symmetry C18（150 mm×4.6 mm,5μm）为分析柱,甲醇-0.2%醋酸=35∶65（v/v）为流动相,流速为0.9 mL·min^-1,采用柱后分流,0.2 mL·min^-1进入质谱,柱温35℃。选择监测的离子为m/z152.1→109.9（对乙酰氨基酚）、m/z195.3→138.1（咖啡因）和m/z181.1→123.9（茶碱）。结果血浆中对乙酰氨基酚和咖啡因的线性范围分别为0.02-4.04μg·mL^-1,5.05~1 010 ng·mL^-1;日内日间精密度RSD均〈7.94%。结论本方法专属性强,灵敏度高,操作简便、快速,符合生物样品分析要求,适用于临床药动学研究。     

LC-MS法检测大鼠血中甲苯磺丁脲含量

目的建立用LC-MS法检测大鼠血中的甲苯磺丁脲的方法。方法 Agilent Zoxbax SB-C18色谱柱,30℃柱温;流动相:0.1%甲酸溶液和乙腈梯度洗脱,流速为0.4 mL·min-1。使用SIM测定甲苯磺丁脲,卡马西平(内标)m/z 237,采用峰面积法定量。结果甲苯磺丁脲在10～1000ng·mL-1浓度范围内线性关系良好(r=0.9988)。日内精密度RSD和日间精密度RSD均小于8%,回收率均大于80%。结论本方法灵敏度高、专属性强,且操作简单,达到生物样本分析的要求。     

RP—HPLC法测定人血浆中洛沙平浓度

目的建立测定人血浆中洛沙平浓度的高效液相色谱法。方法以Diamonsil TM C18反相柱（150m×4．6mm,5μm）为色谱柱,流动相为0．03mol·L^-1醋酸铵．甲醇（21：79）;流速：0.8mL·min^-1;柱温：40℃;检测波长：256nm。以乙酸乙酯为提取剂。结果洛沙平的高、中、低（1000．0．500．0。10．0ng·mL^-1）3种浓度平均回收率分别为99．75％、98．94％、101．93％,日内、日间差RSD均低于7％（n=5）;分析方法的最低检测限为5．0ng·mL^-1;线性范围为10．0—1000．0ng·mL^-1。曲线方程：Y=83．52X-3．65,r=0．9995（n=10）。结论该方法灵敏、准确、简单、快速,可用于临床血药浓度监测和药动学研究。     

UPLC-MS/MS法同时测定人血浆中卡马西平、拉莫三嗪、氯硝西泮、地西泮及其代谢物奥沙西泮浓度

目的 建立同时测定人血浆中卡马西平、拉莫三嗪、氯硝西泮、地西泮及其代谢物奥沙西泮浓度的方法。方法 采用超高效液相色谱-质谱联用法（UPLC-MS/MS）,以磺胺甲噁唑（SMZ）为内标,血浆经甲醇直接沉淀后进样分析。色谱柱为WatersACQUITYUPLCHSSPFP柱（2.1mm×100mm,1.8μm）,流动相为0.1%甲酸的5mmol·L1乙酸铵水溶液-0.1%甲酸的甲醇溶液（0~5min,35∶65→10∶90）,流速为0.2mL·min1。电喷雾离子源,正离子多反应监测扫描分析,卡马西平、拉莫三嗪、氯硝西泮、地西泮和奥沙西泮的离子对分别为m/z237.0→194.06、m/z255.98→144.95、m/z316.01→270.0、m/z285.04→193.07和m/z287.02→241;内标磺胺甲噁唑的离子对为m/z253.96→91.97。结果 卡马西平、拉莫三嗪、氯硝西泮、地西泮和奥沙西泮血药浓度分别在2.4~600ng·mL1（r=0.9997）,2.52~630ng·mL1（r=0.9920）,2.08~520ng·mL1（r=0.9979）,2.28~570ng·mL1（r=0.9982）,8.0~800ng·mL1（r=0.9992）线性关系良好;最低检出限分别为0.24,0.63,0.52,0.57,3.2ng·mL1。日内、日间精密度均〈15%;提取回收率均〉70%,且RSD〈15%。结论 该方法灵敏、快速、专属性强,可用于临床血药浓度测定及药动学研究。     

LC-MS/MS法测定人血浆中甲磺酸雷沙吉兰片浓度及其药动学研究

目的:建立测定人血浆中甲磺酸雷沙吉兰的液相色谱-串联质谱色谱法（LC-MS/MS）,研究甲磺酸雷沙吉兰在健康人体内的药物动力学特征。方法:采用LC-MS/MS测定人血浆中甲磺酸雷沙吉兰浓度,选择监测的离子为m/z 172→117.15（甲磺酸雷沙吉兰）和m/z 340.1→324.1（罂粟碱）。色谱柱为Inertsil ODS-3色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）;流动相:甲醇-（0.2%醋酸胺+0.25%氨水）（85:15）。结果:雷沙吉兰在0.010～40 ng·ml^-1浓度范围内呈良好的线性关系（r=0.999 5）,最低检测浓度为0.010 ng·ml^-1,应用此法测得0.5、1.0、2.0 mg剂量组不同给药方式、多个时间点的雷沙吉兰血药浓度,结果呈线性动力学特征。结论:该方法灵敏度高、专属性强、准确、简便,适用于甲磺酸雷沙吉兰片的人体药动学研究。     

HPLC-MS/MS测定人血浆中妥舒沙星的浓度

目的 建立快速、灵敏测定人体血浆中妥舒沙星浓度的高效液相色谱-串联质谱方法。方法 采用Agilent EclipsePlus C18色谱柱（4.6 mm×150 mm,3.5μm）,乙腈（含0.1%甲酸）-5 mmol.L 1甲酸铵水溶液（36∶64）为流动相等度洗脱,流速为0.5 mL.min 1,柱温40℃。采用多重反应监测（MRM）对妥舒沙星（m/z 405.2→387.2）和内标环丙沙星（m/z 332.2→314.2）的测定。结果 妥舒沙星的线性范围为6-2 000 ng.mL 1,回归方程为y=0.183 5x＋1.461 9×10 4,r=0.996 2,最低定量下限为6 ng.mL 1（S/N〉5）,日内、日间RSD均〈10%,高（1 800 ng.mL 1）、中（750 ng.mL 1）、低（15 ng.mL 1）浓度标准血样的平均回收率分别为97.5%,103.3%,105.9%。结论 该方法灵敏、准确、简单、快速,可用于妥舒沙星的临床血药浓度监测和药动学研究。     

超高效液相色谱-紫外/串联质谱法检测药品中非法添加的邻苯二甲酸二异癸酯

目的：建立超高效液相色谱-紫外/串联四极杆质谱法检测药品中非法添加的邻苯二甲酸二异癸酯（DIDP）。方法：色谱柱为ACQUITY UPLC~（TM）BEH C_8（50 mm×2.1mm,1.7μm）,以甲醇（A）-0.1%甲酸（B）为流动相,梯度洗脱分离,紫外检测波长254 nm;同时采用串联四极杆质谱,电喷雾正离子扫描和多反应监测模式检测。结果：超高效液相-串联四极杆质谱法,DIDP被准确定性,定性离子对（m/z）为447.6/148.9和447.6/307.2。超高效液相-紫外法,DIDP的检测限为0.4 ng;在0.6~5.0μg·ml~（-1）质量浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系,r=0.999 4;回收率为100.2%（RSD=4.8%）。结论：该方法专属、灵敏、测定结果准确,可用于定性、定量检测药品中非法添加的DIDP。