高海拔西藏地区辅助生殖技术培养条件中CO_2浓度的初步研究

目的在西藏拉萨(海拔约3 650m)研究开展人类辅助生殖技术(ART)所需的胚胎实验室培养条件,为西藏地区广大不孕不育夫妇提供ART治疗奠定基础。方法利用血气分析仪检测COOK培养液(受精液、卵裂液、囊胚液)在不同CO2浓度下(4.5%~7.0%)平衡不同时间(12h、24h、48h、72h)后的pH值和HCO-3浓度变化情况,选择COOK培养液所需的最佳CO2浓度,并利用鼠胚实验进一步验证胚胎培养环境的可靠性。结果 (1)在所测试的CO2浓度范围内,COOK培养液pH值随着CO2浓度的增加呈整体下降趋势,随着平衡时间的延长呈逐渐上升趋势。(2)在4.5%、5.0%、5.5%的CO2浓度下平衡12h、24h、48h、72h后,COOK受精液、卵裂液pH值均在厂商提供的使用范围内(7.3~7.5),囊胚液平衡48h后pH接近7.3。(3)对比4.5%和5.0%CO2浓度组培养箱中鼠胚培养情况,结果显示4.5%CO2浓度组鼠胚发育较5.0%CO2浓度组差异显著(受精率75.24%vs.67.63%、2细胞转囊胚率61.94%vs.49.29%)(P0.01)。结论海拔3 650m的胚胎实验室使用COOK培养液时,在4.5%CO2浓度下平衡后,培养液的pH值波动较小,同时鼠胚发育情况良好,达到开展ART技术所需的胚胎实验室的胚胎培养条件;另外,COOK培养液pH值在7.3~7.5之间所需的CO2浓度低于内地,与厂商所提供的随着海拔的升高而增加并不相符。后期仍需进一步摸索海拔和培养液所需CO2浓度之间的关系。     

体外模拟C02气腹对人结肠癌SW480细胞生长的影响

目的通过建立体外模拟CO2,气腹环境,研究CO2,气腹对人结肠癌SW480细胞生长的影响。方法建立体外模拟CO2,气腹环境,在全自动气腹机作用下维持密闭培养箱内压力分别为9、12、15mmHg,持续时间分别为1、2、4h。在处理后第12h通过流式细胞仪观察细胞周期变化;在处理后第12、24、36、48、60、72h用MTT法检测细胞增殖情况;在处理后0、0．5、1、1．5、2、2．5h通过电子pH计检测细胞培养液pH值的变化。结果流式细胞仪检测细胞周期结果显示,CO2,气腹组G02／G1期细胞比例与对照组差异无统计学意义（P〉0．05）。CO2,气腹压力对于人结肠癌G0／G1期细胞周期有显著影响（P=0．008）,但对s期、G2／M期无影响（P〉0．05）;CO,气腹持续作用时间对各细胞周期无影响（P〉0．05）。MTT法检测细胞增殖结果显示,各气腹组人结肠癌SW480细胞的D（490）值均低于对照组,且9mmHg一4h、12mmHg一4h、15mmHg一2h气腹组在处理后第24、36h,15mmHg一4h气腹组在处理后第24、36、48、60h的人结肠癌SW480细胞的JD（490）值与对照组差异具有统计学意义（P〈0．05）。压力处理后第24、36h对SW480细胞的增殖有显著的一过性影响（P〈0．01）,而在第12、48、60、72h对SW480细胞的增殖无影响（P〉0．05）;作用时间对SW480细胞的增殖无影响（P〉0．05）。电子pH计检测细胞培养液pH值结果显示,除9mmHg一1h气腹组在处理后2．5h细胞培养液的pH值与对照组无统计学差异外（P〉0．05）,其余各气腹组在处理后0、0．5、1、1．5、2、2．5h与对照组差异有统计学意义（P〈0．05）。结论体外模拟CO,气腹环境,不会促进结肠癌细胞的增殖,且高CO,气腹压力对结肠癌细胞的增殖有一过性抑制作用,CO2：气腹持续时间对结肠癌细胞的增殖无影响。     

胚胎培养液中添加白蛋白对pH的影响

目的了解胚胎培养液添加白蛋白对pH的影响。方法在HTF受精液、CM卵裂液、G1卵裂液和CSC全程培养液中添加不同浓度的白蛋白制剂,在经过5.0%CO_2过夜平衡后用血气分析仪检测其HCO_3浓度和pH。结果白蛋白制剂的HCO_3~-浓度明显低于培养液;培养液中添加白蛋白会降低HCO_3~-浓度和pH,白蛋白浓度与pH呈高度负相关(P0.01);不同品牌培养液的pH,模型存在较明显差异,HTF和CM的pH明显低于G1和CSC(P0.01)。结论胚胎培养液中添加白蛋白会降低pH且与培养液的品牌相关,应通过实测胚胎培养液的pH来确定CO_2浓度,尤其是搭配使用不同品牌产品的时候,仅仅依靠经验或厂家提供的参数是不可靠的。     

体外模拟二氧化碳气腹对人胃癌细胞迁移运动的影响

目的探讨通过体外模拟气腹环境，观察不同压力二氧化碳（CO2）和氦气（He）对胃癌细胞MKN-45迁移运动的影响。方法将MKN-45细胞置于充满CO2或He的密闭培养箱中，按模拟气腹种类不同分为对照组、CO2气腹组和He气腹组，模拟气腹压力分别12mm Hg和15mm Hg，作用时间均为4h。于处理后用血气分析仪检测培养液pH值；用Transwell法观察细胞迁移运动变化。结果处理结束后即刻检测，CO2组细胞培养液呈酸性，He组细胞培养液呈碱性。CO2组和He组在12mm Hg压力下MKN-45细胞穿过滤膜的数量较对照组差异无明显统计学（P〉0．05），CO2 15mm Hg组细胞穿过滤膜的数量较对照组明显减少（P〈0．01）；He 15mm Hg组与对照组差异无明显统计学（P〉0．05）。结论在临床常用气腹压力下（12mm Hg）CO2对胃癌细胞迁移运动无明显影响。     

不同压力的二氧化碳气腹对胃癌细胞迁移运动和细胞骨架的影响

目的通过体外模拟气腹环境，观察不同压力CO2或He（helium）对胃癌细胞MKN-45迁移运动和细胞骨架的影响。方法将MKN-45细胞置于充满CO2或He的密闭培养箱中，按模拟气腹种类不同分为对照组、CO2气腹组和He气腹组，模拟气腹压力分别为12mmHg和15mmHg，作用时间均为4h。于处理结束后即刻用血气分析仪检测培养液pH值；Transwell法观察细胞迁移运动变化；激光共聚焦显微镜观察细胞骨架变化。结果CO2组细胞培养液呈酸性，He组细胞培养液呈碱性。CO2组和He组在12mmHg压力下MKN-45细胞穿过滤膜的数量较对照组差异无统计学意义（P〉0．05）。CO2 15mmHg组细胞穿过滤膜的数量较对照组明显减少（P〈0．01）；He15mmHg组与对照组差异无统计学意义（P〉0．05）；CO2 15mmHg组细胞微丝、微管结构模糊，伪足消失。结论在临床常用气腹压力（12mmHg）下CO2对胃癌细胞迁移运动及细胞骨架无明显影响；在15mmHg压力下，CO2对胃癌细胞迁移运动起抑制作用，其作用机制可能与其细胞骨架受破坏有关。     

兔髓核细胞体外最佳培养条件的探索

[目的]探索髓核细胞培养的最佳条件，为进一步作为椎间盘组织工程种子细胞提供可能。[方法]以DMEM／F12(1：1，添加FBS10％，pH7．2)作为基础培养液，通过依次改变培养液pH、胎牛血清浓度、抗坏血酸浓度、培养温度、CO2浓度以及培养板处理，计数10d克隆形成数，检测细胞生长代谢，确定最佳培养条件。[结果](1)髓核细胞不易贴壁生长，在未经处理的培养板中进行单层培养细胞增殖能力较弱，克隆形成少；而铺被多聚赖氨酸的培养板中培养可以较快贴壁并形成相对较多的克隆；(2)生长培养液在DMEM／F12(1：1)，pH7．0、胎牛血清浓度15％、抗坏血酸30μg／ml、温度37℃以及CO2浓度为5％时，髓核细胞生长良好，Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖(aggrecan)mRNA表达增高。[结论]在最佳培养条件下，髓核细胞生长状态良好，为椎间盘组织工程髓核细胞的培养奠定了基础。     

不同压力CO2气腹对胃癌细胞增殖凋亡的影响

目的通过体外模拟气腹环境,观察CO2在不同压力下对胃癌细胞MKN-45增殖、凋亡的影响。方法以CO2为气体介质,在气腹机作用下维持密闭培养箱内压力为0、5、10、15mmHg,作用时间为4h。于处理后用血气分析仪检测培养液pH值;MTT法检测细胞增殖情况;通过流式细胞仪观察细胞凋亡指数变化;采用AnnexinV-FITC/PI双标染色、流式细胞仪测定凋亡细胞比例。结果处理结束后即刻检测,CO2组细胞培养液呈酸性,但在恢复正常培养后6h即恢复正常。MTT法检测细胞增殖变化,CO2组0、5、10mmHg压力下处理组与对照组比较无明显差异(P>0.05),而在15mmHg压力下处理组与对照组比较OD490值在前3d无明显差异(P>0.05),在4～7dOD490值下降非常显著(P<0.01)。在CO2环境下,0mmHg组细胞凋亡指数和凋亡比例与对照组相比无明显差异(P>0.05),而5、10、15mmHg组明显大于正常对照组(P<0.05)。结论在较低压力范围内(≤10mmHg)CO2对胃癌细胞增殖、凋亡影响不大,而在15mmHg压力下,CO2可抑制MKN-45细胞增殖,促进其凋亡。     

不同压力CO_2气腹对人胃癌MKN-45细胞生长的影响

目的研究体外模拟不同压力CO2气腹环境对人胃癌MKN-45细胞生长增殖能力的影响。方法实验组于体外建立模拟CO2气腹环境,全自动气腹机维持气腹压力分别为9、12、15mm Hg,作用时间均为4h,对照组直接放入37℃、5%CO2孵箱中培养。处理后第0、0.5、1、1.5、2、2.5、3h,用pH计检测细胞培养液pH值变化;第1、2、3、4、5、6、7天,MTT法检测细胞增殖情况。结果15mmHgCO2气腹处理后胃癌细胞增殖较对照组下降显著(P<0.05),但9、12mmHg组与对照组差异无统计学意义(P>0.05)。CO2气腹处理后细胞培养液pH值较对照组下降非常显著(P<0.01),但在恢复正常培养后最长3h即恢复正常。胃癌细胞增殖在第1天与不同压力CO2气腹处理后细胞培养液的即时pH值有显著相关性(P<0.05),而第2、3、4、5、6、7天均无相关性(P>0.05)。结论模拟9、12mmHgCO2气腹对胃癌MKN-45细胞增殖没有显著影响,模拟15mmHgCO气腹对胃癌MKN-45细胞增殖有显著的抑制作用。     

体外模拟气腹环境对胃癌细胞增殖凋亡的影响

目的通过体外模拟气腹环境,观察二氧化碳(CO2)和氦气(He)在不同压力下对胃癌细胞MKN-45增殖、凋亡的影响。方法实验分为对照组、CO2组和He组,其中CO2组和He组又按照压力不同分为0、5、10、15mmHg组(作用时间均为4h)。细胞在密闭培养箱内经不同压力CO2或He作用4h后用血气分析仪检测培养液pH值;MTT法检测细胞增殖情况;流式细胞仪观察细胞凋亡指数变化;AnnexinV-FITC/PI双标染色、流式细胞仪测定凋亡细胞比例。结果处理结束后即刻检测,CO2组细胞培养液呈弱酸性,He组细胞培养液呈弱碱性。MTT法检测细胞增殖变化,CO2组0、5、10mmHg组OD值与对照组比较无明显差异(P>0.05),15mmHg组OD值与对照组比较在前3天无明显差异(P>0.05),在4~7天OD值明显低于对照组(P<0.01)。而在He组,不同压力组细胞增殖活性与对照组比较无明显差异(P>0.05)。在CO2环境下,0、5mmHg组细胞凋亡指数与对照组比较无明显差异(P>0.05),而10、15mmHg组明显大于正常对照组(P<0.01)。0、5mmHg组细胞凋亡比例与对照组比较无显著差异(P>0.05...     

胰岛素对小鼠早期胚胎体外发育的影响

目的　探讨胰岛素对小鼠体内外来源早期胚胎体外发育的影响。　方法　用添加不同浓度胰岛素和胰岛素+葡萄糖的CZB培养液对小鼠体内外来源胚胎进行体外培养 ,观察囊胚发育率和囊胚细胞数的变化。　结果　小鼠 2 细胞胚胎体外培养 10 2h后 ,0 .0 5 μg/ml胰岛素添加组扩张囊胚率、孵化囊胚率和囊胚细胞数均显著高于其他各浓度添加组。葡萄糖加入显著提高了这一效应。添加 0 .0 5 μg/ml胰岛素和葡萄糖的CZB培养液同样显著提高体外受精 (IVF)胚胎的孵化囊胚率和囊胚细胞数。　结论　添加胰岛素和葡萄糖培养液对体内或IVF小鼠胚胎发育具有相同的促进作用。     

人精子活力试验在IVF实验室质量控制中的应用

目的:评价人精子活力试验作为体外授精-胚胎移植(IVF)实验室质量控制方法的敏感性及应用价值。方法:实验1实验组HTF培养液中加入0.25%、0.75%的甲醛,对照组不加甲醛;所有HTF培养液均加入0.3%牛血清白蛋白、矿物油或者两者都有,了解人精子活力在这些培养条件下的变化。实验2采用人精子活力试验检测3种组织培养管的胚胎毒性。在HTF培养液中加入牛血清白蛋白、矿物油或两者都加,对照组不加任何附加物,了解这些附加物对精子有无保护作用。结果:实验1人精子在含0.25%甲醛的HTF培养液中培养24 h,活力指数为0.594±0.331,高于含0.75%甲醛培养液的0.450±0.284,差异有统计学意义(P<0.01);在含0.25%和0.75%甲醛的胚胎培养液中加入0.3%牛血清蛋白、矿物油,精子活力指数分别为0.683±0.334、0.527±0.345,高于不含牛血清白蛋白及矿物油的0.394±0.311、0.424±0.311,差异有统计学意义(P<0.01)。实验2同样的培养时间与培养条件,丹麦Nunc lom公司7 m l组织培养管中的精子活力指数为0.677±0.335,高于美国Falcon公司的14 m l培养管的0.596±0.327和美国Corn ing公司15 m l组织培养管的0.551±0.317,差异有统计学意义(P<0.01);在培养液中加入0.3%牛血清白蛋白、矿物油,精子活力指数为0.821±0.259、0.645±0.335,高于不含牛血清白蛋白及矿物油的0.571±0.321与0.395±0.245,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:精子对培养环境中的微量毒性成分十分敏感,其活力在短时间内明显下降。人精子活力生物试验是一种敏感的生物测试方法;丹麦Nunc lom公司7 m l组织培养管对精子活力影响最小,适合于人胚胎的培养;培养液中加入牛血清白蛋白及矿物油可以减少培养环境中的毒素影响,对精子及其活力有保护作用。     

二氧化碳气膀胱镜技术在膀胱肿瘤诊断中的应用

目的探讨CO2气膀胱镜技术在诊断膀胱肿瘤中的应用价值。方法以CO2气体为介质,采用气膀胱镜技术,对50例膀胱肿瘤患者进行检查,观察其对呼吸、循环系统及上尿路系统的影响并评价其安全性、可行性。结果操作顺利,检查时间为（21.0±8.2）min。术中、术后无相关并发症发生。检查前、开始5min、10min及结束后30min的血压、心率、血氧饱和度值相比,无统计学差异（P〉0.05）。检查前、后血气分析中pH值、CO2分压值、O2分压值相比无统计学差异（P〉0.05）。检查前、后肾盂及输尿管上段宽度无统计学差异（P〉0.05）。结论 CO2气膀胱镜技术对机体呼吸、循环系统及上尿路系统无明显影响,安全有效;对膀胱肿瘤合并有血尿的患者,相对于传统膀胱镜技术而言更具有优势。     

Gastric air tonometry during laparoscopic cholecystectomy: a comparison of two PaCO2 levels

PURPOSE: Pneumoperitoneum can cause disturbances in acid-base balance and splanchnic perfusion. We studied the effect of ventilation on acid-base balance and gastric mucosal tonometric values in patients undergoing laparoscopic cholecystectomy. METHODS: Twenty-four patients (ASA I-II) were randomly allocated into two groups. In the fixed ventilation group, ventilation was constant allowing free increase in PCO2, while in the constant CO2 group end-tidal PCO2 was fixed with ventilatory adjustment. Intraabdominal pressure was limited to 12 mmHg. Arterial acid-base balance, automated air tonometric variables and gastric mucosal to arterial PCO2 gap were determined frequently from anesthesia induction until three hours postoperatively. RESULTS: During pneumoperitoneum, in the fixed ventilation group arterial PCO2 changed from 5.0 +/- 0.2 to 6.6 +/- 0.4 kPa and pH from 7.43 +/- 0.03 to 7.33 +/- 0.04, tonometric PCO2 from 5.1 +/- 0.5 to 6.9 +/- 0.4 and pH from 7.44 +/- 0.04 to 7.33 +/- 0.04. In the constant CO2 group these variables remained at control levels (P < 0.01 between groups). The PCO2 gap remained unchanged without any differences between the groups. In the recovery room all measured variables were within normal range in both groups. CONCLUSION: Despite inter-group differences in arterial and tonometric PCO2 and pH values during CO2 pneumoperitoneum, the patients did not develop splanchnic hypoperfusion detectable by air tonometric method, as indicated by normal PCO2 gap in both groups throughout the study.     

Effects of pK variability on bicarbonate balance evaluation in dialysis patients

Bicarbonate balance is usually calculated from the Henderson-Hasselbalch equation under the assumption that pK is constant. To evaluate the pK variability and its effects on bicarbonate computed with autoanalyzers in dialysis patients, we studied 44 patients on maintenance hemodialysis. The pH, PCO2, total CO2, and pK were determined in each patient before and after the dialysis session. The mean total CO2 calculated (22.5 +/- 2.7 meq/L) from pH and PCO2 values was significantly higher (p less than 0.001) than that directly measured (20.4 +/- 3.0 meq/L) with total CO2 analyzer. The mean (+/- SD) pK value was 6.14 +/- 0.06 (range 6.05-6.28). The percentage error in computed bicarbonate due to pK variations from the traditional pK value of 6.1 ranged between -11% and 52%. The pK value changed during dialysis in the majority of our patients, thereby confirming that pK consistency does indeed vary. Thus, investigation of acid-base balance based on pH and PCO2 determination may lead to erroneous results determined by pK abnormalities.     

电刺激取精术获取精子经体外培养后冻存方法研究

目的:优化电刺激取精术获取的精子处理和冷冻复苏方法,为临床不射精症的治疗和生育力保存提供新途径。方法:将20例同房不射精患者电刺激获取的精液(或尿液)样本分为两组,其中6例采用PBS洗涤并用Modified-HTF重悬(A组),另外14例用Modified-HTF直接洗涤并重悬(B组),对处理后精子行CASA,分析精子浓度和活动率;采用麦管载体和一步熏蒸法冷活动率为(1.12±0.41)%,M-HTF处理组的精子活动率为(9.23±9.43)%;冷冻复苏后,A组精子复苏后活动率和冷冻复苏率分别为(0.24±0.41)%、8.37%;B组的精子活动率和复苏率显著增加,分别为(4.11±2.33)%、35.41%。同样,电刺激尿液样本中,PBS处理组的精子活动率为(1.30±0.51)%,M-HTF处理组的精子活动率提高至(5.48±5.32)%;冷冻复苏后,A组的精子活动率和复苏率分别为(0.26±0.40)%、6.31%;B组的精子活动率和复苏率,分别为(3.02±1.64)%、45.88%。结论:本研究所建立的电刺激精子经体外培养及冷冻复苏的方法,可以显著增加精液和尿液样本中精子的活力,改善精子的冷冻复苏率,为临床不射精症的治疗和生育力保存提供新途径。     

Effectors of hypercarbia during experimental pneumoperitoneum.

Hypercarbia occurs during laparoscopy with carbon dioxide (CO2) insufflation. This may be due to increased ventilatory dead space after expansion of the peritoneal cavity with impairment of diaphragmatic excursion, or to increased absorption of CO2 from the peritoneum. To separate these effects, the authors examined the consequences of different insufflating gases and of diminished tissue perfusion on hypercarbia and dead space during pneumoperitoneum. Helium was chosen as an alternate insufflating gas because it is both inert and minimally absorbed. Eight swine (18 to 20 kg) were anesthetized, paralyzed, and mechanically ventilated at constant minute volume. Pneumoperitoneum with helium was maintained at 15 mm Hg for 45 minutes. After desufflation and stabilization for 1 hour, pneumoperitoneum was repeated with CO2. The sequence was again repeated after hemorrhagic shock to constant mean arterial pressure of 50 mm Hg. Data was analyzed by analysis of variance; significance levels are P < 0.01 unless otherwise listed. Arterial PCO2 increased significantly with CO2 insufflation within 15 minutes in normotensive animals and within 30 minutes during hypotension. Arterial pH decrease with CO2 pneumoperitoneum was significant in both groups at 30 minutes. Mixed venous PCO2 also increased with CO2 pneumoperitoneum within 30 minutes. Hypotension did not alter these changes. No significant changes were seen with helium pneumoperitoneum. Neither helium nor CO2 pneumoperitoneum significantly altered dead space. The authors make the following conclusions: 1) Absorption of CO2 from the abdomen during CO2 pneumoperitoneum produces respiratory acidosis, which is not seen with helium insufflation; 2) Pneumoperitoneum does not significantly increase dead space with either gas; 3) Transperitoneal absorption of CO2 is only partly related to perfusion because significant hypercarbia occurs during hemorrhagic shock.     

单肺通气期间七氟醚或丙泊酚对脑氧代谢的影响

目的观察单肺通气期间七氟醚或丙泊酚联合靶控持续输注瑞芬太尼对脑氧代谢的影响。方法选择行肺叶切除术患者30例,随机分为七氟醚组（S组）或丙泊酚组（P组）,每组各15例。麻醉诱导后,分别持续吸入七氟醚1%-2.5%或静脉持续泵入丙泊酚4-8 mg/（kg.h）。于双肺通气15 min（T1）,单肺通气15 min（T2）,单肺通气30 min（T3）,恢复双肺通气之后15min（T4）时点记录HR、MAP及BIS值,同时采集桡动脉、颈内静脉球血行血气分析,测定颈静脉球氧饱和度（SjvO2）,并计算脑动静氧含量差（AjvDO2）及COER值。结果两组在T2、T3时点的PaO2值较T1时点明显降低（P〈0.05）;S组各时点的SjvO2值、AjvDO2值、COER值与P组相应时点比较,无统计学差异（P〉0.05）。结论单肺通气过程中七氟醚与丙泊酚联合瑞芬太尼均能够达到满意麻醉效果,并保持脑氧供需平衡。     

Antagonism of fentanyl and alfentanil by intravenous plus subcutaneous naloxone

Twenty patients undergoing microlaryngoscopy were anaesthetized with thiopentone. Half received fentanyl supplementation (about 8.5 micrograms/kg) and the other half alfentanil (about 65 micrograms/kg). Both groups were given naloxone 0.4 mg intravenously plus 0.4 mg subcutaneously shortly after the procedure which lasted some 12 minutes. The degree of ventilatory depression was assessed by a CO2 rebreathing test. The ventilation at an end-tidal PCO2 of 8.0 kPa (V8.0) was noted, and the findings related to a control value obtained on the day before anaesthesia. In the fentanyl group, V8.0 was significantly (p less than 0.05) less one hour after naloxone than 15 minutes after, and remained significantly below the control value for the first 8 hours after microlaryngoscopy. A second peak in plasma fentanyl concentration was observed four hours postoperatively in three patients. Respiratory depression in the alfentanil group was less pronounced and of shorter duration than in the fentanyl group. Postoperative plasma alfentanyl concentration decreased progressively with time in every patient.     

6％的羟乙基淀粉-高渗盐水在失血性休克狗复苏时的作用

背景血流动力学和全身氧输送的变化无法反映内脏低灌注，从而导致无法认识到对失血性休克的处理不足。液体复苏后扩容对改善失血性休克时全身和局部的氧供是必不可少的。我们假设，与传统的代血浆相比，应用少量的扩容剂7．5氯化钠／6％羟乙基淀粉（hydroxyethyl starch．hypertonic saline，HHES）溶液，可能提供较少的全身氧输送和胃血流灌注。我们为失血的狗进行临床上严重出血时常用的固定量液体单次输注，分别观察HHES、乳酸林格液（1actatedRinger，LR）和6％羟乙基淀粉（hydroxyethyl starch，HES）溶液对血管内扩容、早期全身氧合和胃灌注的影响。方法30只狗，出血30ml／kg，保持平均动脉压在40～50mmHg，持续45分钟后，分3组进行复苏：LR组（n=10），输注3倍出血量的液体；HES组（平均分子量130KDa，替代级0．4）（n=10），输注出血量等量的液体；HHES组（n=10），以4ml／kg的速度输注。测定血管内容量增加情况（用Evans蓝和血红蛋白稀释）、血流动力学、全身氧合、静动脉CO2分压差（Pv-aco2）和胃黏膜-动脉血CO2分压差（Pco2间隙）变化，测定时间点为基础值、出血45分钟后以及液体复苏5分钟、45分钟、90分钟时。结果由于HHES的高扩容效力增加了血容量，但它对血管内容量的扩张作用是各溶液中最小的（P〈0．05）。3种溶液对血流动力学影响相同，但相对于LR组和HES组，HHES组相混合静脉血Po，更低，全身氧合、Pv-aco2和胃黏膜Pco2间隙更大（P〈0．05）。结论对狗进行按血压调节的失血性休克和固定容量的复苏，尽管HHES有高效扩容作用，但相比LR和HES，由于输注量受限，它的血管内容量扩充能力较小，全身氧合和胃血流灌注较差。     

人睾丸圆形精子细胞在体外向长形精子细胞分化

目的:探讨人睾丸生精细胞在体外培养条件下发生的分化。方法:取梗阻性无精子症患者睾丸活检标本,机械法离散睾丸细胞。①睾丸细胞混合培养,每24 h观察,计数分析长形精子细胞比率的变化;②显微操作挑取圆形精子细胞,观察单个细胞在微滴培养过程中变形分化的情况。结果:在添加卵泡刺激素、睾酮的HTF培养液中进行睾丸细胞混合培养,24 h后长形精子细胞比率较培养前显著增加(P<0.05);单个圆形精子细胞培养,可见到圆形精子细胞长出鞭毛转化为长形精子细胞,48 h的转化率为3.54%。Vero细胞条件培养液中人睾丸生精细胞的分化与HTF培养液中相同,两者无显著差异。结论:人睾丸组织的圆形精子细胞在体外可分化为长形精子细胞,Vero细胞条件培养液对此分化无促进作用。