慢性乙肝和慢性重型乙肝患者血单核细胞Toll 样受体2的变化

 【目的】 探讨慢性乙型肝炎和慢性重型乙型肝炎患者外周血单核细胞Toll样受体2（TLR2）的变化情况及其意义。【方法】 随机选取慢性乙型肝炎患者31例，设定为慢性乙型肝炎组，慢性重型乙型肝炎患者30例设定为慢性乙型肝炎组，健康志愿者30例为正常对照组，用流式细胞仪检测各组外周血单核细胞表面Toll样受体2的表达，ELISA法检测血清肿瘤坏死因子α（TNF-α）的水平，荧光定量PCR法检测血清HBV DNA并取对数作为复制水平的指标，总胆红素（TB）和凝血酶原时间（PT）的检测按照本院常规检测。三组均数间的比较采用单因素方差分析和Scheffe 检验进行两两间的比较；两组计量资料间的比较采用Mann-Whitney U秩和检验；两组数据间的相关性分析采用线性相关分析；P<0．05为有统计学意义。【结果】 正常对照组、慢性乙型肝炎组及慢性重型乙型肝炎组外周血单核细胞TLR2表达强度和外周血清TNF-α水平均分别为（21．5 ± 2．7）MFI、（39．0 ± 4．1）MFI、（47．7 ± 21．4）MFI和（54 ± 38）ng/L、（164 ± 90）ng/L、（360 ± 140）ng/L，依次逐渐升高，且各组间比较均具有显著性差异；外周血单核细胞TLR2表达水平与血清TNF-α表达水平呈现显著的正相关。慢性重型乙型肝炎组与慢性乙型肝炎组TB，PT和血清HBV DNA对数值分别为（470 ± 225）μmol/L与（101 ± 131）μmol/L， （35．1 ± 21．1）s与（15．4 ± 2．2）s和5．9 ± 2．0与5．4 ± 1．6；慢性重型乙型肝炎组与慢性乙型肝炎组比较，TB、PT显著升高而血清HBV DNA对数值无显著性差异；外周血单核细胞TLR2表达水平与TB及PT呈现显著的正相关，但与血清HBV DNA对数值间无显著的相关性。【结论】 TLR2可能与慢性乙型肝炎及慢性重型乙型肝炎的发病有关。     

乙型肝炎患者外周血淋巴细胞的变化

目的 分析HBV感染者外周血各亚群淋巴细胞的变化.方法 对112例乙肝患者采用荧光定量PCR技术和流式细胞术分别检测血中HBV-DNA及检测各组外周血T细胞哑群CD3+、CD4+、CD8+、CD3-/CD16+CD56+(NK细胞)、CD3-CD19+(B细胞)表达百分比.结果 与急性肝炎组比较,慢性肝炎、肝硬化组CD3、CD4、CD8均有下降(P<0.05),肝硬化组下降最明显.而肝硬化组B细胞百分比较慢性肝炎、急性肝炎组高(P<0.05),NK细胞百分比较慢性肝炎、急性肝炎降低(P<0.01).结论 HBV感染者体内存在T细胞亚群失衡和细胞免疫功能紊乱,外周血T细胞亚群随病情进展而减少,主要为CD3、CD4、CD8.     

慢性丙型肝炎患者外周血T细胞亚型及NK活性的研究

目的：检测慢性丙型肝炎患者外周血Ｔ细胞亚型和ＮＫ活性，并与正常人比较，以观察ＨＣＶ感染对患者细胞免疫功能的影响。方法：采用间接免疫荧光－流式细胞分析法检测外周血Ｔ细胞ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８表达，采用ＬＤＨ释放法测定ＮＫ活性。结果：慢性丙型肝炎患者外周血ＣＤ４、ＣＤ４／ＣＤ８比值、ＮＫ活性明显降低，与正常人比较差异有显著性（Ｐ值分别＜０．０１，＜０．０１和＜０．０５），而ＣＤ８升高（Ｐ值＜０．０５）；ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性组与ＨＣＶ－ＲＮＡ阴性组比较，ＣＤ４／ＣＤ８比值、ＮＫ活性进一步下降，差异有显著性（Ｐ值分别＜０．０５）。结论：慢性丙型肝炎患者存在细胞免疫功能紊乱，提高其细胞免疫功能可能有利于患者的愈后。     

慢性丙型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群的检测

应用单克隆抗体和ＡＰＡＡＰ法对３５例慢性丙型肝炎患者的外周血Ｔ淋巴细胞亚群的分布进行了检测。结果表明慢性丙肝患者ＯＫＴ＿３￣＋细胞与正常对照无显著差异，而ＯＫＴ＿４￣＋、ＯＫＴ＿８￣＋细胞及ＯＫＴ＿４／ＯＫＴ＿８比值均低于正常对照。结果还表明ＨＢｓＡｇ阴性的丙肝患者细胞和ＯＫＴ＿４／ＯＫＴ＿８比值明显低于正常对照，而ＯＫＴ＿８￣＋细胞差别不显著。合并ＨＢｓＡｇ阳性的丙肝患者ＯＫＴ＿４￣＋、ＯＫＴ＿８￣＋细胞均显著低于正常对照和慢性活动性乙型肝炎患者，而ＯＫＴ＿４／ＯＫＴ＿８比值的差异则不显著，ＯＫＴ＿８￣＋细胞还显著低于ＨＢｓＡｇ阴性的丙肝患者。提示慢性丙型肝炎患者外周血Ｔ淋巴细胞亚群分布存在明显的失衡现象；合并ＨＢｓＡｇ阳性对ＯＫＴ＿８￣＋细胞有明显影响。     

恶性肿瘤患者不同病期阶段外周血单核细胞CD14和TLR4的表达研究

目的探讨恶性肿瘤患者不同病期外周血单核细胞CD14和TLR4（Toll样受体4）的表达。方法采用流式细胞术检测50例健康体检者（对照组）及80例恶性肿瘤患者（按照影像学观察到肿瘤大小变化和相关肿瘤标志物的测定值分为稳定期及进展期）外周血单核细胞CD14和TLR4的表达。结果恶性肿瘤患者外周血单核细胞CD14稳定期及进展期的表达水平分别为（6.1600&#177;2.32217）％、（5.8629&#177;1.91896）％,与健康体检者（对照组）（5.5580&#177;1.42272）％比较,无统计学意义,恶性肿瘤患者稳定期TLR4表达水平为（10.4444&#177;3.16225）％与健康体检者（对照组）的（8.8780&#177;5.24612）％比较无统计学意义;进展期TLR4表达水平为（14.7286&#177;6.95213）％,明显高于健康体检者（对照组）（8.8780.4-5.24612）％（P〈0.05）和恶性肿瘤患者稳定期（10.4444&#177;3.16225）％（P〈0.05）。结论单核细胞表面的TLR4的表达水平在恶性肿瘤患者进展期较稳定期及对照组显著增高,而CD14的表达与病期无关,与对照组无差异。因此在CD14处于稳定状态下,TLR4的表达上调有可能预测肿瘤患者病情恶化。     

慢性乙型肝炎患者外周血Tc和Ts细胞分析

目的:探讨慢性乙型肝炎病毒感染后外周血Tc细胞和Ts细胞状态。方法:用双重染色免疫细胞学技术检测40例慢性乙型肝炎患者外周血Tc和Ts细胞,并与HbsAb(+)、HbcAb(+)健康人对比。结果:慢性乙型肝炎外周血Tc细胞水平低于对照组,Ts水平高于对照组,差异均有显著性。结论:慢性乙型肝炎患者外周血Tc和Ts细胞水平与HbsAb(+)、HbcAb(+)健康人不同,这两种细胞水平可能与乙型肝炎病毒感染后慢性化机制有关。     

慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞及肝组织中HBVcccDNA的相关性

目的：通过对慢性乙型肝炎患者肝组织及外周血单个核细胞（PBMC）中乙肝病毒共价闭合环状DNA（HBVcccDNA）的特异性定量检测,探讨两者的相关性和临床可行性。方法：取本院慢性乙型肝炎患者肝组织穿刺标本20份,在肝穿刺当天抽取患者外周抗凝血5mL,标本经相应处理后行HBVcccDNA检测。结果：20份慢性乙型肝炎患者肝组织标本中有18份HBVcccDNA检测为阳性,最大值为5．61×10^5copy／μg,最小值为3．26×10^3copy／μg,平均为1．79×10^4copy／μg。20份血浆中PBMC中HBVcccDNA检测均为阴性。结论：在慢性乙型肝炎患者肝纽织中可检测到HBVcccDNA,但未能在PBMC中检测到HBVcccDNA,因此PBMC不能支持HBV的复制。     

慢性乙型肝炎患者外周恤T淋巴细胞PD-1表达的研究

目的探讨CD4^＋和CD8^＋T淋巴细胞上PD-1的表达与慢性乙型肝炎患者的关系。方法采用流式细胞技术测定66例慢性乙型肝炎患者、17例HBV携带者外周血CD4＋．CD8^＋T淋巴细胞PD-1,并与19例健康人群对照。结果慢性乙型肝炎患者外周血CD4^＋T淋巴细胞PD-1的荧光强度较对照组明显增强,而慢性乙型肝炎患者CD8^＋T淋巴细胞和HBV携带者CD4^＋T淋巴细胞PD-1的表达量和荧光强度都高于对照组。CD4^＋和CD8^＋T淋巴细胞PD-1表达与血清中乙肝病毒载量无明显关系。慢性乙型肝炎轻度组患者CD4^＋和CD8^＋T淋巴细胞PD-1表达的荧光强度明显高于重度组,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论慢性乙型肝炎患者存在细胞免疫功能紊乱和淋巴细胞异常激活现象,CD4＋和CD8＋T淋巴细胞PD-1的表达与其病情发展和转归相关。     

慢性丙型肝炎患者肝细胞胰岛素受体的表达

目的研究胰岛素受体在慢性丙型肝炎患者肝细胞的表达情况。方法选取27名慢性丙型肝炎患者,依照病理诊断分为轻度(F0)、中度(F1-2)、重度(F3-4)3组进行临床生化检测,同时取肝组织提取RNA,反转录为cDNA,利用实时荧光定量PCR检测肝组织胰岛素受体(insulin receptor,INSR)mRNA水平,分析肝组织不同病理分级时INSR的表达及临床生化指标的变化。结果随着肝组织病理分级的加重,丙氨酸氨基转移酶(alanine transam inase,ALT)、天冬氨酸转移酶(aspartate transam inase,AST)及胆红素变化的差异无统计学意义,而空腹血糖、餐后2h血糖、糖化血红蛋白增高,胆碱酯酶(cholineste rase,CHE)及胰岛素受体(INSR)的表达下降。若以F0组INSR的表达量为100%,则F1-2组INSR的表达为78.8%,F3-4组为30%。结论胰岛素受体的表达随肝脏纤维化的增加而减少,Ⅱ型糖尿病发病率升高。     

慢性乙型肝炎患者代谢异常的表现形式分析

目的 探讨慢性乙型肝炎（CHB）患者代谢异常的表现形式。方法 分析110例CHB患者各代谢指标的异常率。结果 1）CHB中93.64%存在HOMA-β减退,60.00%者平均减退70.00%以上;2）59.09%患者HOMA-IR升高,平均1.82;3）35.45%有糖代谢异常;4）52.73%至少有一种血脂成份异常,以HDL-c异常常见;5）少部份患者合并脂肪肝、高血压病或高尿酸血症。结论 CHB患者普遍存在胰岛β细胞功能减退及不同程度的胰岛素抵抗,糖脂代谢异常及脂肪肝亦常见,少见高血压及尿酸代谢异常。     

慢性乙型肝炎患者外周血树突状细胞内HBcAg存在与肝组织学改变的关系

目的 在证实外周血单核细胞诱导的树突状细胞（dendriticcell，DC）中存在HBV的基础上，研究树突状细胞中存在HBcAg与肝组织学改变的关系。方法 通过对24例慢性乙型肝炎患者和8例健康对照者外周血单核细胞诱导树突状细胞，采用流式细胞仪检测树突状细胞共刺激分子（CD80／CD86／CD40／CD54）等表达情况，并结合患者肝组织病理改变评价结果进行比较。结果 慢性乙型肝炎者树突状细胞的CD40、CD86表达率明显低于正常对照组（P〈0．01），CD80明显高于正常对照组（P〈0．01），而慢性乙型肝炎患者外周血树突状细胞中HBcAg阳性组和阴性组之间无明显差异（P〉0．05）。肝组织病理改变中，阴性组的汇管区炎细胞浸润、肝组织炎症总积分均显著高于阳性组（P〈0．05）。结论 乙肝病毒可能对外周血DC表达CD80、CD86、CD40等功能性共刺激分子有明显影响，而与DC内HBV的存在与否无明显关系；DC内HBcAg存在者肝组织炎症程度相对较轻。     

慢性乙型肝炎患者肝脏局部免疫与外周血免疫关系研究

目的 通过检测慢性乙型肝炎患者外周血及肝组织内CD4 T细胞和CD8 T细胞的数量及功能,比较二者之间的联系.方法 (1)用流式细胞仪检测60例HBV感染者和20例正常人外周血中T细胞亚群的数量.(2)选取60例慢性肝炎患者的肝脏石蜡标本.免疫组化方法检测CD4 T、CD8 T淋巴细胞和树突状细胞,分析免疫细胞的类型、数目及分布情况,并作相应比较.结果 (1)HBV感染组外周血T细胞亚群测定值中,CD4 T细胞和CD T/CB8 T比值明显低于对照组(P<0.05);CD8 T细胞升高,明显高于对照组(P<0.05);(2)免疫组化结果显示CD4 T细胞多见于汇管区,CD4 T细胞数量少于CD8 T细胞数量.树突状细胞形态不规则,绝大部分DC分布于坏死灶和汇管区间质中与淋巴细胞伴行,肝细胞内一般不常见,坏死灶越多,淋巴细胞浸润越多的病例中DC细胞也越多.外周血CD4 T、CD8 T的数量与肝脏局部免疫细胞的分布数量不具有相关性(r=0.95;r=0.94).结论 评价慢性肝炎肝脏免疫微环境状况应当综合评价免疫细胞的类型、亚型和功能状态及相互作用等多种因素,在分析、判断疾病进程和治疗上有一定意义.     

慢性乙型重型肝炎黄疸证患者外周血树突状细胞功能的研究

目的比较慢性乙型重型肝炎阳黄和阴黄证患者的外周血树突状细胞功能。方法体外培养阳黄与阴黄患者外周血树突状细胞,流式细胞仪检测其表面分子CD80、CD86、CD40、HLA-DR、CD1a的表达,MLR中刺激T细胞的增殖和分泌IL-12、IFNα的能力。结果阴黄患者的DC表面分子CD86的表达较阳黄组下降明显(P<0.05)。其他表面分子,如CD40、HLA-DR、CD1a和CD80,阳黄与阴黄二者无明显差异;经TNFα刺激后,上述各表面分子的表达均有上调,但阴黄组CD80、CD86、HLA-DR上调的幅度低于阳黄组(P<0.05)。阴黄患者组自身T淋巴细胞增殖的能力较阳黄患者组为低,但差异无统计学意义(P>0.05);经DC刺激后,阴黄患者的T淋巴细胞的增殖效果明显低于阳黄组(P<0.05)。阳黄和阴黄患者的IL-12和IFNα水平未经TNTα刺激前无明显差异,经TNTα刺激后两组的IL-12和IFNα水平较同组未经TNTα刺激者明显升高(P<0.05)。但阴黄组上升的幅度低于阳黄组(P<0.05)。结论慢性乙型重型肝炎阳黄和阴黄患者均存在明显外周血DC功能障碍,运用TNFα激活可提高DC的部分功能,阴黄患者的外周血DC细胞功能低下较阳黄患者更为明显。     

慢性乙型肝炎患者外周血单个河西堡细胞因子检测意义

目的 探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血单个核细胞(PBMC)培养上清液中细胞因子的临床意义.方法 采用免疫酶联免疫吸附技术双抗体夹心法检测30例慢性乙型肝炎患者和15例健康对照外周血单个核细胞IL-4、IL-10和IFN-r的水平.结果 CHB组PBMC培养上清分泌IL-4水平显著高于健康对照组(P相似文献   

TLR7在慢性丙型病毒性肝炎中的研究进展

Toll样受体7(TLR7)是表达在哺乳动物细胞内的跨膜信号转导受体,通过识别丙型肝炎病毒的单链RNA和多种小分子抗病毒化合物(如isatoribine、imiquimod、R-848等),经MyD88信号通路诱导Ⅰ型干扰素分泌和经非依赖干扰素机制发挥抗丙型肝炎病毒的效应。此外,TLR7的单核苷酸多态性还可能影响着慢性丙型肝炎的肝纤维化进程及干扰素抗丙型肝炎病毒的疗效。该文就TLR7的结构、分布、信号转导通路及其在慢性丙型肝炎病毒感染中发挥的作用作一综述。     

慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞亚群的测定分析

目的：探讨淋巴细胞亚群(T淋巴细胞、B淋巴细胞、NK细胞及T细胞亚群)在慢性乙型肝炎患者外周血中的变化意义。方法：通过流式细胞技术比较分析56例慢性乙型肝炎患者及30例键康正常人的外周血淋巴细胞亚群。结果：与正常对照组相比，慢性乙型肝炎患者组外周血CD3^ CD4^ 细胞降低，淋巴细胞CD4^ /CD8^ 比值下降。结论：慢性乙型肝炎患者细胞免疫功能紊乱，存在辅助性T细胞减少及辅助性T细胞和细胞毒性T细胞比例失衡等异常表现。     

慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞细胞因子检测意义

目的探讨慢性乙型肝炎（CHB）患者外周血单个核细胞（PBMC）培养上清液中细胞因子的临床意义。方法采用免疫酶联免疫吸附技术双抗体夹心法检测30例慢性乙型肝炎患者和15例健康对照外周血单个核细胞IL-4、IL-10和IFN-γ的水平。结果CHB组PBMC培养上清分泌IL-4水平显著高于健康对照组（P〈0．05）,而IFN-γ水平则显著低于健康对照组（P〈0．01）;HBVDNA水平与IL-4水平呈正相关,与IFN-γ水平呈负相关。结论CHB存在异常细胞免疫应答,Th1／Th2水平失衡可能与HBV持续感染有关。     

维生素D受体mRNA在白血病患者外周血细胞中的表达

目的 :检测白血病患者外周血维生素D受体 (VDR)mRNA表达 ,探讨 1,2 5 (OH) 2 D3 诱导分化的分子学机制。方法 :以RT_PCR技术检测白血病患者外周血细胞中VDRmRNA表达。结果 :白血病患者外周血细胞中均有VDRmRNA表达。结论 :白血病患者外周血细胞是维生素D3(VD3)作用的靶细胞 ,1,2 5 (OH) 2 D3 的作用可能是通过VD3 核受体 (VDR)而介导 ,提示VD3 能用于各种类型白血病的诱导分化治疗     

慢性乙型肝炎病人树突状细胞体外培养的实验研究

目的　从慢性乙型肝炎 (CHB)病人外周血单个核细胞 (PBMC)体外诱导培养树突状细胞 (DCs) ,探讨DCs在CHB特异性免疫耐受中的作用 ,为治疗运用提供实验物质基础。方法　 10例CHB病人外周血 15ml,分离PBMC后在体外培养条件下 ,加入粒单核巨噬细胞集落刺激因子 (GM CSF)和白介素 4 (IL 4 ) ,诱导DCs增殖分化。透射电镜分析DCs细胞形态学 ,流式细胞仪检测其表型分子的表达。结果　①经本实验体系从CHBPBMC可诱导DCs生成量为每 15ml(1.2～ 4 .7)× 10 6,透射电镜证实呈典型的DCs细胞形态学 ;②DCs表型分子呈极低表达 ,分别为CD83(8.0 2± 3.99) %、CD80 (8.77± 2 .0 6 ) %和MHC DR(14 .0 5± 2 .6 6 ) %。结论　CHB病人PBMC经GM CSF和IL 4混合细胞因子培养体系能诱导一定量DCs产生 ,表现为典型的树突状细胞形态 ,但表型分子表达低下 ,处于非成熟状态。