复方活血汤对放射性损伤小鼠造血细胞bcl-2、bax、bcl-xL基因表达的作用

目的 探讨放射性损伤骨髓衰竭的机理及护理对策。方法 用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ技术检测了＾６０Ｃｏγ放射８．０Ｇｙ照射小鼠（对照组）及照射后立即给复方活血汤治疗小鼠（中药组）的骨髓有核细胞ｂｃｌ－２、ｂａｘ、ｂｃｌ－ｘＬ基因表达。结果 放射损伤后第３，７天，对照组骨髓有核细胞ｂｃｌ－２／ｂａｘ值减小、ｂｃｌ－ＸＬ不表达。中药组与之相反，ｂｃｌ－２／ｂａｘ值明显增大、ｂｃｌ－ＸＬ明显表达。受照后第     

肝细胞癌bcl-2,bax基因表达及意义

肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是我国和东亚地区的常见恶性肿瘤之一,最佳治疗方法是外科切除,而对于多数不能切除的中、晚期肝癌,日本学者Nakakuma[1]首创的碘油加抗癌药物经肝动脉化疗栓塞治疗大大提高了肝细胞癌患者的生存期.     

147Pm照射对人白血病HL-60细胞bc-l2和bax基因表达的研究

目的 研究了¹⁴⁷Pm照射对人白血病HL60细胞bcl-2和bax基因表达作用。方法 运用免疫组织化学技术探讨147Pm对HL-60细胞bcl-2/bax的蛋白表达, 以及RNA分子杂交技术探讨¹⁴⁷Pm对HL-60细胞bcl-2mRNA的转录水平表达。结果 发现对照HL-60细胞中bcl-2蛋白呈高度表达, 为88%;在¹⁴⁷Pm照射下, 可下调至53%.bax在对照细胞中的表达很低;¹⁴⁷Pm作用后, 未见明显改变。而受¹⁴⁷Pm照射后, 可使HL-60细胞中bcl2mRNA表达呈明显下调, 并随受照射时间的延长, 下调作用更加显着。结论 ¹⁴⁷Pm诱发人白血病HL-60细胞的凋亡作用, 与其下调凋亡相关基因bcl-2的表达相关联。     

大鼠在反复高加速度暴露后脑组织中bcl-2、bax、p53和ICE的表达

为了解反复高正加速度（＋Gz)暴露后大鼠脑组织中bcl-2、bax、p53和白细胞介素－1β转化酶基因的表达变化，探讨细胞凋亡在反复高＋Gz暴露所致脑损伤中的病理作用，用半定量逆转录聚合酶链反应方法检测反复高＋Gz暴露后大鼠脑组织中bcl-2、bax、p53和ICE表达水平，并用原位末端脱氧核苷酸转移酶标记法检测脑组织中的凋亡细胞。结果bcl-2在＋Gz重复暴露后6h和24h表达明显降低，而bax、p53和ICE在6h和24h表达明显升高，6h组和24h组在大脑皮质、海皮CA1区和纹状体可见部分神经元发生凋亡。表明反复高＋Gz暴露可引起大鼠脑组织中bcl-2、bax、p53和ICE表达变化，细胞凋亡是反复高＋Gz暴露致脑损伤的机制之一。     

射线照射对胰腺癌细胞凋亡及bcl-2、bax基因表达的影响

目的研究不同剂量的γ射线对人胰腺癌细胞凋亡及bcl2,bax基因表达的影响。方法利用不同剂量的γ射线对体外培养的胰腺癌Panc1细胞进行照射,采用PI和AnnexinⅤPI法定量检测细胞凋亡,流式细胞仪检测照射后胰腺癌细胞Panc1的Bcl2、Bax基因表达水平。结果胰腺癌panc1细胞凋亡百分率在一定剂量范围内(≤15Gy)随着照射剂量的提高而增大,在一定时间范围内(≤24h),随着时间的延长而增大。照射组细胞凋亡相关基因Bcl2表达较对照组明显降低,两组相比差异有统计学意义(P<005);照射组bax基因的表达较对照组明显升高,两组相比差异有统计学意义(P<005)。结论γ射线诱导胰腺癌panc1细胞凋亡具有剂量依赖性和时间相关性,bcl2和bax在胰腺癌细胞凋亡调节过程中起着重要作用,不同剂量γ射线照射胰腺癌细胞时Bcl2和Bax表达水平也不相同,通过降低bcl2的表达及提高bax表达来诱导胰腺癌细胞发生凋亡有可能是γ射线杀伤肿瘤细胞的机制之一。     

蒺藜总皂苷对缺氧复氧损伤心肌细胞凋亡及凋亡相关基因bcl-2与bax表达的影响

目的观察蒺藜总皂苷（GSTT）对培养乳鼠心肌细胞模拟缺血再灌注损伤后心肌细胞凋亡及凋亡相关基因bcl-2、bax表达的影响。方法利用原代培养的SD乳鼠心肌细胞建立模拟心肌缺血再灌注（M1／R）模型,分正常培养组、模型组和蒺藜总皂苷大、小剂量组。流式细胞仪检测心肌细胞凋亡率,免疫组化检测心肌细胞凋亡基因bcl-2、bax的表达。结果GSTT大、小剂量组均可显著降低细胞凋亡率（P〈0．05）。GSTT大剂量组可显著上调bcl2表达（P〈0．01）、下调bax表达（P〈0．05）,而GSTT小剂量组可上调bcl—2表达（P〈0．05）,但对bax表达无明显影响。结论GSTT可抑制模拟缺血再灌注损伤心肌细胞的凋亡,其作用可能是通过上调bcl-2、下调bax表达实现的。     

甲氨蝶呤对妊娠小鼠滋养细胞bcl-2/bax表达的影响

目的探讨甲氨蝶呤（MTX）促进滋养细胞凋亡、抑制滋养细胞增生的机制。方法建立正常妊娠小鼠模型、MTX妊娠小鼠模型,运用免疫组化方法检测两组小鼠孕13 d滋养细胞bax、bcl-2的蛋白表达;同时运用原位细胞凋亡（TUNEL）检测两组小鼠孕13 d的滋养细胞凋亡情况。结果与正常妊娠模型小鼠相比,MTX妊娠模型小鼠滋养细胞bax蛋白表达较强（P〈0.01）,bcl-2蛋白表达减弱（P〈0.01）;MTX妊娠模型小鼠滋养细胞凋亡指数明显高于正常妊娠模型小鼠（P〈0.01）。结论 MTX抑制滋养细胞增生、促进滋养细胞凋亡,可能是通过调节bax、bcl-2蛋白的表达实现的。     

高功率微波对大鼠心肌组织结构损伤及凋亡相关基因表达的研究

目的：研究高功率微波（high power microwave,HPM)对心肌组织结构、超微结构和凋亡相关蛋白表达的影响，以探讨HPM对心肌损伤的剂量效应关系，基本病变规律和分子病理机制。方法：5个不同功率密度的HPM辐照大鼠，于伤后1h,6h,24h,7d,14d及28d采取心肌组织，通过光镜、电镜观察其病变规律，免疫组化检测Bax,Bcl-2,c-Fos和p53蛋白的表达，结果：HPM辐照后心肌纤维早期出现细胞水肿，水变性，中后期可见收缩带，透明样变，损伤存在剂量效应关系。bcl-2/bax,c-fos和p53参与了HPM引起的心肌细胞凋亡。     

运动预适应下调帕金森小鼠中脑bax/bcl-2 mRNA表达比值

目的:探讨运动预适应是否下调帕金森小鼠中脑细胞bax/bcl-2mRNA表达比值。方法:32只雄性小鼠(8～9周龄)首先随机分为安静组、运动组。运动组连续5周,每天1次中等强度(12米/分,20分钟)跑台训练。然后以上两组再各自随机分成两组,于训练结束后第2天分别注射生理盐水或中等剂量MPTP(30mg/kg×2次)。只有表现典型行为变化的MPTP小鼠被认为是成功帕金森模型小鼠,进入最终分组,分为安静+生理盐水组(Se+Sa)、运动+生理盐水组(E+Sa)、安静+MPTP组(Se+M)、运动+MPTP组(E+M)4组,每组8只。训练结束后第11天处死动物,检测小鼠中脑bax、bcl-2mRNA表达,计算bax/bcl-2mRNA表达比值。结果:E+M组小鼠中脑baxmRNA表达较Se+M组显著降低(P<0.05),E+M组bcl-2mRNA表达较Se+M组显著增加(P<0.05),E+M组bax/bcl-2比值显著小于Se+M组(P<0.05)。结论:运动预适应改变帕金森小鼠中脑黑质细胞凋亡信号分子bcl-2、baxmRNA表达,降低bax/bcl-2mRNA表达比值。     

Egr-1调控元件启动的造血因子基因转移对辐射损伤的骨髓基质细胞的保护作用

目的：观察基因修饰的骨髓基质细胞对辐射的耐受作用。方法：通过辐射对CFU－F形成的影响制作细胞存活曲线分析造血因子双顺反子基因修饰的基质细胞（HFCL／FG和HFCL／EFG）的对辐射的耐受，采用3H－TdR掺入法验证上述结果，观察转染细胞对粒系祖细胞生长的影响，结果：HFCL／FG和HFCL／EFG细胞生存曲线的肩明显增宽，D0值增大，N和Dq值增大，3H－TdR掺入实验也验证了该结果，这种细胞对粒系祖细胞的扩增作用明显增强。结论：造血因子基因修饰的骨髓基质细胞具有抗辐射和支持造血作用。     

辐射诱导骨髓细胞凋亡及相关基因表达研究

目的 研究辐射诱导骨髓细胞凋亡、bcl-2和p53基因表达及意义。方法 γ射线全身照射小鼠,采用原位末端标记、原位杂交和图像分析等技术,骨髓细胞凋亡及bcl-2和p53表达。结果 照射后6h骨髓细胞凋亡;bcl-2于细胞凋亡时减少,而于其后修复早期增加;p53于造血细胞凋亡及之后修复均增多,mtp53仅其修复时阳性。结论 辐射可导致骨髓细胞凋亡,且呈剂量相关性;bcl-2与p53基因均参与其凋亡和修复过程。     

梁金菇多糖对辐射损伤小鼠造血功能的影响

目的：研究梁金菇多糖（LJPS）对造血功能辐射损伤的治疗作用及机理。方法：用造血祖细胞克隆法，内源性脾结节形成法，骨髓有核细胞计数及脾脏指数等方面观察了LIPS对60^Coγ射线照射5．5Gy小鼠造血功能的影响，并用免疫组化法检测辐射骨髓及脾脏细胞的 bcl-2蛋白的表达。结果：LJPS辐射后第7天骨髓CFU－GM，CFU－E，CFU－F数量增加，辐射第14天的骨髓有核细胞数，脾脏指数，CFU－S明显增多，辐射第3，7，14天骨髓，脾脏bcl-2蛋白表达上升。结论：LJPS对小鼠造血功能辐射损伤具有治疗作用，其机理与调节骨髓，脾脏bcl-2蛋白表达有关。     

放烧复合伤对小鼠骨髓基质祖细胞体外集落生成能力的影响

目的观察放烧复合伤对小鼠骨髓基质细胞集落形成能力（ＣＦＵＦ）的影响。方法采用Ｄｅｘｔｅｒ型方法,检测经５０Ｇｙγ射线放射损伤、１５％Ⅲ度体表面积烧伤和放烧复合伤小鼠于伤后不同时间骨髓基质细胞集落形成能力。结果单放组和复合伤组于伤后各时相点均显著低于正常组和单烧组;单烧组除伤后第３天低于正常组外（Ｐ＜０．０５）,至伤后第１４天与正常组差异无显著性。单放组骨髓基质细胞在伤后３天和７天经２１天培养时呈小团片状生长,至培养第２８天时仍未长满培养皿底。结论单放组和复合伤组骨髓基质细胞受损后恢复缓慢;放烧复合伤对骨髓基质细胞的损伤具有放射损伤为主的特点     

rhIL-11对急性放射病小鼠骨髓细胞凋亡的影响

目的　研究rhIL 11对急性辐射损伤后骨髓造血细胞凋亡的影响。方法　应用原位末端标记、流式细胞术及琼脂糖凝胶电泳法分别在照射后不同时间观察了rhIL 11对 5 5Gy6 0 Coγ射线全身照射小鼠骨髓造血细胞凋亡的影响。应用免疫组织化学法观察了各组小鼠骨髓细胞Bcl 2和P5 3蛋白的表达变化。结果　①照射前应用rhIL 11可使照射后 6h小鼠骨髓造血细胞凋亡率下降 ,而照射后给药组照射后 12h凋亡率下降更加明显。②照射后 3d给药组P5 3蛋白表达均较照射对照组明显降低 (P <0 0 1) ,Bcl 2蛋白表达则明显升高 ;照射后 7d给药组Bcl 2升高仍明显。结论应用rhIL 11可有效抑制照射后小鼠骨髓造血细胞凋亡 ,有利于造血功能的恢复。rhIL 11对细胞凋亡的影响可能与Bcl 2和P5 3等蛋白的调节密切相关。     

放射及复合烧伤大鼠腹腔灌洗液对骨髓造血祖细胞生长的影响

目的　观察放射损伤、烧伤及放烧复合伤腹腔灌洗液对骨髓体外造血的影响。方法60 Coγ射线全身照射 1 2Gy、5kW溴钨灯致大鼠背部 30 %TBSAⅢ度烧伤。伤后 3 ,1 2 ,2 4 ,48和 72h无菌抽取腹腔灌洗液 ,按 40 μg ml加入到骨髓红系、粒系培养体系中培养。 结果　伤后 3 ,1 2 ,2 4 ,48和72h,烧伤组和复合伤组的CFU E、BFU E和CFU GM培养集落数均显著高于正常对照组 (P <0 0 1 ) ,且以伤后 2 4h最高 ,烧伤组高达 2 1 5 7%、2 0 2 3 %和 2 4 1 2 % ,复合伤组为 1 88 1 %、1 4 7 7%和2 0 4 6 %。但当加入放射损伤大鼠腹腔灌洗液时 ,仅有很少的CFU E、BFU E和CFU GM集落生长。结论　烧伤与放烧复合伤后的腹腔灌洗液对骨髓红系、粒系造血均有明显的促进作用 ,照射组则显示明显的抑制作用     

放射复合伤对骨髓基质细胞粘附功能影响的初步观察

目的初步探讨放射复合伤对骨髓造血微环境中基质细胞粘附功能损伤的机理。方法采用流式细胞仪、细胞粘附实验和细胞粘附阻断实验等方法,检测５０Ｇｙγ射线全身照射、１５％体表面积Ⅲ度烧伤和放射复合伤小鼠骨髓基质细胞表达血管细胞粘附分子（ＶＣＡＭ１）、纤维连接素（Ｆｎ）、层粘素（Ｌｎ）和Ⅳ型胶原（ＣｏｌⅣ）等成分的变化以及骨髓基质细胞贴壁层对骨髓单个核细胞粘附能力的影响。结果①骨髓基质细胞表达ＶＣＡＭ１、Ｆｎ、Ｌｎ和ＣｏｌⅣ的水平具有以单烧组＞正常组＞复合伤组＞单放组的特点。②伤后第３～７天,单烧组骨髓基质细胞的粘附能力显著高于正常组（Ｐ＜００５～Ｐ＜００１）;单放组和伤后第３天的复合伤组则反之。③分别用ＶＣＡＭ１、Ｆｎ、Ｌｎ和ＣｏｌⅣ单抗处理骨髓基质细胞贴壁层后,骨髓单个核细胞的粘附率较未加单抗组均有不同程度的下降。结论骨髓微环境基质细胞粘附功能的损伤可能是影响放射复合伤骨髓造血功能障碍的原因之一。     

辛基酚对MDA-MB-231细胞中bcl2和caspase3表达的影响

目的:观察辛基酚(OP)对乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的影响。方法:以流式细胞分析、免疫细胞化学和RT-PCR等方法观察OP对MDA-MB-231细胞凋亡、bcl2、bax和caspase3表达的影响。结果:4μmol/L、8μmol/L-OP作用MDA-MB-231细胞48 h,其凋亡率分别为26.93±6.76、42.48±8.21(对照4.05±1.14);bcl2表达量荧光值分别为78.05±9.47、42.74±6.49(对照103.12±11.26)。OP降低细胞中bcl2 mRNA表达,增加caspase3 mRNA及其蛋白的表达。结论:OP能诱导MDA-MB-231细胞凋亡,其机制可能是通过上调细胞中caspase3的表达,下调bcl2的表达来诱导细胞凋亡。