比索洛尔对慢性心力衰竭大鼠心肌β1肾上腺素能受体及心功能的调节作用

目的 研究比索洛尔对腹主动脉结扎所致慢性心力衰竭大鼠β1肾上腺素能受体(β1-AR)心功能的调节作用.方法 SD大鼠40只,随机分为4组,即腹主动脉缩窄(COA)组;COA 比索洛尔组;假手术组;假手术 比索洛尔组.采用超声心动图和心室插管法评估心功能,ELISA法检测各组大鼠血浆去甲肾上腺素(NE)水平,RIA法检测心肌腺苷酸环化酶(AC)活性,通过RT-PCR检测心肌β1-AR、β肾上腺素能受体激酶1(β-ARaKl)和Gi蛋白mRNA的表达变化,Western blot检测β1-AR蛋白水平的表达变化.结果 COA组大鼠心功能恶化,血浆NE水平明显升高,β1-ARmRNA表达减少、β-ARKl和Gi蛋白mRNA表达增加,β1-AR的蛋白水平表达减少,AC活性明显下降;比索洛尔明显改善大鼠心功能[射血分数:COA 比索洛尔组:(66.7±8.4)%比COA组:(43.3±7.7)%,P<0.05],降低血浆NE水平[COA 比索洛尔组:(570.2±41.2)pg/mL比COA组:(908.24±75.10)pg/mL,P<0.05],增高β1-AR mRNA表达[COA 比索洛尔组:(57.5±5.4)比COA组:(44.9±4.2)P <0.05],降低β-ARKl和Gi蛋白mRNA表达[β-ARKl:COA 比索洛尔组:(38.0±3.2)比COA组:(52.4β4.1),P<0.05;Gi蛋白:COA 比索洛尔组:(72.8±5.8)%比COA组:(102.9±8.5)%,P<0.053,Western blot 检测显示比索洛尔也增加β1-AR的蛋白水平表达[COA 比索洛尔组:(59.2±4.8)%比COA组:(30.9±2.3)%,P<0.05],AC活性明显升高.结论 比索洛尔能够调节慢性心力衰竭大鼠β1-AR信号转导通路,改善心功能,延缓心力衰竭进展.     

比索洛尔对β_1肾上腺素受体自身抗体阳性心力衰竭大鼠Bcl-2/Bax的影响

目的探讨比索洛尔在降低β1肾上腺素受体(β1-AR)自身抗体阳性率和抗体滴度的同时,是否可以抑制细胞凋亡。方法将90只SD大鼠中80只采用缩窄腹主动脉方法,建立心力衰竭的大鼠模型,15只死亡,入组65只,将大鼠随机分为治疗组(40只)和非治疗组(25只)。治疗组接受比索洛尔4周治疗后,应用ELISA技术检测两组大鼠血清β1-AR自身抗体阳性率和滴度。应用免疫组织化学测两组大鼠血清β1-AR自身抗体阳性的Bax/Bcl-2。结果治疗组较治疗前β1-AR自身抗体阳性率降低27.5%(P<0.05);非治疗组无统计学差异(P>0.05);治疗组较治疗前β1-AR自身抗体滴度降低(P<0.01);非治疗组β1-AR自身抗体阳性滴度无显著差异(P>0.05);治疗组中Bcl-2的表达在β1-AR自身抗体阳性大鼠比阴性大鼠、非治疗组β1-AR阳性大鼠明显增高(P<0.01);Bax的表达比非治疗组阳性大鼠降低(P<0.01);且比同组阴性略有降低。结论比索洛尔治疗降低心力衰竭大鼠β1-AR自身抗体阳性率及抗体滴度,升高了β1-AR自身抗体阳性心力衰竭大鼠Bcl-2/Bax的比值。     

麝香保心丸对心力衰竭大鼠肺脏肾上腺素受体表达的影响

目的探讨麝香保心丸对心力衰竭大鼠肺脏α_(1A)-肾上腺素受体(α_(1A)-AR)和β_1、β_2肾上腺素受体(β-AR)表达水平的变化。方法选择Wistar大鼠54只,随机分为对照组(A组,10只)、假手术组(B组,10只)、心力衰竭模型对照组(C组,9只)、阳性药物对照组(D组,9只)、麝香保心丸小剂量组(E组,9只)和麝香保心丸大剂量组(F组,9只)。超声心动图检测用药前后大鼠心功能,采用Western blot测定各组大鼠肺组织α_(1A)-AR和β_1-AR、β_2-AR蛋白表达水平。结果用药前,A组与B组大鼠LVEF比较,差异无统计学意义(P>0.05);与B组比较,C、D、E、F组大鼠LVEF明显降低(P<0.01)。用药后与C组比较,F组大鼠LVEF明显改善;与B组比较,C组大鼠α_(1A)-AR、β_1-AR蛋白明显降低,β_2-AR蛋白明显升高;与C组比较,D、E、F组大鼠α_(1A)-AR、β_1-AR、β_2-AR蛋白明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论麝香保心丸能改善心肌梗死后心力衰竭大鼠的心脏功能,肾上腺素受体表达水平的变化,有利于维持心力衰竭时肺脏的通气/血流比值,进而对心力衰竭起到有益的治疗作用。     

慢病毒转染的β3-AR基因对心肌肥厚的影响

目的:探讨β3肾上腺素能受体(β3-AR)对SD大鼠乳鼠心肌肥大的影响及其机制。方法:体外培养SD大鼠乳鼠心肌细胞,用携带β3-AR基因的慢病毒转染细胞后,用去甲肾上腺素(NE)诱导细胞48h,建立心肌细胞肥大模型。实验分4组:空白对照组(Control组)、心肌肥厚组(NE组)、β3-AR基因转染+NE组(β3-AR组)、空病毒转染+NE组(空病毒组)。用免疫荧光法鉴定心肌细胞,倒置荧光显微镜观察病毒转染组绿色荧光蛋白(GFP)表达,免疫印迹法(Western Blot)检测β3-AR、丝裂原活化蛋白激酶p38(p38MAPK)、细胞外信号调控激酶(ERK1/2)、磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)和ERK(p-ERK1/2)及原癌基因c-myc、c-fos蛋白水平的表达。结果:(1)慢病毒介导β3-AR基因转染心肌细胞,β3-AR表达较空白对照组明显升高。(2)用Western Blot检测各实验组细胞原癌基因c-myc、c-fos表达,其中NE组、β3-AR组、空病毒组表达均高于空白对照组,其中β3-AR组cmyc、c-fos表达明显高于NE组。(3)NE组、β3-AR组、空病毒组p38MAPK及ERK1/2的磷酸化水平较空白对照组明显上调,其中β3-AR组表达最高。结论:慢病毒介导的β3-AR基因转染使心肌细胞有效高表达β3-AR,β3-AR可能通过MAPK通路促进心肌肥厚。     

比索洛尔对抗β1-肾上腺素能受体自身抗体阳性心衰大鼠心功能的影响

目的 探讨比索洛尔对抗β1-肾上腺素能受体（β1-AR）自身抗体阳性心衰大鼠心功能的影响。方法 采用缩窄腹主动脉的方法,建立慢性心力衰竭的大鼠模型。将心衰组大鼠（90只最终入组65只）随机分为心衰治疗组（40只）和心衰非治疗组（25只）。心衰治疗组接受比索洛尔4周的治疗。心衰非治疗组接受同剂量的蒸馏水同样时间的治疗。应用ELISA法检测大鼠血清β1-AR自身抗体的阳性率和滴度;应用BL-420E生物机能实验系统于治疗前及治疗后4周检测心功能。结果 ①治疗组组内抗β1-AR自身抗体阳性者较阴性者左室舒张末压低,左室变化的最大速率升高,但无统计学意义;非治疗组组内抗β1-AR自身抗体阳性者较阴性大鼠的心功能进一步恶化,左室舒张末压明显升高（P<0.01）,左室变化的最大速率下降（P<0.05）。②治疗组中抗β1-AR自身抗体阳性者与非治疗组中抗β1-AR自身抗体阳性者比较,前者较后者左室舒张末压明显下降（P<0.01）;左室变化的最大速率均显著升高（P<0.05）。结论 比索洛尔治疗后,心衰大鼠抗β1-AR自身抗体阳性者的心功能较非治疗组中抗β1-AR自身抗体阳性者的心功能明显改善。同为治疗组的抗β1-AR自身抗体阳性者的心功能较阴性者的左室舒张末压低,左室变化的最大速率升高。     

心力衰竭心肌β3肾上腺素能受体与氧化应激关系的实验研究

目的 研究心力衰竭(心衰)大鼠心肌β3,肾上腺素能受体(β3-AR)变化,观察选择性β3-AR抑制剂(SR59230A)对β3-AR、氧化应激状态的影响.方法 将异丙肾上腺素(ISO)诱导的心衰大鼠随机分成ISO组(18只)与ISO+SR59230A组(21只),同时以正常大鼠为对照组(7只).ISO+SR59230A组给予SR59230A,每日2次腹腔注射;ISO组给予相应生理盐水1 ml;对照组不予处置.6周后测定心功能、心肌β3-AR、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、小三磷酸鸟苷结合蛋白(Racl)mRNA、蛋白表达及脂质过氧化物(LPO)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)指标.结果 心衰大鼠心功能恶化,心肌β3-AR mRNA表达增加,SR59230A可改善心功能,降低β3-AR mRNA表达(均为P<0.05).心衰时,eNOS、Racl mRNA及蛋白上调,LPO产生增加、T-SOD水平降低.SR59230A降低eNOS、Racl表达,增加心肌组织T-SOD水平,使LPO减少(均为P<0.05).结论 心衰时,β3-AR表达增加,加重心肌氧化应激反应,恶化心功能.β3-AR抑制剂改善心功能可能通过抑制氧化应激、延缓心衰进展来实现.     

比索洛尔对心力衰竭大鼠心肌肌浆网钙ATP酶2a活性的影响

目的:观察比索洛尔对心力衰竭大鼠心肌肌浆网钙ATP酶2a(SERCA2a)活性的影响。方法:采用阿霉素腹腔注射法建立大鼠心力衰竭模型,随机分为正常对照组、假手术组、模型组、比索洛尔组、卡托普利组和比索洛尔+卡托普利组,分别以蒸馏水、比索洛尔、卡托普利、比索洛尔+卡托普利连续灌胃35d。观察大鼠心功能指标,ELISA法检测血浆脑钠肽水平,茎环状引物实时定量PCR检测心肌miR-25-3p表达水平,Western blot检测心肌SERCA2a和PLB蛋白表达水平,定磷法测定心肌SERCA2a活性。结果:比索洛尔组、卡托普利组和比索洛尔+卡托普利组大鼠心功能指标明显高于模型组,血浆脑钠肽水平明显低于模型组,miR-25-3p表达水平明显低于模型组,SERCA2a和受磷蛋白(PLB)蛋白表达水平明显高于模型组(P0.01)。比索洛尔组和比索洛尔+卡托普利组SERCA2a/PLB比值和SERCA2a活性明显高于模型组(P0.01或P0.05),卡托普利组与模型组比较无明显差异。结论:比索洛尔可以改善心力衰竭大鼠心功能,机制可能与下调心肌miR-25-3p表达水平,提高SERCA2a、PLB表达水平,提升SERCA2a/PLB比值,增强SERCA2a活性有关。     

心房颤动患者外周血淋巴细胞β_3肾上腺素受体的表达水平及临床意义

目的:检测心房颤动(房颤)患者外周血淋巴细胞β_3肾上腺素受体(β_3-AR)的表达水平,探索β_3-AR表达水平对房颤的预测价值。方法:选取经临床确诊的98例房颤患者作为房颤组(包括35例阵发性房颤患者、33例持续性房颤患者和30例永久性房颤患者),并选择31例门诊健康体检成年人作为对照组。收集两组受试者的一般临床资料及相关实验室指标。采用荧光实时定量聚合酶链式反应法检测两组受试者外周血淋巴细胞β_3-AR信使核糖核酸(mRNA)的表达量并进行比较。分析外周血淋巴细胞β_3-AR mRNA相对表达水平对房颤的预测价值。结果:房颤组β_3-AR mRNA表达水平高于对照组,相对表达水平为3.16±2.50(P0.05)。阵发性房颤、持续性房颤和永久性房颤患者的β_3-AR mRNA相对表达水平依次为1.90±0.96、2.92±1.45、4.89±3.54,组间比较差异均有统计学意义(P均0.05)。β_3-AR mRNA相对表达水平与左心房内径(LAD)呈正相关(r=0.256,P0.05)。多因素Logistic回归分析显示,β_3-AR mRNA相对表达水平与房颤相关(OR=16.644,95%CI:1.106～250.503,P=0.027)。受试者工作特征曲线显示,β_3-AR mRNA相对表达水平预测房颤的曲线下面积为0.734(95%CI:0.639～0.829,P0.05)。结论:房颤患者外周血淋巴细胞β_3-AR mRNA表达水平显著升高,β_3-AR mRNA表达水平升高可能参与心房重构。由此推断,β_3-AR mRNA表达水平可能是预测房颤的生物标志物。     

心力衰竭大鼠肾脏α_1及β肾上腺素受体各亚型表达的改变

目的探讨大鼠心力衰竭时肾脏α_1肾上腺素受体(α_1-AR)和β肾上腺素受体(β-AR)各亚型表达水平的变化。方法选择雄性Wistar大鼠35只,随机分为对照组10只、假手术组10只,其余大鼠制作心肌梗死后心力衰竭模型,成功9只为模型组。取大鼠肾脏皮质,采用Western blot法分别测定各组大鼠α_1-AR亚型(α_(1)-AR、α_(1B)-AR、α_(1D)-AR)和β-AR亚型(β_1-AR、β_2-AR)表达水平。结果与假手术组比较,模型组大鼠α_(1A)-AR、β_1-AR表达明显下调,差异有统计学意义(P<0.01);各组大鼠α_(1B)-AR、α_(1D)-AR、β_2-AR比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论心力衰竭时肾脏α_(1A)-AR和β_1-AR明显下调,可能与交感神经系统激活有关;而β_2-AR表达水平无明显变化,可能为代偿β_1-AR下调带来的不利影响,以维持肾脏有效灌注,保护肾脏功能。     

β_1肾上腺素受体激动对血管平滑肌细胞迁移的影响

目的观察β_1肾上腺素受体(β_1-AR)激动对血管平滑肌细胞(VSMC)迁移的影响。方法选择原代培养的Wistar大鼠胸主动脉VSMC并分7组:5%FBS组(对照组)、去甲肾上腺素(NE)刺激组(A组)、NE+β_1-AR阻断剂组(B组)、异丙肾上腺素(ISO)刺激组(C组)、ISO+β_1-AR阻断剂组(D组)、NE+蛋白激酶A阻断剂组(E组),NE+蛋白激酶抑制剂组(F组)。各组不同条件持续培养24 h后,以细胞划片法观察各组VSMC迁移距离的变化。另选VSMC加入10~(-4)～10~(-7)mol/L浓度NE刺激,观察其对细胞迁移效率的影响。结果与对照组比较,A组、C组VSMC迁移距离明显缩短,差异有统计学意义(P<0.01)。B组、D组迁移距离与对照组比较,差异无统计学意义。随着NE浓度增加,VSMC迁移距离逐渐缩短,NE对于VSMC迁移的抑制效应呈剂量依赖性。F组VSMC相对迁移距离与A组比较,差异无统计学意义。结论β_1-AR激动可抑制VSMC迁移,此过程不依赖蛋白激酶A的激活。     

益气温阳活血方对慢性心力衰竭心室重塑大鼠β3-肾上腺素能受体、血清Ⅰ型前胶原羧基端肽和Ⅲ型前胶原氨基端肽的影响

目的探讨益气温阳活血方对慢性心力衰竭心室重塑大鼠β3-肾上腺素能受体(β3-AR)、血清Ⅰ型前胶原羧基端肽(PⅠCP)和Ⅲ型前胶原氨基端肽(PⅢNP)的影响。方法通过异丙肾上腺素(ISO)诱导慢性心力衰竭动物模型。计算左、右心室心肌的心脏指数(LVMI、RVMI),应用酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清PⅠCP和PⅢNP含量,以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法以及Western印迹法检测β3-AR mRNA及蛋白质表达水平。结果与正常组比较,模型组LVMI〔(2.987±0.318 vs 2.350±0.468)mg/g〕、血清PⅠCP〔(16.357±3.650 vs 12.843±3.124)pg/ml〕、PⅢNP〔(64.984±17.477 vs 21.245±5.354)pg/ml〕含量及β3-AR mRNA(0.888±0.064 vs 0.743±0.086)与蛋白质(4.413±0.729vs 2.312±0.394)的表达水平明显升高(均P0.05);益气温阳活血方能够明显降低慢性心力衰竭大鼠LVMI,减少PⅠCP和PⅢNP含量,抑制β3-AR mRNA与蛋白质表达水平的升高,与正常组比较〔(2.557±0.379 vs 2.350±0.468)mg/g〕、血清PⅠCP〔(13.111±2.758 vs 12.843±3.124)pg/ml〕和PⅢNP〔(25.967±9.659 vs 21.245±5.354)pg/ml〕含量及β3-AR mRNA(0.781±0.067 vs 0.743±0.086)与蛋白质(2.484±0.642 vs 2.312±0.394),均无显著性差异(P0.05)。结论益气温阳活血方可能通过抑制β3-AR的表达减少PⅠCP和PⅢNP含量逆转心室重塑,改善心脏功能。     

去甲肾上腺素与哌唑嗪对高血压大鼠动脉平滑肌细胞Na+-K+-ATPase活性及mRNA表达的影响

目的 观察去甲肾上腺素(NE)及其α1肾上腺素能受体(α1-AR)拮抗剂哌唑嗪(Prazosin)对自发性高血压大鼠(SHR)动脉血管平滑肌细胞Na -K -ATPase活性及mRNA表达的影响.方法 采用生化酶学方法和逆转录聚合酶链反应技术,观察不同浓度的NE和哌唑嗪对自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞Na -K -ATPase活性和mRNA表达的影响.结果 与SHR组比较,NE(10-7 mol/L)能减弱Na -K -ATPase活性(3.98±0.14 vs 7.92±0.19,P＜0.01)及Na -K -ATPase α1-亚单位mRNA的表达(0.863±0.057 vs 1.307±0.051,P＜0.01),单用哌唑嗪对Na -K -ATPase活性及mRNA的表达均无影响(P＞0.05).哌唑嗪(10-7,10-6,10-5 mol/L)呈剂量依赖性减弱和阻断NE(10-7mol/L)对Na -K -ATPase活性(4.31±0.24,6.15±0.30,7.52±0.31)及Na -K -ATPase α1-亚单位mRNA表达(0.857±0.041,1.096±0.055,1.183±0.059)的影响(P＜0.01,P＜0.05).结论 NE抑制SHR Na -K -ATPase活性和下调Na -K -ATPase α1-亚单位mRNA表达,可能是通过α1-AR途径介导基因转录的下调.肾上腺素能1型受体拮抗剂哌唑嗪可通过阻断α1-AR途径抑制NE对自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞Na -K -ATPase活性和Na -K -ATPase α1-亚单位mRNA表达的影响.     

去甲肾上腺素各受体亚型在非酒精性脂肪肝大鼠肝组织的表达

目的:研究去甲肾上腺素各受体亚型在非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)大鼠肝组织的表达情况.方法:应用高脂饮食建立大鼠NAFLD模型HE染色观察肝脏病理形态学变化,Western blot和Real-time Q-PCR检测α-AR、β_1-AR、β_2-AR蛋白和m RNA的表达.结果:HE染色显示:大鼠NAFLD模型成功建立,随着造模时间延长肝脏脂肪变程度逐渐加重.Western blot检测结果显示,造模2-12 wk大鼠肝组织α-肾上腺素能受体(α-adrenergic receptor,α-AR)、β_1-AR、β_2-AR蛋白表达量均明显升高(P0.05).Real-time Q-PCR结果证实,随着NAFLD病的发展,α-AR、β_1-AR、β_2-AR mR NA表达均逐渐上调(P0.01).结论:高脂饮食法成功建立大鼠NAFLD模型,随着肝病进展,α-AR、β_1-AR、β_2-AR蛋白及m RNA含量明显增加.     

β_3肾上腺素能受体通过微小RNA对慢性心力衰竭大鼠左心房肌L型钙离子通道的调控

目的探讨β_3肾上腺素能受体(β_3-AR)对慢性心力衰竭(CHF)大鼠左心房肌L型Ca2+通道亚单位α2δ-2编码基因CACNA2D2的调控是否与微小RNA(miRNA)-1及miRNA-328存在关联。方法 22只雄性Wistar大鼠随机选6只为正常对照组(NC组),另16只采用皮下注射异丙肾上腺素建立CHF动物模型,将存活的12只大鼠再随机分为CHF组6只和BRL组(在大鼠尾静脉注射β_3-AR特异性激动剂BRL-37344) 6只。采用超声心动图检测大鼠左心房内径(LAD)、左心房射血分数(LAEF)及LVEF。采用苏木精-伊红染色检测大鼠左心房肌病理学变化。采用实时荧光定量PCR检测大鼠左心房肌β_3-AR、CACNA2D2以及miRNA-1、miRNA-328表达水平。结果BRL组大鼠LAD显著大于NC组和CHF组[(4. 42±0. 15) mm vs (3. 50±0. 21) mm和(4. 09±0. 17) mm,P 0. 01]; BRL组LAEF显著低于NC组和CHF组[(34. 91±1. 51)%vs (59. 89±3. 17)%和(40. 09±0. 95)%,P 0.01]。与CHF组比较,BRL组大鼠左心房肌细胞水肿进一步加重,可见明显肥大细胞等病理学改变更显著。与NC组比较,CHF组大鼠左心房肌β3-AR、CACNA2D2、miRNA-1及miRNA-328表达上调(P 0. 01);与CHF组比较,BRL组大鼠左心房肌β3-AR、CACNA2D2、miRNA-1及miRNA-328表达进一步上调(P 0. 01)。miRNA-1、miRNA-328、CACNA2D2与β3-AR表达呈正相关(r=0. 870、0. 904、0. 911,P 0. 01); CACNA2D2与miRNA-1、miRNA-328表达呈正相关(r=0. 880、0. 954,P 0. 01)。结论β3-AR对左心房CACNA2D2的正性调控可能与miRNA-1、miRNA-328存在关联。     

比索洛尔对慢性心衰病人心脏内分泌功能及预后的影响

目的探讨β1受体阻滞剂对心脏内分泌的病理生理及心功能影响。方法110例CHF患者随机分组,比索洛尔组58例,对照组52例,心脏彩色多普勒血流仪测量心功能、酶联免疫法测定BNP、NE水平及放射免疫法测定AngⅡ水平。结果比索洛尔组治疗6个月后,患者症状、心功能改善明显,同时血浆BNP、NE及AngⅡ水平较对照组显著降低(P<0.05)。结论比索洛尔减少BNP、NE、AngⅡ分泌,显著改善心功能及心脏内分泌功能。这种心脏内分泌变化可能有助于心衰病人预后。     

肝纤维化过程中去甲肾上腺素各受体亚型表达的动态变化

目的 研究肝纤维化过程中去甲肾上腺素各受体亚型表达的动态变化.方法 胆总管结扎法建立大鼠肝纤维化模型,HE,Masson染色观察肝脏病理形态学变化;免疫组织化学法检测肝星状细胞活化指标α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达情况;Western blot和实时荧光定量PCR检测α-肾上腺素受体(AR)、β1-AR、β2-AR蛋白和mRNA的表达水平.对数据进行单因素方差分析,LSD检验及相关分析.结果 HE及Masson三色染色显示:随着造模时间延长肝纤维化程度逐渐加重.α-SMA免疫组织化学染色显示:随着肝纤维化的发展,大鼠肝组织中α-SMA阳性细胞明显增多,造模1、2、3,4周时分别为10.58%±1.75%,24.14%±2.02%、29.74%±2.59%,34.28%±2.01%,而假手术组为4.12%±1.51%,P＜0.01.Western blot检测结果显示,造模1～4周大鼠肝组织α-AR、β1-AR,β2-AR蛋白表达量均明显升高(P＜0.05).实时荧光定量PCR结果证实,随着肝纤维化的发展,α-AR、β1-AR、β2-AR mRNA表达水平均逐渐上升(P＜0.01).α-SMA与α-AR、β1-AR、β2-AR蛋白表达水平的相关分析显示,α-SMA与α-AR、β1-AR及β2-AR呈正相关,r值分别为0.564,0.753和0.606.结论 胆总管结扎法成功建立胆汁淤积性大鼠肝纤维化模型,在肝纤维化形成过程中肝星状细胞表达α-SMA增加.随着肝纤维化的进展,α-AR、β1-AR、β2-AR蛋白及mRNA水平明显增加,且与α-SMA呈正相关.     

比索洛尔对心力衰竭大鼠心肌肌浆网钙三磷酸腺苷酶2a活性的影响

目的观察比索洛尔对心力衰竭大鼠心肌肌浆网钙三磷酸腺苷酶2a(SERCA2a)活性的影响。方法采用阿霉素腹腔注射法建立大鼠心力衰竭模型,随机分为假手术组、模型组和比索洛尔组,分别以蒸馏水或比索洛尔连续灌胃35d。心脏超声检测大鼠心功能指标,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血浆脑钠尿肽水平,实时定量聚合酶链反应检测心肌miR-25-3p表达水平,Western blot检测心肌SERCA2a和受磷蛋白表达水平,定磷法测定心肌SERCA2a活性。结果与假手术组比较,模型组大鼠心输出量、左心室短轴缩短率(FS)、左心室射血分数(LVEF)、心肌SERCA2a和受磷蛋白表达水平、SERCA2a与受磷蛋白比值和SERCA2a活性降低[SERCA2a活性(0.029±0.025)比(0.088±0.062)U/mg pro;P0.01],血浆脑钠尿肽和心肌miR-25-3p表达水平升高。与模型组比较,比索洛尔组大鼠心输出量、FS、LVEF、心肌SERCA2a和受磷蛋白表达水平、SERCA2a与受磷蛋白比值和SERCA2a活性升高[SERCA2a活性(0.072±0.063)比(0.029±0.025)U/mg pro;P0.05],血浆脑钠尿肽和心肌miR-25-3p表达水平降低。结论比索洛尔可以改善心力衰竭大鼠心功能,下调心肌miR-25-3p表达水平,提高SERCA2a与受磷蛋白比值,增强SERCA2a活性。     

β3肾上腺素能受体阻断剂对扩张型心肌病大鼠心功能的影响

目的研究选择性β_3肾上腺素能受体(β_3-AR)阻断剂SR59230A对扩张型心肌病大鼠心功能的影响。方法雄性Wistar大鼠72只,随机取14只分为对照组(Nor-C)和用药组(Nor-T),每组7只。其余大鼠应用异丙基肾上腺素制备心力衰竭(简称心衰)模型后,存活大鼠随机分为心衰组(HF-C,8只)和心衰用药组(HF-T,9只)。Nor-T组与HF-T组给予2 mmol/L的SR59230A 0.3 ml尾静脉注射,Nor-C组与HF-C组给予同等剂量生理盐水。血流动力学指标测定后,留取左心室心肌组织,测定内皮源性一氧化氮合酶(eNOS)mRNA、β_3-AR蛋白表达以及cGMP水平。结果Nor-T组与Nor-C组比较,大鼠左心室压力最大上升速率(dp/dt_(max))及左心室压力最大下降速率(dp/dt_(min))绝对值显著增高(P<0.05);左心室收缩末期压力(P_(ES))有上升趋势,左心室舒张末期压力(P_(ED))有下降趋势,但差异无统计学意义(P>0.05);左心室等容舒张时间常数(Tc)显著缩短(P<0.05)。HF-T组较HF-C组dp/dt_(max)、dp/dt_(min)绝对值及P_(ES)显著升高(P<0.05或<0.01);而P_(ED)、Tc则明显减低(P<0.05)。HF-C组与Nor-C组比较,eNOS mRNA及β_3-AR蛋白表达显著增加(P<0.01);而Nor-T组与Nor-C组、HF-T组与HF-C组间差异无统计学意义(P>0.05)。HF-C组较Nor-C组心肌cGMP水平显著增加(P<0.01);Nor-T组与HF-T组cGMP水平分别低于Nor-C组与HF-C组(P<0.05或<0.01)。结论①β_3-AR阻断剂SR59230A可以改善大鼠心功能,尤其以心衰大鼠为著;②心衰时β_3-AR、eNOS表达增加,心肌cGMP水平增高;③β_3-AR阻断剂改善心功能的作用机制主要是通过抑制cGMP水平实现的。     

去甲肾上腺素与哌唑嗪对高血压大鼠动脉平滑肌细胞Na~+-K~+-ATPase活性及mRNA表达的影响

目的观察去甲肾上腺素(NE)及其α1肾上腺素能受体(α1-AR)拮抗剂哌唑嗪(Prazosin)对自发性高血压大鼠(SHR)动脉血管平滑肌细胞Na -K -ATPase活性及mRNA表达的影响。方法采用生化酶学方法和逆转录聚合酶链反应技术,观察不同浓度的NE和哌唑嗪对自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞Na -K -ATPase活性和mRNA表达的影响。结果与SHR组比较,NE(10-7mol/L)能减弱Na -K -ATPase活性(3·98±0·14vs7·92±0·19,P<0·01)及Na -K -ATPaseα1-亚单位mRNA的表达(0·863±0·057vs1·307±0·051,P<0·01),单用哌唑嗪对Na -K -ATPase活性及mRNA的表达均无影响(P>0·05)。哌唑嗪(10-7,10-6,10-5mol/L)呈剂量依赖性减弱和阻断NE(10-7mol/L)对Na -K -ATPase活性(4·31±0·24,6·15±0·30,7·52±0·31)及Na -K -ATPaseα1-亚单位mRNA表达(0·857±0·041,1·096±0·055,1·183±0·059)的影响(P<0·01,P<0·05)。结论NE抑制SHRNa -K -ATPase活性和下调Na -K -ATPaseα1-亚单位mRNA表达,可能是通过α1-AR途径介导基因转录的下调。肾上腺素能1型受体拮抗剂哌唑嗪可通过阻断α1-AR途径抑制NE对自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞Na -K -ATPase活性和Na -K -ATPaseα1-亚单位mRNA表达的影响。     

比索洛尔改善心力衰竭大鼠心功能的机制探讨

目的:观察比索洛尔对心力衰竭大鼠心功能的影响,并探讨其机制。方法:80只SD大鼠随机选取10只为正常对照组,10只作为假手术组,假手术组腹腔注射10 ml/kg的生理盐水。造模过程中有15只死亡,左心室短轴缩短率不达标5只,40只成功造模大鼠按随机数字表法分成4组:模型组(n=10)、比索洛尔组(n=10)、卡托普利组(n=10)和比索洛尔+卡托普利组(n=10)。观察各组大鼠心功能指标,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测血浆B型利钠肽水平,实时定量逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测心肌miR-25-3p表达水平,免疫蛋白印迹试验(Western blot)检测心肌肌浆网钙ATP酶2a(SERCA2a)和受磷蛋白(PLB)表达水平,定磷法测定心肌SERCA2a活性。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠心输出量、左心室短轴缩短率、左心室射血分数、心肌SERCA2a和PLB表达水平、SERCA2a/PLB比值和SERCA2a活性显著降低,血浆B型利钠肽水平和心肌miR-25-3p表达水平显著升高(P均0.01)。与模型组比较,比索洛尔组、卡托普利组和比索洛尔+卡托普利组大鼠心输出量、左心室短轴缩短率、左心室射血分数、心肌SERCA2a和PLB表达水平、SERCA2a/PLB比值和SERCA2a活性显著升高,血浆B型利钠肽水平和心肌miR-25-3p表达水平显著降低(P均0.05)。结论:比索洛尔可以改善心力衰竭大鼠心功能,机制可能与下调心肌miR-25-3p表达,提高SERCA2a和PLB表达,提升SERCA2a/PLB比值,增强SERCA2a活性有关。