HPLC-MS/MS法测定人血浆中的甲氨蝶呤浓度

目的建立人血浆中甲氨蝶呤(MTX)浓度测定的液质联用方法,并应用于临床MTX浓度监测。方法血清用甲醇沉淀蛋白,内标选择噻氯匹定(IS),色谱柱为Kromasil C8(50 mm×2.1 mm,5μm),流速0.6 m L·min-1,流动相为含0.1%甲酸的甲醇和水,梯度洗脱,柱温40℃。质谱在ESI正离子模式下使用MRM扫描方式,MTX和IS的离子对分别为:m/z 455.2>308.2和m/z 264.1>154.0。结果 MTX浓度在0.01~1μmol·L-1内线性良好,日内和日间的精密度和准确度均在±15%内。MTX在低、中和高浓度的回收率为92.2%~100.5%,10倍和100倍稀释不影响测定结果并且在所有测定的条件下均稳定。结论本研究建立的液质联用测定MTX血浆浓度的方法快速、简便、准确、稳定,适用于MTX的临床药物浓度监测和药动学研究。     

HPLC/MS法测定人血浆中氯雷他定的浓度及人体生物等效性

目的建立测定人血浆中氯雷他定的LC/MS方法,并应用于药物制剂生物等效性研究。方法18名健康受试者单剂量口服氯雷他定20 mg后,血浆样品经液液萃取,通过液相色谱质谱联用法测定其质量浓度,并计算药动学参数。结果氯雷他定测定方法的线性为0.5~20.0μg.L-1,定量下限为0.5μg.L-1;参比制剂的主要药动学参数tmax为(0.94±0.21)h,ρmax为(16.41±2.83)μg.L-1,t1/2为(9.56±4.21)h,用梯形法计算,AUC0~t为(38.70±6.93)μg.h.L-1;受试制剂的主要药动学参数tmax为(0.94±0.21)h,ρmax为(16.45±2.42)μg.L-1,t1/2为(8.89±4.06)h,用梯形法计算,AUC0~t为(43.67±9.55)μg.h.L-1,以AUC0-t计算,受试制剂相对生物利用度为(113.4±19.0)%。结论该法适用于氯雷他定制剂的生物等效性评价。     

HPLC-MS/MS法测定大鼠血浆中金丝桃素的浓度

目的：建立HPLC-MS/MS法测定大鼠血浆中金丝桃素的浓度。方法：血浆样本加入适量内标,经乙腈直接沉淀蛋白后采用HPLC-MS/MS进行分析。色谱柱采用Ultimate C18柱（150 mm×2.1 mm,5.0μm）;流动相由乙腈-5 mmol·L^-1醋酸铵（含0.1%甲酸）（90∶10）组成,柱温35℃;流速0.5 ml·min^-1;采用电喷雾离子源（ESI）,以多反应监测方式（MRM）进行定量分析。金丝桃素和内标吡格列酮在负离子模式下定量分析离子对分别为m/z 503.2→m/z 405.1和m/z 355.0→m/z 41.9。结果：金丝桃素在0.1-13.2 ng·ml^-1线性关系良好（r〉0.99）,最低定量限为0.1 ng·ml^-1,提取回收率为84.19%-98.71%,日内、日间精密度均不高于18.47%。结论：该方法分析速度快、灵敏、准确,为临床进一步研究金丝桃素提供了基础。     

LC／MS法测定人血浆中的卡维地洛浓度

目的：建立测定人血浆中卡维地洛浓度的LC／MS方法。方法：以盐酸氨溴索为内标,待测血浆样品经乙腈沉淀,高速离心后取上清液进样,色谱柱为SHIMADZU VP-ODS柱（250mm×2．0mm,5μm）,甲醇-0．1％甲酸水溶液：64：36（含10mmol·L^-1乙酸铵）为流动相。ESI离子源;CDL Tempe 250℃,Heat Block Tempe 200℃,Detector Voltage 1．7Kv;正离子方式检测,扫描方式为选择离子扫描（SIM）,用于定量的离子分别为卡维地洛m／z：407;内标（氨溴索）m／z：379;扫描时间：0．2s。结果：内源性物质不干扰卡维地洛的检测,每个样品分析时间约4．4min,卡维地洛的线性范围为0．3—120ng·ml^-1,批内、批间RSD均小于10％,低、中、高浓度的（0．6,5,60ng·ml^-1）平均提取回收率分别为92．43％、85．08％、88．32％。结论：该法操作快速、简单、准确,介质用量少,可用于,临床药物动力学研究中大批量血样的处理。     

HPLC-MS/MS法测定人体血浆中吲哒帕胺的浓度

目的:建立一种简便、灵敏的测定人体血浆中吲哒帕胺浓度的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)方法。方法:以瑞格列奈钙为内标,采用乙腈:0.1%甲酸水溶液=90∶10为流动相,以Agilent-ZORBAX-C18柱(2.1mm×150mm,5.0m)色谱柱为分析柱,通过电喷雾离子源(ESI),以正离子多反应监测(MRM)方式进行进样检测。检测离子为[M+H]+m/z 364.1m/z 188.8(吲哒帕胺)和[M+H]+m/z 451.1m/z 134.8(瑞格列奈钙,内标)。结果:吲哒帕胺线性范围为0.5～50ng/mL,定量下限为0.5ng/mL,线性关系良好;高、中、低三个浓度的日内、日间的RSD均<15%,平均回收率为94.60%～110.33%。结论:本方法专属性强,操作简便,灵敏度高,适用于吲哒帕胺制剂的临床药动学研究。     

HPLC-MS-MS法定量测定人血浆中多潘立酮的浓度

目的：建立HPLC-MS-MS方法定量测定人血浆中多潘立酮浓度。方法：以地西泮为内标,采用甲醇：0.5%乙酸=80：20为流动相,以Inerstil C18（2.1mm×100mm,3.0μm）色谱柱为分析柱,通过电喷雾离子源（ESI）,以正离子多反应监测（MRM）方式进行检测。多潘立酮和地西泮用于定量分析的离子对分别为[M＋H]^＋m/z426.2→m/z175.2和[M＋H]^＋m/z285.0→m/z193.0。结果：多潘立酮线性范围为1～80μg·L-1,定量下限为1μg·^L-1（n=6）。日内、日间的RSD均〈15%,平均回收率〉75%。结论：本方法专属性强,样品处理方便,灵敏度高,适用于多潘立酮临床药动学研究。     

HPLC-MS/MS法测定人血浆中尼古丁浓度

目的建立简单、快速且灵敏的液质联用法检测人血浆中尼古丁的浓度。方法 血浆样品经二氯甲烷萃取后,采用Thermo Hypurity CN柱(2.1mm×150mm,5μm)分离,以乙腈-20mmol.L-1甲酸铵(50∶50,v/v)为流动相,流速为0.30mL·min-1。采用电喷雾离子源(ESI源)正离子多反应监测(MRM)扫描分析,尼古丁和d-4-尼古丁的离子选择通道分别为:m/z163→130和m/z 167→133.9。结果尼古丁的线性范围为0.597～76.48ng·mL-1,最低检测浓度为0.597ng·mL-1,平均提取回收率为70.7%～86.8%,日内和日间变异均<15%。结论本方法简单、灵敏、快速、重现性好,适用于尼古丁的人体临床药物代谢动力学及生物等效性研究。     

HPLC-MS/MS法测定人血浆中西洛他唑浓度

目的建立灵敏快速检测人血浆中西洛他唑浓度的HPLC-MS/MS方法。方法采用色谱柱为Thermo Hy-purity C18（150 mm×2.1 mm,5μm,USA）,流动相为乙腈（含0.1%甲酸）-甲醇=25∶75（v/v）;流速为0.2mL.min-1;ESI＋离子源,MRM进行离子方式监测。质谱参数：源电压3 500V,源温度100℃,去溶剂化温度350℃,锥孔气流速50 L.h^-1,去溶剂化气流速350 L.h^-1;血浆处理采用乙腈直接沉淀萃取方法。结果血浆中西洛他唑检测方法的线性范围为4.90-2 510 ng.mL-1,最低检出浓度为4.90 ng.mL-1,血浆中西洛他唑的方法回收率在80%-120%,日内RSD〈10%,日间RSD〈15%。结论本方法用于测定人血浆中西洛他唑的浓度,简单、快速、灵敏。     

HPLC—MS—MS法测定人血浆中坎地沙坦的浓度

目的建立高效液相色谱电喷雾离子化质谱联用法测定人血浆中坎地沙坦的浓度。方法样品用有机溶剂（二氯甲烷乙醚-1：4）萃取后．有机层用氮气吹干，100μL流动相定容后进样。流动相为0．1％甲酸水溶液-甲醇-乙腈（15：5：80，v／v／v），内标为非那雄胺。采用二级质谱选择性离子检测坎地沙坦（441／263）和非那雄胺Fin—asteride（373．4／305．3）。结果坎地沙坦的线性范围0．78～200μg·L^-1（r^2=0．9945），平均相对回收率在94．07％～102．86％，批内和批间RSD均〈10％。坎地沙坦的最低定量限为0．78μg·L^-1，提取回收率〉88％。结论该方法准确、灵敏，可用于坎地沙坦的人体药动学研究。     

超高效液相色谱串联质谱法快速测定尼扎替丁在人体血浆中的含量

目的: 建立超高效液相色谱串联质谱法测定人体血浆中尼扎替丁的含量。方法: 血浆以甲醇直接沉淀蛋白, 上清液用于目标物的检测;色谱柱为Waters ACQUITY UPLC BEH C₁₈;流动相为5 mmol·L^-1醋酸铵水溶液-甲醇 (65:35, V/V);流速:0.20 mL·min^-1;进样量:3 μL;柱温:35 ℃;样品室温度:6 ℃;采用电喷雾正离子模式电离, 尼扎替丁和内标雷尼替丁的监测离子分别为(m/z)332.2→155.0, (m/z)315.2→130.0。结果: 尼扎替丁的线性范围为10~3 000 ng·mL^-1, 平均回收率为93.2%~101.1%, 批内、批间RSD均小于15%。结论: 本研究建立的分析方法快速、准确、灵敏、简便, 适用于尼扎替丁人体药动学方面的研究。     

Determination of diethylstilbestrol in human plasma using high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry

A sensitive, fast, and reproducible high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry (LC-MS/MS) method for the determination of diethylstilbestrol in human plasma was developed and validated. The plasma samples were pretreated by direct deproteinization with ethyl acetate. Daidzein was used as the internal standard. The separation was carried out on a Agilent Technologies 1200 series XDB C₁₈ column (2.1 mm×150 mm, 5 µm) with a mobile phase of acetonitrile-2.5 mmol/L ammonium acetate (60:40, v/v). Triple quadrupole mass spectrometric detection in negative ion mode was used for multiple-reaction-monitoring of the transitions atm/z 267.2→237.3 and m/z 253.2→132.3 for diethylstilbestrol and daidzein, respectively.The calibration curves were linear over the concentration range from 0.1 to 20 ng/mL (r² = 0.9984). The lower limit of quantificationwas 0.1 ng/mL (s/n mLs)for diethylstilbestrol, which was sensitive enough to perform pharmacokinetic studies after diethylstilbestroladministration. Inter-day and intra-day precisions were no more than 7% with accuracies of 90%-105%. This method could be applied to therapeutic drug monitoring of diethylstilbestrol, which is helpful for evaluating the clinical efficacy and safety of diethylstilbestrol.     

高效液相色谱-串联质谱法测定人血清中替加环素的浓度

目的：建立人血清中替加环素浓度的高效液相色谱-串联质谱法（HPLC-MS/MS）测定方法。方法：以[叔丁基-d9]替加环素为内标,将待测血清样品经氢氧化钠碱化后,加乙酸乙酯-二氯甲烷（4∶1,V/V）提取,上清液经真空干燥,得到的残渣经流动相复溶后进样。进样液经Agilent Eclipse plus C₈（4.6 mm×100 mm,5 μm）色谱柱分离,甲醇-水（30∶70,V/V,含0.005 mol·L^-1甲酸铵和0.25%甲酸）为流动相,流速0.5 mL·min^-1,进行洗脱,采用电喷雾电离源（ESI）,以多反应监测（MRM）方式进行正离子检测。用于定量分析的离子分别为替加环素m/z586.4→513.3和[叔丁基-d9]替加环素m/z595.4→514.3。结果：血清中替加环素的浓度与峰面积比在10~2 000 ng·mL^-1范围内线性关系良好,定量下限为10 ng·mL^-1,提取回收率大于70.04%,日内日间精密度小于4.54%。结论：该法简单、灵敏、快速,分离效果良好,可用于人体血药浓度测定和PK/PD研究。     

高效液相色谱-质谱联用法检测患者血浆中替考拉宁的浓度

目的：建立高效液相色谱-质谱联用法（HPLC-MS）定量测定人血浆中替考拉宁的浓度。方法：采用乙腈蛋白沉淀法处理50 μL血浆,以达托霉素为内标,色谱柱：Welch Ultimate XB C₁₈（2.1 mm×50 mm,3 μm）;柱温：40℃;流动相：乙腈-水（0.5%甲酸）,梯度洗脱5.5 min。采用ESI离子源,正离子模式多反应监测方式（MRM）检测血浆中替考拉宁浓度,替考拉宁定量离子对分别为m/z 940.5→316.2,内标达托霉素离子对为m/z 811.0→313.0,碰撞电压分别为20 eV和42 eV。考察方法的选择性、残留、基质效应、线性范围、准确度与精密度和样本稳定性等。结果：血浆替考拉宁在1.0~100.0 mg·L^-1线性关系良好,定量下限为1.0 mg·L^-1。批内、批间精密度的标准偏差（RSD）均≤10.9%,替考拉宁的内标归一化基质效应在92.7%~109.3%且RSD≤12.0%。血浆样本可在-20℃条件下长期冻存至少41 d。临床实际样本检测中未发现干扰,方法稳定性良好。结论：该方法简便灵敏、准确可靠,适用于人体血浆中替考拉宁浓度的测定。     

超高效液相色谱-质谱联用法测定人血浆中沙丁胺醇浓度

目的：建立测定人血浆中沙丁胺醇浓度的超高效液相色谱-质谱联用方法。方法：内标选用沙丁胺醇-d9,以甲醇沉淀血浆中蛋白,取上清液吹干复溶;采用Welch Ultimate XS-C₁₈色谱柱（3.0 mm×100 mm,3 μm）,预柱选用Welch Ultimate XB-C₁₈柱（2.1 mm×5 mm,5 μm）,以含0.1%甲酸5 mmol·L^-1乙酸铵的5%乙腈和纯乙腈为流动相,梯度洗脱;应用电喷雾离子化,正离子模式下进行多反应监测沙丁胺醇（m/z 240.2→m/z 147.9）和内标沙丁胺醇-d9（m/z 249.1→m/z 149.1）的浓度。结果：沙丁胺醇的线性范围为5~2 000 pg·mL^-1,定量下限为5 pg·mL^-1,日内、日间准确度为101.93%~109.03%,精密度RSD为1.45%~8.50%。结论：本方法简便、准确、灵敏、稳健且经济,适用于硫酸沙丁胺醇吸入气雾剂的临床药动学研究和生物等效性评价。     

高效液相色谱-质谱/质谱联用法测定人血浆中莫沙必利

建立测定人血浆中莫沙必利的高效液相色谱-质谱/质谱联用法。取血浆样品经液-液萃取后，以乙腈为有机相，0.3%甲酸水溶液为水相，采用梯度洗脱的方式，用C₁₈柱分离，通过电喷雾离子化，以多反应监测(MRM)方式进行正离子检测。莫沙必利线性范围为0.17~68.00 ng·mL^-1，定量下限为0.17 ng·mL^-1，每个样品测试时间仅2.8 min，日内、日间精密度(RSD)均小于13%，准确度(RE)在±6.3%范围内。应用此法研究了20名志愿者单剂量口服枸橼酸莫沙必利片后的药代动力学特点。该方法、灵敏、准确、快速，适用于莫沙必利的药代动力学及生物等效性研究。     

HPLC-MS/MS法测定人血浆中甲氧氯普胺的浓度

目的建立测定人血浆中甲氧氯普胺浓度的LC-MS/MS方法。方法采用Alltech Alltima C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,3μm),以5 mmol.L-1乙酸铵-乙腈-甲醇(体积比为50∶40∶10)为流动相,流速为0.2 mL.min-1,血浆样品在碱性条件下液-液萃取,通过电喷雾离子化四极杆串联质谱,以多离子反应监测(MRM)方式进行检测。用于定量分析的离子对分别为m/z300.20→m/z227.00(甲氧氯普胺)和m/z152.20→m/z134.00(内标,苯丙醇胺)。结果甲氧氯普胺线性范围为0.5~200.0μg.L-1,最低定量限为0.5μg.L-1,平均回收率为(71.38±6.35)%,日内和日间精密度均小于15%。结论该法适用于临床药物浓度监测和药物动力学的研究。     

高效液相色谱-质谱-质谱联用法测定人血浆中艾司西酞普兰浓度及其药代动力学研究

目的建立测定人血浆中艾司西酞普兰浓度的高效液相色谱-质谱-质谱联用法.方法血浆样品经甲醇沉淀后进行分析.色谱柱Lichrospher CN柱150 mm×4.6 m I.D.5μm,流动相甲醇水(含15 mmol·L-1乙酸铵)甲酸(72∶28O.1,v/v/v),流速1.0ml·min-1,电喷雾离子化三重四极杆串联质谱检测,以选择离子反应监测(SRM)扫描方式进行检测,采用选择离子反应监测(SRM)方式进行定量分析,用于监测的离子为m/z 325.0→234.0(西酞普兰)和m/z 409.1→238.1(氨氯地平,内标).结果线性范围为0.20～50.00ng·ml-1,最低定量浓度为0.20 ng·ml-1,应用此法测试了10名健康受试者口服草酸艾司西酞普兰片(10 mg)后不同时间的血药浓度,得到艾司西酞普兰药动学参数,Cmax为9.21±2.10 ng·ml-1,Tmax为3.75±1.04h,AUC0-t为514.6±152.3 ng·h·ml-1,AUC0-∞为540.5±162.3 ng·h·ml-1,t1/2为34.06±7.71 h及Ke为0.021±O.004h-1.结论该法专属、灵敏、简便、快速,适用于人血浆中艾司西酞普兰浓度的测定.