加味温胆汤对日本快速老化模型鼠肝细胞核活性基因的影响

目的：探讨加味温胆汤对日本快速老化模型鼠（SAM-P/10)肝细胞核活性基因的影响。方法：采用DAN酶I活性基因探针,酶解DNA。结果：经治疗后各组肝细胞核基因组经DAN酶消化的肝细胞核酶解片段缩小,接近R／1系水平。结论：加味温胆汤具有提高SAM－P／10鼠肝细胞核活性基因水平,并增加转录活性的作用。推测其机制与其改善了SAM－P／10 鼠肝细胞染色质构象,从而有利于DNA酶的消化作用有关。     

补肾益精中药对老龄小鼠活性基因及核糖核酸酶活性的影响

目的　研究补肾益精药物对老龄小鼠肝细胞核活性基因、血清核糖核酸酶及血 Ｓ Ｏ Ｄ 活性的影响,初步探讨补肾益精药物延缓衰老的分子机理。方法　用紫外分光光度法和电泳法检测活性基因,用紫外发光光度法检测 Ｒ Ｎ Ａ ａｓｅ 活性,用化学发光法检测 Ｓ Ｏ Ｄ活性。结果　青龄小鼠肝细胞核对活性基因探针 Ｄ Ｎ Ａ ａｓｅⅠ的消化敏感性、血 Ｓ Ｏ Ｄ 活性显著高于老龄对照组,血清 Ｒ Ｎ Ａ ａｓｅ 活性较老龄对照组显著降低;服用了补肾益精药物的老龄小鼠其肝细胞核对 Ｄ Ｎ Ａ ａｓｅⅠ消化敏感性和血 Ｓ Ｏ Ｄ 活性较老龄对照组均显著升高,血清 Ｒ Ｎ Ａ ａｓｅ 活性较老龄小鼠显著降低。结论　补肾益精药物益肾宝及左归饮使老龄小鼠肝细胞核中的活性基因数及血 Ｓ Ｏ Ｄ 活性升高,血清 Ｒ Ｎ Ａ ａｓｅ 活性降低,这可能是补肾益精药物延缓衰老的分子机理之一。     

大鼠肝,脑细胞清蛋白基因活性变化与增龄关系的研究

以脱氧核糖核酸酶Ⅰ(DNaseⅠ)的敏感性作为检测基因活性指标,滑蛋白cDNA片段为特异探针,以点杂交放射自显影为手段,比较大鼠肝脑组织在增龄过程中清蛋白基因的转录活性变化。结果表明脑组织清蛋白基因转录活性较低,且无明显增龄改变,肝组织清蛋白基因转录活性较高,有增龄改变;青年鼠的活性高于老年鼠和断乳鼠。     

老年大鼠肝低密度脂蛋白受体的变化

运用受体的放射配基结合分析，研究了不同月龄大鼠肝低密度脂蛋白（ＬＤＬ）受体功能。结果表明，４月龄、２０月龄、２６月龄大鼠肝ＬＤＬ受体最大结合容量（Ｒｍａｘ）分别为２７．６６±８．８２、１６．７９±１０．３２，１５．１７±９．５７（ｎｇ／ｍｇ匀浆蛋白），２０月龄、２６月龄组明显低于４月龄组（Ｐ＜０．０１）；受体解离常数（ＫＤ）分别为６．６２±１．９９、８．７７±２．３６、９．５９±２．０４（μｇ／ｍｌ匀浆），１２０月龄、２６月龄明显高于４月龄（Ｐ＜０．０５及０．０１）。提示老年大鼠肝ＬＤＬ受体结合位点数减少，亲和力下降，受体功能衰退。结果还表明，２０月龄、２６月龄大鼠血清ＴＣ和ＬＤＬ－Ｃ高于４月龄组（Ｐ＜０．０１）。老年大鼠肝ＬＤＬ受体功能衰退可能是其血清ＬＤＬ升高的重要原因。     

微卫星基因活性与大肠癌关系的研究进展

结直肠癌是常见的恶性肿瘤,近年来我国结直肠癌的发病率和死亡率均呈上升趋势,对其发病机制研究的重要性渐为人们认识涉及了多基因改变,微卫星不稳定性,细胞凋亡机能受限,端粒酶活化以及多条信号传导通路异常等.近期分子学研究发现,DNA修复基因突变引起DNA错配修复系统的功能降低或丧失,从而引起遗传物质不稳定,主要表现为微卫星的不稳定性(microsatellite instability,MSI),进而导致肿瘤的发生.研究表明,微卫星不稳定性可能是结直肠癌发生过程中一个新发现的重要机制.     

老年鼠外周血淋巴细胞凋亡及细胞免疫功能变化的研究

目的　探讨老年鼠外周血淋巴细胞 (PBL)的凋亡及与细胞免疫功能变化的关系 ,为深入研究随增龄而发生的免疫功能变化提供实验依据。方法　采用 TUNEL法及流式细胞仪观察老年鼠 PBL凋亡 ;用免疫组化法检测 bcl- 2 ,bcl- xl,bax基因表达的变化 ;以淋巴细胞转化实验和NK杀伤实验判断淋巴细胞功能 ;用免疫荧光法测定外周血淋巴细胞亚群。结果　老年鼠外周血淋巴细胞凋亡较青年鼠高 (P<0 .0 1 ) ,bcl- 2及 bcl- xl表达下降 ,而 bax的表达量明显增加。老年鼠淋巴细胞转化能力降低 ,CD8阳性细胞明显降低 ,脾脏细胞对 NK靶细胞杀伤能力降低。结论　老年鼠免疫功能随年龄增长而降低的原因可能与老年鼠的 PBL凋亡增加有关 ,调控衰老过程中 PBL凋亡可能是减缓老年人免疫力降低的有效途径。     

肝片吸虫GST真核表达载体构建及重组蛋白活性分析

目的构建肝片吸虫谷胱甘肽S-转移酶（GST）的真核表达载体,研究重组蛋白的免疫原性。方法以构建好的重组质粒pET30a-FhGST为模板,利用PCR技术扩增肝片吸虫谷胱甘肽S-转移酶基因（GST）,连接真核表达载体pEGFP-N1,构建重组质粒pEGFP-GST,转染Hela细胞,荧光显微镜下观察绿色荧光,Western blotting检测重组蛋白表达情况。结果重组质粒pEGFP-GST在Hela细胞中获得了表达,Western blotting结果表明真核表达质粒表达的重组蛋白能与自然感染肝片吸虫的山羊阳性血清发生特异性反应。结论肝片吸虫GST真核表达载体构建成功,真核表达产物可与自然感染的山羊阳性血清发生特异性反应,具有生物学活性,可做为分子疫苗的候选进行进一步的研究。     

活性依赖性神经保护蛋白同源基因在帕金森病模型鼠脑中的表达

帕金森病 (PD)是以震颤、强直、运动迟缓为特征的中枢神经系统疾病 ,主要病理变化为黑质致密部多巴胺能神经元变性。PD是中老年人常见的致残疾患 ,备受关注。近年发现将活性依赖性神经保护蛋白 (ADNP)加入神经细胞培养基中 ,可抵御某些毒性物质对神经细胞的伤害 ;在小鼠及大鼠体内实验亦显示有预防脑损伤作用〔1〕。我们于2 0 0 1年 6月至 2 0 0 2年 4月制备类似PD症状的大鼠模型 ,旨在探讨ADNP的表达量与PD病变有无关系。　　一、材料与方法　　 1.PD样脑损伤动物模型的建立 :7周龄雄性C5 7BL小鼠 10只 (本校动物中心提供 ) ,实验…     

老年冠心病凝血纤溶活性变化的研究

为探讨D-二聚体(D-dimer,DD)、纤维蛋白原(fibrinogen,Fg)、凝血酶原时间(prothrombin time,PT)、活化部分凝血激酶时间(activated partial thromboplastin time,APTT)在老年冠心病患者中的变化及相互关系,本研究测定了50例健康老年人和80例冠心病患者血浆中DD、Fg含量及PT、APTT,并进行比较分析.     

快速老化脑萎缩模型鼠脑细胞核蛋白质及染色质非组蛋白的变化

近年来,基因调控学说在衰老机制研究中日趋活跃,有关染色质非组蛋白（ＮＨＣＰ）的调控作用的研究也逐步深入。目前研究较多的是一组相对分子质量较低（小于３００００～４００００）的蛋白质,通常称为高迁移率（ＨＭＧ）染色质ＮＨＣＰ,与基因活性有关。有研究指出,衰老机体的肝脑细胞核ＤＮＡ模板活力降低,同时起基因调控作用的ＮＨＣＰ含量也明显减少。　　日本京都大学开发的快速老化模型小白鼠ＳＡＭ,被用于衰老机制和一些老化相关疾病的研究领域。我们于１９９６年３月至１９９７年６月观察了３、６、１２月龄的快速老化脑萎缩…     

IL-6基因-572 C/G多态性调控启动子的核提取物结合活性

目的 探讨-572C/G多态性位点对IL-6基因启动子与核提取物结合活性的影响,为预测疾病的发生发展提供参考.方法 将携带-572位点C等位基因型的IL-6基因启动子区(-1029～52bp)克隆到pGL3-Basic载体中,构建pGL3/-572C载体,采用定点突变试剂盒获得pGL3/-572G载体.将构建的IL-6...     

抗衰老蛋白klotho基因研究的新进展

衰老和死亡是任何物种的个体都难以避免的最终结局，但至今，我们对衰老发生分子机制的理解还相当有限。鉴于它的重要性，一直是生物学研究的热点。经过多年的研究，现在关于衰老的机制已经提出多种学说，每种学说都有其优势和不足。机体抗衰老基因的研究引起了大家的关注，如Sir2及其相关基因、klotho基因等都具有抗衰老效应，其中klotho基因是哺乳动物中研究得最为清楚的一个。     

衰老与基因关系的研究进展

衰老（senescence）又称老化,是指生物发育成熟后,机体随年龄的增长而发生机能减退,内环境稳定能力与应激能力下降,结构、组分逐步退行性变等不可逆转的现象。疾病或异常因素可引起病理性衰老,使衰老现象提早出现。     

治疗急性胰腺炎的大黄活性成分筛选及其靶基因生物学功能分析

目的 筛选治疗急性胰腺炎的大黄活性成分、活性成分靶基因,探讨靶基因的生物学功能及相关信号通路.方法 依托TCMSP数据库查询大黄所对应的靶基因,通过ADME参数(DL≥0.18,OB≥30％)筛选大黄可能的活性成分及其靶基因;然后,运用Genecards、OMIM、DRUGBANK等数据库获取急性胰腺炎的发病相关基因;...     

抗人肝癌MDscFV基因的表达及其免疫活性初步研究

将抗人肝癌单克隆抗体MD的重链可变区VH和轻链可变区VL基因重组，并使其表达。采用PT-PCR技术扩增VH及VL基因，通过重叠延伸拼接PCR在VH和VL基因间引入连接短肽，体外构建MDscFV基因，经过常规转化与筛选，诱导表达蛋白。MDscFV基因全长为732bp，VH354bp位于上游VL330bp位于下游。重组蛋白相对分子量36kDa。scFV保留了与亲本抗体MD相似的免疫活性。成功地构建了抗人单链抗体MDscFV，并获得了较高水平的功能性表达。     

幽门螺杆菌vacA基因分型与毒素活性关系的研究进展

vacA基因编码VacA毒素,VacA毒素是幽门螺杆菌产生的重要毒力因子,使细胞发生空泡变性,vacA基因信号序列和中区序列的不同可在各菌株间表现为五种不同的基因表现型,各型与毒素的活性关系密切,主要是由于不同细胞表面有针对毒素的各型特异性受体,VacA毒素显示了两个不同的受体结合点。VacA毒素只有同细胞粘附、被细胞内化才能产生空泡毒作用。     

老年大鼠肝细胞核与染色质对DNA酶Ⅰ消化敏感性的研究

生物衰老时,活性基因数减少,本实验以DNA_(ase)I为活性基因探针,以断奶大鼠为对照,研究老年大鼠肝细胞核与染色质对DNA_(ase)I消化的敏感性。发现老年大鼠肝细胞核与染色质对DNA_(ase)的消化敏感性明显低于断奶大鼠,经统计学处理差异显著,其P值分别<0.02。     

衰老相关基因研究进展

<正>衰老是指伴随着年龄增长而产生的一系列生理和解剖学方面的变化,也是人体对内环境和外环境适应能力逐渐减退的表现,是生物体在生命后期阶段出现的全身性、进行性、多因素共同作用的循序渐进的退化过程,是生命过程的必然规律〔1〕。衰老可表现为头发花白、皮肤褶皱、行动迟缓、相关激素分泌减少、记忆功能减退及多种脏器退行性变化等〔2〕。从整个衰老的分子特征来看,可以概括为:基因组不稳定、细胞衰老、端粒损     

下丘脑弓状核的衰老变化研究进展

下丘脑弓状核是下丘脑的重要核团之一，在衰老过程中发生了某些形态和结构的变化，这些变化同机体的衰老有一定的关系。