ChM-I同源蛋白-Tenomodulin的表达与作用

软骨调节素-I（chondromodulin-I，ChM-I）是近年来新发现的一种软骨源性生长因子，也是一种血管生成抑制剂。研究已证实，ClaM-I在软骨的无血管区高度表达，调节软骨的生长、分化及退变：ChM-I在其他软骨样组织，如视网膜、软骨终板等也特异性表达，在维持组织的正常生理功能中发挥重要的作用。近来有研究者报道了一种与ChM-I同源的新的蛋白质Tenomodulin（TeM），也称为ChM-IL或tendint。TeM在肌腱、韧带等缺乏血管的组织中高度表达，有关TeM结构、表达及作用的研究正逐渐兴起。     

碱性成纤维细胞生长因子对人椎间盘细胞外基质合成及软骨调节素表达的影响

目的研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对人椎间盘细胞基质合成能力以及血管生长抑制因子软骨调节素-1(ChM-1)表达的影响,为椎间盘退变的生物学治疗提供可供参考的生长因子。方法取4 例因腰椎间盘退变性疾病而于本院行腰椎间盘切除手术患者的椎间盘组织,分别进行髓核和纤维环细胞培养及表型鉴定。取传代细胞继续培养1 周后,向培养基中加入不同浓度的bFGF(0, 0.1 ng/ml, 1 ng/ml 和10 ng/ml),72 h 后收集细胞。采用Real-time RT-PCR 检测各组细胞中Aggrecan 和Ⅱ型胶原mRNA表达情况;同时利用Real-time RT-PCR和Western blot 方法检测bFGF 对ChM-1 mRNA和蛋白表达的影响。结果bFGF 可明显抑制人椎间盘细胞外基质成分Aggrecan 和Ⅱ型胶原mRNA的表达(P<0.05)。Real-time RT-PCR和Western blot 方法均提示bFGF 可抑制ChM-1 的表达水平(P<0.05),并具有剂量依赖性。结论bFGF 在发挥分解代谢功能的同时还具有潜在的促进血管生长作用。     

软骨调节素Ⅰ和结缔组织生长因子蛋白在骨髓间充质干细胞和软骨细胞中的差异表达

背景:骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化起促进作用的除转化生长因子、成纤维细胞生长因子、骨形态发生蛋白、胰岛素样生长因子基因在软骨细胞中高表达外,软骨调节素Ⅰ和结缔组织生长因子在软骨细胞中的高表达可能在软骨形成过程中发挥重要作用.目的:以Western blot检测软骨调节素Ⅰ和结缔组织生长因子在大鼠骨髓间充质干细胞、透明软骨细胞及弹性软骨细胞中的差异表达.设计、时间及地点:以细胞为对象的对比观察性实验,于2007-10/2008-04在大连医科大学附属第一医院中心实验室,大连医科大学生物实验室完成.材料:2月龄SD大鼠,雌雄不限.方法:以密度梯度离心法和贴壁培养法提取SD大鼠骨髓间充质干细胞,酶消化法提取肋软骨透明软骨细胞和耳廓弹性软骨细胞,分别培养二三代后提取细胞总蛋白,Western blot检测骨髓间充质干细胞、透明软骨细胞及弹性软骨细胞中软骨调节素Ⅰ和结缔组织生长因子蛋白水平表达,并进行定量分析.主要观察指标:软骨调节素Ⅰ和结缔组织生长因子蛋白水平.结果:透明软骨细胞、弹性软骨细胞中软骨调节素Ⅰ蛋白表达明显高于骨髓间充质干细胞(P<0.05),透明软骨细胞和弹性软骨细胞中软骨调节素Ⅰ蛋白的表达差异无显著性意义(P>0.05).透明软骨细胞、弹性软骨细胞中结缔组织生长因子蛋白的表达明显低于骨髓间充质干细胞(P<0.05),透明软骨细胞和弹性软骨细胞中结缔组织生长因子蛋白的表达差异无显著性意义(P>0.05).结论:透明软骨细胞和弹性软骨细胞中高表达软骨调节素Ⅰ蛋白,骨髓间充质干细胞高表达结缔组织生长因子蛋白,说明软骨调节素Ⅰ可能在成熟的软骨细胞中发挥着重要作用,提示其可作为定向诱导骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化的重要备选生物因子.     

骨性关节炎患者血管内皮生长因子的表达

目的 检测骨性关节炎(OA)关节软骨中血管内皮生长因子(VEGF)的表达.方法 应用SYBRGreen Ⅰ实时定量聚合酶链反应(PCR)检测20例OA和10例外伤患者关节软骨中VEGF mRNA表达,并用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定关节软骨组织VEGF含量.结果在OA和对照组患者软骨组织中都存在VEGF121、VEGF165和VEGF189 3种亚型的mRNA表达,但OA的VEGF121和VEGF165表达高于对照组.ELISA定量显示,OA患者的软骨组织分泌VEGF较对照组明显升高[(31.27±7.81)ng/g总蛋白、(5.15±2.69)ng/g总蛋白,P＜0.01)].结论 VEGF在OA的发病过程中起重要的作用.     

基底膜蛋白多糖的功能多样:血管发生与软骨形成及软骨骨化

背景:基底膜蛋白多糖功能多样,在调节血管生物学行为和损伤修复中具有重要作用.目的:探讨基底膜蛋白多糖在组织发育、血管发生、软骨形成中的调节机制.方法:应用计算机检索Sciencedirect和中国生物医学文献数据库(2000-01/2010-12),检索词分别为"perlecan,angiogenesis,cartilage,heparan sulfate,vascular endothelial growth facto"和"基底膜蛋白多糖,血管,软骨,硫酸乙酰肝素,血管内皮生长因子".纳入与基底膜蛋白多糖的表达、功能密切相关,同一领域选择近期发表或在权威杂志发表的文章.排除重复性研究或Meta分析类文章.结果与结论:检索到129篇文献,按纳入及排除标准筛选后,共纳入35篇符合标准的文献.经分析得出以下结论:基底膜蛋白多糖在机体发育过程必不可少,其具体作用机制受细胞微环境的影响.基底膜蛋白多糖功能强大,在与生长因子、成形素、基质蛋白交互作用下,可用相同的机制来调节每一个程序.     

CTGF反义寡核苷酸对纤维结缔组织疾病的治疗作用与机制

结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF),是一种富含半胱氨酸的多肽[1],属于即刻早期基因家族(CCN)。由成纤维细胞、平滑肌细胞和内皮细胞合成分泌。成年哺乳动物心、脑、肾、肺、肝及胎盘组织中均有表达。在病理状态下,其过度表达与一些纤维增生性疾病的发生及发展有着密切关系。1 CTGF的促纤维化作用目前,人们已经知道CTGF有促进细胞增殖、合成胶原、调节细胞外基质基因的表达、介导细胞黏附、刺激细胞迁移、加速新生血管的形成、促进软骨增生和骨骼发育、影响细胞凋亡过程等多种生物作用。其促纤维化的作用已成为…     

血管内皮生长因子及其受体在肺损伤中作用的研究进展

血管内皮生长因子(VEGF)既是一种多能性的生长因子,又是一种通透因子,在正常肺组织中大量表达,通过血管内皮生长因子受体(VEGFR)发挥其生理作用,具有促有丝分裂、血管生成和内皮细胞存活,增加血管通透性等作用,在急性肺损伤的发生、发展及转归中是一把双刃剑,其作用日益引起人们的重视.通过对VEGF在ALI/ARDS不同阶段中的作用的研究,有望为ALI/ARDS的药物治疗提供理论依据.     

基质金属蛋白酶和胶原在创伤关节软骨组织中的表达

背景:研究发现,基质金属蛋白酶和胶原参与关节软骨组织机体生理重建及病理破坏.目的:观察膝关节骨软骨缺损及表面软骨缺损动物模型关节软骨组织中胶原及基质金属蛋白酶的表达变化.方法:雌性SD大鼠48只随机分为3组:骨软骨缺损组在双膝关节制作骨软骨缺损模型,表面缺损组在双膝关节制作表面软骨缺损,对照组双膝关节制作关节囊切开.分别于术后4、8、12周取股骨髁标本,行苏木精-伊红染色,免疫组化检测Ⅰ型胶原、Ⅱ型胶原、基质金属蛋白酶3的表达.结果与结论:骨软骨缺损组术后4周缺损中有少量新生组织生成,8及12周可见到纤维组织填充,修复组织细胞外基质Ⅰ型胶原免疫组化染色阳性,Ⅱ型胶原免疫组化染色阴性,关节软骨组织中基质金属蛋白酶3表达增高.表面缺损组表面软骨缺损4及8周未见修复迹象,12周可见微量纤维组织填充,细胞外基质Ⅰ型胶原免疫组化染色阳性,Ⅱ型胶原免疫组化染色阴性,术后表面缺损组关节软骨组织基质金属蛋白酶3表达增高.对照组关节软骨组织Ⅰ型胶原免疫组化染色阴性,Ⅱ型胶原免疫组化染色阳性,基质金属蛋白酶3低表达,无形态学异常改变.说明机械性损伤可以导致关节软骨细胞外基质成分发生改变,丧失其原有的生物学特性而退变,基质金属蛋白酶3在损伤后的软骨组织中表达增高,使细胞外基质的降解增加,是导致关节软骨退变的重要因素.     

骨质疏松大鼠膝关节组织总胶原、Ⅰ型及Ⅱ型胶原蛋白的含量变化

背景:目前研究认为胶原蛋白在骨细胞的增殖与分化、骨质的形成和吸收、骨基质矿化等过程中起着非常重要的作用.目的:观察骨质疏松模型大鼠膝关节组织总胶原、Ⅰ型及Ⅱ型胶原蛋白含量变化.方法:SD雌性大鼠40只随机分为实验组和对照组,实验组大鼠行双侧卵巢切除16周后,取膝关节软骨和交叉韧带,采用微量羟脯氨酸测定法及酶联免疫吸附法测定大鼠膝关节软骨及前交叉韧带组织总胶原、Ⅰ型及Ⅱ型胶原蛋白含量.结果与结论:骨质疏松膝关节模型大鼠膝关节软骨、前交叉韧带总胶原、Ⅰ型及Ⅱ型胶原蛋白含量明显下降(P < 0.05),Ⅰ型/Ⅱ型胶原比值也显著降低(P < 0.05),提示骨质疏松可引起膝关节内组织总胶原、Ⅰ型及Ⅱ型胶原含量及其比值改变,与膝关节骨性关节炎的发生密切相关.     

促红细胞生成素与妇科恶性肿瘤的相关性

促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)是一种糖蛋白细胞因子,广泛分布于人体肾脏、肝脏、神经组织、消化道、生殖系统等,尤其在许多人类的恶性肿瘤组织中高度表达。因此近年来EPO对于恶性肿瘤的生物学作用成为研究热点,其中EPO的抗凋亡与促血管生成作用尤为重要。     

血管内皮生长因子及其受体在妊娠期高血压疾病中的研究进展

血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)是作用最强、特异性最高的血管新生调节因子,近来国内外的一些研究相继发现VEGF及其受体的异常表达参与妊娠期高血压疾病的发病及其病理生理过程,对探讨妊娠期高血压疾病的病因及发病机制起了重要的作用.VEGF是1989年由Ferrara等[1]在牛垂体滤泡星形胶质细胞体外培养液中分离纯化出来的,是目前惟一确定的高度特异性促血管内皮生成因子,具有促进血管内皮增殖、促进细胞游走、增加血管通透性等作用,在妊娠期高血压疾病、子宫内膜异位症、流产、心血管疾病、肿瘤、糖尿病等中发挥了重要的作用,现就其及其受体在妊娠期高血压疾病的研究作以下综述.     

颈椎病终板软骨组织中血管内皮生长因子和缺氧诱导因子-1α表达的相关性

目的:探讨颈椎病软骨终板组织中血管内皮生长因子(VEGF)、缺氧诱导因子-1!(HIF-1α)的表达及意义。方法:采用免疫组化SP法检测25例颈椎病患者和20例颈椎外伤患者(对照组)终板软骨组织中VEGF和HIF-1α的表达,并且对颈椎病患者终板软骨组织中VEGF和HIF-1α表达进行相关性分析。结果:颈椎病终板软骨组织中VEGF和HIF-1α阳性表达率分别为(28±12)%和(39±17)%,对照组VEGF及HIF-1α阳性表达率分别为(43±14)%和(63±11)%;终板软骨组织中VEGF和HIF-1α表达均低于对照组(P<0.05);相关分析显示,颈椎病终板软骨组织中VEGF和HIF-1α表达存在正相关性(r=0.86,P<0.05)。结论:颈椎病终板软骨组织中VEGF和HIF-1α表达明显减少,HIF-1α对调节VEGF的表达起到关键性作用。     

西拉普利和缬沙坦对大鼠心肌梗死后心脏间质胶原代谢及心肌血管紧张素mRNA表达的影响

心肌纤维化是心室重构过程中的重要方面.肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS)激活是心肌间质纤维化发生的主要病理机制,血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)作为肾素一血管紧张素系统(RAS)的效应分子,在心室重构过程中发挥关键作用.Ang Ⅱ主要通过与其特异性受体结合来发挥生理和病理效应,血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)和选择性Ⅰ型血管紧张素(AT1)受体拮抗剂(ARB)从不同水平抑制RAS.本研究通过对大鼠心肌梗死后心肌组织AT1、AT2受体和Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达变化的研究,探讨心肌局部Ang Ⅱ受体表达在心肌梗死后的变化及其与心脏间质重构的关系,并观察ACEI、ARB对AngⅡ受体表达的影响及对心脏间质重构的作用.     

Akt和Bad信号分子在人膝骨性关节炎中的变化

背景:已知磷脂酰肌醇三磷酸激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,P13K)/蛋白激酶B(protein kinase B,PKB/Akt)信号途径具有促进细胞增殖、抑制凋亡的功能,有关P13K/Akt信号途径在骨性关节炎发病中的意义也引起关注,但缺乏对P13K/Akt信号途径在人膝骨性关节炎软骨组织中表达及意义的研究.目的:观察Akt、Bad信号分子在人膝骨性关节炎中的变化情况.方法:苏木精-伊红染色观察软骨组织形态学改变,免疫组织化学技术检测31例膝骨性关节炎患者关节软骨(实验组)与10例正常人膝关节软骨(对照组)Akt及Bad的分布和表达.结果与结论:①骨性关节炎关节软骨厚度变薄,浅层破溃;中层和深层软骨细胞排列紊乱、分布不均.②膝骨性关节炎患者中、深层软骨组织中Akt的表达均明显低于正常人关节软骨组织(P＜0.01);Bad在骨性关节炎患者及正常人关节软骨组织内均有表达,但无显著性差异(P＞0.01).提示软骨细胞内P13K/Akt信号途径与骨性关节炎的发生发展密切相关,P13K/Akt途径的变化可能是导致关节软骨破坏的主要因素之一.而Bad并没有参与骨性关节炎关节软骨细胞的生命活动,P13K/Akt途径调节另有其他底物存在.     

HIF-1α在乳腺癌组织中的表达及其临床意义

乏氧诱导因子-1(HIF-1)是一种随着细胞内氧浓度变化而调节基因表达的转录激活因子,由氧调节亚单位HIF-1α和HIF-1β组成,具有DNA结合活性.其中, HIF-1β在有氧及缺氧状态下均稳定于细胞中, HIF-1α是主要的氧调节亚基,在氧正常时迅速被蛋白酶降解,而在缺氧时半衰期显著延长,可调节多种靶基因如葡萄糖转运因子、VEGF、红细胞生成素等的表达,对维持肿瘤细胞的能量代谢、刺激新生血管生成、促进肿瘤细胞增殖和转移起重要作用.本研究,运用免疫组织化学的方法,检测了乳腺癌组织中HIF-1α的表达情况,现报道如下.     

微小RNA与冠心病的研究进展

微小RNA(microRNA,miRNA)是内源性的大小在20～23核苷酸的一类非编码的RNAs,广泛存在于真核生物体内,并在进化中高度保守.其中一些miRNA在心血管系统中高度表达和特异表达,它们在冠心病的发病机制及治疗中也起重要的作用,其中miR-126与miR-21参与内皮细胞功能的调节,miR-15和miR-320的下调可预防缺血诱导的细胞凋亡,miR-221/miR-222、miR92a参与调节血管的再生,miR-29的下调可抑制梗死后的纤维化.本文简要概述近年来有关miRNA与冠心病研究的部分进展并进行相应的展望.     

ACE基因插入/缺失多态性与肾素-血管紧张素-醛固酮系统及相关心血管疾病的关系研究进展

肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS)是人体内重要的体液调节系统。RAAS存在于血管壁、心脏、肾脏和肾上腺等组织中,作用于循环系统,参与对靶器官的调节。在正常情况下,它具有调节水、盐平衡,血管张力和交感神经活性,维持内环境稳定,调节血压以及对心血管系统的正常发育、功能稳态等作用而被认为与心血管疾病的发生、发展及预后有密切联系;因此编码该系统的各个基因就成为许多课题研究的很有吸引力且极具价值的候选基因。RAAS在健康和疾病中发挥着中心作用,但该系统活性的决定因素尚未完全阐明。血管紧张素转换酶(ACE)是RAAS中的一种关键酶,它主要将血管紧张素Ⅰ(AngⅠ)水解转化成具有强大生物活性的血管紧张素Ⅱ(AngⅡ),同时降解缓激肽使之失活。目前,ACE基因插入/缺失(I/D)多态性与冠心病、心肌病、高血压等心血管疾病的关系已引起人们广泛的注意,研究报道很多,但结果不一。因此探讨ACE基因多态性与RAAS及相关心血管疾病关系的重要性,无论是在阐明疾病的分子生物学发病机制,还是指导临床药物的应用,都会带来前所未有的启发。     

软骨组织工程研究中的刺激因子

组织工程中刺激因子的作用是诱导、加速或,和增强软骨形成.生长因子与其添加物加入体外培养介质中或加入支架中体内递送以控制细胞分化和组织形成.目前,许多生长因子以及其他可溶性因子如透明质酸、硫酸软骨素和胰岛素已开始被单一地或协同地应用于软骨组织工程,其作用效果依赖于细胞的类型和培养条件.基因治疗利用过分表达的生物活性分子作用于细胞是另一种局部转导的方法.另一种刺激因子是调节负载方式的机械信号,如流体静压和动态压力或通过生物反应器.目前应用于软骨组织工程中的生物反应器包括:平行平板生物反应器、旋转壁式生物反应器以及同轴圆柱生物反应器.生物反应器可以提高营养传输能力,提供流体动力环境,施加液诱导剪应力,进而促进软骨特异性基质蛋白的合成.     

胎盘及脐血管中Apelin、ApJ和AT1R表达的研究

目的探讨新的血管活性肽Apelin及其受体ApJ蛋白在人胎盘及脐带血管组织中的表达及定位,并与血管紧张素型Ⅱ1型受体(AT1R)蛋白的表达部位相比较。方法收集10例妊娠37～41周妇女(晚孕组)的胎盘组织及5例脐带血管,采用免疫组织化学(免疫组化)方法进行Apelin、ApJ及AT1R蛋白的表达及定位分析。结果(1)人胎盘组织中存在Apelin、ApJ及AT1R蛋白的表达。Apelin及其受体ApJ蛋白主要定位于胎盘滋养细胞及血管内皮细胞,部分绒毛间质细胞中有ApJ蛋白的表达。(2)Apelin-36蛋白及受体APJ蛋白在脐静脉为阳性表达,动脉血管内皮细胞为弱阳性表达,在血管内皮细胞周围的平滑肌细胞中也可见到APJ蛋白的阳性表达。(3)AT1蛋白主要表达于脐静脉血管内皮细胞,而脐动脉血管中仅有少数血管内皮细胞可见到弱阳性染色。结论胎盘及脐血管组织中,Apelin/ApJ受体作为相对独立的自分泌和旁分泌调节机制对妊娠期胎盘血管系统功能的调节可能有一定的作用。     

创伤性关节炎软骨中基质金属蛋白酶13及组织特异性抑制剂1的表达

背景:关节软骨损伤后继发性退变机制仍不十分清楚。近年研究发现关节软骨细胞外基质合成与降解失衡是造成软骨变性的重要原因之一,其中基质金属蛋白酶可能起决定性的作用。目的:观察基质金属蛋白酶13及其组织特异性抑制剂1在创伤性关节炎中的表达及与软骨退变的关系。方法:将新西兰兔分别用骨水泥制作的模具从1.33kg,46cm高度和0.43kg,20cm高度进行自由落体撞击制备轻型和重型撞击创伤性关节炎兔模型。结果与结论:苏木精-伊红染色和免疫组织化学染色结果显示,基质金属蛋白酶13和组织特异性抑制剂1在两组均增高(P<0.05)。组织特异性抑制剂1在重型撞击创伤性关节炎模型兔软骨组织中的分泌明显高于轻型撞击组(P<0.05)。说明关节软骨在创伤后,基质金属蛋白酶13及组织特异性抑制剂1表达上调,共同作用促进了关节软骨退变,其中组织特异性抑制剂1的过量表达可能是造成关节软骨进一步损害的原因之一。