液质联用测定人血浆中泮托拉唑的血药浓度

目的建立液质联用测定人血浆泮托拉唑药物浓度的方法。方法采用WatersAtlantisTMC18柱(2.1mm×100mm,3.0μm),流动相:0.1%甲酸溶液-乙腈(40∶60),流速0.2mL·mL-1,柱温30℃,进样量5μL,电喷雾电离源(ESI),MRM法检测,泮托拉唑母离子[M+H]m/z384.2,子离子m/z200.5,内标盐酸帕罗西汀母离子[M+H]m/z330.1,子离子m/z192.1。结果线性范围为10~5000ng·mL-1,最低检测浓度为1.0ng·mL-1,三种浓度的平均回收率均在90%以上,日内RSD为1.8%~4.0%(n=5),日间RSD为1.2%~1.7%(n=5)。结论该法操作简便,灵敏度高,分析快速,适用于临床上人血浆中泮托拉唑浓度测定。     

LC-MS/MS法测定人血浆中替利定和去甲替利定的质量浓度

目的:建立LC-MS/MS法测定人血浆中替利定和去甲替利定的质量浓度。方法:选用Agilent-Zorbax-Eclipse-XDB-C18色谱柱,以甲醇-1 mmol·L-1醋酸铵(75∶25)为流动相,采用正离子,多反应监测方式测定样品质量浓度。用于定量分析的离子对分别为[M+H]+m/z 274.3→m/z 155.1(替利定),[M+H]+m/z 260.2→m/z 155.1(去甲替利定)和[M+H]+m/z 284.8→m/z 192.9(地西泮)。结果:血浆样品中,替利定在0.5～250 ng·mL-1范围内线性关系良好(r=0.9936),最低定量质量浓度为0.5 ng·mL-1;去甲替利定在1～500 ng·mL-1范围线性关系良好(r=0.9948),最低定量质量浓度为1 ng·mL-1。二者日内与日间RSD均小于15%,平均回收率高,且稳定性均较好。结论:本方法简便快速、灵敏准确、特异性强,适用于盐酸替利定和去甲替利定的体内药代动力学研究。     

LC-MS/MS法同时测定人血浆中氯吡格雷及其羧酸代谢物的浓度

目的建立快速测定人血浆中氯吡格雷及其羧酸代谢物SR26334含量的LC-MS/MS法。方法乙醚-正己烷(4:1,V:V)2次液-液提取法(中性和酸化条件下),采用Teknokroma C_(18)色谱柱,以那格列奈和吡格列酮为内标,同时测定血浆中氯吡格雷和SR26334的浓度。流动相:甲醇-0.1%甲酸(80:20,V:V);流速:0.2mL·min~(-1);以多反应离子监测方式检测:氯吡格雷[M+H]~+,m/z 322.1→212.1;那格列奈[M+H]~+,m/z 318.3→166.2;氯吡格雷羧酸代谢物SR26334[M+H]~+,m/z 308.1→q98.1;吡格列酮[M+H]~+,m/z 357.2→134.2。结果氯吡格雷和内标那格列奈的保留时间分别在4.4和3.7min,SR26334和内标吡格列酮的保留时间分别在1.3和1.7min,氯吡格雷的线性范围为5～5000ng·L~(-1);SR26334的线性范围为20～2500μg·L~(-1)。提取回收率大于75%,方法回收率大于90%,日内、日间RSD小于10%(n=5)。结论本方法简便快速,适用于氧吡格雷制剂的新药临床研究和临床长期治疗病人血药浓度的常规监测。     

LC-MS/MS测定人血浆中罗红霉素的浓度及其在生物等效性研究中的应用

目的建立LC-MS/MS测定人血浆中罗红霉素浓度的方法,并研究其制剂的生物等效性。方法以克拉霉素为内标,色谱柱:Alltech Alltima(2.1 mm×100 mm,3.5μm);流动相:0.1%甲酸溶液-乙腈(45∶55);流速:0.2 mL·min-1;柱温:30℃。采用三重四极杆串联质谱,电喷雾离子源,正离子模式检测,以选择反应监测(SRM)方式进行检测,罗红霉素母离子[M+H]+m/z 837.5,子离子m/z 679.2,内标克拉霉素母离子[M+H]+m/z 748.5,子离子m/z 590.2。结果罗红霉素线性范围为0.10～20.00μg·mL-1,最低检测限为0.01μg·mL-1,3种浓度的相对回收率为100.8%～103.1%,日内、日间RSD均<5.9%(n=5)。生物等效性研究表明受试制剂和参比制剂生物等效,受试制剂相对生物利用度为(100.655±9.552)%(P=0.5%)。结论该方法专属、灵敏、快速,适用于罗红霉素制剂的生物等效性研究。     

LC-MS/MS法测定人血浆中西替利嗪的浓度

目的:建立以高效液相色谱串联质谱电喷雾检测(LC-MS/MS)法测定人血浆中西替利嗪浓度的方法。方法:以甲醇沉淀蛋白处理血样后进样分析。其中,色谱柱为AllureC18,流动相为2mmol·L-1醋酸胺+0.5%甲酸水溶液∶甲醇=65∶35,流速为0.3mL·min-1,内标为格列齐特;采用电喷雾离子化源,检测方式为正离子多离子反应监测,用于定量分析的离子反应分别为m/z389.2→m/z201.3(西替利嗪)、m/z324.1→m/z127.2(格列齐特)。结果:西替利嗪血药浓度在2.0～1000.0ng·mL-1范围内线性关系良好(r=0.9995);方法回收率≥97.2%,日内RSD≤2.4%,日间RSD≤11.1%,平均提取回收率>96.7%。结论:本方法简便、灵敏、准确可靠,可用于测定人血浆中西替利嗪的浓度及其药动学研究。     

人血浆中伏立康唑的LC-MS-MS法测定方法学研究

目的:建立测定人血浆中伏立康唑浓度的液相色谱-串联质谱联用法。方法:待测血浆0.5 mL经乙醚-二氯甲烷萃取,以甲醇-10 mmo.lL-1醋酸铵水溶液(80∶20)为流动相,流速为1.0 mL.min-1,液相色谱-串联质谱联用法多反应离子检测,正离子模式,用于定量分析的离子分别是伏立康唑m/z351.0→127.0[M H ]和地西泮m/z285.8→193.3[M H ]。结果:血浆中无干扰测定的内源性物质,每个样品分析时间小于5 min,线性范围为20.0~4 000 ng.mL-1,定量下限为20.0 ng.mL-1,批内、批间精密度均小于10%,提取回收率大于85%。结论:该法操作快速、简单、准确、灵敏度高,适用于临床药动学研究。     

HPLC-MS/MS法测定人体血浆中吲哒帕胺的浓度

目的:建立一种简便、灵敏的测定人体血浆中吲哒帕胺浓度的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)方法。方法:以瑞格列奈钙为内标,采用乙腈:0.1%甲酸水溶液=90∶10为流动相,以Agilent-ZORBAX-C18柱(2.1mm×150mm,5.0m)色谱柱为分析柱,通过电喷雾离子源(ESI),以正离子多反应监测(MRM)方式进行进样检测。检测离子为[M+H]+m/z 364.1m/z 188.8(吲哒帕胺)和[M+H]+m/z 451.1m/z 134.8(瑞格列奈钙,内标)。结果:吲哒帕胺线性范围为0.5～50ng/mL,定量下限为0.5ng/mL,线性关系良好;高、中、低三个浓度的日内、日间的RSD均<15%,平均回收率为94.60%～110.33%。结论:本方法专属性强,操作简便,灵敏度高,适用于吲哒帕胺制剂的临床药动学研究。     

以氘代利伐沙班为内标物的UHPLC-MS/MS法测定Beagle犬血浆中利伐沙班及其药动学研究

摘要： 目的 建立测定Beagle犬血浆中利伐沙班浓度的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS) 法。 方法 以甲基叔丁基醚：二氯甲烷(2:1)沉淀蛋白处理血浆样品,D4-利伐沙班为内标, 采用 Thermo BDS HYPERSI L C18色谱柱（100×4.6 mm,2.4 μm）;流动相：A相为甲醇溶液（含0.015 mol/L甲酸铵和0.1%甲酸）; B相为水/甲醇(90/10)溶液（含0.015 mol/L甲酸铵和0.1%甲酸）,梯度洗脱。质谱条件为电喷雾离子源,正离子模式检测,扫描方式为多反应离子监测。用于定量检测的离子反应分别为 [M+H]+ m/z 436@30eV→m/z144.900（利伐沙班）和 [M+H]+ m/z 440@24eV→m/z144.900（D4-利伐沙班）。结果 血浆利伐沙班浓度在0.5-400 ng·mL-1范围内线性关系良好（r=0.9961）,定量下限为0.5ng/ml,批内批间精密度均<13%,提取回收率89.4%-96.5%,基质效应94.7%-97.2%。血浆样品冻存（-80℃）33d稳定性良好,反复冻融3次及提取后室温放置12h条件下,样品浓度均无显著变化。将本法应用于Beagle犬口服给予利伐沙班片后的药动学考察,主要药动学参数如下：tmax(2.11±1.133) h,Cmax(179.3±50.65) ng/ml, t1/2(10.05±4.34) h,AUC0-t(1161.6±339.74) h·ng·ml-1。结论 试验结果表明本法操作简单,灵敏度高,重现性良好,结果准确可靠,可用于测定Beagle犬血浆中利伐沙班浓度和其体内的药动学研究。     

LC/MS/MS法测定人血浆中愈创木酚甘油醚浓度及药动学研究

目的:建立以高效液相色谱-质谱联用法测定人血浆中愈创木酚甘油醚浓度的方法,并研究愈创木酚甘油醚片的人体药动学。方法:碱化的血浆药品经乙酸乙酯萃取后,以甲醇-1%甲酸(70:30)为流动相,对乙酰氨基酚为内标,采用Aquasil C18柱分离。通过液相色谱-串联质谱联用仪,以选择反应监测方式进行检测,定量分析的离子反应分别为m/z199→m/z125(愈创木酚甘油醚)和m/z152→m/z110(对乙酰氨基酚)。结果:愈创木酚甘油醚检测浓度在5·0～2500ng·mL-1范围内线性关系良好(r=0·9953),定量下限为5·0ng·mL-1。20名受试者口服愈创木酚甘油醚片0·2g后的主要药动学参数Cmax为(754·6±190·5)ng·mL-1、t1/2为(0·97±0·12)h、tmax为(0·63±0·22)h、AUC0～t为(1435·8±441·9)ng·h·mL-1、AUC0～∞为(1444·9±449·3)ng·h·mL-1。结论:本方法简便、快速、灵敏,可用于愈创木酚甘油醚的临床药动学研究。     

LC-MS/MS法测定人血浆中曲美他嗪的浓度及其药动学研究

目的:建立以高效液相色谱-电喷雾串联质谱法测定人血浆中曲美他嗪浓度的方法,并研究其在健康人体内的药动学。方法:色谱柱为Shimadzu Shim-pack VP-ODS,流动相为甲醇-0.2%甲酸(12∶88),流速为0.8 mL·min-1,柱温为室温;采用电喷雾离子源(ESI源),选择正离子监测(SIM)质荷比(m/z)为267.25(曲美他嗪,[M+H]+)和338.05(法莫替丁,[M+H]+)的正电荷的准分子离子峰。结果:曲美他嗪血药浓度在2～250 ng·mL-1范围内线性关系良好(r=0.997 8),方法的定量下限为2 ng·mL-1;日内、日间RSD均≤9.3%,提取回收率在71.1%～75.8%之间(RSD≤5.4%)。22名受试者单剂量口服盐酸曲美他嗪片40 mg后曲美他嗪的平均药动学参数分别为:cmax(156.2±24.4)μg·L-1、tmax(2.16±0.36)h、t1/2(5.44±0.75)h、AUC0～24(1 191±205)μg·h·L-1、AUC0～∞(1 260±212)μg·h·L-1。结论:本方法简便、准确、灵敏、专属性强,适用于人血浆中曲美他嗪浓度的测定及其药动学研究,对于评价盐酸曲美他嗪疗效和安全性有重要意义。     

UPLC-MS/MS法同时测定人血浆中卡马西平、拉莫三嗪、氯硝西泮、地西泮及其代谢物奥沙西泮浓度

目的 建立同时测定人血浆中卡马西平、拉莫三嗪、氯硝西泮、地西泮及其代谢物奥沙西泮浓度的方法。方法 采用超高效液相色谱-质谱联用法（UPLC-MS/MS）,以磺胺甲噁唑（SMZ）为内标,血浆经甲醇直接沉淀后进样分析。色谱柱为WatersACQUITYUPLCHSSPFP柱（2.1mm×100mm,1.8μm）,流动相为0.1%甲酸的5mmol·L1乙酸铵水溶液-0.1%甲酸的甲醇溶液（0~5min,35∶65→10∶90）,流速为0.2mL·min1。电喷雾离子源,正离子多反应监测扫描分析,卡马西平、拉莫三嗪、氯硝西泮、地西泮和奥沙西泮的离子对分别为m/z237.0→194.06、m/z255.98→144.95、m/z316.01→270.0、m/z285.04→193.07和m/z287.02→241;内标磺胺甲噁唑的离子对为m/z253.96→91.97。结果 卡马西平、拉莫三嗪、氯硝西泮、地西泮和奥沙西泮血药浓度分别在2.4~600ng·mL1（r=0.9997）,2.52~630ng·mL1（r=0.9920）,2.08~520ng·mL1（r=0.9979）,2.28~570ng·mL1（r=0.9982）,8.0~800ng·mL1（r=0.9992）线性关系良好;最低检出限分别为0.24,0.63,0.52,0.57,3.2ng·mL1。日内、日间精密度均〈15%;提取回收率均〉70%,且RSD〈15%。结论 该方法灵敏、快速、专属性强,可用于临床血药浓度测定及药动学研究。     

LC-MS/MS方法测定人血浆中多西环素浓度

目的建立迅速、简单、灵敏的液相色谱-串联质谱法测定人血浆中多西环素的浓度。方法血浆样品采用固相萃取的方法,以含0.04%TFA的混合溶液(甲醇-乙腈-水=45∶45∶10,v/v/v)为流动相;采用Dikma C18柱(30 mm×4.6 mm,5μm)分离,通过电喷雾电离源(ESI),以选择性反应监测(SRM)方式进行正离子检测,用于定量分析的离子反应分别为m/z 444.7→428.1(多西环素)和m/z 464.6→448.0(内标,去甲金霉素)。结果建立的人血浆内多西环素测定方法线性范围为50⁵ 000 ng·mL-1,定量下限可达50 ng·mL-1。日内、日间精密度(RSD)均<12%。结论该方法预处理简洁,灵敏,专属性强,可方便用于人血浆中多西环素的测定。     

HPLC-MS-MS法定量测定人血浆中多潘立酮的浓度

目的：建立HPLC-MS-MS方法定量测定人血浆中多潘立酮浓度。方法：以地西泮为内标,采用甲醇：0.5%乙酸=80：20为流动相,以Inerstil C18（2.1mm×100mm,3.0μm）色谱柱为分析柱,通过电喷雾离子源（ESI）,以正离子多反应监测（MRM）方式进行检测。多潘立酮和地西泮用于定量分析的离子对分别为[M＋H]^＋m/z426.2→m/z175.2和[M＋H]^＋m/z285.0→m/z193.0。结果：多潘立酮线性范围为1～80μg·L-1,定量下限为1μg·^L-1（n=6）。日内、日间的RSD均〈15%,平均回收率〉75%。结论：本方法专属性强,样品处理方便,灵敏度高,适用于多潘立酮临床药动学研究。     

UPLC-MS/MS法测定小鼠血浆及脑组织中马钱子碱浓度

目的建立小鼠血浆及脑组织中马钱子碱浓度的UPLC-MS/MS测定方法 ,用于小鼠马钱子碱药动学研究。方法色谱柱为Acquity UPLC BEHC18柱（2.1mm×50mm,1.7μm）。流动相为水（含0.1%甲酸）-甲醇（75：25,v/v）,流速0.25mL.min-1,柱温40℃。吗氯贝胺为内标,采用ESI＋模式,多重反应选择离子检测,马钱子碱m/z395→324,吗氯贝胺m/z269→182。样品处理采用液液萃取。结果马钱子碱在小鼠血浆中线性范围为5.016～5016ng.mL-1,脑组织中线性范围为3.009～725.4ng.g-1,日内精密度（RSD）均〈8.5%,日间精密度（RSD）均〈11.2%,方法回收率范围血浆中为91.7%～112.9%,脑组织中为95.6%～107.2%。结论本方法简单、灵敏、准确,适用于小鼠体内马钱子碱浓度测定及药动力学研究。     

高效液相色谱串联质谱法测定人体血浆中阿那曲唑的浓度

目的建立液质联用法来检测人体血浆中阿那曲唑的浓度。方法血浆样品经MTBE萃取后,选用来曲唑为内标。色谱柱为Thermo Hypurity C18柱(2.1 mm×150 mm,5μm);流动相为乙腈-0.1%甲酸(60∶40);流速为0.20 mL.min-1;采用ESI+MRM进行离子方式监测;源电压:3.6 kV;源温度:100℃;阿那曲唑和来曲唑的离子选择通道分别为:m/z294.69→225.41,286.25→217.60。结果阿那曲唑的线性范围为0.214~214 ng.mL-1,最低检测浓度为0.214 ng.mL-1,方法回收率在80%~120%,日内、日间RSD均<15%。结论本方法简单、灵敏,可以准确检测人体血浆中阿那曲唑的浓度。     

HPLC-MS/MS测定人血浆中妥舒沙星的浓度

目的 建立快速、灵敏测定人体血浆中妥舒沙星浓度的高效液相色谱-串联质谱方法。方法 采用Agilent EclipsePlus C18色谱柱（4.6 mm×150 mm,3.5μm）,乙腈（含0.1%甲酸）-5 mmol.L 1甲酸铵水溶液（36∶64）为流动相等度洗脱,流速为0.5 mL.min 1,柱温40℃。采用多重反应监测（MRM）对妥舒沙星（m/z 405.2→387.2）和内标环丙沙星（m/z 332.2→314.2）的测定。结果 妥舒沙星的线性范围为6-2 000 ng.mL 1,回归方程为y=0.183 5x＋1.461 9×10 4,r=0.996 2,最低定量下限为6 ng.mL 1（S/N〉5）,日内、日间RSD均〈10%,高（1 800 ng.mL 1）、中（750 ng.mL 1）、低（15 ng.mL 1）浓度标准血样的平均回收率分别为97.5%,103.3%,105.9%。结论 该方法灵敏、准确、简单、快速,可用于妥舒沙星的临床血药浓度监测和药动学研究。     

LC-MS法测定人尿液中依非巴特的浓度

目的：建立测定人尿液中依非巴特浓度的方法。方法：尿液样品经蛋白沉淀后,采用液-质联用法进样测定,以甲醇-0.008mol·L-1甲酸铵水溶液（含0.1%甲酸）（35∶65）为流动相,AgilentZorbaxEclipseXDB-C18为色谱柱进行分离;采用电喷雾电离源,以多反应监测（MRM）方式进行正离子检测,用于定量分析的离子对依非巴特为m/z832.6→m/z646.4,内标为m/z931.6→m/z745.6。结果：依非巴特尿药浓度在5.0～5000.0ng·mL-1范围内线性关系良好（r=0.9996）,最低定量限（LLOQ）为5.0ng·mL-1;日内和日间RSD均〈7%,方法回收率为99.4%～103.1%,绝对回收率≥93%。结论：本方法选择性强、灵敏度高、重现性好,能快速、准确测定人尿液中依非巴特的浓度,并且成功用于依非巴特尿药排泄的研究。     

UPLC-MS/MS法测定比格犬血浆中阿司匹林、水杨酸和单硝酸异山梨酯的浓度

目的:建立灵敏的超高效液相色谱-质谱联用法测定比格犬血浆中的阿司匹林、水杨酸和单硝酸异山梨酯的浓度。方法:选用Waters BEH C18(100 mm×2.1 mm,1.7μm)色谱柱,分别以0.5%甲酸/5 mmol.L-1醋酸铵-乙腈和2 mmol.L-1醋酸铵-乙腈为流动相,采用梯度洗脱进行分离,样品采用乙酸乙酯提取后进样,通过电喷雾电离源,以多重反应监测(MRM)方式进行负离子检测,用于定量分析的离子对分别为m/z 178.9→136.9(阿司匹林)、m/z 136.9→64.9(水杨酸)和m/z 293.7→250.0(内标,双氯酚酸钠)测定阿司匹林和水杨酸;m/z 249.6→58.9(单硝酸异山梨酯)和m/z 293.7→250.0(内标,双氯酚酸钠)测定单硝酸异山梨酯。结果:阿司匹林、水杨酸和单硝酸异山梨酯的线性范围分别为2.0～2000.0,20.0～16000.0,9.6～9557.0 ng.mL-1;定量下限分别可达2.0,20.0,9.6 ng.mL-1;日内、日间精密度(RSD)均小于15%。结论:本方法灵敏度较高,血浆用量少,适用于比格犬血浆样品中阿司匹林、水杨酸和单硝酸异山梨酯的测定和药物动力学研究。     

LC-MS/MS法测定人血浆中白藜芦醇的浓度

目的:建立液相色谱-串联质谱法测定人血浆中白藜芦醇浓度的方法。方法:血浆样品经四硼酸钠溶液碱化后,经甲基叔丁基醚提取处理。分析柱为RestekC1(82.1mm×150mm,5.0μm),保护柱为GminiC1(84mm×3.0mm,10.0μm),流动相为乙腈-水(85∶15,V/V,其中含0.2mmol·L-1乙酸铵),流速为0.3mL·min-1,进样量为5μL,内标为3,5-二羟基-4-异丙基二苯乙烯,使用电喷雾离子源,以负离子多重反应监测(MRM)方式进行检测。用于定量白藜芦醇和内标的MRM扫描离子通道分别为m/z227.0→143.0、253.2→211.0。每个样品的分析时间为5min。结果:白藜芦醇和内标的保留时间分别为1.43、2.55min。血浆中内源性物质对测定无干扰,白藜芦醇检测浓度在0.1～50.0ng·mL-1范围内同其与峰面积之比呈良好线性关系(r=0.9969),定量下限为0.1ng·mL-1。日内、日间RSD均低于11.25%,方法回收率为(91.70±3.81)%～(99.00±3.29)%。结论:本方法特异性强,灵敏度高,测定结果可靠,适用于白藜芦醇的血药浓度测定。     

小型猪血浆中二丙酸倍他米松及其代谢物倍他米松的LC-MS/MS同时测定方法的建立及在药动学研究中的应用

目的：建立同时测定小型猪血浆中二丙酸倍他米松及其代谢物倍他米松的LC-MS/MS法,并研究小型猪皮肤外用二丙酸倍他米松乳膏后,二丙酸倍他米松及倍他米松的药动学特征。方法：血浆样品经酸化后以乙醚-环己烷（4∶1）提取,LC-MS/MS分析,以Hedera ODS-2（150 mm×2.1 mm,5μm）为分析柱,流动相为5 mmol·L-1醋酸铵水溶液（含0.1%乙酸）–甲醇,梯度洗脱。二丙酸倍他米松、倍他米松及内标布地奈德的监测离子对分别为m/z 563.2（[M＋CH3COO]-）→483.1、m/z 451.2（[M＋CH3COO]-）→361.0和m/z 489.3（[M＋CH3COO]-）→357.1。对小型猪外用二丙酸倍他米松乳膏后其血浆中二丙酸倍他米松及代谢物倍他米松的浓度进行测定,并计算主要药动学参数。结果：二丙酸倍他米松血药浓度在26.85~644.4 ng·L-1范围内线性关系良好,倍他米松血药浓度在10.62~637.2 ng·L-1范围内线性关系良好。结论：本方法专属性强、简便、灵敏,可用于血浆样本中二丙酸倍他米松及其代谢物倍他米松的测定及药动学研究。