重组白细胞介素12对小鼠哮喘气道炎症及NO、IgE水平的影响

目的 探讨重组小鼠白细胞介素12(rmIL-12)腹腔注射对哮喘小鼠气道炎症的抑制作用及对血浆NO、IgE水平的影响.方法 25只C57BL/6小鼠随机分为对照组、哮喘组和rmIL-12治疗组,后两组又各自分为末次激发后2d和8d两个亚组(每个亚组5只).以卵白蛋白(OVA)致敏和激发制作哮喘模型.治疗组在每次激发前30 min腹腔注射0.1mL含rmIL-12 0.14μg的PBS溶液.收集各组小鼠的支气管肺泡灌洗液(BALF)血浆,ELISA法检测血浆中NO和IgE水平,BALF沉淀行细胞总数和嗜酸性粒细胞(EOS)分类计数.HE染色观察肺组织病理变化.结果 ①哮喘组小鼠HE染色可见明显的嗜酸性粒细胞浸润,治疗2d和8d组的病理改变较哮喘组明显好转,与对照组无明显区别.②哮喘组小鼠的细胞总数、EOS百分比、NO和IgE水平较对照组均明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05).治疗2d亚组与相同时间段的哮喘组相比,细胞总数、EOS百分比、NO和IgE水平明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05).治疗8d亚组与哮喘组相比,NO和IgE差异有统计学意义(P＜0.05).③NO与IgE存在密切相关(r=0.839,P ＜0.01).结论 rmIL-12能够明显抑制哮喘小鼠的肺部炎症,同时降低NO和IgE的表达.     

哮喘患儿血清IL-12 、IL- 4与IgE水平变化的研究

目的 研究哮喘患儿白细胞介素12(IL—12)、白细胞介素4(IL—4)与免疫球蛋白E(IgE)水平的变化。方法 哮喘患儿30例，随机分为：发作组15例；缓解组：15例。健康对照组：20例。分别检测血清IL—12、IL—4(ELISA法)与IgE(MELA法)水平。结果 发作组血清IL—12水平明显低于缓解组，有显性差异(P＜0．05)，缓解组血清IL—12水平明显低于对照组，有显性差异(P＜0．01)；发作组血清IL—4水平明显高于缓解组，有显性差异(P＜0．05)，缓解组血清IL—4水平明显高于对照组，有显性差异(P＜0．01)；发作组血清IgE水平明显高于缓解组，有显性差异(P＜0．05)，缓解组血清IgE水平明显高于对照组，有显性差异(P＜0．01)。哮喘患儿血清IL—12水平与IgE呈负相关(P＜0．01)，哮喘患儿血清IL—4水平与IgE呈正相关(P＜0．01)。结论 哮喘患儿血清IL—12水平降低，IL—4和IgE水平升高，表明儿童哮喘是一种慢性气道炎症，在缓解期仍需抗炎治疗。     

肝癌细胞对树突状细胞白介素-12 表达的影响

目的 研究肝癌细胞(hepatocellular carcinoma cells,HCCs)微环境对树突状细胞(dendritic cells, DCs)的白介素-12(interleukin-12, IL-12)表达的影响,以进一步理解肿瘤的免疫逃逸机制. 方法 免疫磁珠法从人外周血分离CD14+单核细胞,加入rhGM-CSF和rhIL-4将单核细胞诱导分化为imDCs,利用rhTNF-α将imDCs诱导为mDCs,imDCs和mDCs与HCCs在Transwell中共培养48 h,ELISA法分别检测不同培养条件下上清液中IL-10、IL-12、转化生长因子β1(trasnformed growth factor-β1,TGF-β1)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达量. 结果 与HCCs共培养后,imDCs和mDCs的IL-12的表达量分别从(115.076±8.129)pg/ml和(258.346±3.609)pg/ml下调至(17.599±1.757)pg/ml和(6.787±1.123)pg/ml (P<0.05, P<0.01),而且培养上清中的TGF-β1浓度分别从(133.172±3.053)pg/ml和(174.446±3.972)pg/ml上调至(633.025±9.527)pg/ml和(486.806±10.515)pg/ml(P<0.05,P<0.01),VEGF的浓度分别从0 pg/ml上调至(830.892±7.564)pg/ml和(858.169±5.419)pg/ml(P<0.01). 结论 HCCs可抑制DCs的IL-12的表达,这可能是HCCs损伤DCs免疫调节功能的方式之一.     

BCG干预对哮喘小鼠气道炎症及调节性T细胞生成的影响

目的观察减毒卡介活菌疫苗(BCG)干预后哮喘小鼠气道炎症及调节性T细胞生成的变化,以探讨其可能的作用机制。方法24只昆明小鼠随机分为哮喘组、BCG干预组、正常对照组。昆明小鼠以卵白蛋白(OVA)致敏激发建立哮喘模型,于OVA致敏前及后5d分别以BCG皮内注射干预;正常对照组小鼠以生理盐水代替OVA致敏激发。所有小鼠在最后一次激发后24h收集支气管肺泡灌洗液(BALF)和外周血。计数BALF中的细胞总数及嗜酸性粒细胞(EOS)数。并用流式细胞仪分析外周血CD4 CD25 调节性T细胞(Treg)的百分比。开腹取脾,制备脾单细胞悬液并培养48h,收集上清液。Elisa法测定上清液中的IL-10含量。结果哮喘组小鼠BALF中的细胞总数及EOS计数较正常对照组显著增高(P<0.01),而BCG干预组其BALF中的细胞总数及EOS的计数较OVA致敏激发组降低(P<0.01);哮喘组外周血CD4 CD25 Treg百分比为(11.59±1.33)%,较正常对照组的(13.66±1.68)%显著下降(P<0.01);而BCG干预组CD4 CD25 Treg百分比为(14.4±2.75)%,较哮喘组明显上升(P<0.05)。BCG干预组脾细胞培养上清液中IL-10的水平(7.79±1.34pg/ml)较哮喘组(5.54±0.66pg/ml)显著升高(P<0.01)。结论BCG能明显抑制哮喘小鼠气道的炎症反应,其干预机制可能与促进Treg生成有关。     

耐受性树突状细胞对哮喘小鼠气道变应性炎症反应的抑制作用

目的: 用卵白蛋白(OVA)刺激的未成熟树突状细胞(immature dendritic cell, imDC)免疫小鼠,观察其对小鼠OVA激发的气道过敏性炎症反应的抑制作用,探讨耐受性树突状细胞疫苗诱导免疫耐受的可能机制,为临床防治哮喘提供新的思路.方法: 制备BALB/c小鼠髓性imDC.其余BALB/c小鼠分4组,10只/组:其中两组于第-7天分别注射无菌PBS(PBS组)、OVA刺激的imDC(imDC组),第三组于第13～20天注射地塞米松(地塞米松组),第四组不作任何处理(健康对照组);除健康对照组外,其余各组诱导哮喘反应:第0天和第9天分别注射OVA致敏,14～20天每日予OVA气雾攻击.第21天每组处理5只小鼠,检测肺部炎症细胞浸润及嗜酸性粒细胞比例、气道黏液分泌、脾细胞Th1/Th2型细胞因子表达及脾细胞中CD4 CD25 细胞比例;第49天,处理剩余动物,观察哮喘预后.结果: mDC注射组肺部炎症浸润较轻,脾细胞表达白细胞介素(IL)-13、4降低而γ-干扰素(IFN-γ)无显著影响,脾细胞中CD4 CD25 细胞比例较高,气道黏液分泌则少于PBS组,且预后良好. 结论: 过敏原特异性imDC疫苗注射可在一定程度上缓解哮喘小鼠气道的变应性炎症反应.     

哮喘患者血清IL-12、IL-13及IgE的测定及意义

目的 检测哮喘患者血清中的IL-12、IL-13和IgE水平,明确IL-12、IL-13和IgE相关性及与哮喘的关系.方法 采用ELISA法测定47例哮喘患者(其中急性发作期27例,缓解期20例)血清白细胞介素IL-12、ILL-13和IgE水平,并与体检正常25例健康人(对照组)进行对照;对哮喘发作期IL-12、IL-13与IgE水平行相关分析.结果 急性发作期患者血清IL-12水平显著低于缓解期和对照组(P＜0.05),而IL-13和IgE水平显著高于缓解期和对照组(P＜0.05).IL-12与IgE呈负相关(r=-0.429,P＜0.05),IL-13与IgE呈正相关(r=0.517,P＜0.05).结论 初步认为IL-12和IL-13参与支气管哮喘发病的整个过程;检测血清IL-12、IL-13及IgE水平可反映支气管哮喘的炎症状态及评价治疗效果.     

哮喘患者气道上皮TSLP表达加重气道炎症的研究

目的 研究支气管哮喘患者气道上皮中胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)的表达,探讨其对哮喘患者气道炎症的影响.方法 采用免疫荧光法测定哮喘患者(哮喘组)及健康人(对照组)各10例支气管镜刷检涂片中TSLP的表达活性,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肺泡灌洗液(BALF) 中TSLP含量及血浆中白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素5(IL-5)和白细胞介素13 (IL-13)的含量,流式细胞术检测外周血单个核细胞(PBMCs)中CD40、CD80、CD86的表达水平.结果 哮喘组血浆中IL-4、IL-5和IL-13的水平显著高于对照组(P＜0.05),且TSLP与其成正相关;与对照组相比,哮喘组气道上皮TSLP,PBMCs中CD40、CD80、CD86高表达(P均＜0.01);吸入舒利迭(50/250)治疗1个月后,气道上皮TSLP,PBMC中CD40、CD80、CD86的表达水平明显降低,血浆中TSLP、IL-4、IL-5和IL-13的含量也降低.结论 哮喘气道上皮中TSLP表达增高,TSLP通过上调CD40、CD80、CD86表达,激活树突状细胞(DC)诱导CD4+ T细胞向Th2分化发育,加重哮喘的气道炎症,通过降低TSLP表达可降低DC的活化,减少Th2细胞因子的分泌,从而减轻哮喘炎症反应,为哮喘提供新的治疗途径.     

小剂量氨茶碱对粉尘螨诱导的哮喘小鼠气道炎症及树突状细胞作用的研究

目的:研究氨茶碱对临床常见变应原粉尘螨致敏诱发的哮喘小鼠气道炎症及树突状细胞(DC)密度、分布的影响。方法:粉尘螨腹腔注射与雾化吸入诱发BALB/c小鼠哮喘发作,末次吸入24 h后采用免疫组织化学及计算机图像分析方法比较各组小鼠气道DC的分布及密度改变,并测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数、嗜酸性粒细胞(EOS)计数及IL-5(ELISA测定)浓度。结果:粉尘螨诱发后哮喘小鼠BALF中EOS计数(3.29±1.38)×1 06/L、IL-5水平(25±5)pg/ml均较正常组EOS计数(0.05±0.01)×106/L、IL-5水平(6±3)pg/ml显著升高(P<0.05、P<0.01),气道DC密度个数每平方毫米上皮面积(1542±28)个与正常组小鼠每平方毫米上皮面积(600±20)个比较,差异有显著性(P<0.01)。小鼠经小剂量氨茶碱处理后气道DC密度、BALF中EOS计数和IL-5水平与哮喘组比较,差异有显著性(P<0.05)。各组小鼠肺内DC分布未见明显变化。结论:小剂量氨茶碱抑制EOS性气道炎症,下调气道DC密度,未影响DC肺内分布。     

哮喘患儿血清IL-12、IL-4与IgE水平变化的研究

目的　研究哮喘患儿白细胞介素 12 (IL 12 )、白细胞介素 4 (IL 4 )与免疫球蛋白E(IgE)水平的变化。 方法哮喘患儿 30例 ,随机分为 :发作组 15例 ;缓解组 :15例。健康对照组 :2 0例。分别检测血清IL 12、IL 4 (ELISA法 )与IgE(MEIA法 )水平。结果　发作组血清IL 12水平明显低于     

支气管哮喘患者外周血IL-18mRNA及IgE的表达及其意义

目的探讨支气管哮喘（Bronchial asthma）外周血白细胞介素18（Interleukin 18,IL-18）及IgE的表达及其临床意义。方法采用荧光定量聚合酶链反应法测定24例支气管哮喘患者外周血及20例正常对照者外周血IL-18mRNA的定量表达,采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测患者及对照者血清中免疫球蛋白E（Immunoglobulin E,IgE）的水平,分析支气管哮喘患者IL-18mRNA的定量表达与IgE表达的相关性。结果支气管哮喘患者外周血IL-18mRNA及IgE表达明显高于健康对照者的表达（t=16．51,P〈0．001;t=18．15,P〈0．001）;支气管哮喘患者外周血IL-18mRNA的定量表达与IgE表达呈显著的正相关（r=0．41790,P=0．0421）。结论IL-18及IgE的过度表达可能参与了支气管哮喘的发病。     

调节性T细胞和树突状细胞的免疫耐受与哮喘的关系

调节性T细胞和树突状细胞作为机体免疫系统的重要组成部分,在维持免疫耐受中发挥了不可替代的作用。二者相互影响,共同维持免疫耐受。哮喘是机体对吸入抗原的持续应答,肺的免疫耐受被打破所致。调节性T细胞可抑制哮喘的发生和发展,恢复肺的免疫耐受。树突状细胞不仅是免疫反应的起始细胞,而且具有免疫调节作用,两种相互促进,同时又相互制约,研究调节性T细胞和树突状细胞、哮喘发生与发展的关系,对哮喘的防治有重要意义。     

硫酸脑苷酯对小鼠哮喘模型气道炎症及白细胞介素-10表达的影响

目的:观察硫酸脑苷酯对哮喘小鼠气道炎症及IL-10的影响,探讨其在哮喘治疗中可能的机制.方法:将26只6-8周龄的BALB/c雌性小鼠随机分成A、B、C组,A组为正常对照组(6只),B组为哮喘对照组(10只),C组为硫酸脑苷酯干预的哮喘组(10只).应用苏木精-伊红(HE)染色行肺组织病理学检查.实时荧光定量聚合酶链反...     

支气管哮喘患者白细胞介素12、免疫球蛋白E及内皮素1的水平测定及意义

支气管哮喘是临床常见的呼吸道疾病，是呼吸道慢性变态反应性炎症性疾病。气道慢性变态反应性由多种炎性细胞、炎性介质和细胞因子共同参与，检测哮喘患者自细胞介素（interleukin，IL）-12、免疫球蛋白E（immunoglobulin—E，Ig—E）及内皮素1（endothelin-1，ET-1）水平，以探讨三者在支气管哮喘不同病程中的作用。     

树突状细胞在哮喘中的作用及吸烟对其影响的研究进展

树突状细胞(DCs)是功能最强的抗原递呈细胞,在哮喘的发病机制中起着非常重要的作用。香烟烟雾可以调节DCs的免疫功能,进而影响哮喘的病理、生理过程。现综述DCs在哮喘中的作用及吸烟对其影响,深入研究吸烟对哮喘DCs功能的影响,必将为哮喘患者的防治提供新的方向和思路。     

树突状细胞与上下呼吸道炎性反应一致性研究进展

上下呼吸道炎性反应一致性近年来受到国内外学者的广泛关注,树突状细胞是目前已知能够激活初始型T细胞的专职抗原递呈细胞,研究表明树突状细胞诱导初始型T细胞向不同细胞亚型分化的作用与上下呼吸道炎症性疾病的发病机制密切相关,而对树突状细胞与上下呼吸道症发病关系的深入研究,将进一步加强对整个呼吸道炎性疾病的认识。     

哮喘患儿血清IL—12,IL—6及IgE水平变化的研究

目的：研究哮喘患儿发作期与缓解期血清ＩＬ－１２、ＩＬ－６与ＩｇＥ水平,方法：选择符合哮喘诊断标准发作期患儿２５例,缓解期患儿１１例,取其静脉血检测血清ＩＬ－１２、ＩＬ－６和ＩｇＥ水平,结果：发作期ＩＬ－１２水平明显降低,与缓解期比较差异有显著意义（Ｐ〈０．０５）。发作期ＩｇＥ水平明显升高,与缓解期比较差异也有显著意义（Ｐ〈０．０５）。ＩＬ－６水平在发作期升高,缓解期下降,但两者比较差异无显著意义（     

耐受性树突状细胞在移植免疫中的研究进展

树突状细胞(DC)是目前已知的体内功能最强大的专职抗原递呈细胞,能诱导免疫应答的产生,同时在诱导移植免疫耐受调节中也起着重要的生物学作用。目前,DC诱导移植免疫耐受的作用已成为研究热点,并提出耐受性DC的概念。现就耐受性DC的体内迁移过程、体外获得以及在分子机制等方面进行综合分析,为进一步理解和研究耐受性DC在移植免疫反应中的作用奠定基础。     

雷公藤多甙和IL-10对人DC内IL-12p40和DCCK1 mRNA转录的影响

目的 :研究雷公藤多甙和IL 10对DC内IL 12p40和DC CK1转录的影响。方法 :通过GM CSF、IL 4和TNFα体外培养体系 ,从人外周血单个核细胞中诱导DC ,IL 12p40和DC衍生的趋化因子 1(DC CK1)转录采用逆转录多聚酶链反应 (RT PCR)技术。结果 :通过GM CSF、IL 4和TNFα体外培养体系可以获得成熟功能性DC ,雷公藤多甙和IL 10能抑制DC内IL 12p40mRNA的转录 ,但对DC CK1mRNA的转录无明显影响。结论 :雷公藤多甙、IL 10可能通过抑制IL 12p40mR NA的转录而干扰DC的功能     

骨髓间充质干细胞移植对慢性哮喘小鼠气道炎症及气道重塑的影响

目的探讨同种异体骨髓间充质干细胞（BMSC）移植对慢性哮喘小鼠气道炎症和气道重塑的影响。方法 40只雌性BALB/c小鼠随机分为正常对照组、BMSC对照组、哮喘模型组和BMSC治疗组。从雄性BALB/c小鼠分离BMSC。用卵白蛋白（OVA）制备慢性哮喘模型。观察BMSC移植对慢性哮喘小鼠气道炎症和气道重塑的影响,并采用流式细胞术检测BMSC对脾组织CD4＋CD25＋调节性T细胞比例的影响。结果哮喘模型组支气管上皮黏膜脱落,上皮黏膜有杯状细胞增生,部分管腔内有黏液栓塞,气道、血管旁有大量炎性浸润,以及气道平滑肌细胞增生和肥大。正常对照组及BMSC对照组无气道炎症及气道重塑的表现,而BMSC治疗组气道炎症及气道重塑明显减轻。与BMSC对照组及正常对照组比较,哮喘模型组CD4＋CD25＋调节性T细胞占淋巴细胞的比例显著降低（P〈0.05）;与哮喘模型组比较,BMSC治疗组CD4＋CD25＋调节性T细胞占淋巴细胞的比例明显提高（P〈0.05）;BMSC治疗组与正常对照组及BMSC对照组无显著差异。结论 BMSC移植能明显减轻慢性哮喘小鼠气道炎症及气道重塑程度,并能上调外周CD4＋CD25＋调节性T细胞的比例。     

HBsAg 对脂多糖诱导树突状细胞分泌IL-6和IL-12的影响

目的 研究HBsAg 对脂多糖诱导树突状细胞（DCs）分泌IL-6 和IL-12 的影响。方法 采用重组人粒- 单核 集落刺激因子（rhGM-CSF）联合重组人白细胞介素4（rhIL-4）诱导单个核细胞得到未成熟树突状细胞（iDCs）,分别加入HBsAg1、2、5μg/ml,并设对照组,各组再加入脂多糖诱导为成熟DCs。采用流式细胞术鉴定各组iDCs 的表型（CD11c、HLA-DR）,ELISA 法检测脂多糖诱导后培养上清液中IL-6 和IL-12 的水平。结果 iDCs 的CD11c/ HLA-DR 双阳性率为（83.62±6.89）%,显著高于单纯培养组（20.57±11.19）%,差异有统计学意义（P＜0.05）。HBsAg 1、2、5μg/ml 组培养上清液中IL-6 分别为（609.36±127.06）、（566.01±173.46）、（295.03±76.08）pg/ml,低于对照组（1356.97±181.78）pg/ml（均P＜0.05）;HBsAg2、5滋g/ml 组IL-12 分别为（854.49±67.92）、（472.09±55.70）pg/ml,低于对照组（1248.78±112.09）pg/ml（均P＜0.05）;1滋g/ml 组IL-12（1103.53±134.15）pg/ml,与对照组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 低浓度HBsAg 可下调脂多糖诱导的DCs 细胞因子分泌。