蛋白标志物在不同化疗模式下荷人卵巢癌裸鼠移植瘤中的表达差异

目的：通过检测肿瘤干细胞标记物CD133、增殖细胞核抗原Ki－67、肺耐药蛋白（ lung resistance protein , LRP）水平的表达,在蛋白表达水平上探讨顺铂低剂量节拍（low－dose metronomic,LDM）化疗及最大可耐受剂量（maxi－mum tolerated dose ,MTD）化疗两种不同化疗模式,对荷人卵巢癌裸鼠移植瘤的影响。方法建立荷人裸鼠皮下移植瘤模型36例。随机分为3组对照组（注射0．9％氯化钠溶液）、LDM－DDP组（低剂量节拍化疗）和MTD－DDP组（最大耐受剂量化疗）,治疗期间观察肿瘤细胞在裸鼠体内的生长、转移情况及化疗的副作用。疗程结束后,通过抑瘤率比较两种化疗模式的优劣。使用Western Blot方法检测各组移植瘤组织中LRP、Ki－67及CD133的表达。结果 LDM较MTD化疗能更明显的抑制肿瘤生长（ P ＜0．05）。 LRP蛋白表达的两两比较：MTD－DDP组、LDM－DDP组LRP蛋白表达均高于对照组,LDM－DDP组LRP蛋白表达较MTD－DDP组低（ P ＜0．05）。增殖细胞核抗原Ki－67的蛋白表达的两两比较：Ki－67蛋白在LDM－DDP中的瘤组织中,表达最低,明显低于MTD－DDP组及对照组,而MTD－DDP组与对照组及LDM－DDP组比较无差异（ P ＞0．05）。肿瘤干细胞标记物CD133的蛋白表达：化疗结束,MTD－DDP组、LDM－DDP组化疗结束后,CD133蛋白表达显著增高,与对照组比较具有统计学意义,而且MTD－DDP组表达量最高,明显高于LDM－DDP组（（ P ＜0．05）。结论顺铂LDM化疗较MTD化疗能更明显抑制裸鼠皮下移植瘤生长,并能降低移植瘤中耐药相关蛋白及肿瘤标记物CD133的表达。     

人卵巢癌HO8910细胞株中干细胞的筛选及生物学特性鉴定

目的筛选人卵巢癌HO8910细胞株中的干细胞并观察其生物学特性。方法以常规培养的HO8910细胞为基础(对照组),采用紫杉醇结合无血清培养基悬浮培养法筛选卵巢癌干细胞(干细胞组)。对筛选出的干细胞分别采用MTT法检测细胞的增殖情况;体外侵袭实验检测细胞侵袭能力;流式细胞术检测CD24、CD44、CD45、CD133、CD117表达及Hoechst33342染色阳性率;Western blot检测ABCG2、Nanog、Oct4及BCRP等干细胞标志基因的蛋白表达,并对卵巢癌干细胞在裸鼠体内的致瘤性进行检测。结果 (1)在紫杉醇结合无血清培养筛选条件下,部分HO8910细胞能够较好的生长,具有干细胞特性。(2)干细胞组各时间点的细胞增殖能力较对照组明显增强。(3)干细胞组穿膜细胞数较对照组明显增多。(4)干细胞组CD24+、CD44+、CD45+的阳性表达率与对照组比较,差异均无统计学意义;CD133+、CD117+的阳性表达率及Hoechst33342染色阳性率与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。(5)干细胞组ABCG2、Nanog、Oct4、BCRP等干细胞标志基因的蛋白表达水平与对照组比较均明显增强。(6)干细胞组细胞在裸鼠体内致瘤性明显高于对照组。结论紫杉醇结合无血清培养基悬浮培养法能够筛选出具有干细胞特征的卵巢癌干细胞;卵巢癌干细胞在体外及体内的生物学特性较普通卵巢癌细胞有很大差异。     

诺斯卡品逆转人卵巢癌裸鼠移植瘤对顺铂耐药的作用及机制

目的：探讨微管抑制剂诺斯卡品（ NOS ）逆转人卵巢癌细胞株 SKOV3/DDP 裸鼠皮下移植瘤对顺铂（ DDP）耐药的作用及其机制。方法建立人卵巢癌裸鼠移植瘤模型,分为对照组、DDP组、NOS组、NOS与DDP联合组,每组6只。观察各组裸鼠饮食和精神状态,测量裸鼠的体重及移植瘤的体积,并绘制肿瘤生长曲线。用网搓法制备单细胞悬液,采用流式细胞术检测移植瘤细胞周期和细胞凋亡率的变化,细胞中X链锁凋亡抑制蛋白（ XIAP ）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（Caspase-3）、B细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）和生存素（Survivin）蛋白表达。结果联合组裸鼠移植瘤体积明显小于对照组和其他用药组（ P ＜0ⅱ．05）。与对照组和DDP组比较,联合组皮下移植瘤细胞凋亡率显著增加（ P ＜0．05）,G2/M期细胞比例增多（ P ＜0．05）,细胞中XIAP、Bcl-2和Survivin蛋白表达降低（ P ＜0．05）, Caspase-3蛋白表达升高（ P ＜0．05）。结论 NOS增加了移植瘤细胞对DDP的敏感性,逆转其对DDP的多药耐药,其机制可能与XIAP、Bcl-2和Survivin蛋白表达的下调,Caspase-3蛋白表达的上调有关。     

Isolation of cancer stem cells from ovarian cancer cell line HO9810 and identification of their biological characteristics

目的 筛选人卵巢癌HO8910细胞株中的干细胞并观察其生物学特性.方法 以常规培养的HO8910细胞为基础(对照组),采用紫杉醇结合无血清培养基悬浮培养法筛选卵巢癌干细胞(干细胞组).对筛选出的干细胞分别采用MTT法检测细胞的增殖情况;体外侵袭实验检测细胞侵袭能力;流式细胞术检测CD24、CD44、CD45、CD133、CD117表达及Hoechst33342染色阳性率;Western blot检测ABCG2、Nanog、Oct4及BCRP等干细胞标志基因的蛋白表达,并对卵巢癌干细胞在裸鼠体内的致瘤性进行检测.结果 (1)在紫杉醇结合无血清培养筛选条件下,部分HO8910细胞能够较好的生长,具有干细胞特性.(2)干细胞组各时间点的细胞增殖能力较对照组明显增强.(3)干细胞组穿膜细胞数较对照组明显增多.(4)干细胞组CD24+、CD44+、CD45+的阳性表达率与对照组比较,差异均无统计学意义;CD133+、CD117+的阳性表达率及Hoechst33342染色阳性率与对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).(5)干细胞组ABCG2、Nanog、Oct4、BCRP等干细胞标志基因的蛋白表达水平与对照组比较均明显增强.(6)干细胞组细胞在裸鼠体内致瘤性明显高于对照组.结论 紫杉醇结合无血清培养基悬浮培养法能够筛选出具有干细胞特征的卵巢癌干细胞;卵巢癌干细胞在体外及体内的生物学特性较普通卵巢癌细胞有很大差异.     

双氢青蒿素对人卵巢癌细胞株HO-8910裸鼠移植瘤的作用及P53表达的影响

目的探讨双氢青蒿素(DHA)对人卵巢癌细胞株HO-8910裸鼠皮下移植瘤的作用及P53表达的影响。方法将人卵巢癌细胞株HO-8910注入裸鼠的腋下,建立人卵巢癌移植瘤的动物模型,随机分为空白组,低剂量DHA组、中剂量DHA组、高剂量DHA组、顺铂阳性对照组,观察干预后各组移植瘤抑瘤率;免疫组织化学法和蛋白印迹法检测肿瘤细胞内P53蛋白的表达;应用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)法测定移植瘤中P53 mRNA的表达。结果①DHA对裸鼠移植瘤的生长有一定的抑制作用,并具有浓度依赖性。②病理学观察见细胞的体积较大,胞质疏松,核深染,可有不同程度的核固缩、核碎裂及核溶解,细胞中可见局灶性坏死。③免疫组织化学法结果证实随着DHA剂量的增加突变型P53蛋白表达减弱;蛋白印迹法检测到DHA组野生型P53蛋白表达上调。④RT-PCR法检测到DHA组野生型P53基因表达上调。结论 DHA对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤的生长有明显的抑制作用,且与剂量有一定的关系,其机制可能与上调野生型P53的表达导致细胞凋亡有关。     

帕比司他抑制卵巢癌裸鼠移植瘤上皮-间质转化和生长机制探讨

目的　探究帕比司他（LBH589）对卵巢癌裸鼠移植瘤上皮-间质转化（EMT）、生长及具有PDZ结合域的转录共刺激因子（TAZ）/表皮生长因子受体（EGFR）通路的影响。方法　将造模成功的雌性BALB/c裸鼠50只按随机数字表法分成5组（n=10）：阳性对照组（腹腔注射5 mg/kg贝伐单抗）、模型组（腹腔注射等量生理盐水）以及LBH589低、中、高（腹腔注射10、30及50 nmol/L LBH589）浓度组,干预后每3 d测量各组瘤体积,计算抑瘤率。干预14 d后,采用Western blot法检测各组瘤组织TAZ、EGFR、上皮钙黏附蛋白E（E-Cad）、波形蛋白（Vim）表达。结果　与模型组比较,3 d时阳性对照组、LBH589高浓度组小鼠皮下移植瘤体积减小（P＜0.05）,6 d、9 d、12 d时LBH589各浓度组、阳性对照组小鼠皮下移植瘤体积均减小（P＜0.05）;与阳性对照组比较,LBH589低、中浓度组小鼠9 d、12 d时皮下移植瘤体积增大,12 d时抑瘤率降低（P＜0.05）;与LBH589低、中浓度组相比,干预9 d、12 d LBH589高浓度组小鼠皮下移植瘤体积减小,12 d LBH589高浓度组抑瘤率升高（P＜0.05）;与模型组比较,阳性对照组、LBH589各浓度组移植瘤组织中E-Cad蛋白表达升高,Vim、TAZ、EGFR蛋白表达降低（P＜0.05）;与阳性对照组比较,LBH589低、中浓度组移植瘤组织中E-Cad蛋白表达降低,Vim、TAZ、EGFR蛋白表达升高（P＜0.05）;与LBH589低、中浓度组相比,LBH589高浓度组移植瘤组织中E-Cad蛋白表达升高,Vim、TAZ、EGFR蛋白表达降低（P＜0.05）。结论　TAZ/EGFR通路在卵巢癌裸鼠移植瘤生长和EMT中有重要作用,LBH589可能通过抑制TAZ/EGFR通路激活,发挥抑制卵巢癌裸鼠移植瘤生长和EMT的作用。     

Survivin基因沉默对裸鼠人卵巢癌细胞移植瘤凋亡的影响

目的探讨survivin基因沉默对人卵巢癌细胞株SKOV3裸鼠移植瘤凋亡的影响。方法将重组survivin shRNA plasmid转染人卵巢癌细胞株SKOV3细胞,通过裸鼠移植瘤实验比较survivin基因沉默对裸鼠移植瘤的生长抑制作用,荧光定量聚合酶链反应(PCR)和蛋白印迹法检测与凋亡密切相关的cytochrome-c、caspase-9和caspase-3基因的表达。结果裸鼠移植瘤实验显示,与对照组(空载体组和未转染组)相比,survivin shRNA plasmid转染组人卵巢癌细胞株SKOV3细胞生长速度减慢,肿瘤体积缩小(P<0.05);荧光定量PCR和蛋白印迹法结果都显示,与对照组相比,survivin shRNA plasmid转染组cytochrome-c、caspase-9和caspase-3的表达明显升高(P<0.05)。结论 survivin基因沉默可通过促进肿瘤细胞的凋亡而抑制裸鼠移植瘤生长。     

顺铂联合8-硝基白杨素对人卵巢癌细胞裸鼠移植瘤生长的影响

目的 研究顺铂联合8-硝基白杨素对人卵巢癌COC1细胞裸鼠移植瘤生长的影响。方法 建立人卵巢癌COC1细胞裸鼠皮下移植瘤模型,随机分成4组,每组5只：生理盐水组、8-硝基白杨素组、顺铂组、8-硝基白杨素+顺铂组。观察各组裸鼠移植瘤体积、重量及裸鼠体质量的变化;裸鼠血清乳酸脱氢酶、谷丙转氨酶、肌酐值和外周血白细胞计数的变化;FCM测定瘤组织细胞凋亡率;Western blot分析瘤组织细胞凋亡的可能分子生物学机制。结果 与顺铂组和8-硝基白杨素组相比,顺铂联合8-硝基白杨素联合作用COC1细胞裸鼠移植瘤后,移植瘤的体积、移植瘤的重量均明显降低(P<0.05);与顺铂组相比,顺铂联合8-硝基白杨素联合组裸鼠体质量无明显差异(P>0.05),裸鼠血清乳酸脱氢酶、谷丙转氨酶、肌酐值和外周血白细胞计数无明显差异(P>0.05);顺铂和8-硝基白杨素联合作用COC1细胞16 d后,COC1细胞发生凋亡,同时bcl-2蛋白表达降低,caspase-3蛋白表达增高。结论 顺铂联合8-硝基白杨素通过降低bcl-2蛋白表达,活化caspase-3蛋白表达来抑制人卵巢癌COC1细胞裸鼠移植瘤生长。     

双氢青蒿素对卵巢癌细胞株HO-8910生长及Ang-2表达的影响

目的观察双氢青蒿素对人卵巢癌细胞HO-8910裸鼠移植瘤生长及Ang-2表达的影响。方法建立人卵巢癌细胞株系HO-8910裸鼠皮下移植瘤模型。实验分为空白组、顺铂组、青蒿素高剂量组、青蒿素低剂量组、青蒿素高剂量+顺铂组(各组n=5),观测各组小鼠成瘤情况,肿瘤重量差异以及常规病理检查变化,并采用免疫组化法检测肿瘤组织内Ang-2表达情况。结果与给药组比较,对照组小鼠体重大、生长快(P<0.05)。与青蒿素低剂量组比较,高剂量组、顺铂组和联合组肿瘤生长较慢,重量减轻,其抑瘤率分别为49.24%,56.06%,75.00%,差异有统计学意义(P<0.01)。其中联合用药组效果最好(P<0.05),而高剂量组和顺铂组差异无统计学意义(P>0.05)。免疫组化结果提示给药组中Ang-2的含量明显低于对照组(P<0.05),高剂量组比低剂量组更少(P<0.05),而联合处理组几乎未见Ang-2的表达。结论双氢青蒿素对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤的生长具有抑制作用且成剂量依赖性,与化疗药联合应用效果更好,其机制可能是青蒿素下调Ang-2的表达,直接或间接影响肿瘤组织血管生成而发挥抗肿瘤作用。     

贝伐单抗对Lewis肺癌裸鼠血清及移植瘤中血管内皮生长因子A表达的影响

目的 检测贝伐单抗对Lewis肺癌裸鼠血清和移植瘤中血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor-A,VEGF-A)表达的影响。方法 选择♂ BALB/c裸鼠32只,制作Lewis肺癌裸鼠皮下移植瘤模型,随机均分为对照组、贝伐单抗组、顺铂组、联合用药组。给药3周后处死裸鼠,ELISA法检测血清和皮下瘤中VEGF-A表达,取出皮下瘤做病理切片观察血管情况,并用免疫组化方法检测皮下瘤中VEGF-A表达。结果 3个给药组裸鼠血清VEGF-A含量显著低于对照组(P<0.05)。3个给药组裸鼠皮下瘤VEGF-A含量均比对照组低,其中贝伐单抗及联合用药组与对照组之间的差异有统计学意义(P<0.05)。3个给药组的皮下瘤较对照组坏死、血管更少;联合用药组较贝伐单抗组坏死、血管更少;贝伐单抗组较顺铂组的血管更少,但坏死无明显差别。3个给药组皮下瘤VEGF-A阳性数均明显低于对照组(P<0.05)。结论 贝伐单抗能抑制Lewis肺癌生长,可能与抑制血清和皮下瘤VEGF-A表达有关,且顺铂能增强该作用。此外,VEGF-A高表达的裸鼠,其皮下瘤的血管也更丰富。     

HFI对卵巢癌裸鼠移植瘤的疗效

目的研究HFI对卵巢癌裸鼠移植瘤的生长抑制作用。方法建立人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型,当瘤体积增长到100～200mm3时,随机分成4组(n=10),然后分别给予不同浓度(0.5mg·kg-1,0.25mg·kg-1)的HFI,裸鼠移植瘤体积及裸鼠体重每隔一天监测一次。结果各组的裸鼠体重没有显著性差异(P>0.05)。HFI(0.5mg·kg-1)剂量组和(mg.kg-1)剂量组的肿瘤体积增长速度显著低于阴性对照组(P<0.05)。移植瘤体积及瘤体重量在HFI(0.5mg·kg-1)剂量组和(0.25mg·kg-1)剂量组分别为[(911±286.631)mm3,(0.495±0.115)g]和[(1291.545±827.216)mm3,(0.542±0.237)g]显著低于阴性对照组[(1410.965±341.340)mm3,(0.714±0.124)g(P<0.05)]。HFI(0.5mg·kg-1)剂量组和(0.25mg·kg-1)剂量组的移植瘤瘤体抑瘤率分别为40.04%,16.07%,显著高于阴性对照组(0%)。HFI(0.5mg·kg-1)剂量组的裸鼠移植瘤体积与裸鼠体重之比的增长速度明显低于阴性对照组(P<0.05)。结论HFI能够显著抑制裸鼠移植瘤的生长。     

腺病毒介导的血管抑素K1-5转基因治疗裸鼠卵巢癌移植瘤

目的：探讨血管抑素k1-5对裸鼠卵巢癌皮下移植瘤的治疗作用。方法：20只荷瘤裸鼠随机分成4组．每组5只，DDP组：顺铂（DDP）20mg／kg，腹腔内注射隔日1次，连续5次；AdHA组：表达血管抑素k1-5基因的腺病毒载体（AdHA）1×10^8 pfu／次，隔日1次，连续5次；AdHA＋DDP组：AdHA1×10^8 pfu／次，隔日1次，连续5次＋DDP20mg／kg，腹腔内注射隔日1次，连续5次，以上3组为实验组。NS组（对照组）：生理盐水（NS）100此，腹腔内注射隔日1次，连续5次。以肿瘤体积、瘤质量及组织学改变来评价AdHA治疗效果及安全性。结果：瘤体内多点注射表达血管抑素k1-5的腺病毒能显著抑制肿瘤生长，AdHA组、DDP组及AdHA＋DDP组较NS组肿瘤体积及瘤质量明显降低（P〈0．05或P〈0．01），且AdHA组及AdHA＋DDP组较Ns组微血管密度明显降低（P〈0．05）。结论：表达血管抑素k1-5的腺病毒载体能抑制裸鼠卵巢癌皮下移植瘤的生长，且与化疗药联合应用有协同作用，提高肿瘤抑制率。     

旱生香茶菜总二萜对荷人肝癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响及其毒性研究

目的研究IXD对荷人肝癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响及其毒性。方法对荷人肝癌的裸鼠经灌胃给以IXD,观察其体内对人肝癌移植瘤生长的影响及对裸鼠主要脏器的毒性。结果对裸鼠人肝癌移植瘤增殖的抑制率和肝脏重量的影响,与阴性对照组比较IXD中、高剂量组均有显著性差异(P<0.05)。对裸鼠体重增加的抑制率IXD中、高剂量组与阳性对照组比较有显著性差异(P<0.01)。对脾、肾重量的影响,IXD低、中、高剂量组与阴性对照组比较均无显著性差异(P>0.05)。结论IXD对裸鼠人肝癌移植瘤生长有一定的抑制作用,IXD对裸鼠具有一定的毒性作用。     

奥曲肽对人卵巢癌耐顺铂细胞株SKOV3/DDP移植瘤增殖的影响

目的探讨奥曲肽对人卵巢癌耐顺铂细胞株SKOV3/DDP裸鼠移植瘤生长的影响。方法将SKOV3/DDP细胞接种雌性BALB/c-nu/nu裸鼠右腋前皮下构建移植瘤动物模型,成瘤后随机分成4组。奥曲肽组(A):奥曲肽100μg.kg-1.d-1,用药28 d;顺铂组(B):顺铂4 mg.kg-1.d-1,成瘤后第1、8、15、22天用药;联合组(C):奥曲肽和顺铂联用;对照组(D):生理盐水对照。用药4周后处死裸鼠,取肿瘤标本计算瘤重和瘤体积,并采用免疫组织化学法检测瘤块中生长抑素受体2(SSTR2)和表皮生长因子受体(EGFR)的表达。结果各用药组肿瘤标本的瘤重、瘤体积均低于D组,C组的瘤重、瘤体积低于A、B组(P<0.01)。各组移植瘤细胞均有SSTR2表达;EGFR表达量D组显著高于其他各组(P<0.01),C组及A组EGFR表达量低于其他两组(P<0.01)。结论奥曲肽能抑制人卵巢癌耐顺铂细胞株SKOV3/DDP的裸鼠移植瘤的生长,并与顺铂有协同作用。     

耐药蛋白P-gp与Topo-Ⅱ在B细胞非霍奇金淋巴瘤中的表达及意义

目的:检测B细胞非霍奇金淋巴瘤(NHL)组织中P-糖蛋白(P-gp)与拓朴异构酶Ⅱ(Topo-Ⅱ)蛋白表达,并探讨二者在B细胞NHL中的意义。方法:应用免疫组化EnVision法检测52例B细胞NHL组织(其中初治组41例,复发组11例)和10例坏死增生性淋巴结炎组织(对照组)中P-gp与Topo-Ⅱ蛋白的表达情况。结果:初治组中P-gp、Topo-Ⅱ的表达与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);复发组中P-gp、Topo-Ⅱ的表达与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);初治组中P-gp与Topo-Ⅱ的表达呈正相关(r=0.404,P<0.001);复发组中P-gp与Topo-Ⅱ的表达无相关性;P-gp表达与首疗程化疗效果比较差异有统计学意义(P<0.05);Topo-Ⅱ表达与首疗程化疗效果比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:初治B细胞NHL化疗的耐药性低,提示化疗效果较好;复发组中可能产生了至少2种机制导致耐药的发生,常规剂量的化疗可能疗效不佳;检测P-gp比检测Topo-Ⅱ对B细胞NHL化疗效果判断更有意义。     

内皮抑素重组腺相关病毒对宫颈癌裸鼠Bcl-2、Bax和Caspase-3蛋白表达的影响

目的:探讨内皮抑素重组腺相关病毒(rAAV-ES)对人宫颈癌HeLa细胞裸鼠移植瘤的生长抑制作用及其机制。方法:采用左腋皮下接种法,建立人宫颈癌裸鼠模型共60只。造模1周后,随机分为rAAV-ES实验组、空病毒组和磷酸盐缓冲液(PBS)对照组,每组20只。观察裸鼠皮下移植瘤的生长情况,计算肿瘤体积。治疗3周后颈椎脱臼处死裸鼠,完整剥离肿瘤,称瘤质量并计算抑瘤率。HE染色观察肿瘤细胞形态,免疫组织化学技术检测各组肿瘤组织中Bcl-2、Bax和Caspase-3蛋白的表达情况。结果:成功建立宫颈癌裸鼠模型。实验组治疗后肿瘤生长速度较对照组和空病毒组明显减慢(P<0.01),抑瘤率为62.55%。Bcl-2在实验组的阳性率低于空病毒组和PBS对照组(均P<0.01);各组Bax阳性率比较差异无统计学意义(P>0.05);Caspase-3在实验组的阳性率高于空病毒组和PBS对照组(均P<0.01)。Bcl-2与Caspase-3的表达呈负相关(rs=-0.653,P<0.01)。结论:rAAV-ES可抑制宫颈癌移植瘤的生长,其机制可能与通过下调Bcl-2蛋白、激活下游的Caspase-3诱导细胞凋亡有关。     

醋酸丙氨瑞林对人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响

目的探讨不同剂量醋酸丙氨瑞林(alarelin acetate)对人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响及作用机制。方法建立裸鼠移植瘤模型,将荷瘤裸鼠随机分为4组:实验对照组,醋酸丙氨瑞林低、中、高剂量组(0、20、40、80μg/kg)。治疗期间定期测量肿瘤大小,观察裸鼠全身状况。治疗4周后,将移植瘤完整取出,称取瘤质量,计算抑瘤率。利用免疫组织化学法检测移植瘤组织中livin蛋白的表达。结果醋酸丙氨瑞林低、中、高剂量组的抑瘤率分别为17.8%、26.5%和43.6%,与对照组比较,醋酸丙氨瑞林各治疗组肿瘤生长缓慢,差异有统计学意义(P<0.05)。免疫组织化学结果:与对照组相比,醋酸丙氨瑞林各治疗组livin蛋白的表达水平明显降低,且各治疗组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论不同剂量的醋酸丙氨瑞林均能抑制人子宫内膜癌裸鼠移植瘤的生长,且呈剂量依赖关系,其作用机制可能与下调livin蛋白表达有关。     

PI-88 对 TE-13 细胞及裸鼠移植瘤中乙酰肝素酶表达的影响

目的 探讨硫酸化寡聚多糖 （PI-88） 对食管鳞癌细胞株 TE-13 乙酰肝素酶 （Hpa） 表达的影响, 以及对裸鼠人食管癌移植瘤生长、 血管生成及 Hpa 蛋白表达的影响。方法 体外培养 TE-13 细胞, 实验分为 A 组（对照组）、 B组 （15 mg/L PI-88 干预组） 和 C 组 （30 mg/L PI-88 干预组）。培养 36 h 后 Western blot 检测各组细胞 Hpa 蛋白表达。选取 10 只 BALB/c/nu 裸鼠, 皮下接种 TE-13 细胞建立食管癌裸鼠移植瘤模型, 建模成功后随机均分为观察组及对照组。观察组腹腔注射 PI-88 40 mg/ （kg·d）, 对照组给予等剂量生理盐水, 连续注射 14 d。每 2 d 测量移植瘤体积,注射第 14 天处死动物, 剥除移植瘤行 CD34 染色, 检测微血管密度（MVD）。Western blot 及免疫组化染色检测 Hpa蛋白表达。结果 与 A 组相比, B、 C 组细胞 Hpa 蛋白表达量明显降低 （P < 0.001）, 且存在药物浓度依赖性。观察组裸鼠移植瘤体积、 MVD 值、 Hpa 蛋白表达水平及阳性细胞数均低于对照组（均 P < 0.05）。结论 PI-88 可抑制 TE-13 细胞及食管癌裸鼠皮下移植瘤中 Hpa 表达, 并抑制肿瘤生长和血管生成。     

裸鼠人肝癌移植瘤耐药模型的建立

目的 建立裸鼠人肝癌(HCC)移植瘤多药耐药(MDR)模型.方法 体外培养肝癌细胞系HepG2,建立裸鼠的皮下肿瘤.诱导组(12只)用阿霉素(ADM)间歇腹腔注射,诱导建立裸鼠肝癌耐药模型;对照组(4只)腹腔注射等容积的生理盐水.MTT比色法检测耐药细胞的MDR,RT-PCR和流式细胞术检测肿瘤耐药基因MDR1-mRNA和P-糖蛋白(P-gp)的表达,罗丹明试验观察该蛋白功能.结果 移植瘤组织形态及生物学方面符合人肝癌特征.诱导组肝癌细胞MDR1-mRNA和P-gp蛋白的表达均明显高于对照组.诱导组HepGZ对ADM的耐药指数增加了15.6倍.耐药细胞有较强的药物外排功能.结论 成功地建立了与临床肝癌相似的裸鼠肝癌耐药模型.     

药物对卵巢癌裸鼠移植瘤组织中HLA-G和HLA-E表达的影响

目的探讨天花粉蛋白、米非司酮、顺铂在卵巢恶性肿瘤治疗中的作用机制。方法培养卵巢癌OVCAR3细胞株。制备人卵巢癌裸鼠移植瘤模型。将裸鼠随机分为5组:对照组、天花粉蛋白组、米非司酮组、顺铂组、顺铂和米非司酮联合用药组。观察各组裸鼠皮下移植瘤体积,采用RT-PCR方法和流式细胞技术检测其中人类白细胞抗原G(HLA-G)、人类白细胞抗原E(HLA-E)mRNA和蛋白表达情况。结果(1)各用药组移植瘤体积均明显小于对照组(P<0.01),米非司酮组和顺铂组对肿瘤的抑制率明显低于联合组(P<0.01)。(2)和对照组比较,HLA-G、HLA-E、mRNA和蛋白表达在顺铂组无明显改变(P>0.05),在其余各组都显著降低(P<0.01)。HLA-GmRNA和蛋白表达之间呈正相关(r=0.692,P<0.01)。HLA-EmRNA和蛋白表达之间呈正相关(r=0.472,P<0.01)。HLA-GmRNA和蛋白表达与HLA-E呈正相关(r分别为0.388和0.668,P<0.05)。结论与顺铂不同,天花粉蛋白和米非司酮的抗肿瘤作用机制之一是能够明显下调肿瘤组织中HLA-G和HLA-E的表达水平,同顺铂联合使用,有望取得更好的...