灵芝菌液体深层培养的研究

本文研究了培养基成分及摇瓶发酵条件对灵芝菌丝体生长的影响,进行了 100 L气升环流式生物反应器的扩大试验。研究表明,无机盐KH_2PO_4和MgSO_4·7H_20对生长有影响,其最适浓度分别为0.1％和0.025％.麸皮、玉米粉和葡萄糖对菌丝体生长都有显著的作用。在摇瓶培养中,菌丝体易形成菌丝球,其大小随振荡速度而变化。将菌丝球用玻璃球打碎制成的匀浆种比直接用菌丝球接种获得的产量高。 100 L气升环流式生物反应器培养结果表明,以较皮为培养基的氛源,5d菌丝体干重为5～6g/L;以豆粉为培养基的氮源,5d菌体干重可达7～8g/L。     

LTK63粘膜佐剂与脱乙酰壳多糖释放系统联用能提高鼻腔免疫疫苗的免疫原性

大肠杆菌肠毒素 ( LT)是一种潜在的粘膜佐剂 ,经定位诱变可获得无毒性突变体 LTK63。表面带正电的脱乙酰壳多糖微粒可以吸附带负电的 LTK63和无毒性白喉毒素突变体 CRM1 97。意大利 Chiron分公司 Baudner评价了 C群脑膜炎球菌结合疫苗( CRM- Men C)鼻内免疫小鼠时 ,脱乙酰壳多糖微粒和粘膜佐剂 LTK63对免疫应答的影响。　　疫苗经鼻腔免疫或皮下注射方式于 0、2 1和 35天免疫小鼠 3次。每剂疫苗含 2 .5μg Men C寡糖、5μg CRM1 97载体蛋白、1μg LTK63或 2 0μg脱乙酰壳多糖微粒。在适宜浓度下 ,Men C结合疫苗单独或与 LTK63…     

小鼠口服和鼻腔接种脱乙酰壳多糖微粒预防白喉的效力研究

本文研究了小鼠口服和鼻腔接种脱乙酰壳多糖微粒后能否增强对白喉类毒素 ( DT)的全身和局部免疫应答。　　 6周龄的雌性 BALB/c小鼠分别口服和鼻腔接种含 DT的脱乙酰壳多糖微粒 ( DT/CSmp)、白喉类毒素磷酸盐缓冲盐水 ( DT/PBS)和空的脱乙酰壳多糖微粒 (阴性对照 ) ,同时设立阳性对照组 ,即皮下注射明矾吸附的 DT( DT/Alum)。另外 ,给小鼠接种不同剂量的 DT/CSmp来观察剂量依赖性应答。所有小鼠均于第 1、3周接种 ,第 4周采集血液、粪便和鼻粘膜冲洗液 ,用 ELISA检测血清DT特异性 Ig G和鼻粘膜冲洗液、粪便 DT特异性 Ig A滴…     

抗原吸载多孔脱乙酰壳多糖微球的制备和体外释放研究

为了降低传染病的死亡率,急需一种改进的疫苗递送方法,以减少给药次数而起到长期保护作用。关于可生物降解聚合物和脂质体作为疫苗控释载体的研究较多。理想的疫苗控释制剂应一次性给药产生抗体反应,达到长久的作用。本研究以可生物降解的脱乙酰壳多糖为材料,制备多孔微球,作为新城病(ND)疫苗的吸附载体。以控制ND疫苗的释放。将3g脱乙酰壳多糖溶解于1%醋酸液100mL中,然后经喷嘴滴入10%三聚磷酸钠(TPP)水溶液,将形成的脱乙酰壳多糖微球维持1h后,用去离子水洗涤,然后在水中用5%乙二醇二甘油酯(EGDE)将微球的葡萄糖残基进行化学交联12h。…     

反相高效液相色谱法测定复方氨基酸注射液中的乙酰半胱氨酸和乙酰酪氨酸

目的建立一种等度洗脱反相高效液相色谱法测定复方氨基酸注射液中的N 乙酰 L 半胱氨酸和N 乙酰 L 酪氨酸。方法KromasilC1 8柱 (2 0 0mm× 4 .6mm ,5 μm) ,流动相为 2 0mmol L磷酸二氢钠溶液 (用 5 0 %H3PO4 溶液调pH 2 .5 ) 乙腈 (94∶6 ) ,流速为 1.0ml min ,进样量 10 μl,检测波长 2 10nm。 结果N 乙酰 L 半胱氨酸和N 乙酰 L 酪氨酸均在 6 0～ 14 0 μg ml浓度范围内呈良好的线性关系 (r=0 .9999) ,平均回收率分别为 10 2 .2 %、99.9% ,RSD(n =9)分别为 0 .6 %、0 .5 %。结论此法简便实用 ,有较好的精密度和准确度     

口服脱乙酰壳多糖缓释小珠和微粒的体外释药行为

口服缓释给药系统易受胃肠道的生理状态影响 ,药物释放存在着许多易变因素。本研究以生物半衰期短、胃肠道副作用大的非甾体类抗炎药双氯芬酸钠 ( DFS)为模型药物 ,采用无毒、易吸收的天然脱乙酰壳多糖为主要聚合物材料将其制成口服缓释小珠和微粒 ,探讨其体外释药特性 ,为口服缓释给药系统释药速率的平稳调控提供设计思路。室温下连续搅拌 3h,使 0 .5g纯化的脱乙酰壳多糖溶于 36.71 5g的 2 %醋酸中 ,加入 0 .1 g甘氨酸 ,搅拌混匀 ,以注射器将上述混合液滴入不断搅拌的氢氧化钠 -甲醇液中 ,将形成的小珠置于含有约1 1 .0 6g戊二醛水溶液中…     

252例健康人凝血参数参考范围调查分析

目的:探讨本地区人群凝血参数参考范围。方法:选择本地区5岁～70岁健康人2 5 2名,分成4个年龄段(5岁～17岁、18岁～2 9岁、30岁～5 9岁、6 0岁以上) ,分别用梅里埃血凝仪及其配套试剂进行测定其凝血酶原时间(PT)及其国际标准化比值(NIR)、活化部分凝血酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原浓度(Fib)。结果:PT、APTT、TT、与年龄、性别有关(P >0 .0 5 ) ,其正常参考范围分别是:11s～13s、2 5s～37s、12s～18s;Fib与年龄、性别无关(P <0 .0 5 ) ,随着年龄增长而增高,儿童及少年青春期较低,6 0岁以上老年人明显增高,女性高于男性,其参考范围为<6 0岁(男) 1.6 g/L、(女) 1.7g/L～4 .2 g/L ;>6 0岁(男) 1.9g/L～4 .3g/L、(女) 2 .1g/L～4 .6 g/L。结论:调查结果与国内文献报道相近,可作为本地区正常人群的参考范围     

脱乙酰壳多糖作为药用辅料的研究进展

脱乙酰壳多糖(chitosan)是20世纪70年代开始研究的药用辅料，它在人体内易生物降解，无皮肤和眼粘膜刺激性，生物相容性好，是目前公认很有发展前途的天然高分子化合物。由于脱乙酰壳多糖独特的性质，在药剂学中日益被广泛应用和研究，本文就其在药剂学中的应用作一综述。 1 来源 脱乙酰壳多糖是壳多糖在碱性条件下去乙酰基后的产物。壳多糖来源于昆虫、甲壳类动物的外骨骼和动物的细胞壁。在虾壳等软壳中含壳多糖15～30％，蟹壳等硬壳中含壳多糖15～20％。     

用聚磷酸钠-脱乙酰壳多糖包衣制备茶碱的控释颗粒

茶碱的有效血浓度的上下限较窄,分别为20μg/ml及10μg/ml,为了避免血浓度波动太大已研制出许多茶碱的缓释剂型。本文主要介绍用聚磷酸钠及脱乙酰壳多糖(Chitosan)制备茶碱的控释颗粒。取茶碱20g与聚磷酸钠10、14或20g分散于醋酸乙酯200ml中,加入22～28ml水,以500r/min速度搅拌得凝聚颗粒。分离,     

脱乙酰多糖作为药用辅料的研究进展

脱乙酰壳多糖(chitosan)是20世纪70年代开始研究的药用辅料,它在人体内易生物降解,无皮肤和眼粘膜刺激性,生物相容性好,是目前公认很有发展前途的天然高分子化合物。由于脱乙酰壳多糖独特的性质,在药剂学中日益被广泛应用和研究,本文就其在药剂学中的应用作一综述。1　来源脱乙酰壳多糖是壳多糖在碱性条件下去乙酰基后的产物。壳多糖来源于昆虫、甲壳类动物的外骨骼和动物的细胞壁。在虾壳等软壳中含壳多糖15～30%,蟹壳等硬壳中含壳多糖15～20%。2　性质脱乙酰壳多糖是2-氨基-2-去氧-D-葡萄糖为基本单元,通过β-1.4糖甙键连接而成的线性多…     

一株扩展青霉生长特性及展青霉素生物合成的研究

扩展青霉是侵染食品、水果及中药材并产生展青霉素的主要产毒菌株。文章采用正交试验法考察了碳氮源、金属元素以及不同的发酵条件对扩展青霉生长及展青霉素生物合成的影响,结果表明,有利于该菌生长及毒素合成的培养基为(%):葡萄糖1.0、淀粉2.0、(NH4)2SO41.0、MgSO4 0.5,pH值6.0,在25℃、200 r/min、10%接种量、40 mL/250 mL的摇瓶发酵条件下发酵10 d,菌丝体生物量和展青霉素含量分别达到4.725 mg/mL和126.72μg/L。     

高细胞密度分批补料培养生产DHA的海藻寇氏隐甲藻

分别以葡萄糖和乙酸为碳源 ,研究用分批补料培养海藻寇氏隐甲藻生产 DHA的发酵工艺。在以葡萄糖为碳源的培养基中 ,发酵期间需维持一个相当高的葡萄糖浓度 (5～2 0 g/ L)。而在以乙酸为碳源的培养基中 ,由培养液的 p H值来控制乙酸的添加量。乙酸 (5 0 % ,w/ w)组成的补料相对于葡萄糖 (5 0 % ,w/ v)组成的补料 ,可获得较高的 DHA总发酵指数 (r DHA) ,分别是 38和 14 m g· L- 1· h- 1。用纯乙酸补料可提高到 4 8m g· L- 1· h- 1 ,并获得 10 9g/ L 的干生物量、6 1g/ L,脂类、19g/ L 的 DHA。这是目前已报道的异养藻类所能达到的…     

以薏苡仁为基质的茯苓发酵罐补料液体发酵

将薏苡仁添加到茯苓发酵罐液体发酵培养基中组成药性培养基,薏苡仁可促进茯苓的生长。文章研究了以薏苡仁为基质的茯苓发酵罐补料液体发酵,确定了最佳的补料时间和补料量。在最佳补料液体发酵工艺下,茯苓菌丝体产量达15.09g/L,茯苓胞外多糖产量达7.52g/L。     

Projuvant~(TM)可增强对鼻腔接种的破伤风类毒素的免疫应答

粘膜接种蛋白和多肽抗原诱导的免疫应答通常较弱 ,粘膜免疫接种的成功极大程度上依赖于有效粘膜佐剂的研制。本实验研究了在非离子型嵌段共聚物 Pluronic○RF1 2 7( F1 2 7) /脱乙酰壳多糖或溶血卵磷脂 ( LPC)存在的情况下 ,粘膜接种破伤风类毒素 ( TT)所诱导的全身和粘膜免疫应答。　　 F1 2 7是一种非离子型聚氧乙烯 -聚氧丙烯共聚物 ,由于其具有表面活性剂及蛋白稳定的特性而被广泛用于制药业。此外 ,由于它为水溶性的 ,并具有极好的药物释放特性而被用作许多药物的运载工具。脱乙酰壳多糖和 L PC则能增强渗透能力。　　研究选用 6…     

在苯甲醛乳液中酶促合成(R)-苯乙酰甲醇

R-苯乙酰甲醇 (1)是麻黄碱和伪麻黄碱合成的手性前体物。在一个简单的苯甲醛及丙酮酸的批转化反应中 ,利用来源于丝状真菌爪哇根霉 (Rhizopus javanicus) NRRL 13 161的部分纯化的丙酮酸脱羧酶 (PDC)作为催化剂 ,经改进反应条件可提高 1的产量。生物转化可用 2～ 2 .5 mol/L 的MOPS(起始 p H6.5 )作为缓冲液。高浓度 MOPS、少量乙醇和 KCl都可使 PDC稳定。在起始物为 40 0 mmol/L的苯甲酸和 60 0 mmol/L丙酮酸中 ,用 PDC (7.4u/mg)在 2 9h内 ,6℃条件下可产生 5 0 .6g/L(3 3 7mmol/L)的 1。 1的产率分别是 97% (以苯甲醛计 )和…     

HPLC测定人血浆中螺旋霉素的浓度及其药代动力学研究

目的 :建立人血浆中螺旋霉素 (SPM )浓度的测定方法及进行人体药代动力学的研究。方法 :采用高效液相色谱法 ,色谱柱 :phenomenex C1 8色谱柱 (5 μm,2 5 0 mm× 4 .6 mm) ,以乙腈∶磷酸二氢钾缓冲液(0 .0 5 mol/ L,p H为 2 .86 ) =5∶ 18(v/ v)为流动相 ,以乳酸司帕沙星为内标 ,流速 1.0 ml/ min,柱温为 2 0℃ ,紫外检测波长 2 32 nm,用螺旋霉素与内标的峰面积比进行定量。线性范围 2 5～ 32 0 0μg/ L ,最低检测浓度为2 0μg/ L ,对 18名健康受试者单次口服 4 5 0万 u螺旋霉素片剂后的药代动力学进行研究。结果 :18名健康受试者的血药浓度数据经 3p97拟合 ,符合血管外给药一室模型 ,AU C0～ t为 (44 72 .0± 6 74 .3) μg· h/ L,Cmax为(16 14 .4± 2 98.2 ) μg/ L,Tmax为 (2 .75± 0 .31) h,T1 /2 ke为 (2 .6 4± 0 .70 ) h。结论 :该方法简便 ,稳定性好 ,噪音小 ,灵敏度和准确度高 ,能够满足人体内低浓度药物的测定及药代动力学研究的要求。     

胰α-淀粉酶参考品的实验研究

目的研究淀粉酶测定用的α 淀粉酶参考品。方法从人胰中用硫酸铵沉淀 ,DEAE Sephacel、CM SepharoseCL 6B及SephadexG75三步色谱提纯。用特定的基质稀释分装 ,制成冻干或液体型 ,分别存于 - 2 0℃及4℃ ,研究其有关性质。结果提纯酶比活为 12 9.2kU/g蛋白 ,Km与人血清中淀粉酶一致 ;不同方法间的偏差与人血清标本相似 ,有比例互换性 ;根据加速变性试验推算冻干品在 - 2 0℃ ,液体型在 4℃的年失活率分别为 0 .0 3%、0 .37% ;用IFCC法测定冻干型为 (10 48± 40 .9)U/L ,液体型为 (1198± 32 .8)U/L ;冻干品复溶物及液体型再用水作 1∶1稀释后测淀粉酶活力分别为 (5 37± 2 0 .9)U/L及 (5 98± 19.8)U/L。结论此品适合作为淀粉酶测定的参考品 ,但必须进一步试用和认证。     

表达GST-NK4工程菌的发酵工艺研究

目的建立重组GST NK4融合基因工程菌的发酵工艺。方法采用摇瓶、发酵罐发酵,对影响工程菌生长和表达的条件如pH值、诱导时间及诱导剂浓度等进行优化。结果根据优化的条件,15L发酵罐发酵11h ,菌体收获量可达到湿重(2 4 .6±0 .98)g/L ,目的蛋白质的表达量占菌体总蛋白质的5 0 %左右。结论确定了周期短、产率高且稳定可靠的发酵工艺     

反相高效液相色谱法测定兔血浆中硝洛地平浓度

目的 :建立硝洛地平兔血浆样本固相萃取反相高效液相色谱分析方法。方法 :正交设计优选色谱条件及萃取条件 ,以非洛地平为内标 ,采用C18 固相萃取柱 ,色谱柱采用NOVA -PackC18 柱 (4 6mm×250mm ) ,检测波长为237nm。结果 :色谱条件为 :流动相 :乙腈 -水 (55∶45) ;流速 :1 0ml/min ;柱温 :45℃ ;萃取条件为 :A1B1C3。血浆样品在6 25～400μg/L浓度范围内呈现良好线性关系 ,r=0 9996 ;最低检测浓度为2 5μg/L。日内精密度RSD为3 81 %～5 58 % ;日间精密度RSD为4 60 %～8 76 % ;方法回收率为100 7 %～101 8 %。结论 :本方法灵敏度高、选择性强、简便快速、重现性好 ,可作为硝洛地平血浆样本测定方法     

他莫昔芬软膏在3种基质中的体外透皮释药比较

目的 :测定 1%他莫昔芬在 3种软膏基质中的体外透皮释放 ,评价 3种软膏基质对主药经皮渗透的影响。方法 :以人离体皮肤为渗透释药模型 ,试验用Franz扩散池 ,2 35nm处UV测定。结果 :在凡士林、聚乙二醇和聚羧乙烯 3种基质中他莫昔芬的渗透系数分别为 0 ,( 1.0 6± 0 .2 1)和 ( 1.2 8± 0 .2 0 ) μg/ (cm2 ·h) ,在 2 4h和 46h时的累积释放量分别为 0 ,( 31.9± 2 .4)和 ( 2 3.5± 2 .9) μg/cm2 及0 ,( 5 5± 3)和 ( 5 2± 4) μg/cm2 。结论 :他莫昔芬在水溶性软膏基质聚乙二醇和聚羧乙烯的渗透及释放都优于凡士林软膏基质