褪黑素对肺炎链球菌溶血素致大鼠脑损伤细胞凋亡的影响

目的 探讨褪黑素(MT)对肺炎链球菌溶血素(PLY)致脑损伤细胞凋亡的影响.方法 幼鼠84只随机分成3组:9 g·L-1盐水组(NS组)28只,颈内动脉注射9 g·L-1盐水;PLY组28只,颈内动脉注射0.2 mL(7 μg)PLY; MT组28只,腹腔注射(1 g·L-1)MT 10 ng·kg-1,15 min后颈内动脉注射0.2 mL(7μg)PLY.每组按照注射后不同的时间点(24 h、48 h)分为2个亚组.预定时间点处死动物,制备脑组织标本.干湿质量法测定其脑组织含水量( BWC),甲酰胺法测定伊文思兰(EB)水平,免疫组织化学技术测定凋亡诱导因子(AIF)表达,原位末端标记法检测细胞凋亡.结果　HE染色光镜下可见PLY组血管间隙增宽,大脑皮质炎性细胞浸润,胶质细胞和神经无细胞有不同程度肿胀、空泡变性.NS组无上述病理变化.MT组大鼠脑组织改变较PLY组轻.PLY组各时间点脑组织BWC水平、EB水平、AIF水平明显增加,24h高于48 h,差异有统计学意义.PLY组各时间点凋亡细胞数明显增加,48 h高于24h,差异有统计学意义.各时间点PLY组与对照组比较均有统计学差异.予以MT干扰后各时间点脑组织各指标以及凋亡细胞数均降低,与PLY组比较,差异有统计学意义.结论　MT能够降低AIF表达,减少神经细胞凋亡,保护脑组织.     

肺炎链球菌溶血素致大鼠脑损伤模型髓样细胞触发受体1的动态变化及意义

目的 探讨髓样细胞触发受体1(TREM-1)在肺炎链球菌溶血素(PLY)致大鼠脑损伤中的动态变化及意义.方法 将64只SD大鼠按简单随机法均等分为PLY组和对照组,分别经左侧颈内动脉注射0.1mL PLY和等体积灭菌9g/L盐水;观察注射后4h、6h、12 h和24 h不同时间点脑组织大体和组织学变化,并应用免疫组织化学法检测脑组织中神经细胞损伤标志物胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和神经元特异性烯醇化酶(NSE)蛋白表达水平,同时应用酶联免疫吸附法检测TREM-1、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白细胞介素6(IL-6)表达水平.结果 PLY组脑组织大体和组织学结果提示大鼠脑损伤存在,且脑组织中GFAP和NSE蛋白表达及TNF-α和IL-6表达在4h开始增加,随注射时间点推移,其表达水平动态增加,与相应时间点对照组相比,差异均有统计学意义(P均＜0.05).PLY组脑组织TREM-1蛋白表达在4h明显增加,在6h有所下降,但仍高于对照组,差异均有统计学意义(P均＜0.05),12 h与24 h TREM-1蛋白表达水平明显下降,与对照组相比差异无统计学意义(P均＞0.05).结论 TREM-1蛋白表达在PLY诱发的大鼠脑损伤早期明显上调,可能通过促进炎性因子TNF-α和IL-6的表达而参与脑损伤的病理发展过程.     

儿童肺炎链球菌感染性心内膜炎3例

对多中心收治的3例肺炎链球菌感染性心内膜炎患儿的临床资料进行回顾性分析。例1为2岁11个月男童,以间断发热1个月余,皮肤发花20 d,发现心脏赘生物1 d入院。超声心动图提示三尖瓣中等团块样回声,血培养结果示肺炎链球菌;例2为3岁10个月女童,以间断发热8 d,腹痛1 d入院。超声心动图提示二尖瓣强回声团,血培养结果示肺炎链球菌。例3为3岁4个月女童,以咳嗽20 d,发热9 d入院。住院期间出现急性左心衰竭。超声心动图提示二尖瓣团块状高回声,血培养结果示肺炎链球菌,菌株血清型23F。3例患儿均有发热表现,2例合并呼吸系统症状。例2出现脑梗死,例3出现急性左心衰竭。3例患儿均通过超声心动图确诊,使用万古霉素治疗后有效,提示本病临床表现多样,万古霉素是重要的抗感染治疗药物之一。     

肺炎链球菌3型相关溶血尿毒症综合征一例临床分析

目的 探讨儿童肺炎链球菌相关溶血尿毒症综合征(SP-HUS)的临床特点.方法 回顾性分析1例3型肺炎链球菌相关HUS患儿的临床、辅助检查特点和随访情况,并复习文献,探讨SP-HUS的诊断要点.结果 患儿女,1.5岁,以发热、咳嗽伴气促5d入院.右肺呼吸音低于左侧,叩诊浊音.辅助检查:血常规示WBC 3.7×109/L,Hb 83 g/L,PLT 11 × 109/L.CRP＞180 mg/L.红细胞形态检查示红细胞大小不一,易见红细胞碎片.尿常规示红细胞计数42.66/HP,尿潜血阳性(+++),尿蛋白(++++).血培养、胸腔积液培养和痰培养均为肺炎链球菌.采用简易棋盘式肺炎链球菌分型试剂盒进行血清型分型证实为3型.Coombs试验示直接抗人球蛋白试验阳性.血补体C3 0.699 g/L,补体C4 0.064 g/L.胸部X线片示右侧胸腔积液,右肺感染.胸部CT示两肺多发感染,右肺下叶多发肺气囊.入院后考虑SP-HUS,予去甲万古霉素针、头孢哌酮舒巴坦针静脉滴注抗感染,连续性肾脏代替治疗,洗涤红细胞纠正贫血等治疗后,血小板恢复正常,溶血停止,贫血纠正,肝肾功能及尿常规正常;肺部病灶好转,直接Coombs试验转阴,补体C3、C4恢复正常.3个月后随访,肝肾功能及尿常规均正常.结论 肺炎链球菌感染出现溶血性贫血、血小板减少、急性肾衰竭、Coombs试验阳性时应考虑SP-HUS可能.肺炎链球菌3型感染与HUS相关.     

丙酮酸乙酯对内毒素致幼鼠感染性脑损伤的保护作用

目的探讨内毒素（LPS）致幼鼠感染性脑损伤模型的建立及丙酮酸乙酯（EP）对LPS所致幼鼠感染性脑损伤的保护作用及其可能机制。方法240只1月龄健康大鼠,随机分为9g/L盐水对照组（NS组）、LPS诱导脑损伤组（LPS组）、EP干预组（EP组）。LPS组颈外动脉注射LPS（1mg/kg）建立感染性脑损伤模型,NS组仅给予同量9g/L盐水;EP组在给予LPS的同时通过腹腔注射一次性给予EP（40mg/kg）。感染性脑损伤模型建立成功后,取各组脑组织标本,采用甲酰胺法检测其脑组织伊文思蓝（EB）水平,免疫组织化学技术检测其脑组织神经元特异性烯醇化酶（NSE）、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、核转录因子（NF-κB）蛋白水平,并观察各组不同时间点脑组织形态及病理变化。结果与NS组比较,LPS组脑组织EB、NSE、GFAP、NF-κB蛋白的表达水平均于6h开始增加,24h达高峰,48h及72h各指标仍高于NS组（Pa〈0.05）,LPS病理改变显示胶质细胞肿胀、血管周围间隙增宽、炎性细胞浸润、神经元肿胀、细胞核固缩、空泡变性坏死等明显脑损伤。EP干预组脑组织EB水平、NSE、GFAP、NF-κB蛋白的表达水平显著下调（Pa〈0.05）。结论EP可减轻LPS所致的幼鼠感染性脑损伤,其机制可能与EP抑制NF-κB的活性,进而减轻炎性反应有关。     

肺炎链球菌的感染与免疫研究进展

肺炎链球菌是儿童侵袭性细菌感染的主要病原菌,可以引起肺炎、脑膜炎和脓毒症等危及生命的疾病。作为上呼吸道常见定植菌,了解其感染过程中机体的免疫反应对于疾病的治疗至关重要。该文综述肺炎链球菌抗原结构、肺炎链球菌结合疫苗及主要毒力因子,并重点描述肺炎链球菌感染后机体的免疫反应,包括固有免疫、巨噬细胞、中性粒细胞和T细胞的作用。     

肺炎链球菌内肽酶O及表面黏附素A联合蛋白疫苗免疫保护作用研究

目的原核表达肺炎链球菌内肽酶O(PepO)及肺炎链球菌表面黏附素A(PsaA),评价其作为疫苗候选蛋白的免疫保护效果。方法设计pepO,psaA目的基因片段的特异性引物,经PCR扩增,构建重组质粒pET28a(+)-pepO,pET28a(+)-psaA,重组质粒转化大肠埃希菌BL21(DE3)诱导表达,经纯化后获得高纯度目的蛋白PepO及PsaA。经黏膜免疫BALB/c小鼠制备其特异性抗血清,ELISA检测抗体效价,Western blot分析验证目的蛋白抗血清的特异性。将BALB/c小鼠随机分为阴性对照组、PepO组、PsaA组及PepO+PsaA联合免疫组,每组18只。构建不同血清型肺炎链球菌感染模型,评估目的蛋白单用及联合使用的免疫保护效果。结果成功制备并获得目的蛋白PepO及PsaA,经Western blot验证目的蛋白抗血清特异性好。PepO组和联合免疫组小鼠唾液中IgA及血清中IgG效价比较差异无统计学意义(P0.05),但均高于PsaA组(P0.05)。PepO组、PsaA组及联合免疫组对鼻腔感染肺炎链球菌D39及CMCC31436小鼠的保护率高于阴性对照组(P0.05),且PepO组及联合免疫组对鼻腔感染肺炎链球菌D39小鼠的保护率高于PsaA组(P0.05)。抗定植实验结果显示,与对照组比较,PepO组、PsaA组及联合免疫组均能有效降低肺炎链球菌CMCC31693及CMCC31207在小鼠鼻咽部和肺部的定植(P0.05),且联合免疫组对降低肺炎链球菌CMCC31207在小鼠肺部的定植效果更好(P0.05)。结论 PepO+PsaA联合疫苗经黏膜途径免疫小鼠后,较单用对小鼠有更好的保护作用,能有效抵抗肺炎链球菌在鼻咽部、肺部的定植,是一组较有开发潜力的蛋白疫苗。     

耐青霉素肺炎链球菌的研究进展

耐青霉素肺炎链球菌（PRSP）不仅对β－内酰胺类抗生素耐药，也对红霉素，复方新诺明，四环素等多种抗生素耐药，其耐药水平也越来越高，耐药机制是青霉素结合蛋白的改变。[近期应用抗生素，接触密集人群及有往住院史是PRSP感染的危险因素，由PRSP引起的脑膜炎和急性中耳炎较为难治，需应用非常规抗生素，控制这一全球性问题需要研究新的方法，避免不必要的抗生素应用，开发有效的肺炎链球菌疫苗将有助于控制其流行。     

儿童肺炎链球菌耐药性变迁

肺炎链球菌是儿童呼吸道细菌感染的首位病原。由于抗生素的长期广泛使用,肺炎链球菌对β-内酰胺类、大环内酯类和喹诺酮类等多种抗生素的耐药性增强,耐药肺炎链球菌导致的感染增多,流行范围更广,给临床抗生素的选择带来困难。现回顾近30年来,我国儿童人群肺炎链球菌分离株对常用抗生素耐药性的变迁。肺炎链球菌耐药性快速进展更加强调了防控肺炎链球菌感染和减少抗生素不合理使用的重要性。     

国内儿童肺炎链球菌耐药状况

<正>肺炎链球菌是一种威胁儿童健康的常见致病菌,可致中耳炎、鼻窦炎、肺炎,还可导致更为严重的侵袭性肺炎链球菌疾病(invasive pneumococcal disease,IPD),包括脓胸、菌血症、脓毒症和脑膜炎等。由于抗生素的长期过度使用。近年来,肺炎链球菌耐药性增强,由耐药肺炎链球菌     

宫内窘迫肾损伤新生动物模型的建立

目的建立一种新的宫内窘迫肾损伤动物模型,探讨新生儿窒息后肾损伤的发病机制。方法暴露孕21日Wistar大鼠双角子宫,以无创动脉夹钳夹一侧供应子宫的动脉和血管,时间为10、30 min,取下动脉夹行再灌注,时间分别为30 min,2、6、122、4 h,剖宫取胎鼠,取出胎鼠双侧肾脏,行HE染色和透射电镜观察。结果21日龄胎鼠肾脏尚处于发育中,肾小管的发育成熟程度落后于肾小球;随着缺氧缺血及再灌注时间的延长,肾脏损害逐渐加重,近曲小管的变化出现早且重。结论近足月胎鼠宫内缺氧缺血及再灌注模型可能是研究新生儿宫内窘迫后肾及其他脏器损伤的较理想模型。     

Playfulness in Children with Traumatic Brain Injury

The sequelae of paediatric traumatic brain injury (TBI) are well documented as being permanent and pervasive. The impact, however, on how a child approaches the childhood occupation of play, termed 'playfulness,' has been neglected. This prospective analysis of difference study used the Test of Playfulness to compare the playfulness of eight children aged 3-13 years diagnosed with moderate to severe TBI to an age-matched control group. Using Rasch analysis, the TBI group did demonstrate the behaviour of playfulness, but to a significantly lower extent than the control group (Wilcoxon matched-pairs signed-ranks (T(8) = 0, p= .012). The findings suggest that playfulness is negatively impacted by TBI, and that strategies to legitimise and optimise playfulness be incorporated into therapy practice for this population.     

油酸诱导幼猪急性肺损伤模型的建立

目的 建立幼猪油酸所致肺损伤模型,并观察最佳油酸成模剂量.方法 取5～7周龄、体质量5～7 kg的健康雄性幼猪15只,随机分为实验组(n=9只)及对照组(n=6只).各组动物均予经口气管插管后呼吸机机械通气,颈内动脉及颈外静脉置管.实验组幼猪予油酸80 ～150mg·kg-1用9 g·L-1盐水稀释至15 mL,微量泵经其颈外静脉持续60 min缓慢注入右心室,对照组幼猪予9 g·L-1盐水15 mL微泵维持60 min静脉输入,取不同时间点(实验组0h～成模时;对照组0～6h)监测生命体征及各项呼吸力学、血气参数、血流动力学参数,至血氧分压/吸入氧体积分数[pa(O2)/FiO2] ＜39.4 kPa确认成模,实验组中3只动物立即处死,其余动物撤机后维持存活1周,实验结束后取左侧肺组织行病理学检测.结果 油酸泵入3～14h,实验组pa(O2)/FiO2值出现显著下降,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05),肺形态学达急性肺损伤标准.其中实验组7只幼猪至3～8hpa(O2)/FiO2值均明显下降,油酸剂量为80～120 mg · kg-1,另2只成模时间分别为11 h及14 h,使用油酸剂量达150 mg·kg-1.对照组至通气6hpa( O2)/FiO2值在各时间点差异均无统计学意义.实验组动物在通气起始,体循环动脉血压(SBP)及心率较为稳定,随着通气时间延长,实验组及对照组SBP、心率变化无统计学意义.结论 使用油酸80～150 mg·kg-1可成功建立幼猪油酸所致肺损伤模型,最佳油酸成模剂量为80～120 mg·kg-1.     

宫内感染与早产儿脑损伤的关系

目的 探讨宫内感染与早产儿脑损伤的关系及其发生机制.方法 选取2008年6月-2010年6月在佛冈县人民医院产科分娩的85例早产儿.对孕母胎盘进行绒毛膜羊膜炎检测,确定是否存在宫内感染;用酶联免疫吸附试验法检测早产儿脐带血细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-10水平;早产儿出生3～7 d行头颅超声或CT检查、新生儿行为神经测定(NBNA)及早期运动发育指标检测,确定有无脑损伤并分组.结果 1.孕母绒毛膜羊膜炎患病率为33%(28/85例),早产儿脑损伤患病率为46%(13/28例);非绒毛膜羊膜炎早产儿脑损伤患病率为7%(4/57例),二者患病率比较,差异有统计学意义(χ2=15.84,P<0.05).2.脑损伤组脐带血IL-1β、IL-6、TNF-α水平分别为(6.53±3.17) μg·L-1、(7.95±4.32) μg·L-1和(5.43±1.82) μg·L-1,均高于无脑损伤组[(1.53±1.22) μg·L-1、(1.65±2.10) μg·L-1和(3.23±0.83) μg·L-1];而IL-10水平为(1.21±0.23) μg·L-1,低于无脑损伤组[(1.59±0.25) μg·L-1];上述细胞因子二组比较差异均有统计学意义(Pa<0.05).结论 宫内感染的早产儿易发生脑损伤,细胞因子可能介导了宫内感染早产儿脑损伤的过程.     

Prehospital Evaluation and Management of Traumatic Brain Injury in Children

The care of patients with TBI has improved dramatically over the past 3 decades with an estimated 20% reduction in mortality rates, in part due to advances in diagnosis and prehospital care. However, a great deal of variation still exists in practice with respect to the diagnosis and management of pediatric head trauma. Training programs should be developed to educate EMS providers and medical control physicians on the Brain Trauma Foundation guidelines for management of TBI, taking into consideration aspects of care unique to children. The effect of utilization of these guidelines on patient outcomes should subsequently be evaluated. In the future, early intervention with antioxidants, glucocorticoids, and immunosuppressants may become part of trials in the prehospital setting aimed to decrease secondary injury.Prehospital providers are often responsible for the triage of children with minor TBI. Current practice in acute care settings ranges from clinical observation of children with minor TBI who are grossly intact neurologically, to obtaining plain films, CT scans, and rarely magnetic resonance imaging. When indicated, the ideal imaging modality for head injury is noncontrast CT scan, which can reliably detect both intracranial injury and skull fracture. The child with a normal neurological examination after isolated head trauma and a negative CT scan is at very low risk of later developing intracranial abnormalities and may be safely discharged home with close observation. Children who have had a concussion must not return to contact sports until they are completely symptom free both at rest and on exertion. At that time, a gradual return to sports is recommended. These children should be referred for neurocognitive screening and assessment when indicated.