用单克隆抗体研究和分析霍乱弧菌抗原

本文用ELISA以12株单克隆抗体(McAb)对55株EL-Tor霍乱弧菌和用遗传学方法突变的28株霍乱弧菌的菌体抗原进行了研究1同时与四种常规分型方法进行对比试验。结果用12株McAb可将55株EL-Tor霍乱弧菌分成11种抗原决定簇和18个McAb型,将遗传学方法的突变株分成9种抗原决定簇和10个McbA型。其中一株McAd 2B_1H_1F_3能识别所有55株EL-Tor弧菌和大部份突变株霍乱弧菌,表明有种的特异性;其余11株McAb与各型霍乱弧菌的抗原     

用单克隆抗体分析霍乱弧菌菌体抗原的初步研究

<正> 用单克隆抗体(McAb)对微生物的抗原性鉴定和分析研究中,国内外已有不少报道。谢正旸等用霍乱弧菌McAb对霍乱弧菌快速诊断及其对抗原的特异性及敏感性进行了研究。然而,用单克隆抗体分析霍乱弧菌抗原性的研究尚未见报道。因此为了对霍乱的防治诊断、病原学及流行病学提供依据,我们用霍乱弧菌McAb对霍乱弧菌的抗原性进行研究。本文是用12株McAb检测50株不同血清型的El Tor型霍乱弧菌的抗原性,并初步分析了它们抗原决定簇的差异。     

霍乱弧菌单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立(摘要)

用霍乱弧菌稻叶型35A3菌体抗原免疫的BALB/c小鼠脾细胞,与骨髓瘤细胞Sp2/0～Ag14融合,获得了841C71、841C72两个分泌抗霍乱弧菌菌体抗原单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞系。其产生的抗体与同名菌0抗原做ELISA、间接血凝及微量杀菌试验,测知培养上清抗体滴度为1:8～1:64,腹水抗体滴度为1:1280～1:5120,对小川型O抗原滴度     

用菌体抗原筛选霍乱弧菌单克隆抗体的ELISA

<正> 众所周知,ELISA常用作筛选和鉴定可溶性抗原单克隆抗体(McAb)的常规方法。但对颗粒性抗原的淋巴细胞杂交瘤产生的McAb,则缺少准确、敏感、微量、快速的筛选和鉴定的检测系统。Stocken(1979)Nachamkin(1981)曾将细菌等细胞性抗原贴附于微孔塑料板上进行固相免疫测定。我们在     

用单克隆抗体对西尼罗病毒的抗原分析(文摘)

西尼罗(West Nile)病毒是黄病毒属中经蚊传播的成员,广泛分布于非洲、亚洲及欧洲的部分地区,主要引起地方性和流行性人类感染。亚尼罗病毒体为单链RNA基因组,含有表面囊膜(E)、衣壳(C)及膜样(M)三种结构蛋白。E蛋白含有大多数涉及免疫反应的抗原决定族。     

人鼻咽癌相关抗原的单克隆抗体免疫荧光组织化学观察(摘要)

本文应用鼻咽癌(NPC)相关抗原的单克隆抗体(McAb),人胚组织(系引产胎儿)。成人正常组织及肿瘤组织(来自本校手术标本)。鼻咽癌组织及鼻咽粘膜慢性炎组织(来自本校和汕头地区医院活检标本均经病理诊断确诊)。兔抗鼠BALb/cIgG荧光抗体(北京生物制品研究所)。组织以Crystat切片,丙酮固定,间接免疫荧光法处理,Olympus荧光显微镜观察,细胞膜上出现黄绿色荧光者为阳性细胞。对照试验(NPC培养细胞、阳性血清、乙脑单抗、培养液)。     

人工合成HLA-B_(27)多肽抗原的单克隆抗体研究

本文报道用人工合成HLA-B_(27)抗原决定基的多肽为免疫原来制备McAb的研究.根据计算机对B_(27)分子一级结构的B细胞识别序列的分析结果,用固相法合成了B_(27)分子多态区抗原决定基上P_(62-24)与P_(69-84)两个肽段,分别与KLH和BSA载体偶联,免疫RALB/c小鼠.当按常规方法免疫动物进行5次融合,所得17株抗小肽McAb均可与载体分子有较强的交叉反应.当在融合前的末次加强免疫改为仅用不接载体的小肽来进行,三次融合就获得了9株不与载体分子发生交叉反应的特异性抗肽McAb,为今后鉴定出可和天然B_(27)分子起反应的McAb提供了基础.文中对这二种免疫方案还作了比较和讨论。     

霍乱弧菌单克隆抗体诊断应用的研究—Ⅰ.霍乱弧菌单克隆抗体的敏感性和特异性检测结果

将所获得的12株霍乱弧菌单克隆抗体杂交瘤细胞系所产生的单克隆抗体(McAb),用不同年代的霍乱弧菌(两种生物型)及常见的肠道菌(含不凝集弧菌),以试管凝集试验法测定它们的敏感性和特异性,并以霍乱弧菌多克隆抗体比较。结果表明,12株霍乱弧菌单克隆抗体,对各型霍乱弧菌(9株)均有不同程度的抗体效价(1:40～1280),其中四株单克隆抗体对各型霍乱弧菌的凝集效价比多克隆抗体的凝集效价高,所以较敏感;所有12株单克隆抗体,对不凝集弧菌等9种、株肠道菌的凝集效价,均<1:140,而多克隆抗体对这些肠道菌有不同程度交叉凝集(1:40～220)的却有2/4,证明这些单克隆抗体的特异性比多克隆抗体高,适合于诊断应用。     

用狂犬病毒糖蛋白单克隆抗体分析其抗原决定簇

本文通过聚丙烯酰胺凝胶电泳方法精制糖蛋白,用蛋白酶V_8消化的糖蛋白碎片经25%聚丙烯酰胺凝胶电泳进行分离,转移到硝酸纤维素薄膜上,用糖蛋白单抗进行免疫染色。通过WesternBlot分析技术,得到一个与单抗起阳性反应的多肽碎片(G—V—6),并分析该碎片的氮基酸序列。资料表明,糖蛋白的这个抗原决定簇位于残基130—141位置。结果提示,Western Blot分析技术在合成疫苗的发展中将是一个有用的工具     

霍乱弧菌单克隆抗体诊断应用的研究——Ⅱ.酶标霍乱弧菌单克隆抗体快速检测霍乱弧菌的实验研究

本文就所获得的12株霍乱弧菌单克隆抗体中有种特异性的三株(2B_1H_1C_6,2B_1H_1F_6及2B_1H_1F_3)单克隆抗体及抗霍乱弧菌多克隆抗体,作酶标抗体直接法和间接法,对霍乱弧菌模拟标本进行快速检测,探究在临床诊断应用中的价值。结果表明,酶标McAb较酶标多克隆抗体敏感,前者在10~4/ml菌时可以检出,后者要在10~4～10~6/ml菌时才能检出;同时表明酶标间接法比直法敏感,特异性实验结果显示酶标单克隆抗体对10株霍乱弧菌有很高的     

ABC-ELISA筛选抗LSP单克隆抗体(摘要)

亲和素,生物素复合剂-酶联免疫吸附试验(ABC-ELISA)是近年开展起来的免疫学新技术,用于单克隆抗体筛选具有灵敏度高、特异性强、稳定性好、操作简便、快速、经济等特点。本文ABC试剂由上海生物制品所提供,LSP参照Mcfarlane等方法由我室自行制备。LSP包被浓度为15μg/ml,每孔100μl,抗原包被后置4℃过夜,用PBS-T洗4次,加待测     

用单克隆抗体检出胰癌新标志-(YH206抗原)

本文用单克隆抗体检出胰癌相关抗原(YH 206)发现在胰癌有较高的阳性率。就其作为胰癌标志的实用进行了研究。用间接过氧化物酶法作免疫组织学检查,用ELISA分析抗原的化学性质、免疫印渍法等,用ELISA夹心法测定血液抗原。 结果发现组织学检查5例胰癌,其中4例阳性。在成人正常组织中胰腺及肾脏只有极弱的反应。胎儿组织中,包括胰腺为强阳性。还发现YH206抗原在癌症患者血清中以高分子糖     

天津地区抗霍乱弧菌单克隆抗体(McAb)细胞系的建立及其应用的研究

应用天津市防病中心保存的EL-Tor霍乱弧菌小川型和稻叶型菌体抗原,混合免疫BALB/c小鼠,小鼠免疫脾细胞与骨髓瘤细胞Sp 2/0-Ag 14融合,采用ELISA法筛选抗霍乱弧菌McAb阳性孔,细胞融合率为328/384(85.2％);经过三次克隆化后筛选出9株分泌抗霍乱弧菌菌体抗原的McAb杂交瘤细胞系。取其中两株细胞进行分析研究;培养上清抗体效价在     

抗旋毛形线虫单克隆抗体的制备和抗原定位研究(文摘)

作者用旋毛形线虫感染期幼虫免疫的BALB/c小鼠脾细胞,与Sp2/0骨髓瘤细胞进行杂交。融合率92.1％,抗体阳性率16.6％,通过克隆化已初步建立分泌抗幼虫可溶性抗原的单克隆抗体的杂交瘤细胞18株。采用间接过氧化物酶法,以证实能特异地识别此虫感染期幼虫抗原组分的3株单克隆抗体定位抗原,揭示相关抗原组分主要位于幼虫的角皮层、杆状体,其次为肠道。     

主要组织相容性抗原的单克隆抗体(续)

七、人类MHC HLA和β_2-微球蛋白的单克隆抗体 (一)概述 HLA复合物是已知人类中最富有多态性的一个系统。这种多态性的维持在保证种系存活上有重要功能。简言之,HLA-A,-B,-C抗原由人第6对染色体短臂上的基因编码,相当于小鼠的H-2K,D,L位点。这些人类组织相容性抗原可以通过血清学方法,用常规人同种抗血清测定。生化研究已揭示HLA-A、B、C抗原是与β2M非共价键结合的糖蛋白,分子量分别为44,000和12,000道尔顿。多态性决定簇在较大的44,000道尔顿链上,而较小的β2M链是由第15对染色体上的一个基因编码的,表现为不改变性。HLA抗原在所有正常细胞表面表达,也许除外红细胞、滋养层细胞和精细胞。     

用单克隆抗体分析日本脑炎病毒的抗原结构

采用对日本脑炎(JE)病毒中山-RFVL株有血凝抑制反应的26株单克隆抗体,分析了JE病毒的抗原结构。 这些抗体均能与JE病毒的E糖蛋白(V_3)反应。采用ELISA竞争法分析了其中21株IgG类抗体所识别的抗原决定簇的位置关系。分析结果表明,JE病毒至少有5个不同的抗原决定簇部位。此外,推测JE病毒种特异性部位与黄病毒属特异性部位是各自独立存在的。 上述抗体对中山-RFVL株的ELISA效价、HI效价及中和抗体效价之间没有明显的关系。     

用单克隆抗体测定血中卵巢肿瘤抗原NB/70K(文摘)

作者用4种不同抗卵巢肿瘤抗原NB/7oK的单克隆抗体(NBi2123。、NB129i3、NBi3s34和NB13831),用放射免疫测定法(RIA)检测人血中卵巢肿瘤抗原NB/70K的水平。以区别健康人、良性妇科疾病与恶性卵巢疾病。 方法未治疗的卵巢癌患者60例,健康对照组99例、良(32例)、恶性(44例)乳腺、肺(良性30例,恶性51例)和胃肠(良性29例,恶性49例)疾病患者的血清冷藏一70℃备用,恶性病经临床和病理检查所证实。标本加入单克隆抗体(McAb)37℃孵育15 min,然后加入I‘23标记的NB/70K,在37℃中继续孵育40 min。冷却后加入沉淀剂与兔抗鼠球蛋白,37℃孵育40 m…     

霍乱弧菌单克隆抗体诊断应用的研究——Ⅲ.单克隆抗体免疫荧光快速检测霍乱弧菌的实验研究

为了进一步研究所获得的霍乱弧菌单克隆抗体在诊断应用中的价值,将其中一株2B_1H_1C_6用FITC标记,进行免疫荧光直接法和间接法快速检测霍乱弧菌模拟标本,同时以标记多克隆抗体相比较。结果表明,单克隆抗体的间接荧光比多克隆抗体的间接荧光特异,前者仅对伤寒疾杆菌和痢疾杆菌有很微弱的非特异荧光(±),而后者对多数肠道菌有±～++的非特异荧光,在1000～10,000菌/ml时,两种抗体的免疫荧光均可检出,18份粪便模拟粪便的