干细胞在汗腺再生中的应用研究进展

汗腺作为皮肤的重要附属器官之一,对体温调节和内环境稳态维持起重要作用。烧伤后汗腺遭到破坏,无法进行自我修复,最终遗留排汗障碍问题,而目前的临床治疗策略均无法有效恢复损伤汗腺的功能。因此亟待寻求能够促进汗腺再生并恢复其正常功能的治疗手段。干细胞来源广泛、免疫原性低、增殖能力强且具有多向分化潜能等优势,已成为再生医学领域的...     

人工诱导获得汗腺上皮样细胞的研究进展

皮肤作为人体最大的器官,在维持体温平衡方面具有重要作用。而这一作用的实现,主要依赖汗腺的分泌排泄功能。在严重烧伤的患者中,汗腺组织常常受到严重破坏,失去其原有的功能,导致体温失调。因此,修复、再生汗腺组织成为亟待解决的重点问题。国内外学者已将多种干细胞诱导分化为具有一定分泌排泄功能的汗腺上皮样细胞。但在目前研究中,仍存在转化时间较长、转化率较低等难题。通过回顾各类干细胞分化为汗腺上皮样细胞的诱导因素、实验方法及条件,可为汗腺再生修复的研究提供参考。     

汗腺发育及其调控研究进展

汗腺是上皮中较复杂的器官系统,有多种遗传性皮肤病伴有汗腺发育和功能异常,这表明汗腺的结构、汗腺形成、分化和增殖受基因调控。作为皮肤特定组织结构,汗腺在体温调节、体液平衡及物质代谢等方面具有重要作用。临床上大面积严重皮肤创烧伤后形成的瘢痕组织导致汗腺缺失,造成患者生活质量降低。因此,了解汗腺发育过程中的基因表达调控规律,对汗腺修复与再生具有重要的意义。     

皮肤附属器与创面愈合的关系

浅II度烧伤、浅表裂伤和皮肤磨削术等真皮乳头层损伤时,汗腺和毛囊-皮脂腺等皮肤附属器与表皮一起完全再生。较深的皮肤缺损如深II度烧伤、皮下剥离和皮肤溃疡等真皮深层组织丢失或破坏瘢痕愈合,皮肤附属器不能完全重建,无法分泌汗液和皮脂,造成体温调节、皮肤屏障和保护等功能受损,严重影响伤员的生活质量。近年来,有关皮肤附属器与创面愈合关系的研究以及诱导较深创面汗腺再生等研究已经成为热点。     

汗腺发生过程中细胞外基质成分的组织化学变化

由于汗腺组织的毁损,大面积深度烧伤后创面修复均无排汗功能.表皮干细胞是皮肤及其附属器发生、修复、改建的关键性源泉[1].因此,我们设想模拟汗腺的发生,通过调控表皮干细胞的分化方向而重建汗腺,可能是重建汗腺的唯一途径.细胞外基质作为一功能活性区域,与细胞的分化紧密相关[2].我们通过汗腺发生过程中几种主要细胞外基质变化规律的观察,试图探明汗腺发生与细胞外基质间的最佳相关性,为诱导表皮干细胞定向分化为汗腺细胞提供依据.     

深Ⅱ度烧伤创面汗腺干细胞标志物的变化规律

目的 了解深Ⅱ度烧伤创面愈合过程中汗腺上皮细胞增殖并向表皮细胞转化的规律,探讨其机制.方法 选择2004年1月-2007年12月,江苏省泰州市第四人民医院和山东大学第二医院收治的四肢与躯干烧伤患者28例.收集患者深Ⅱ度烧伤创面组织标本37块、浅Ⅱ度烧伤创面组织标本21块、正常皮肤标本10块.采用免疫组织化学双染色法,观察细胞角蛋白10(CK10)、CK14、CK19、bel-2和P63在深、浅Ⅱ度烧伤创面及正常皮肤汗腺分泌部上皮细胞中的表达情况.结果 正常皮肤汗腺分泌部上皮细胞中等强度表达CK19、CK14和CK10,基底层肌上皮细胞微弱表达P63和CK14,CK10表达阳性的终末分化细胞不表达bcl-2和P63.浅Ⅱ度烧伤创面修复过程中,其汗腺分泌部结构及上述蛋白表达未见异常.深Ⅱ度烧伤后7 d创面汗腺分泌部上皮细胞P63和bcl-2表达增强;伤后8～10 d创面基底细胞增殖、迁移和鳞状上皮化,形成bcl-2、P63、CK19和CK14表达强阳性的实心岛状上皮结构,并随肉芽组织向创面浅层迁移,经鳞状上皮增殖完成创面再上皮化.深Ⅱ度烧伤创面愈合后13～30 d,超常增殖的表皮基底层和基底上层细胞仍强烈表达bcl-2、CK14、CK19和P63. 结论干细胞和短暂扩充细胞逆分化过程导致上皮生长滞后和肉芽组织过度增殖,这种失衡现象可能是导致深Ⅱ度烧伤创面修复失控的重要机制之一.     

汗腺发生过程细胞外基质成分的免疫组织化学变化

由于汗腺组织的毁损 ,大面积深度烧伤后创面修复均无排汗功能。表皮干细胞是皮肤及其附属器发生、修复、改建的关键性源泉[1] 。因此 ,我们设想模拟汗腺的发生 ,通过调控表皮干细胞的分化方向而重建汗腺 ,可能是重建汗腺的唯一途径。细胞外基质作为一功能活性区域 ,与细胞的分化紧密相关[2 ] 。我们通过汗腺发生过程中几种主要细胞外基质变化规律的观察 ,试图探明汗腺发生与细胞外基质间的最佳相关性 ,为诱导表皮干细胞定向分化为汗腺细胞提供依据。一、材料和方法取胎龄 11～ 3 1周流产胎儿背部皮肤 2 0份 ,均为因车祸及其他外伤等原因导致…     

具有附属器官再生性能的人工皮肤替代物研究进展

缺损皮肤的再生与修复一直是临床亟待解决的难题之一。目前,虽然已有众多的皮肤替代物实现了临床应用,但是多数只能简单地实现表皮层和真皮层的结构性修复,修复的皮肤组织往往不含毛囊、汗腺、皮脂腺等皮肤附属器,难以重建皮肤的各项功能。本文从种子细胞、支架材料及其生物活性化三个方面,详细介绍了具有附属器官再生功能,特别是毛囊再生性能的皮肤替代物的研究进展,同时对该领域未来发展进行展望。     

深Ⅱ度烧伤创面治疗与愈合后的关系

深Ⅱ度烧伤为皮肤真皮深层的损伤,由于人体各部位真皮厚度不一,烧伤程度不一,故深Ⅱ度烧伤的临床变数较大。浅的接近浅Ⅱ度,深的则临界Ⅲ度。深Ⅱ度创面有真皮残留,网织层内存有毛囊、汗腺和皮脂腺,这些皮肤附件的上皮增殖可形成修复创面的上皮岛,虽然不需植皮创面也能自行愈合     

外泌汗腺汗液分泌离子通道调控机制研究进展

汗腺在人体皮肤中分布广泛, 其中外泌汗腺主要起散热排汗作用。汗液分泌由神经系统调控, 包括分泌部分泌与导管部重吸收2个过程, 涉及钙离子通道、钾离子通道、钠钾氯协同转运蛋白1、Best2蛋白、水通道蛋白5、囊性纤维化跨膜转导调节因子、上皮钠离子通道等多种离子通道和蛋白。该文将对涉及外泌汗腺汗液分泌的神经传导体系、各类离子通道等进行综述, 以期为损伤汗腺再生修复及干细胞转化研究提供一定的理论依据。     

汗腺样细胞经冻存复苏后再生汗腺功能的研究

目的:研究由人脐带间充质干细胞(UCMSCs)分化而来的汗腺样细胞在冻存与复苏后的生物学活性与促汗腺再生能力.方法:分离培养人UCMSCs 和人汗腺细胞,通过两种细胞共培养方式促进UCMSCs向汗腺细胞分化.分化后的干细胞经冻存、复苏处理后,局部移植于裸鼠烫伤脚掌,通过组织学观察和发汗试验观察汗腺组织再生修复情况.结果...     

复合汗腺的组织工程三维皮肤模型的构建

目的：运用组织工程化方法在体外建立复合汗腺的三维皮肤模型,阐明汗腺体外再生的可行性,并为初步建立含有汗腺的仿生化功能性组织工程皮肤奠定实验基础。方法：分离培养人表皮细胞、成纤维细胞和汗腺细胞,将表皮细胞与汗腺细胞按1：1的比例共培养,在培养体系中分别加入含表皮细胞生长因子（EGF）的微球,噻唑蓝（MTT）法观察细胞增殖情况,并与培养时直接加入EGF及不加EGF的对照组进行比较。将共培养的细胞接种于复合成纤维细胞的胶原基质并通过三维培养方式构建组织工程皮肤模型,在模型中加入复合EGF的微球释放载体促进汗腺再生和上皮化进程,HE染色和免疫组织化学方法检测所构建组织工程皮肤以及体外再生汗腺的结构,并与模型中直接加入EGF和未加EGF的对照组进行比较。结果：MTT检测结果显示,与两对照组相比较,通过共培养方式获得的表皮与汗腺细胞团在复合EGF微球作用下生长良好,有明显增殖作用;组织学观察结果显示所构建组织工程皮肤模型具有和正常皮肤相似的结构,并在真皮浅层形成了类似汗腺结构的细胞密集区域,存在大量汗腺特异性标志——角蛋白19（CK19）和癌胚抗原（CEA）阳性的细胞,这种现象在单纯EGF组仅有微弱表现,在空白对照组则无此现象出现。结论：构建具有汗腺结构的体外皮肤模型具有可行性,这为汗腺再生和功能性组织工程皮肤的研究开创了新的途径。     

表皮干细胞:实现创面由解剖修复到功能修复飞跃的新策略

创面愈合是一个既古老又新近的课题.随着社会的发展、科技的进步以及人民生活水平的日益提高,伤病员(尤其是大面积深度烧伤患者)已不仅仅满足于目前临床上常用消灭创面的治疗手段,而是要求修复后的创面在外观和功能等方面与正常皮肤相近,甚至含有各种皮肤附件(汗腺、毛囊、皮脂腺等).因此,在基本完成加速受创皮肤解剖修复之后,如何实现和恢复受创皮肤的功能已成为组织修复领域急需要解决的重大问题.皮肤组织工程学概念的引入,使得实现由继往的解剖修复到今后的功能修复飞跃的现代创面修复模式成为可能.近来研究表明,皮肤组织特异性干细胞-表皮干细胞是皮肤及其附属器发生、修复、改建的关键性源泉.故深入开展以表皮干细胞为核心的修复细胞的增殖、迁移过程,胞外基质的合成与分泌,生长因子与基质信号的传递等相关基础理论研究,对于促进皮肤功能和结构的生理性修复意义重大,已成为当前最为活跃的研究热点.     

国外烧伤皮肤代用品研究进展

采用早期切痂和有效的封闭创面是救治大面积烧伤病人生命和促进病人创面修复的重要手段之一.然而皮肤严重受损和缺乏合适的皮肤替代物,大大阻碍了烧伤创面的重建.显然,采用皮肤替代物来治疗烧伤其重要作用是不言而谕的.     

外胚叶发育不全基因信号途径与汗腺发育及修复的关系

目的 探讨外胚叶发育不全（ectodysplasin，EDA）基因信号途径与汗腺发育及修复的关系。方法通过对近期国内外相关文献的回顾，了解EDA基因的生物学特性、信号传导途径和促进汗腺发育的分子机制。结果大量实验证实EDA基因在胎儿发育早期参与了胚胎皮肤汗腺的形态和功能发生。结论EDA基因对皮肤汗腺的发生和结构的形成以及皮肤生理功能的维持具有重要意义，可为实现基因调控皮肤受损汗腺的完美修复找到一条新路。     

ERK与NF-κB信号通路在汗腺发育过程中作用的研究进展

大面积深度烧伤形成的瘢痕组织往往导致患者汗腺等皮肤附属器受损或丧失,从而影响患者的生存质量。因此,汗腺重建研究具有重大的临床意义。汗腺细胞的分化、增殖和结构的形成受多种细胞外基质成分、调控因子、作用蛋白和信号通路的调控,迄今为止人们仍未能在体外建立功能完全的汗腺组织。因此,如何从汗腺发生的角度来实现汗腺的重建成为当前创伤修复研究的重要课题。研究证实胞外信号调节激酶（ERK）信号通路与核转录因子-κB（NF-κB）信号通路在汗腺发生和发育过程中具有重要作用,现就以上两条通路的研究进展综述如下。     

瘢痕性斑秃患者毛发移植手术中的技术配合

头面部是人体的暴露及美容单位,在烧伤的发病率中仅次于手部烧伤,居第二位。头皮烧伤后,由于其毛囊、汗腺等皮肤附件密度较高,多数情况下创面可自行愈合。但另一方面,当头皮出现深度烧伤,或创面出现感染等情况时,其愈后常常会形成秃发,临床上称之     

采用基因芯片筛选与汗腺发育相关基因的初步研究

目的：探讨人胚胎皮肤汗腺在不同发育胎龄时的基因表达变化特征及其可能的生物学意义。方法：收集12周（H1）、16周（H2）、24周（H3）等3组不同胎龄胎儿皮肤,组织常规切片,显微镜下观察胚胎皮肤不同发育阶段的汗腺结构特征,提取不同胎龄的胚胎表皮组织总RNA,用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法和基因芯片技术检测胚胎皮肤汗腺在不同发育阶段的基因表达变化规律。结果：光镜下可见不同发育阶段的胎儿皮肤具有典型的组织学结构,胎龄24周时汗腺结构初步形成,数量稳定。在95%的可信区间内,H2与H1样本相比较（H2/H1）,差异表达基因有113个,其中下调的基因有45个,上调的基因有68个;H3与H2样本相比较（H3/H2）,差异表达基因有91个,其中下调的基因有66个,上调的基因有25个;差异表达的基因包括生长因子、细胞外基质分子和外胚层发育因子等,与汗腺发育进程密切相关。结论：将基因芯片运用于汗腺发生机制的研究,可以较全面地反映汗腺发育及成熟过程中基因表达变化规律,寻找特异性调控基因。通过对汗腺不同发育阶段的基因表达及功能研究,可以筛选关键步骤调控基因,指导实现分子基因水平调控皮肤创面修复和汗腺组织再生。     

提高人工复合皮修复能力的新策略

寻求理想的皮肤替代物，可为大面积烧伤患者提供足够的皮源以提高救治成功率；改善中、小面积烧（创）伤患者创面修复质量；提高患者的生存能力等，均具有重要的现实意义。随着细胞学、材料学、组织工程学的发展，各种生物敷料和皮肤替代物相继出现，为实现皮肤的修复与再生带来了巨大的希望。具有表皮和真皮结构的复合皮（composite skin，cs），是当前皮肤组织工程学的研究热点。目前虽然在CS的研究上取得了一些进展，并有成品上市，但其修复能力有限。本文就当前CS存在的一些不足和提高其修复能力的可能途径作一综述。     

脂肪来源干细胞修复创面的研究进展

创面修复是指机体遭受外力作用后，皮肤肌肉等组织出现离断或损伤后的修复过程，其中包括各种组织的再生和肉芽组织增生瘢痕形成等复杂的病理生理过程。一般的创面通过缝合可促进其愈合。而大面积烧伤、挤压伤、糖尿病患者，因创面损伤大，愈合能力差，往往形成不愈合创面。目前，临床多采用皮瓣或皮片移植来修复此类创面，但是存在着供皮区组织缺损及瘢痕形成等缺点。干细胞技术为皮肤组织的修复提供了新的思路。