蛋白激酶抑制剂对青石棉诱导肺成纤维细胞的细胞周期调控蛋白表达的影响

目的 探讨青石棉致人胚肺成纤维细胞（ＨＥＰＦ）增殖的细胞周期变化的机制。方法 用流式细胞技术检测青石棉诱导ＨＥＰＦ的细胞周期调控蛋白表达的改变,观察酷氨酸蛋白激酶（ＴＰＫ）和蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）的抑制剂对其表达的影响。结果 青石棉可诱导ＨＥＰＦ的Ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１、Ｃｙｃｌｉｎ Ｅ、ＰＣＮＡ、Ｃｙｃｌｉｎ Ａ、Ｃｙｃｌｉｎ Ｂ１和Ｐ３４ｃｄｃ２激酶等蛋白的阳性表达率发生改变。在青石棉组,ＰＫＣ抑制剂使表达的阳性率较未加入ＰＫＣ抑制剂组明显降低,对Ｐ３４ｃｄｃ２激酶影响不大（Ｐ〉０．０５）;而ＴＰＫ抑制剂使ＰＣＮＡ表达的阳性率增高;Ｐ３４ｃｄｃ２激酶表达的阳性率降低（Ｐ〈０．０１）。结论 这几种蛋白可能均了青石棉致ＨＥＰＦ增殖,ＰＣＮＡ（和Ｐ３４ｃｄｃ２激酶）表达的改变可能与上游的ＰＫＣ（和ＴＰＫ）信号通路有关。     

青石棉处理的肺泡巨噬细胞上清液对人胚肺成纤维细胞？…

为了探讨青石棉对肺损伤的机理,用兔肺泡巨噬细胞（ＡＭ）和人胚肺成纤维细胞（ＨＥＰＦ）组成体外模型,采用ＭＴＴ颜色反映法测定青石棉处理兔ＡＭ２４ｈ后的培养上清液刺激ＨＥＰＦ细胞增殖情况,同时用标准石英作为阳性对照,二氧化钛作为阴性对照,以不同粉尘处理的ＡＭ培养上清液作为正常对照。结果发现青石棉能明显刺激ＨＥＰＦ增殖,呈剂量－效应关系（Ｐ〈０．０１）。青石棉浓度在１００μｇ／ｍｌ时,青石棉组ＨＥＰＦ的     

蛋白激酶C抑制剂对温石棉诱导肺成纤维细胞增殖的影响

目的 探讨蛋白激酶Ｃ（ＰＣＫ）信号通路在温石棉诱导的肺泡巨噬细胞因子致人胚肺成纤维细胞（ＨＥＰＦ）增殖中的作用。方法 采用体外细胞培养技术,用四甲基偶氮唑蓝（ＭＴＴ）颜色反应法检测温石棉处理兔肺泡巨噬细胞（ＡＭ）的上清液刺激ＨＥＰＦ增殖和ＰＫＣ抑制剂对其产生的影响,同时设空白对照、正常对照（未加粉尘处理的ＡＭ培养上清液）、阴性对照（标准ＴｉＯ２）和阳性对照（标准ＳｉＯ２）。结果 温石棉处理ＡＭ２４ｈ后的培养上清液再处理ＨＥＰＦ４８ｈ,ＨＥＰＦ增殖,且与粉尘浓度存在显著的剂量－效应关系（ｒ＝０．６７１８,Ｐ〈０．０１）;１００ｕｇ／ｍｌ温石棉染尘组ＨＥＰＦ的净增殖率达４０．５６％,是正常对照组的２．６５倍,高于标准ＳｉＯ２组和标准ＴｉＯ２组。１００ｕｇ／ｍｌ粉尘处理ＡＭ的培养上清液的稀释程度与其促使ＨＥＰＦ增殖的     

公共场所空气质量指标的对应分析

用对应分析 (Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｅｎｃｅａｎａｌｙｓｉｓ,ＡＮＡＣＯＲ)法评价空气质量指标 ,相似的分类指标才会在坐标图上彼此靠近 ,可将两两指标不同分类间的关系在二维坐标图上给出直观、形象的表达。监测数据来自福州 5家有中央空调的歌舞厅。对二氧化碳、细菌总数、相对湿度、负离子浓度和监测时间等 5个指标各分为 3个等级 ,进行对应分析。用ＳＰＳＳ8 0软件包进行分析与绘图。对应分析结果的联合坐标图显示 :ＭＣ2与ＭＢ、ＬＣ2与ＬＢ、ＨＣ2与ＨＢ ;ＭＣ2与Ｔ1、ＬＣ2与Ｔ0、ＨＣ2与Ｔ2 ;ＭＢ与Ｔ1、ＬＢ与Ｔ0、ＨＢ与Ｔ2均很…     

青石棉处理的肺泡巨噬细胞上清液对人胚肺成纤维细胞的作用

为了探讨青石棉对肺损伤的机理,用兔肺泡巨噬细胞(AM)和人胚肺成纤维细胞(HEPF)组成体外模型,采用MTT颜色反映法测定青石棉处理兔AM24h后的培养上清液刺激HEPF细胞增殖情况,同时用标准石英作为阳性对照,二氧化钛作为阴性对照,以不用粉尘处理的AM培养上清液作为正常对照.结果发现青石棉能明显刺激HEPF增殖,呈剂量-效应关系(P＜0.01).青石棉浓度在100μg/ml时,青石棉组HEPF的净增殖率达60.91%,是正常对照组的3.48倍,高于阳性对照和阴性对照100μg/ml青石棉处理兔AM的培养上清液的不同稀释度对HEPF增殖的影响不同,随稀释度的加大,其促细胞增殖的能力越弱,以12稀释度作用最强,明显高于阳性对照和阴性对照(P＜0.01).提示青石棉处理肺泡巨噬细胞的培养上清液中存在有促进肺成纤维细胞增殖的生物活性物质,若能阻止这些生物活性物质的合成和分泌将对石棉相关疾病的预防和治疗具有重要意义.     

支链氨基酸对大鼠心肌缺血损伤的防护作用

目的：观察支链氨基酸（ＢＣＡＡ）对大鼠心肌缺血损伤的预防作用。方法：选用Ｗｉｓｔａｒ大鼠３０只，随机分成三个组，每组１０只。Ａ组：正常对照组；Ｂ组：异丙肾上腺素（ＩＳＯ）对照组；Ｃ组：ＩＳＯ＋ＢＣＡＡ组，其中Ｂ、Ｃ组用ＩＳＯ造成大鼠心肌缺血性损伤。用酶试剂盒和原子吸收法测定了血清、心肌中ＬＤＨ、ＧＯＴ、α－ＨＢＤＨ、ＣＫ、ＰＫ的酶活力及心肌中Ｋ＋、Ｍｇ２＋、Ｃａ２＋离子的含量。结果：Ｂ组大鼠血清和心肌中ＬＤＨ、ＧＯＴ、α－ＨＢＤＨ、ＣＫ、ＰＫ的酶活力均明显升高，心肌中Ｃａ２＋的含量也显著升高，而Ｍｇ２＋的含量明显降低，Ｋ＋含量也有下降的趋势，但变化不显著。Ｃ组大鼠血清中ＬＤＨ、α－ＨＢＤＨ、ＣＫ、ＰＫ的酶活力明显低于Ｂ组，而且ＣＫ的活力接近正常水平；心肌中ＬＤＨ、ＧＯＴ、α－ＨＢＤＨ、ＣＫ的活力均低于Ｂ组并达到正常水平。补充ＢＣＡＡ后能有效地拮抗心肌细胞内钙的增加，使心肌内Ｃａ２＋含量明显低于Ｂ组，与正常对照组无显著差异，但ＢＣＡＡ不能升高受损心肌中Ｍｇ２＋的含量。结论：给予ＢＣＡＡ对心脏缺血性损伤具有一定的防护效果     

摩托车尾气颗粒对人肝、肺细胞CYP1A1的诱导作用

摩托车尾气颗粒 (ＭＥＰ)含多环芳烃类物质 (ＰＡＨｓ)。这类物质在体内通过细胞色素Ｐ45 0 (ＣＹＰ)代谢活化。已有研究发现ＭＥＰ的有机浸出液诱导大鼠ＣＹＰ酶系活性增强。本研究用体外实验探讨ＭＥＰ对人ＣＹＰ1Ａ1的诱导作用。首先 ,用 0 5 μｍ石英纤维滤膜收集ＭＥＰ。用气相色谱 质谱 (ＧＣ ＭＳ)分析其有机溶剂 (二氯甲烷∶己烷 =1∶1 )浸出液化学成分。取人肝癌细胞株ＨｅｐＧ2和肺癌细胞株ＮＣＩ Ｈ32 2分别进行细胞培养 ,加入ＭＥＰ浸出液 (溶于ＤＭＳＯ中 ,终浓度小于 0 1 % )。收集细胞 ,离心 ,制备微粒体蛋白和细胞液。用…     

溴氰菊酯对大鼠脑钙调蛋白含量和蛋白激酶活性的影响

为探讨溴氰菊酯（Ｄｅｌｔａｍｅｒｔｈｒｉｎ，ＤＭ）神经毒作用机理，采用竞争性固相酶联免疫法（ＥＬＩＳＡ）和放射性同位素法分别观察了ＤＭ对不同脑区钙调蛋白（Ｃａｌｍｏｄｕｌｉｎ，ＣａＭ）含量和蛋白激酶（Ｐｒｏｔｅｉｎ ｋ８ｉｎａｓｅ）活性的影响。结果表明，大鼠经ＤＭ处理徨，大脑和小脑ＣａＭ含量无明显变化，而大脑皮层和海马中ＰＫＡ，ＰＫＣ活性明显增强。同时，脑细胞膜和细胞浆中ＰＫＣ活性亦明显升高，说明     

HCV体外感染多种细胞株的观察

目的 寻找ＨＣＶ体外感染的细胞培养系统。方法 选用ＨＣＶ ＲＮＡ阳性血清感染人单核细胞株（Ｕ９３７）、人Ｔ淋巴细胞株（Ｍｏｌｔ－４）、人胆囊细胞株（Ｋｉｒｌｉｃｈ）、猪肾细胞株（ＰＫ１５）、鼠睾丸细胞株（ＳＴＥ）、人肝癌细胞株（ＨｅｐＧ２、Ｈｅｐ３Ｂ）等７种细胞。应用ＲＴ－ＰＣＲ法检测ＨＣＶ ＲＮＡ在这种７种细胞中的感染和复制情况。结果 ７种细胞中均能检测到ＨＣＶ ＲＮＡ正链，并且在Ｕ９３７、Ｍｌ     

煤尘刺激肺泡巨噬细胞对人胚肺成纤维细胞的作用

目的了解煤尘对肺成纤维细胞增殖的影响。方法采用不同浓度煤尘刺激兔肺泡巨噬细胞（ＰＡＭ）,观察其上清液对体外培养的人胚肺成纤维细胞（ＨＥＬＦ）的作用,测定ＨＥＬＦ的增殖程度、培养液上清中羟脯氨酸（Ｈｙｐ）含量,了解胶原合成能力。结果空白对照、ＰＡＭ、煤尘组和阳性对照组（二氧化硅）ＨＥＬＦ的增殖程度均数分别为０．２８５、０．３６８、０．３９８、０．７６８,Ｆ＝９３．９２,Ｐ＜０．０１。其中２００ｍｇ／Ｌ煤尘作用于ＰＡＭ后,其上清液对ＨＥＬＦ有显著刺激增殖作用（Ｐ＜０．０１）;１００、２００ｍｇ／Ｌ煤尘对ＨＥＬＦ的增殖率分别为９．７４％、１７．００％。１００ｍｇ／Ｌ组Ｈｙｐ含量为（３０．３９±０．２７）ｍｇ／Ｌ,明显高于ＰＡＭ对照组［（２７．５８±１．４６）ｍｇ／Ｌ］,Ｐ＜０．０５。结论一定浓度煤尘体外作用于ＰＡＭ,可刺激成纤维细胞增殖,同时伴有胶原合成能力的增加。     

氰戊菊酯对肺的生化毒理学研究

应用支气管肺泡灌洗术研究了氰戊菊酯对大鼠毒作用的生化效应，结果表明支气管肺泡灌洗液中肌酸磷酸激酶（ＣＰＫ）、白蛋白（Ａｌｂ）、总蛋白（ＴＰ）、碱性磷酸酶（ＡＫＰ、酸性磷酸酶（ＡＣＰ）、α１－抗胰蛋白酶（α１－ＡＴ）、苹果酸脱氢酶（ＭＤＨ）、乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）、葡萄糖、乳酸含量均显著升高，其中以ＣＰＫ最敏感。染毒后４ｈ，大多数指标即明显改变，第４天基本恢复正常。血液中仅ＡＣＰ、α１－ＡＴ和Ａｌｂ含     

衢州地区病毒性肝炎血清学分型调查

为了解本辖区内病毒性肝炎的型别构成 ,以提供制订各型病毒性肝炎防制措施的科学依据 ,我们对 16 7份病毒性肝炎血清标志物进行检测调查 ,结果报告如下。材料与方法1　研究对象　 1998～ 1999年期间 ,经县 (市 )人民医院临床诊断的病毒性肝炎住院患者 16 7例血清计 16 7份。2　病原学分型标准　甲型肝炎 ,血清抗ＨＡＶ ＩｇＭ阳性(ＥＬＩＳＡ法 ) ;乙型肝炎 ,血清ＨＢｓＡｇ、抗ＨＢｃ ＩｇＭ阳性或血清ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、抗ＨＢＣ阳性 (ＥＬＩＳＡ法 ) ;丙型肝炎 ,血清抗ＨＣＶ阳性 (ＥＬＩＳＡ法 ) ;丁型肝炎 ,血清抗ＨＤＶ—ＩｇＭ…     

接触二甲基甲酰胺对肝功能的影响

二甲基甲酰胺 (ＤＭＦ)由于其低毒性 ,所以对作业人员的危害往往被忽视。我们通过对某腈纶厂车间空气监测和作业人员体检 ,探讨接触ＤＭＦ对人体肝功能的影响。一、对象与方法1 对象 :某腈纶厂工龄为 4年 ,无心、肝、肾等脏器疾病的男性职工 2 2 8人。已剔除ＨＢｓＡｇ 、ＨＡＶ ＩｇＭ 、Ａｎｔｉ ＨＣＶ 人员。2 方法 :自动生化分析仪测定空腹血中丙氨酸转氨酶(ＡＬＴ)、碱性磷酸酶 (ＡＫＰ)、天冬氨酸转氨酶 (ＡＳＴ)、γ 谷氨酰转肽酶 (γ ＧＴ)。有 1项异常均认为该职工肝功能异常。快速检气管定时检测化工、纺丝车间不同班组岗位…     

黄曲霉毒素B1在人支气管细胞中的代谢与细胞毒性

流行病学研究表明吸入被黄曲霉毒素Ｂ1(ＡＦＢ1)污染谷物的粉尘与发生肺癌的危险性增加有关 ,但是ＡＦＢ1在人肺中的活化与代谢机制尚不明确。本研究以ＳＶ40永生化的人支气管上皮细胞系 (ＢＥＡＳ 2Ｂ)为对照细胞 ,通过ｃＤＮＡ转染得到分别表达人细胞色素Ｐ450 1Ａ2 (Ｂ ＣＭＶ1Ａ2 )和人细胞色素Ｐ450 3Ａ4(Ｂ3Ａ4)的两个细胞系 ,以比较ＡＦＢ1在人肺细胞中的活化与细胞毒性。在含ＬＨＣ 9的Ｔ75组织培养瓶中培养ＢＥＡＳ 2Ｂ细胞 ,保持温度为 3 7℃ ,ＣＯ2 浓度为5%。采用竞争性定量ＲＴ ＰＣＲ法对ＣＹＰ表达进行定量 ,ＲＴ ＰＣＲ…     

重庆市新生儿疾病筛查32 598例分析

儿童是国家的希望,他们的身心健康关系到国家的兴旺发达。依法筛查新生儿(先天性甲低ＣＨ,苯丙酮尿症ＰＫＵ)疾病,是防止患儿病残,提高人口素质的一项有力措施[1]。1　对象和方法1996年11月～1999年9月在重庆市筛查网络(城区28所产院)采集出生后母乳喂养3～5天的新生儿足跟血,滴在美国903号滤纸上,用滤纸干血斑(以下简称血片)标本,以时间分辩免疫荧光分析法ＤＥＬＦＩＡ检测ＴＳＨ、Ｔ3、Ｔ4诊断ＣＨ;用细菌抑制法ＢＩＡ检测苯丙氨酸浓度,诊断ＰＫＵ。2　结　果用ＤＥＬＦＩＡ检测血片31496例,查出ＴＳＨ>20ｍＵ/Ｌ者223例,及时通知患儿来中…     

抗TNF抗体,IFN—γ对活化的成纤维细胞的作用

用加不同浓度石棉纤维培养的ＡＭ上清液活化ＷＩ－３８细胞，再加抗ＴＮＦ抗体或ＩＦＮ－γ，分别用＾３Ｈ－胸腺嘧啶（＾３Ｈ－ＴｄＲ）和＾１４Ｃ－脯氨酸（＾１４Ｃ－Ｐｒｏ）掺入法，观察其对肺成纤维细胞的作用。结果显示，抗ＴＮＦ抗体，ＴＮＦ－γ都有抑制成纤维细胞增殖的作用，并影响胶原合成。     

E-选择素和最迟激活抗原-4介导造血液细胞粘附于骨髓内皮细胞

ＣＤ34+造血祖细胞 (ＨＰＧｓ)粘附到窦状隙内皮细胞在ＣＤ34+ＨＰＣｓ移植到骨髓细胞 (ＢＭ )寄居发挥一个关键作用。作者研究了从人类ＢＭ或外周血细胞(ＰＢ)获得的纯化ＣＤ34+ＨＰＣｓ相互反应时的各种粘附分子的作用。结果是 :ＰＢＣＤ34+细胞粘附到人ＢＭ内皮细胞 (ＨＢＭＥＣｓ)仅发生于用白介素 (ＩＬ) - 1预刺激内皮细胞之后。在加入佛波酯 -肉豆寇乙酸酯(ＰＭＡ)后 ,明显地增强此种粘附。ＰＢＣＤ34+细胞粘附于ＩＬ - β预先兴奋的ＨＢＭＥＣｓ可被抗Ｅ -选择素单抗 (ｍＡｂｓ)和ＰＢＣＤ34细胞神经酰胺酶处理所阻断。Ｅ-选择素介…     

镉通过Caspase9活化诱导C6神经胶质瘤细胞凋亡

慢性镉暴露可导致一系列病理状态 ,已有研究表明镉诱导多种组织和细胞的凋亡 ,但是产生凋亡的机制尚不明确。本研究比较了镉诱导不同细胞系凋亡的能力 ,探讨镉诱发Ｃ6胶质瘤细胞凋亡的分子机制。培养Ｃ6大鼠胶质瘤细胞、ＰＣ1 2嗜铬细胞瘤细胞、3Ｔ3Ｌ1鼠纤维母细胞、Ｅ3 67大鼠成神经细胞瘤细胞、Ａ54 9人纤维母细胞、Ｌ92 9鼠纤维母细胞、ＶＨ1 6人纤维母细胞、ＮＩＨ3Ｔ3鼠纤维母细胞。用中性红富集实验和 3 (4 ,5 二甲基噻唑 2 ｙｌ) 2 ,5 二苯 四唑溴 (ＭＯＬ ＬＴＴ)实验检测不同剂量镉染毒后对细胞活力的影响 ,结果以细胞活力…     

碳酸镧在CA、UDS和MN试验中的抗诱变作用

应用人胚纤维母细胞（ＨＥＦ）染色体畸变（ＣＡ）试验、非程序ＤＮＡ合成（ＵＤＳ）试验和小鼠骨髓细胞微核（ＭＮ）试验，研究了碳酸镧对短波紫外线（ＵＶ）、盐酸氮芥（ＮＨ２ＨＣ１）、亚砷酸钠（ＮａＡｓＯ２）和环磷酰胺（ＣＰ）致突变作用的影响，从遗传学角度评估了碳酸镧的抗诱变作用。结果表明：碳酸镧在ＵＶ、ＮＨ２ＨＣｌ和ＣＰ诱导的不同遗传终点中，显示了不同程度的诱变抑制作用。但碳酸镧对ＮａＡｓＯ２诱导的ＣＡ效应仅有下降趋势，而无统计学意义，故认为其抗诱变作用可能有某种专属性。     

DNA修复酶6-氧-甲基嘌呤-DNA甲基转移酶研究进展

Ｆｏｏｔｅ与Ｏｌｓｓｏｎ等于 1980年发现Ｅ .ｃｏｌｉ 6 氧 甲基嘌呤 ＤＮＡ甲基转移酶 (ＭＧＭＴ或ＡＧＴ ,ＥＣ2 .1.1.6 3)与Ｏ6 甲基鸟嘌呤 (Ｏ6ｍＧ)的修复有关。Ｋａｕｔｉａｎｉｎｅｎ等又于 1986年发现肿瘤转化株细胞内的ＭＧＭＴ活力成倍增高。随后 ,人们发现2 0 %的人类肿瘤细胞系的ＭＧＭＴ活力下降 ,ＭＧＭＴ活力还与肿瘤的诱导及耐药性有关[1] 。一、ＭＧＭＴ基因与ＭＧＭＴ蛋白质1 基因结构 :人ＭＧＭＴ(ｈＭＧＭＴ)基因位于 10号染色体2 6ｑ上[2 ] ,含有 5个外显子、4个内含子[3 ] 。碱基组成比例为Ａ :174、Ｃ :2 31、Ｇ…