柞蚕抗菌肽对大鼠大肠癌的防治作用

目的观察柞蚕抗菌肽体外抗肿瘤作用及对大鼠大肠肿瘤发生的影响。方法采用MTT法检测柞蚕抗菌肽对人结肠癌细胞株LS-174T、人胃粘膜上皮细胞株GES-1的杀伤作用。以二甲肼(DMH)诱发的Wistar大鼠大肠肿瘤为模型,观察柞蚕抗菌肽对大鼠大肠肿瘤的防治作用;DMH诱癌及柞蚕抗菌肽灌胃均18周,第33周结束实验。结果柞蚕抗菌肽在体外对人结肠癌细胞株具有选择性杀伤作用;灌胃可明显降低大鼠大肠肿瘤发生率(65%,P<0.01),但大肠癌平均个数及肿瘤质量指数无显著性差异(P>0.05)。结论柞蚕抗菌肽对DMH诱导的大鼠大肠癌具有预防作用。     

基因工程抗菌肽对结肠癌细胞株及二甲肼诱发的大鼠大肠肿瘤的影响

目的 研究基因工程抗菌肽对肿瘤细胞的选择性抗肿瘤作用及对大鼠大肠肿瘤的影响.方法 采用琼脂扩散法检测基因工程抗菌肽生物活性及致死浓度(LC),MTT法测定对人胃黏膜上皮细胞株GES-1、人结肠癌细胞株LS-174T的细胞毒作用及半数抑制浓度(IC50).以二甲肼(DMH)诱发的Wistar大鼠大肠肿瘤为模型,观察基因工程抗菌肽对大鼠大肠肿瘤的防治作用.结果 基因工程抗菌肽及对照抗菌肽的致死浓度(LC)分别为1.87μmol/L和0.44μmol/L.基因工程抗菌肽、对照抗菌肽及5-FU对胃黏膜上皮细胞株GES -1的IC50分别为大于64.0、60.0和84.0μmol/L,对人结肠癌株LS- 174T的IC50分别为10.3、20.0和63.0μ mol/L.基因工程抗菌肽灌胃明显降低大鼠结肠肿瘤发生率(58％,P＜0.05),大肠肿瘤平均个数及肿瘤质量指数(TMI)差异无统计学意义.结论 基因工程抗菌肽在一定浓度范围内对肿瘤细胞具有选择性杀伤作用,动物实验结果提示可防治DMH诱导的大鼠大肠肿瘤发生.     

姜黄素和儿茶素联用对二甲基肼诱导的大鼠大肠癌变过程中环氧合酶2表达的影响

目的探讨姜黄素和儿茶素联用对二甲基肼(DMH)诱导的大鼠大肠隐窝异常病灶(aberrant crypt foci，ACF)的数量及其对大鼠大肠组织环氧合酶2(cyclooxygenase-2，COX-2)表达的影响，方法利用DMH诱导大鼠大肠癌模型，研究姜黄素、儿茶素单独及联合应用对诱癌初期大鼠大肠ACF数量和对大鼠大肠癌发生的影响。同时应用RT-PCR方法检测了姜黄素和儿茶素对大鼠大肠癌变早期肠粘膜和癌瘤形成后肿瘤组织COX-2mRNA表达的影响。结果与阳性对照组相比，姜黄素和儿茶素和两者联用均可以显著抑制DMH诱导的大鼠ACF的数量和大鼠大肠癌的发生．两者联用的抑制作用明显高于两药单独应用。DMH可以诱导大鼠大肠组织COX-2mRNA的表达。姜黄素和儿茶素联用对抑制诱癌早期大鼠肠粘膜COX-2mRNA的表达有协同作用，但对大肠癌形成后肿瘤组织COX-2mRNA的表达无明显抑制作用。结论姜黄素和儿茶素联合应用对抑制DMH诱导的大鼠大肠癌的形成有协同作用，这种作用可能主要是通过抑制诱癌早期ACF的数量和COX-2mRNA的表达实现的。     

姜黄素和儿茶素联用对二甲基肼诱导的大鼠大肠癌变过程中环氧合酶2表达的影响

目的 探讨姜黄素和儿茶素联用对二甲基肼(DMH)诱导的大鼠大肠隐窝异常病灶(aberrantcryptfoci,ACF)的数量及其对大鼠大肠组织环氧合酶2(cyclooxygenase-2,COX-2)表达的影响。方法 利用DMH诱导大鼠大肠癌模型,研究姜黄素、儿茶素单独及联合应用对诱癌初期大鼠大肠ACF数量和对大鼠大肠癌发生的影响。同时应用RT-PCR方法检测了姜黄素和儿茶素对大鼠大肠癌变早期肠粘膜和癌瘤形成后肿瘤组织COX-2mRNA表达的影响。结果 与阳性对照组相比,姜黄素和儿茶素和两者联用均可以显著抑制DMH诱导的大鼠ACF的数量和大鼠大肠癌的发生,两者联用的抑制作用明显高于两药单独应用。DMH可以诱导大鼠大肠组织COX-2mRNA的表达。姜黄素和儿茶素联用对抑制诱癌早期大鼠肠粘膜COX-2mRNA的表达有协同作用,但对大肠癌形成后肿瘤组织COX-2mRNA的表达无明显抑制作用。结论 姜黄素和儿茶素联合应用对抑制DMH诱导的大鼠大肠癌的形成有协同作用,这种作用可能主要是通过抑制诱癌早期ACF的数量和COX-2mRNA的表达实现的。     

胃泌素拮抗剂和活化T淋巴细胞联合应用对结肠癌细胞的杀伤作用

目的:探讨联合应用胃泌素拮抗剂和CD28/CD80单克隆抗体共刺激活化的健康人外周血T淋巴细胞(PBLs)在体外对结肠癌细胞株HT-29的杀伤作用.方法:分离与体外培养外周血PBLs,并用CD28/CD80共刺激活化PBLs;用含活化的PBLs和(或)胃泌素拮抗剂CI-988的RPMI 1640培养基培养HT-29细胞.MTT法检测2者对HT-29细胞的杀伤率,并用电镜观察效应细胞杀伤结肠癌细胞株HT-29的超微结构及HT-29细胞的凋亡情况.结果:胃泌素拮抗剂与活化PBLs合用,对结肠癌细胞株HT-29的杀伤率((95.81±1.99)%)大于单用胃泌素拮抗剂((66.36±1.31)%)(P＜0.05).电镜结果显示,效应细胞作用12 h肿瘤细胞就发生部分坏死,部分肿瘤细胞可见凋亡.结论:联合应用活化的PBLs和胃泌素拮抗剂CI-988可以提高对结肠癌细胞株HT-29 杀伤作用.活化的淋巴细胞杀伤结肠癌细胞可能是通过诱导肿瘤细胞坏死及凋亡2条途径来实现.     

吡格列酮对二甲基肼诱导的大鼠畸变隐窝灶的抑制作用

目的 :明确吡格列酮 (噻唑烷二酮类药物 ,外源性过氧化物酶体增生物激活受体γ配体 ,PPARγ)对二甲基肼 (DMH)诱导的大鼠畸变隐窝灶 (ACF)的影响 ,并与非甾体类抗炎药舒林酸进行比较。方法 :8周龄雌性SD大鼠 ,共 32只 ,随机分为 4组 ,每组 8只。第 1组为模型对照组 (DMH组 ) ,大鼠腹腔注射DMH(12 0mg·kg-1) ;第 2组为阴性对照组 ,大鼠腹腔注射生理盐水 (每只 1ml) ,两组均给予普通饲料喂养。第 3组为舒林酸组 ,用含有舒林酸 (32 0mg·kg-1)的饲料喂养 ,1周后腹腔注射DMH(12 0mg·kg-1)。第 4组为吡格列酮组 ,用含有吡格列酮 (10 0mg·kg-1)的饲料喂养 ,1周后腹腔注射DMH(12 0mg·kg-1)。含药饲料均喂养到实验结束。所有大鼠在注射DMH 5周后处死 ,计数每只大鼠大肠黏膜中ACF个数以及每个ACF中隐窝 (AC)个数。结果 :DMH组中 ,平均每只大鼠大肠中ACF为 (182± 93)个 ,AC为 (2 6 3± 198)个 ;生理盐水组中未见明显ACF ;舒林酸组ACF和AC分别为 (91± 4 9)个和 (14 0± 6 9)个 ,与DMH组相比 ,分别减少 5 0 .0 % (P <0 .0 1)和 4 6 .9% (P <0 .0 5 )。吡格列酮组ACF和AC分别为 (97± 2 3)个和 (14 8± 31)个 ,与DMH组相比 ,分别减少 4 7.0 % (P <0 .0 1)和 4 3.9% (P <0 .0 5 )。吡格列酮组与舒林酸组ACF及AC     

二甲肼诱发大鼠大肠癌的组织学动态观察

作者对DMH诱发大鼠大肠癌过程进行了动态研究,结果显示40只大鼠在DMH作用下,大肠粘膜显示不同程度的病变。实验第8周,大肠粘膜呈现早期增生性改变;第10～15周主要表现为粘膜轻、中度不典型增生;第18～32周除粘膜不典型增生外,大肠腺瘤和癌逐渐形成,其中检出腺瘤14个,原位癌10个,浸润性癌35个。20只对照大鼠大肠粘膜无明显病变。提示大肠癌的组织发生系经过粘膜增生→不典型增生或腺瘤→原位癌→浸润性癌的发展过程,证实不典型增生是大肠癌重要的癌前病变。     

平阳霉素与McAb R19偶联物的制备及对大肠癌细胞的杀伤作用(简报)

最近研究表明,平阳霉素对移植于裸鼠的人大肠癌有显著疗效。本实验使用的抗大肠癌McAb R_(19)是以人盲肠癌Hce-8693细胞免疫LOU/C大鼠,取脾细胞与骨髓瘤IR983F细胞融合而得到的杂交瘤细胞株所分泌的IgG2b型抗体,对结肠癌HT-29细胞呈强阳性反应。本研究将McAb R19与平阳霉素(A5)偶联,用克隆生成法观察偶联物和游离药物对肿瘤细胞的杀伤作用。     

NS-398联合奥沙利铂对大鼠结肠癌的作用及机制的初步研究

目的:探讨选择性环氧合酶-2(COX-2)抑制剂NS-398及化疗药物奥沙利铂对实验性大鼠结肠癌的防治作用及其可能的作用机制。方法:采用1,2-二甲肼(DMH)+右旋葡聚糖苷钠(DSS)诱导大鼠结肠癌,实验分4组:对照组、NS-398干预组、奥沙利铂干预组及联合干预组,观察各组大鼠结肠癌的发生率并检测肿瘤组织微血管密度(MVD)、血管内皮生长因子(VEGF)mRNA和基质金属蛋白酶2(MMP-2)mRNA的表达。结果:NS-398干预组、奥沙利铂干预组结肠癌发生率,MVD以及VEGF和MMP-2mRNA表达均明显低于对照组(P<0.05),而联合干预组要低于NS-398干预组和奥沙利铂干预组(P<0.05)。结论:NS-398及奥沙利铂通过阻断肿瘤血管形成达到抗大鼠结肠癌的目的,其抗血管形成机制可能是下调VEGF mRNA及MMP-2mRNA的表达。NS-398与奥沙利铂在抗肿瘤血管生成方面具有协同作用。     

As2O3注射液体外对人大肠癌细胞抑制作用的观察

目的 明确中药砒霜制剂三氧化二砷(As2O3)注射液对人大肠癌细胞的体外抑制作用，为临床应用As2O3治疗大肠癌提供实验依据。方法 采用活细胞观察法、台盘兰拒染法、四甲基偶氮唑蓝比色(MTT)法和透射电镜观察了As2O3对体外培养的人大肠癌细胞株CoLo-320生长的影响及其形态学变化。结果 As2O3能显著地抑制人大肠癌细胞CoLo-320的生长，用药后诱导其出现了典型的细胞凋亡超微结构改变。结论 As2O3对人大肠癌细胞具有显著抑制生长作用，该抑制作用与诱导细胞凋亡密切相关。     

柞蚕抗菌肽对大鼠大肠癌的防治作用

OBJECTIVE: To gain insight into the putative anticancer effect of the antibacterial peptides, cecropins, from Chinese oak silkworm, Antheraea pernyi, on the cancer cells and 1,2-dimethylhydrazine (DMH)-induced colon carcinogenesis in rats. METHODS: Growth inhibitory effect of the cecropins on normal human gastric epithelial cell line (GES-1) and human colon adenocarcinoma cell line (LS-174T) was observed using a microculture tetrazolium (MTT) colorimetric methods. Male Wistar rats were divided into 4 groups. Group1 was given on a weekly basis cecropins from Antheraea pernyi (3,000 Ua/ml) by gavage at 2 doses of 10 ml/kg body weight and exposed to subcutaneous injection of DMH at the dose of 20 mg/kg body weight. Group 2 was received weekly DMH only. Group 3 was given the cecropins by gavage at the same dose as in group 1. Group 4 was weekly exposed to subcutaneous injection of EDTA (1 mmol/L). All treatments were completed in a course of 18 weeks and the experiment was finished at week 33. RESULTS: MTT assay showed selective cytotoxic activity of the cecropins against the human colon adenocarcinoma cells line. The viability of the cancer cells was about 54% and 100% for the normal cells. There was a significantly lower incidence of large intestinal tumors in rats gavaged with cecropins (65%, P<0.01), but the tumor burden (tumors/tumor-bearing animal) and tumor mass index were comparable between the groups (P>0.05). CONCLUSION: The cecropins possess effective anti-tumor activity with no cytotoxicity against normal eukaryotic cells, and impede the neoplastic process in murine large intestines.     

人参皂甙Rh2诱导人喉癌细胞株Hep-2凋亡的研究

目的:研究人参皂甙Rh-2(G-Rh2)诱导喉癌Hep-2细胞凋亡的作用。方法:应用流式细胞术、琼脂糖凝胶电泳检测G-Rh2处理前后Hep-2细胞的凋亡情况,并应用SP免疫组化法检测药物处理前后相关基因产物Bax、Bcl-2蛋白的表达,观察G-Rh2对喉癌Hep-2细胞的诱导凋亡作用及其对细胞周期的影响。结果:(1)G-Rh2具有诱导凋亡作用,且呈量效、时效关系,细胞凋亡率随G-RH2浓度及作用时间的增加而升高,并可将细胞周期阻滞于G0/G1期。(2)G-Rh2处理Hep-2后,Bax表达上调,Bcl-2在G-Rh2处理前后无明显变化。结论:G-Rh2对体外培养的Hep-2细胞具有诱导凋亡的作用,其机制可能与上调Bax的表达及细胞周期阻滞有关。     

2-(3-羧基-1-丙酰氨基)-2-脱氧-D-葡萄糖诱导人结肠癌SWlll6凋亡的作用

目的:研究D-葡萄糖衍生物2-(3-羧基-1-丙酰氨基)-2-脱氧-D-葡萄糖(COPADG)对人结肠癌SWlll6细胞生长增殖的影响,进而探讨COPADG诱导SWlll6细胞凋亡的作用.方法:用不同浓度的COPADG处理SWlll6,采用MTT法测定其对SWlll6细胞生长增殖的抑制作用,通过DNA琼脂糖凝胶电泳、流式细胞术观察其对SWlll6细胞诱导凋亡的效应.结果:COPADG能抑制SWlll6细胞的生长增殖,并呈一定的浓度、时间依赖性;COPADG能诱导结肠癌SWlll6细胞凋亡;DNA琼脂糖凝胶电泳呈现典型的DNA梯形条带图谱;流式细胞仪检测出现典型的亚二倍体凋亡峰.结论:COPADG在体外可显著诱导结肠癌SWlll6细胞凋亡.     

siRNA干扰Caco-2细胞鞘磷脂合酶2 (SMS2)基因对药物转运体的影响

 目的  研究鞘磷脂合酶2 (sphingomyelin synthase 2,SMS2)缺损对人结肠癌细胞(colon cancer cell,Caco-2)中药物转运体P 糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)及多药耐药相关蛋白2 (multidrug resistance-associated protein 2,MRP2)的表达与功能的影响。方法  SMS2特异性siRNA转染至Caco-2细胞。采用RT-PCR和real-time PCR检测SMS2-特异性siRNA的干扰效率;采用Western blot法检测siRNA转染后P-gp和 MRP2蛋白表达的变化;采用胞内蓄积试验,通过HPLC检测P-gp及MRP2专一性底物罗丹明123及普伐他汀的蓄积含量,分析下调SMS2水平对Caco-2细胞中P-gp及MRP2功能的影响。结果  应用siRNA下调SMS2水平后,P-gp和MRP2的蛋白质水平均显著下调;胞内蓄积实验结果显示罗丹明123及普伐他汀的蓄积量明显增加,说明P-gp和MRP2的外排功能减弱。结论  SMS2基因表达下调对Caco-2细胞中P-gp和MRP2的表达以及功能均有显著影响。     

DDR1促进胰腺癌细胞AsPC-1的迁移及侵袭能力

目的 探讨盘状结构域受体1 (DDR1)对胰腺癌细胞迁移及侵袭能力的影响.方法 利用qRT-PCR检测DDR1在胰腺癌旁组织及癌组织中的表达水平.通过脂质体转染DDR1表达质粒至胰腺癌细胞AsPC-1中,应用Western blot验证其转染效果.通过划痕实验及Transwell法检测转染DDR1表达质粒后细胞迁移及侵袭能力的变化情况.Western blot检测转染后基质金属蛋白酶2 (MMP2)和基质金属蛋白酶9 (MMP9)的表达水平.结果 与癌旁组织比较,胰腺癌组织的DDR1 mRNA表达水平显著升高(P<0.05).转染质粒后,AsPC-1细胞DDR1蛋白表达量显著升高(P<0.05).应用划痕试验及Transwell试验结果显示,与对照组比较,AsPC-1/DDR1迁移力上调(51.11±11.51)%,侵袭力上调(77.25±10.64)%,差异均具有统计学意义(P<0.05).过表达DDR1后,AsPC-1细胞中MMP2和MMP9表达水平显著升高(P<0.05).结论 DDR1通过改变MMP2和MMP9的表达水平,促进胰腺癌细胞的迁移及侵袭,有望成为靶向治疗的新方向.     

结肠癌环氧化酶-2和血管内皮生长因子C表达与淋巴结转移关系的研究

目的探讨环氧化酶-2(COX-2)和血管内皮生长因子-C(VEGF-C)在人结肠癌组织中的表达及其与淋巴结转移的关系。方法采用免疫组化Envision二步法检测VEGF-C及COX-2在60例结肠癌组织中的表达,并取10例结肠腺瘤组织标本作对照。结果在60例结肠癌组织中COX-2和VEGF-C的阳性表达率均明显高于对照组,差异均有统计学意义(均<0.05)。结肠癌淋巴结转移患者COX-2和VEGF-C的表达率均高于无淋巴结转移患者(均<0.05),COX-2与VEGF-C在结肠癌中表达呈正相关(=0.331,<0.05)。结论 COX-2和VEGF-C的高表达在结肠癌的发生发展以及淋巴转移过程中起着重要作用,可作为判断结肠癌预后的重要参考指标。     

野生型K-RAS2基因对人结肠癌细胞生长的抑制作用

目的:研究野生型K-ras2基因对人结肠癌细胞株Caco-2的生长影响作用。方法:将野生型K-ras2基因转染结肠癌细胞株Caco-2并筛选稳定表达的克隆;用四甲基偶氮唑(MTT)法观察细胞的生长情况,用流式细胞仪观察细胞周期及凋亡的情况。结果:野生型K-ras2基因可使结肠癌细胞株Caco-2的生长明显受到抑制,使细胞受阻于G0/G1期。结论:野生型K-ras2基因能有效抑制结肠癌细胞Caco-2的生长。     

抑郁模型大鼠血浆、脑垂体和结肠组织中P物质和血管活性肠肽的变化

目的 观察抑郁症对大鼠血浆、脑垂体和结肠组织中P物质 (substanceP,SP)和血管活性肠肽(vasoactiveintestinalpeptide,VIP)的影响。方法 建立经典的大鼠抑郁模型。采用放射免疫方法分别检测大鼠血浆、脑垂体和结肠组织中SP和VIP的含量。结果 抑郁模型大鼠血浆、脑垂体和结肠组织中SP的含量显著增加(73. 82±15. 19vs56. 07±10. 32; 217. 63±40. 14vs106. 11±27. 37; 6. 39±0. 76vs2. 51±0. 62;P<0. 05 );VIP的含量显著降低 (50. 31±12. 09vs74. 69±16. 87; 48. 90±12. 56vs 71. 47±17. 25; 1. 37±0. 42vs2. 9 8±0. 71;P<0. 05 )。结论 大鼠脑垂体和结肠组织中SP和VIP的含量异常可能与抑郁症导致的脑和结肠损害有关。     

促红细胞生成素(EPO)对叶酸在Caco-2细胞中跨膜转运的影响

 目的 采用人结肠腺癌细胞系(human colon adenocarcinoma cell line) Caco-2单细胞层模型观察促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)对叶酸跨膜转运的影响。方法 采用Caco-2单层细胞模型,观察不同剂量EPO (0.3、1、3 U/mL)处理对叶酸在摄取与外排双向转运方面的影响。通过real time-PCR与Western blot观察EPO处理对质子偶联的叶酸转运体(proton coupled folate transporter,PCFT)、还原叶酸载体(reduced folate carrier,RFC)以及多药耐药相关蛋白2 (multidrug resistance-associated protein 2,MRP2)表达的影响。结果 EPO在剂量0.3~3 U/mL范围内可剂量依赖地增加叶酸在摄取方向的转运,增幅分别为31.6%、61.5%和120.5%。高剂量EPO(3 U/mL)对叶酸在外排方向的转运也具有促进作用,增幅为56.9%,而中低剂量EPO (1、0.3 U/mL)对叶酸外排无明显作用。叶酸转运体PCFT、RFC及MRP2均受EPO影响而表达上调,并呈剂量依赖和时间依赖关系。结论 EPO可上调叶酸的摄取并呈剂量依赖关系,高剂量EPO对叶酸的摄取与外排具有双向促进作用。