ERK通路参与的未分化甲状腺癌FRO细胞凋亡过程及三氧化二砷的调控作用研究

目的：探讨三氧化二砷促进未分化甲状腺癌FRO细胞凋亡的机制,为临床治疗提供参考。方法将生长状态良好的未分化甲状腺癌FRO细胞随机分为5组：对照组、U0126（10μM）组、三氧化二砷低剂量（1μM）组、三氧化二砷中剂量（10μM）组、三氧化二砷高剂量（100μM）组。分析各组细胞凋亡蛋白、ERK通路蛋白表达。结果研究发现三氧化二砷能引起未分化甲状腺癌FRO细胞Bax、Caspase-3和Caspase-6蛋白表达增强以及Raf、Ras、MEK、ERK1/2和Bcl-2表达减弱（P﹤0.05）,且高剂量效果比中剂量和低剂量更显著（P﹤0.05）。结论三氧化二砷能有效促进未分化甲状腺癌FRO细胞凋亡,且此过程与其抑制ERK信号转导通路蛋白过表达有关。     

miR-200 b介导血肿瘤屏障通透性增加的机制

目的：研究微小RNA（ microRNA,miRNA）miR-200b是否介导血肿瘤屏障（ blood-tumor barrier, BTB）通透性增加。方法：测量跨内皮阻抗值（ TEER）、辣根过氧化物酶（ HRP）渗漏量,分析血脑屏障（ blood-brain barrier,BBB）和BTB通透性的改变,应用Real-time PCR检测血脑屏障BBB和BTB大鼠脑微血管内皮细胞（ rat cerebral microvascular endothelial cell RCMEC,ECs）miR-200b的表达,应用miR-200b agomir和miR-200b antagomir分别转染GECs（ECs和U87脑胶质瘤细胞共培养的细胞）后分析血肿瘤屏障的通透性改变;应用Western blot检测紧密连接相关蛋白ZO-1（ zonula occludens-1）的表达;应用免疫荧光方法观察GECs紧密连接相关蛋白ZO-1和丝状肌动蛋白（ filamentous actin,F-actin）结构和分布的改变。结果：与BBB 相比,BTB的TEER值显著降低,HRP显著升高;与BBB 的ECs 相比,GECs内源性miR-200b表达显著降低;miR-200b agomir和miR-200b antagomir成功转染到GECs 中;miR-200b agomir 组TEER值显著升高,HRP流量显著降低,以及ZO-1表达显著升高,抑制ZO-1由内皮细胞的边缘向细胞质转移,抑制丝状肌动蛋白由细胞膜边缘向细胞中央区分布,F-actin分布于细胞边缘明显增加,应力纤维形成明显减少;miR-200b an-tagomir结果与miR-200b agomir实验结果相反。结论：MiR-200b介导BTB通透性增加。     

不同剂量X射线照射对小鼠免疫系统的影响

目的：观察不同剂量X射线照射对小鼠免疫系统的影响。方法将24只小鼠随机分为对照组（无照射）,低剂量照射组（每次2 Gy）和高剂量照射组（每次5 Gy）,每组各8只。比较不同剂量X射线对小鼠进行单次全身照射后,胸腺、脾脏变化及对外周血白细胞,淋巴细胞及血小板数量的影响。结果高剂量照射组胸腺指数较对照组降低,差异具有统计学意义（P﹤0.05）,而低剂量照射组胸腺指数与对照组比较,差异无统计学意义（P﹥0.05）;随着X线照射剂量的增大,脾脏指数降低,差异均有统计学意义（P﹤0.05）;与对照组比较,低、高剂量照射组小鼠外周血白细胞,淋巴细胞及血小板数量均减少,差异均有统计学意义（P﹤0.05）。结论不同免疫器官对X射线敏感度不同,X射线对免疫功能的损伤随着射线剂量的增加而增大,因此应该加强对放射治疗患者免疫器官的保护。     

丹参酮ⅡA对乳腺癌细胞的影响及其分子机制

目的 观察丹参酮ⅡA(TanⅡA)对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其分子机制.方法 选取处于对数生长期的乳腺癌MCF-7细胞,设对照组(0μg/ml TanⅡA)和处理组(0.25、0.50、0.75μg/ml TanⅡA),处理MCF-7细胞48 h.MTT法检测各组MCF-7细胞的增殖抑制率,流式细胞术检测各组MCF-7细胞的凋亡率,Western Blot和RT-PCR分别检测各组MCF-7细胞中p53、Bcl2的蛋白和mRNA表达水平.结果 与对照组比较,不同剂量TanⅡA处理组的MCF-7细胞增殖抑制率升高(P﹤0.05),且呈剂量-时间依赖性;随着TanⅡA作用剂量的增加,MCF-7细胞的凋亡率逐渐增大,均高于对照组(P﹤0.05).与对照组比较,0.75μg/ml TanⅡA处理组的p53蛋白表达升高,Bcl2蛋白表达水平下降,差异有统计学意义(P﹤0.05);与对照组比较,0.75μg/ml TanⅡA处理组的p53 mRNA表达水平增加,Bcl2 mRNA表达水平降低,分别为对照组的4.88倍和0.42倍(P﹤0.05);0.75μg/ml TanⅡA处理组的p-AKT蛋白表达水平(0.866±0.015)低于对照组的p-AKT蛋白表达水平(1.000±0.020),差异有统计学意义(P﹤0.05).结论 TanⅡA对乳腺癌MCF-7细胞具有抑制增殖和促进凋亡的作用,其凋亡作用与p53和Bcl2蛋白的表达有关,其抗凋亡机制与p-AKT信号通路有关.     

胃癌细胞SGC7901凋亡的PI3K/Akt通路介导作用及雷帕霉素的作用机制分析

目的：分析雷帕霉素对胃癌细胞中PI3K/Akt蛋白表达的影响作用,以为临床治疗提供参考。方法将生长状态良好的胃癌细胞SGC7901随机分为4组：对照组,雷帕霉素低剂量组、中剂量、高剂量组（n=8）。采用DAPI染色法分析各组细胞的凋亡情况;采用免疫印迹法和Real-time PCR检测PI3K/AKT信号通路中相关蛋白PI3K、AKT、mTOR蛋白及mRNA的表达。结果雷帕霉素低、中、高剂量组均可抑制细胞的增殖,差异具有统计学意义（P﹤0.05）;雷帕霉素下调了胃癌细胞中PI3K、AKT、mTOR蛋白及mRNA的表达,且与对照组比较,差异均有统计学意义（P﹤0.05）。结论雷帕霉素主要通过抑制PI3K、AKT及mTOR的过表达发挥肿瘤抑制作用。     

腱蛋白样蛋白2在胃癌中的表达及临床意义

目的 探索腱蛋白样蛋白2(CHRDL2)在胃癌组织中的表达及临床意义。方法 应用免疫组化法分析CHRDL2在86例胃癌组织及79例癌旁组织中的表达情况,分析CHRDL2蛋白表达与胃癌患者临床特征和预后的关系。预后影响因素分析采用Cox多因素回归分析。结果 胃癌组织中CHRDL2蛋白高表达率明显高于癌旁组织,差异有统计学意义（P﹤0.01）。N1～3期胃癌患者的胃癌组织中CHRDL2蛋白高表达率高于N0期患者,差异有统计学意义（P﹤0.05）。CHRDL2低表达患者的总生存率高于CHRDL2高表达患者,差异有统计学意义（P﹤0.05）。肿瘤直径﹥5 cm、TNM分期为Ⅲ～Ⅳ期均为胃癌患者预后的独立危险因素（P﹤0.05）。结论 CHRDL2在胃癌组织中高表达,可能成为预测胃癌发生、发展以及患者预后的新的生物标志物,为胃癌临床诊治提供新思路。     

坎地沙坦对小鼠肝癌移植瘤及新生血管生成的抑制作用

目的 探讨血管紧张素Ⅱ 1型受体拮抗剂坎地沙坦对小鼠肝癌移植瘤生长及血管生成的影响。方法 建立肝癌H22细胞小鼠移植瘤模型。将48只小鼠随机分为生理盐水组（0.2ml d1～d8）、低剂量坎地沙坦组（2mg／kg,0.2ml d1～d8）、高剂量坎地沙坦组（20mg／kg,0.2ml d1～d8）和氟尿嘧啶组（25mg／kg,0.2ml d1～d6）,每组12只。第9天处死小鼠取瘤组织,测瘤重,计算抑瘤率;免疫组化法检测移植瘤组织内血管内皮生长因子（VEGF）和CD34表达,测定微血管密度（MVD）。另取40只小鼠以相同条件进行平行实验,每组10只,观察小鼠的生存时间。结果 高剂量坎地沙坦组及氟尿嘧啶组的抑瘤率分别为35.3％和50.6％,均高于低剂量坎地沙坦组的20.7％,差异有统计学意义（P＜0.05）;与生理盐水组相比,低剂量（5.083±1.240）与高剂量坎地沙坦组（4.083±1.165）VEGF分值均显著降低（P＜0.05）,且高剂量组降低更明显（P＜0.05）;与生理盐水组相比,低剂量（20.633±2.171）与高剂量（17.150±2.713）坎地沙坦组MVD均显著降低（P＜0.01）,且高剂量组降低更明显（P＜0.05）;高剂量坎地沙坦组及氟尿嘧啶组小鼠的生命延长率分别为39.5％和30.6％,均高于低剂量坎地沙坦组的20.4％（P＜0.05）。结论 坎地沙坦可抑制小鼠肝癌移植瘤的生长,其机制可能与抑制肿瘤新生血管生成有关。     

HSP27在胃印戒细胞癌组织中的表达及其与β-catenin和Vimentin的关系

目的：检测热休克蛋白27（HSP27）、β-连接素（β-catenin）及波形蛋白（Vimentin）在胃印戒细胞癌中的表达,并分析三者之间的关系。方法：选取70例胃镜活检组织,包括印戒细胞癌（ SRCC）30例,低分化腺癌30例,黏膜慢性炎症10例。免疫组化检测HSP27、β-catenin及Vimentin蛋白的表达。结果：印戒细胞癌HSP27表达率及β-catenin异位表达率分别为80%、40%,与低分化腺癌（53.3%、66.7%）比较差异具有统计学意义（P﹤0.05）。印戒细胞癌中HSP27与β-catenin异位表达率间存在负相关（P﹤0.05）。印戒细胞癌β-catenin正常表达率（46.7%）与低分化腺癌（23.3%）之间差异无统计学意义（ P﹥0.05）,与HSP27表达无相关性（P﹥0.05）。印戒细胞癌Vimentin表达率（33.3%）与低分化腺癌（53.3%）比较无统计学差异（P﹥0.05）,并与β-catenin的异位表达及HSP27之间无相关性（ P﹥0.05）。结论：HSP27、β-catenin及Vimen-tin在印戒细胞癌及低分化腺癌中均有不同程度的异常表达。印戒细胞癌HSP27的表达显著高于低分化腺癌,而β-catenin的异位表达显著低于低分化腺癌,并且Vimentin的表达率与低分化腺癌比较,处于较低水平。在印戒细胞癌及低分化腺癌中,三者的表达差异可能与肿瘤的不同生物学行为有关。     

舒芬太尼在肾母细胞瘤患儿术后镇痛中的应用效果及对患儿免疫功能的影响

目的探讨舒芬太尼在肾母细胞瘤患儿术后镇痛中的应用效果及对患儿免疫功能的影响。方法采用随机数字表法将42例肾母细胞瘤患儿分为低剂量、中剂量和高剂量组,每组14例,低剂量组、中剂量组、高剂量组患儿术后舒芬太尼镇痛剂量分别为1.0、2.5、4.0μg/kg。术后6、24、48 h,采用中文版儿童疼痛行为量表(FLACC)评估三组患儿的镇痛效果,以及不良反应发生情况;麻醉前和术后1、24、72 h,检测三组患儿免疫功能指标,包括免疫球蛋白(Ig)G、IgA、IgM。结果术后6、24、48 h,中剂量组、高剂量组患儿FLACC评分均低于低剂量组患儿,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。术后1、24、72 h,低剂量组患儿IgG、IgA、IgM水平均低于本组麻醉前,差异均有统计学意义(P﹤0.05);术后1、24 h,中剂量组和高剂量组患儿IgG、IgA、IgM水平均低于本组麻醉前,差异均有统计学意义(P﹤0.05),但术后72 h,中剂量组和高剂量组患儿IgG、IgA、IgM水平与麻醉前比较,差异均无统计学意义(P﹥0.05)。低剂量组患儿未发生不良反应,中剂量组患儿发生恶心1例,高剂量组患儿发生恶心5例、呕吐3例。结论2.5μg/kg的舒芬太尼在肾母细胞瘤患儿术后镇痛中效果明显,且对患儿的免疫系统发挥一定的保护作用,可以减轻患儿术后免疫功能抑制。     

沉默survivin表达对甲状腺癌细胞凋亡的影响及其机制研究

目的探讨沉默survivin表达对甲状腺癌细胞凋亡的影响及其可能的作用机制。方法采用免疫印迹法(Western blot)检测存活蛋白(survivin)在甲状腺癌组织(n=98)、癌旁组织(n=98)及细胞SW579中的表达;将survivin siRNA和non-target siRNA转染SW579细胞,分别设为干扰组和阴性组,以不做任何处理的细胞作为对照组。转染48 h后,Western blot检测survivin、cleaved caspase 3和Bcl-2蛋白的表达,流式细胞仪检测细胞的凋亡率。结果甲状腺癌组织和细胞中survivin蛋白相对表达量均明显高于癌旁组织和正常甲状腺细胞,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。对照组与阴性组细胞中survivin相对表达量比较,差异无统计学意义(P﹥0.05);干扰组细胞中survivin相对表达量明显低于对照组,差异有统计学意义(P﹤0.01)。对照组与阴性组细胞凋亡率比较,差异无统计学意义(P﹥0.05);干扰组细胞凋亡率明显高于对照组,差异有统计学意义(P﹤0.01)。干扰组细胞中cleaved caspase 3蛋白相对表达量明显高于对照组,Bcl-2蛋白相对表达量明显低于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.01);阴性组和对照组cleaved caspase 3和Bcl-2蛋白相对表达量比较,差异均无统计学意义(P﹥0.05)。结论 survivin在甲状腺癌组织和细胞中呈高表达,沉默其表达可诱导甲状腺癌细胞凋亡,其作用机制可能与上调cleaved caspase 3和下调Bcl-2蛋白的表达有关。     

百合多糖联合大蒜素对肝癌H22荷瘤小鼠肿瘤生长及血清细胞因子水平的影响

目的:探讨百合多糖联合大蒜素对肝癌H22荷瘤小鼠肿瘤生长及血清细胞因子水平的影响。方法:雄性 BALB/c小鼠腋下注射肝癌H22细胞计数瘤液建立荷瘤模型,分为百合多糖组（100 mg/kg）、大蒜素组（40 mg/kg）、百合多糖低剂量+大蒜素组（50 mg/kg+40 mg/kg）、百合多糖中剂量+大蒜素组（100 mg/kg+40 mg/kg）、百合多糖高剂量+大蒜素组（150 mg/kg+40 mg/kg）、正常组、模型组和环磷酰胺组（30 mg/kg）。处理7 d后,观察小鼠的肿瘤重量,计算抑瘤率;胸腺、脾脏称重,计算胸腺指数和脾脏指数;ELISA法检测血清免疫相关细胞因子IL-18、TNF-α、IFN-γ、IL-2、IL-6水平及促血管生长因子VEGF水平。结果:大蒜素组、百合多糖中剂量+大蒜素组、百合多糖高剂量+大蒜素组抑瘤率分别为27.27%、34.68%和30.64%。百合多糖中剂量+大蒜素组和百合多糖高剂量+大蒜素组胸腺指数明显高于模型组(P<0.01)。百合多糖高剂量+大蒜素组较模型组明显升高IL-18水平(P<0.01)。百合多糖中剂量+大蒜素组TNF-α水平高于模型组(P<0.05)。百合多糖中剂量+大蒜素组较模型组明显升高IL-2水平(P<0.01)。百合多糖高剂量+大蒜素组较模型组降低VEGF水平(P<0.05)。结论:百合多糖联合大蒜素能抑制肝癌H22荷瘤小鼠肿瘤的生长,提高荷瘤小鼠的胸腺指数,并促进小鼠分泌免疫相关细胞因子IL-18、TNF-α、IL-2,减少分泌VEGF。     

血管生成抑制剂YH-16抑制结肠癌肝转移的研究

背景与目的:YH-16是新合成的重组人血管内皮抑制素,Ⅱ期临床试验已证实YH-16联合化疗治疗晚期非小细胞肺癌具有协同作用。本文探讨血管生成抑制剂YH-16对结肠癌肝转移的抑制作用。方法:MTT法测定血管生成抑制剂YH-16对血管内皮细胞和结肠癌CT26细胞的IC50;经小鼠脾脏下极包膜下注入CT26细胞建立结肠癌肝转移模型,60只小鼠随机分为对照组、低剂量YH-16组、中剂量YH-16组、高剂量YH-16组,YH-16剂量分别为0mg/kg、0.40mg/kg、0.75mg/kg和1.50mg/kg,术后2周观察各组小鼠肝转移情况,采用免疫组化方法检测肝转移瘤组织中血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)的表达和肿瘤微血管密度(microvesseldensity,MVD)。结果:(1)YH-16对结肠癌CT26细胞和血管内皮细胞的IC50分别为(2.16±0.28)μg/ml和(0.64±0.10)μg/ml,前者是后者的3.38倍;(2)对照组,低、中、高剂量YH-16组肝转移率分别为100.0%、92.3%、80.0%和73.3%。高剂量YH-16组肝转移瘤数目明显低于对照组、低剂量YH-16组和中剂量YH-16组(P值均<0.05);(3)对照组,低、中、高剂量YH-16组脾脏肿瘤体积的中位数分别为1.180cm3、1.201cm3、0.887cm3和0.781cm3,四组比较无显著性差异(P>0.05);(4)YH-16各剂量组肝转移瘤组织中VEGF的表达较对照组无明显降低,四组肝转移瘤的MVD分别为65.00±9.58、58.15±8.81、51.60±7.10和44.53±11.47,中、高剂量YH-16组的MVD计数较对照组明显降低,高剂量YH-16组MVD计数较中剂量和低剂量YH-16组明显降低(P值均<0.05)。结论:血管生成抑制剂YH-16可以明显抑制结肠癌肝转移。     

Effects of combining low frequency ultrasound irradiation with papaverine on the permeability of the blood–tumor barrier

This study was performed to determine whether low frequency ultrasound (LFU) irradiation, Papaverine (PA) infusion and combination LFU irradiation with PA infusion opened the blood–tumor barrier (BTB) by affecting tight junctions (TJ)-associated proteins zonula occluden-1 (ZO-1), occludin and caludin-5. In a rat brain glioma model, we found that the mRNA and protein expression levels of ZO-1, occludin and claudin-5 were decreased by LFU irradiation and PA infusion. LFU-induced and PA-induced decrease of ZO-1, occludin and claudin-5 was further decreased after combining LFU irradiation with PA infusion. Immunohistochemistry assay showed that the decreased expression of ZO-1, occludin and claudin-5 was the most obvious in the tumor capillaries. Meanwhile, Evans blue assay showed that the permeability of BTB was increased, and transmission electron microscopy (TEM) indicated that TJ was opened. This led to the conclusion that LFU irradiation and PA infusion together can open the BTB by paracellular pathway. Significantly down-regulated expression levels of ZO-1, occludin and claudin-5 might be one of the molecular mechanisms of combining LFU and PA enhancing the permeability of BTB.     

蝎毒多肽提取物对白血病小鼠Bcl-2 SDF-1α与TGF-β1 表达的影响*

目的:探讨蝎毒多肽提取物（PESV）对白血病小鼠Bcl- 2、SDF-1 α 与TGF-β 1 表达的影响,探究PESV对白血病细胞增殖和浸润的影响与机制。方法:NOD-SCID 小鼠60只,按本课题前期研究方法,建立人白血病NOD-SCID 小鼠髓外浸润模型。选取造模成功的小鼠40只,随机分为4 组,每组10只,分别为高、中、低剂量组和模型组,另设同周龄正常NOD-SCID 小鼠10只为空白对照组。高、中、低剂量组每只分别尾静脉注射PESV 1.2mg/（kg ·d）、0.6mg/（kg ·d）、0.3mg/（kg ·d）,模型组和空白组每只均尾静脉注射0.9% 的生理盐水0.3mL/d,35d 后全部处死,取血清和骨髓细胞培养液上清,用ELISA 法进行Bcl- 2、SDF-1 α 与TGF-β 1 的检测。结果:高、中、低剂量组存活率均高于模型组,高、中、低剂量组小鼠血清以及骨髓的Bcl- 2、SDF-1 α 均明显低于模型组（P<0.05）,而TGF-β 1 均高于模型组,均以高剂量组效果最为明显（P<0.05）。 结论:蝎毒多肽提取物可以有效的降低白血病小鼠血清及骨髓中Bcl- 2、SDF-1α的表达,提高TGF-β1 的表达,具有较好的阻抑白血病细胞增殖和浸润的作用。      

白桦酯醇对卵巢癌裸鼠皮下移植瘤组织中MMP-2和MMP-9表达的影响及意义

目的 探讨白桦酯醇对卵巢癌SKOV3细胞裸鼠皮下移植瘤组织中基质金属蛋白酶-2（MMP-2）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）表达的影响和意义。方法 建立卵巢癌SKOV3细胞裸鼠移植瘤模型,将30只裸鼠随机分为白桦酯醇高剂量组（80mg／kg）、中剂量组（40mg／kg）、低剂量组（20mg／kg）以及对照组（生理盐水）和紫杉醇组（135mg／m2）,每组6只,腹腔给药02ml/只,隔日1次,连续21d。停药后第2d处死裸鼠,测量其移植瘤体积和瘤重;用免疫组织化学法检测移植瘤组织中MMP-2和MMP-9蛋白的表达并计算表达率。结果 白桦酯醇处理组和紫杉醇组的移植瘤体积和瘤重均小于对照组（P＜0.05）;白桦酯醇中、高剂量组的抑瘤率分别为44.5％和51.4％,均高于其低剂量组的17.5%（P＜0.05）。与对照组比较,白桦酯醇处理组和紫杉醇组移植瘤组织中MMP-2和MMP-9蛋白表达水平均减弱;白桦酯醇低、中、高剂量组移植瘤组织中MMP-2和MMP-9蛋白的表达率（％）分别为47.13±8.67和53.82±7.41、38.29±4.37和48.79±4.63、26.88±5.12和38.93±2.82,均低于对照组的56.78±6.42和69.35±5.03,且白桦酯醇3组之间的差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论 白桦酯醇对卵巢癌SKOV3细胞皮下移植瘤的生长有抑制作用,其机制可能与下调MMP-2和MMP-9蛋白的表达有关。     

奥希替尼联合贝伐珠单抗治疗伴EGFR T790M突变肺腺癌的疗效与机制研究

  目的  通过移植瘤动物实验探讨奥希替尼联合抗VEGF单克隆抗体靶向药物贝伐珠单抗的疗效及作用机制,为进一步临床试验提供理论依据。  方法  构建EGFR T790M突变的H1975人肺腺癌细胞移植瘤动物模型。实验分组:低剂量奥希替尼组、高剂量奥希替尼组、低剂量奥希替尼联合贝伐珠单抗组、高剂量奥希替尼联合贝伐珠单抗组。每组各5只小鼠,给药  方法  奥希替尼2.5 mg/kg/d或5 mg/kg/d,采用每天灌胃处理;贝伐珠单抗5 mg/kg,每周2次腹腔注射。接种后和给药期间绘制肿瘤生长曲线,给药2周后处死裸鼠,活检整个肿瘤。免疫组织化学SP法检测肿瘤HIF-1α、VEGF和微血管密度（microvessel density,MVD）。应用Western blot法检测EGFR及其下游AKT和ERK信号通路蛋白的表达。  结果  给药2周后,高剂量奥希替尼单药组较低剂量奥希替尼单药组肿瘤体积明显缩小,HIF-1α、VEGF表达率和MVD显著降低（P < 0.05）,p-EGFR、p-AKT和p-ERK表达减少（P < 0.05）。低剂量奥希替尼联合贝伐珠单抗组肿瘤体积明显小于低剂量奥希替尼单药组（P < 0.05）,上述因子均明显降低（P < 0.05）。低剂量奥希替尼联合组与高剂量奥希替尼单药组比较,肿瘤体积差异无统计学意义（P=0.178）,p-EGFR、p-AKT、p-ERK表达差异无统计学意义（P＞0.05）。高剂量奥希替尼联合组与高剂量奥希替尼单药组体积差异无统计学意义（P=0.642）。两个联合组之间,体积差异均无统计学意义（P=0.072）,上述因子表达差异均无统计学意义（P＞0.05）。  结论  贝伐珠单抗能够显著增加奥希替尼对伴EGFR T790M突变的肺腺癌移植瘤的杀伤能力。贝伐珠单抗与奥希替尼协同作用是通过降低肿瘤中VEGF表达,改善肿瘤微环境,增强抑制EGFR下游信号通路激活而实现的。      

人参皂苷Rb2体内抑制破骨细胞的作用及其机制研究

目的探究人参皂苷Rb2在体内调控破骨细胞的作用及机制。方法通过去势建立小鼠骨质疏松模型,分为4组(假手术组,去势组,低剂量组,高剂量组),腹腔注射不同浓度Rb2溶液[低剂量组5 mg/(kg·d),高剂量组20 mg/(kg·d),假手术组、去势组注射蒸馏水],常规饲养12周。使用Elisa试剂盒检测血清破骨细胞活性指标抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant factor acid phosphatase,TRAP)、I型胶原C端肽(C-terminal telopeptide-I,CTX-1)水平,股骨远端TRAP染色,从髓腔中提取和培养原代破骨细胞,TRAP染色并计数检测破骨细胞分化情况,Western-blot技术检测原代破骨细胞核因子κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)p65蛋白及自噬相关分子自噬标志轻链3(autophagy marker light chain 3,LC3)、哺乳动物雷帕霉素蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)、5’-磷酸腺苷活化蛋白激酶(adenosine 5’-monophosphateactivated protein kinase,AMPK)、磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(phosphorylated adenosine monophosphate activated protein kinase,pAMPK)蛋白表达水平。结果去势小鼠血清TRAP(64.10±1.18)pg/ml、CTX-1(70.43±1.71)ng/ml浓度最高,其余各组血清指标明显降低,高剂量组尤甚[分别为(44.62±2.02)pg/ml和(49.55±2.72)ng/ml](P<0.01)。去势组股骨远端TRAP染色阳性细胞密集,阳性区域最大,随着Rb2浓度增加,TRAP染色阳性区域面积减少(P<0.05)。去势组多核破骨细胞数量最多(152.00±18.55/孔),低剂量组(118.40±18.46/孔)和高剂量组(99.60±13.89/孔)。TRAP染色阳性细胞数量均有不同程度减少,低剂量组最少(84.00±15.23/孔),各组P<0.01。与去势组相比,各组NF-κB在细胞质增加(P<0.05),在细胞核减少(P<0.01);各组mTOR表达减少,AMPK、pAMPK表达增加,LC3 II/LC3 I比值增高(P<0.05)。结论人参皂苷Rb2在体内通过抑制NF-κB信号通路以及调控mTOR介导的自噬信号通路抑制破骨细胞。