芪丹通脉片对动脉粥样硬化大鼠单个核细胞中细胞间黏附分子1及血管细胞黏附分子1 mRNA表达的影响

目的黏附分子的表达与动脉粥样硬化的发生发展有关.观察芪丹通脉片对实验性动脉粥样硬化大鼠外周血单个核细胞中细胞间黏附分子1和血管细胞黏附分子1 mRNA表达的影响. 方法模型构建、样品采集与分析分别于2003-03/06,2003-06/09在解放军第四军医大学实验动物中心、西京医院检验科分生实验中心完成.将健康雄性SD大鼠72只随机分为6组模型组、空白对照组、阳性对照辛伐他汀组、芪丹通脉片低剂量组、芪丹通脉片中剂量组、芪丹通脉片高剂量组,每组12只.采用高脂饮食配合口服维生素D3建立大鼠动脉粥样硬化模型,各组动物灌胃给药.采用半定量反转录聚合酶链反应的方法检测各组动物外周血单个核细胞中细胞间黏附分子1和血管细胞黏附分子1 mRNA的表达,分析造模及各药物组细胞间黏附分子1和血管细胞黏附分子1 mRNA表达的变化.结果72只大鼠均纳入实验结果分析.细胞间黏附分子1和血管细胞黏附分子1基因的表达模型组比空白对照组明显增加(1.37±0.08,1.40±0.06,P=0.000);辛伐他汀组及各中药组均明显低于模型组(P=0.000),且芪丹通脉片高剂量组的作用明显优于芪丹通脉片低剂量组(0.40±0.06,0.40±0.05;0.61±0.07,0.67±0.05,P=0.003,0.007). 结论高脂饮食能使细胞间黏附分子1和血管细胞黏附分子1的表达明显增加,而芪丹通脉片各剂量组可以不同程度地下调血管壁内细胞间黏附分子1和血管细胞黏附分子1的表达.而且芪丹通脉片高剂量组的作用效果明显优于低剂量组.     

复方太子参片的药效学实验研究

目的对复方太子参片的主要药效学进行观察,为该药的临床应用提供药效学实验依据。方法通过二甲苯致小鼠耳廓肿胀实验,观察其抗炎作用;通过小鼠氨水引咳实验,观察其镇咳作用;通过大鼠毛细管祛痰实验,观察其祛痰作用;通过磷酸组胺致豚鼠哮喘实验,观察其平喘作用。结果复方太子参片能降低二甲苯导致的小鼠耳廓肿胀程度,具有明显的抗炎作用;能显著抑制25%氨水诱发的小鼠咳嗽;能明显增加大鼠痰量的排出;能有效抑制磷酸组胺诱发的豚鼠哮喘。结论复方太子参片具有抗炎、止咳、祛痰、平喘作用。     

芪丹通脉片对动脉粥样硬化大鼠单个核细胞中细胞间黏附分子1及血管细胞黏附分子1 mRNA表达的影响

目的：黏附分子的表达与动脉粥样硬化的发生发展有关。观察芪丹通脉片对实验性动脉粥样硬化大鼠外周血单个核细胞中细胞间黏附分子1和血管细胞黏附分子1 mRNA表达的影响。方法：模型构建、样品采集与分析分别于2003—03／06，2003—06／09在解放军第四军医大学实验动物中心、西京医院检验科分生实验中心完成。将健康雄性SD大鼠72只随机分为6组：模型组、空白对照组、阳性对照辛伐他汀组、芪丹通脉片低剂量组、芪丹通脉片中剂量组、芪丹通脉片高剂量组，每组12只。采用高脂饮食配合口服维生素耽建立大鼠动脉粥样硬化模型，各组动物灌胃给药。采用半定量反转录聚合酶链反应的方法检测各组动物外周血单个核细胞中细胞间黏附分子1和血管细胞黏附分子1 mRNA的表达，分析造模及各药物组细胞间黏附分子1和血管细胞黏附分子1 mRNA表达的变化。结果：72只大鼠均纳入实验结果分析。细胞间黏附分子1和血管细胞黏附分子1基因的表达：模型组比空白对照组明显增加（1．37&;#177;0．08，1．40&;#177;0．06,P=0．000）；辛伐他汀组及各中药组均明显低于模型组（P=0．000），且芪丹通脉片高剂量组的作用明显优于芪丹通脉片低剂量组（0．40&;#177;0．06，0．40&;#177;0．05；0．61&;#177;0．07，0．67&;#177;0．05。P=0．003．0．007）。结论：高脂饮食能使细胞间黏附分子1和血管细胞黏附分子1的表达明显增加，而芪丹通脉片各剂量组可以不同程度地下调血管壁内细胞间黏附分子1和血管细胞黏附分子1的表达。而且芪丹通脉片高剂量组的作用效果明显优于低剂量组。     

龙藤筋骨片的药效学实验研究

目的 对龙藤筋骨片的主要药效学进行观察,为该药的临床应用提供药效学实验依据.方法 采用蛋清致大鼠足肿胀实验,考察受试药对蛋清引起大鼠足肿胀的影响；采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀,考察受试药对小鼠耳廓肿胀的影响；采用小鼠扭体法实验,考察受试药对化学刺激冰醋酸引起疼痛的影响；采用小鼠热板法实验,考察受试药热刺激引起疼痛的影响.结果 龙藤筋骨片能明显对抗蛋清引起的炎症,具有明显的抗炎作用；能够降低二甲苯导致的小鼠耳廓肿胀程度；减少小鼠由于腹腔注射醋酸引起的扭体次数,并可提高小鼠因热引起疼痛的痛阈值,有一定的镇痛作用.结论 龙藤筋骨片具有活血化瘀、消肿止痛之功效.     

中药芪丹通脉片对心肌缺血/再灌注损伤大鼠的影响

目的:探讨中药芪丹通脉片对大鼠缺血/再灌注(I/R)损伤心肌的影响。方法:采用结扎左冠状动脉前降支方法制备大鼠心肌I/R模型。将36只健康雄性SD大鼠随机均分为假手术组、模型组、恬尔心组以及芪丹通脉片高、中、低剂量组(浸膏干粉剂量分别为3.24、1.08和0.36 g.kg-1.d-1)。动态Ⅱ导联心电图监测I/R期间各组大鼠心率及ST段变化值。实验结束后采全血,采用酶联免疫吸附法(EL ISA)检测血清白细胞介素-10(IL-10)的含量,并用透射电镜观察心肌组织超微结构变化。结果:芪丹通脉片高、中、低剂量组可明显减慢大鼠I/R期间增快的心率,降低升高的ST段;减少炎性细胞浸润,减轻心肌超微结构损伤;并可增加血清IL-10含量,其中高剂量组作用最强(P<0.05或P<0.01),且芪丹通脉片高剂量组与恬尔心组的作用差异无统计学意义。结论:中药芪丹通脉片可改善受损心肌超微结构及异常心电图,促进内源性IL-10大量释放,抑制炎症反应,从而发挥心肌保护作用。     

复方解热颗粒制剂的药效及急性毒性研究

目的观察复方解热验方水提浓缩物的解热及抗炎作用。方法采用大鼠皮下注射干酵母为发热模型,观察给复方解热颗粒后对大鼠体温的影响;小鼠耳涂抹巴豆油合剂建立炎症模型,观察受试用药对小鼠耳肿胀的影响。结果解热药6 g/kg于致热后1.5 h降低大鼠体温,降温作用持续2 h,3 g/kg组于药后2.5 h引起大鼠体温降低,1.5 g/kg组于致热后0.5 h即能降低发热大鼠体温,作用时间1 h。对巴豆油合剂致小鼠耳肿胀抑制率,2.5 g/kg剂量组为64%,5 g/kg剂量组为34%。结论复方解热颗粒制剂有明显的解热抗炎作用。     

降血压肽对人脐静脉内皮细胞增殖及内皮素表达的影响

背景:降血压肽是一类能够降低人体血压的多肽,可通过抑制人体血管紧张素Ⅱ的生成而达到降低血压的作用。目的:在细胞分子水平探讨降血压肽对人脐静脉内皮细胞生长及内皮素表达的影响,为进一步将降血压肽开发为降压保健食品提供实验依据。设计:重复测量设计。单位:华南理工大学生命科学与工程学院,深圳职业技术学院应用生物技术系。材料:实验于2004-09/2005-03在深圳职业技术学院应用生物技术研究所完成。降血压肽由深圳职业技术学院应用生物技术研究所制备,在一定条件下抑制血管紧张素转移酶活性一半时所需要的抑制剂浓度为15μmol/L。传至4代的人脐静脉内皮细胞用于实验,随机分为7组:空白对照组、降血压肽150mg/L组、降血压肽300mg/L组、降血压肽600mg/L组、卡托普利阳性对照组、去甲肾上腺素阴性对照组、降血压肽 去甲肾上腺素组。方法:①脐静脉内皮细胞按一般细胞培养方法进行,培养液为M199 体积分数为0.15的小牛血清 青霉素10000U/mL 链霉素100mg/L。细胞长满致融合状态后,按1∶2比例传代,传至第4代的细胞用于实验。②空白对照组含体积分数为0.15小牛血清的M199;降血压肽150,300,600mg/L组在此基础上加入降血压肽至终浓度分别为150,300,600mg/L;卡托普利阳性对照组在此基础上加入卡托普利至终浓度为10-5mol/L;去甲肾上腺素阴性对照组在此基础上加入去甲肾上腺素终浓度为100μg/L;降血压肽 去甲肾上腺素组在此基础上加入降血压肽至终浓度300mg/L,去甲肾上腺素至终浓度100μg/L。③采用细胞计数法测定各组细胞生长状况,放免法测定不同培养时间各组细胞培养液中内皮素含量,反转录聚合酶链式反应法测定内皮素mRNA的表达,免疫组化测定细胞内皮素蛋白的表达。主要观察指标:①降血压肽对内皮细胞增殖、分泌内皮素的影响。②降血压肽对内皮细胞内皮素mRNA、内皮素蛋白表达的影响。结果:①降血压肽对内皮细胞增殖、分泌内皮素影响:随着培养时间的延长,与空白对照组比较,卡托普利阳性对照组及降血压肽各剂量组均有抑制内皮细胞生长、降低培养液中内皮素含量的作用(P<0.01或0.05);去甲肾上腺素可促进内皮细胞的生长和分泌内皮素,但加入降血压肽后细胞密度和内皮素含量均接近空白对照组(P>0.05)。②降血压肽对内皮细胞内皮素mRNA、内皮素蛋白表达的影响:与空白对照组比较,阳性对照卡托普利组及降血压肽各剂量组均可下调内皮素mRNA和内皮素蛋白的表达(P<0.01或0.05);去甲肾上腺素可上调内皮素mRNA和内皮素蛋白的表达,加入降血压肽后各基因表达接近空白对照组(P>0.05)。结论:不同剂量的降血压肽对内皮细胞均有抑制生长作用,可降低细胞释放内皮素的含量,下调内皮素基因的表达,且能够有效对抗去甲肾上腺素的促脐静脉内皮细胞生长及分泌作用。     

银杏黄酮对骨骼肌抗疲劳能力的影响

目的:分析银杏黄酮对大鼠背斜方肌微动脉血液循环、腓肠肌收缩能力及小鼠运动能力的影响。方法:实验于2004-02在广西师范大学体育学院完成。银杏黄酮由桂林思特新技术公司天然植物制品厂生产,银杏黄酮含量24%,银杏内酯含量6%,符合国际标准。①大鼠背斜方肌微动脉血液循环的观察:选用SD大鼠40只,随机数字表法分为空白对照组、银杏黄酮2.0,3.0,4.0g/L浓度组,10只/组。各组大鼠均制备游离肌肉标本,游离面固定于特制灌流盒上,用林格氏液灌流,连续观察管径为15～20μm的横向微动脉30min,分别于观察处滴注0.1g/L的去甲肾上腺素障碍液50μL。当血管出现收缩时,银杏黄酮2.0,3.0,4.0g/L浓度组分别滴注对应的银杏黄酮溶液1mL,空白对照组则滴注等量的生理盐水。测量微动脉血管口径的变化以及血管流态的变化。②大鼠腓肠肌肌肉收缩的观察:所选动物的基本情况及分组与背斜方肌微动脉血液循环观察实验相同,共36只大鼠,9只/组。麻醉后于腓肠肌跟腱处结扎剪断,将悬浮电极尖端插入腓肠肌内,通过生理刺激器以1次/s、电压0.8V分别给予各组腓肠肌标本以连续刺激,至肌肉停止收缩时停止刺激,作为肌肉疲劳时间。然后银杏黄酮2.0,3.0,4.0g/L浓度组分别注射相应浓度的银杏黄酮溶液1mL,空白对照组注射等量生理盐水。5min后继续给予刺激,记录肌肉收缩的情况及肌肉疲劳后恢复正常状态的时间。③运动实验:选用健康雄性昆明种小白鼠60只,随机数字表法分为安静对照组、安静服药组、单纯训练组、服药训练组,15只/组。安静服药组、服药训练组每天早晚各灌胃给药1次,剂量为2.4mL/kg体质量;安静对照组、单纯训练组每天灌予等量的白开水。单纯训练组、服药训练组小鼠每天在规格为100cm×50cm×80cm的透明玻璃泳池内进行1次尾部负重游泳训练,30min/次,6d为1个周期,然后休息1d,共训练6周;安静对照组、安静服药组小鼠每天进行15min的无负重游泳适应性训练。各组小鼠第5周进行爬绳实验,测量静止耐力。第6周进行力竭性游泳实验。结果:背斜方肌微动脉血液循环的观察实验选用SD大鼠40只,腓肠肌肌肉收缩的观察实验选用SD大鼠36只,运动实验选用昆明种小白鼠60只,3个实验各自独立,所有动物均进入结果分析。①银杏黄酮对微动脉血管口径的影响:与空白对照组比较,而给药5min后,银杏黄酮各浓度组微动脉血管口径均明显增大(P<0.05或0.01)。②银杏黄酮对微动脉血管流态的影响:与空白对照组比较,银杏黄酮各浓度组微动脉血管流态3级评定、血流停止时间和血流恢复正常条数均有明显差异(P<0.05或0.01)。③银杏黄酮对腓肠肌肉收缩的影响:与空白对照组比较,银杏黄酮各浓度组肌肉疲劳时间无明显变化(P>0.05),但肌肉疲劳恢复时间均明显降低(P<0.05或0.01)。④各组小鼠爬绳及负重游泳能力的比较:安静服药组小鼠的爬绳静止时间明显长于安静对照组(P<0.05),服药训练组小鼠的负重游泳时间显著强于单纯训练组(P<0.01)。结论:银杏黄酮具有促进血液循环、提高新陈代谢速率和缩短肌肉疲劳的恢复等功效,在运动训练的协同作用下,能显著提高小鼠的运动能力,延缓疲劳的发生。     

活血化瘀类中药制剂对海马缺血损伤大鼠学习记忆的影响

目的:探讨活血化瘀类中药制剂芪丹通脉片对海马梗死模型大鼠学习记忆能力的保护作用。方法:①实验于2004-09/12在第四军医大学西京医院理疗科实验室完成。选用SD雄性健康成年清洁级大鼠48只。随机将大鼠分为6组:空白对照组,假手术组,模型组,芪丹通脉片高、中、低剂量组,每组8只。②除空白对照组和假手术组,其余各组大鼠均采用光化学法诱导大鼠双侧海马梗死模型。假手术组尾静脉注射等体积生理盐水后光纤插入照射。芪丹通脉片(主要成分为黄芪、丹参、桂枝、红花等)高、中、低剂量组分别于术后当日以3.24,1.08,0.36mg/kg的剂量,10mL/kg溶液灌胃7d,1次/d。模型组、假手术组用生理盐水替代等体积灌胃,余同中药治疗组。空白对照组正常饲养。③分别在大鼠术前,术后3,5,7d用Morris水迷宫评价缺血大鼠学习记忆能力,并观察大鼠脑组织病理结构改变。④计量结果差异比较采用单因素方差分析和重复测量数据的方差分析,LSD检验。结果:大鼠48只均进入结果分析。①芪丹通脉各剂量组大鼠脑组织病理结构损伤较模型组轻。②平均逃避潜伏期:术前各组大鼠差异不明显;术后3d,模型组及芪丹通脉各剂量组明显长于空白对照组和假手术组(P<0.05),证明造模成功,芪丹通脉各剂量组明显短于模型组(P<0.05)。术后5和7d,空白对照组和假手术组及芪丹通脉片各剂量组明显短于缺血组(P<0.05)。结论:芪丹通脉片能改善海马缺血大鼠学习记忆能力,对局部脑梗死有保护作用。     

益眠达片治疗失眠的药效学研究

目的观察益眠达片对小鼠的镇静催眠作用,观察小鼠对催眠及阈下催眠剂量戊巴比妥钠作用的影响,及益眠达片对小鼠自主活动的影响。方法实验小鼠随机分为:益眠达片高剂量组、中剂量组、低剂量组,安神补脑液组,艾司唑仑片组,空白对照组,按照实验要求给药,观察记录入睡潜伏期和睡眠持续时间,观察记录30min内翻正反射消失达1min以上的小鼠数以及末次给药30min后,2min内小鼠自发活动次数。结果益眠达片缩短戊巴比妥钠致小鼠入睡的潜伏时间,延长睡眠持续时间,增加阈下催眠剂量戊巴比妥钠小鼠入睡率;益眠达片可抑制小白鼠自发活动次数。结论益眠达片具有镇静催眠作用。     

ADMA损伤血管内皮后Apelin-13对大鼠血压的影响

目的探讨在非对称性二甲基精氨酸(ADMA)导致大鼠血管内皮损伤的病理条件下,血管活性肽apelin-13对大鼠离体血管产生的效应及对血压的影响。方法成年雄性SD大鼠20只,分为ADMA组和对照组。用微量渗透泵给予两组大鼠分别持续注射ADMA[10 mg/(kg.d)]和生理盐水,28天。基线水平测量大鼠血压。28天后复测血压并检测血清ADMA、一氧化氮(NO)的浓度。给予大鼠尾静脉注射apelin-13(10 nmol/kg),观察血压变化。使用透射电镜观察大鼠尾动脉血管内皮细胞超微结构。行离体尾动脉实验观察apelin-13(10-10～10-5 mol/L)对两组血管环的作用。结果 28天后,ADMA组大鼠血清ADMA浓度明显高于对照组,而NO浓度降低。ADMA组大鼠收缩压较对照组明显升高(154±5 mmHg比123±4 mmHg,P<0.01)。静脉注射apelin-13(10 nmol/kg)后,ADMA组大鼠血压升至159±3 mmHg(P<0.05),而对照组降至113±3 mmHg(P<0.05)。透射电镜下可观察到ADMA组大鼠血管内皮细胞出现变性甚至坏死。离体血管实验表明apelin-13使ADMA组血管收缩而诱发对照组血管环舒张,呈浓度依赖性。结论 ADMA可对血管内皮细胞造成严重损伤,并导致大鼠高血压。在这种病理状态下,apelin-13可促进血管收缩,进而加重大鼠高血压。     

通脉益智丹对血管性痴呆大鼠学习记忆的影响

目的:根据祖国医学和中西医结合理论,认识瘀阻脑窍、脑失所养是血管性痴呆主要病机。方法:拟定了以活血化瘀、养血补虚、醒脑开窍的通脉益智丹对血管痴呆大鼠进行实验研究。结果:实验研究发现,该方可明显缩短拟血管性痴呆大鼠在穿梭箱法大鼠回避性条件反射潜伏期,明显提高血管性痴呆大鼠回避阳性率,显著提高痴呆大鼠Y-迷宫正确次数。结论:提示通脉益智丹对血管性痴呆大鼠有良好的治疗作用。     

活血化瘀类中药制剂对海马缺血损伤大鼠学习记忆的影响

目的：探讨活血化瘀类中药制剂芪丹通脉片对海马梗死模型大鼠学习记忆能力的保护作用。 方法：①实验于2004—09／12在第四军医大学西京医院理疗科实验室完成。选用SD雄性健康成年清洁级大鼠48只。随机将大鼠分为6组：空白对照组，假手术组，模型组，芪丹通脉片高、中、低剂量组，每组8只。②除空白对照组和假手术组，其余各组大鼠均采用光化学法诱导大鼠双侧海马梗死模型。假手术组尾静脉注射等体积生理盐水后光纤插入照射。芪丹通脉片（主要成分为黄芪、丹参、桂枝、红花等）高、中、低剂量组分别于术后当13以3．24，1．08，0．36mg／kg的剂量，10mL／kg溶液灌胃7d，1次／d。模型组、假手术组用生理盐水替伐等体积灌胃，余同中药治疗组。空白对照组正常饲养。③分别在大鼠术前，术后3，5，7d用Morris水迷宫评价缺血大鼠学习记忆能力，并观察大鼠脑组织病理结构改变。④计量结果差异比较采用单因素方差分析和重复测量数据的方差分析，15D检验。 结果：大鼠48只均进入结果分析。①芪丹通脉各剂量组大鼠脑组织病理结构损伤较模型组轻。②平均逃避潜伏期：术前各组大鼠差异不明显；术后3d，模型组及芪丹通脉各剂量组明显长于空白对照组和假手术组（P〈0．05），证明造模成功，芪丹通脉各剂量组明显短于模型组（P〈0．05）。术后5和7d，空白对照组和假手术组及芪丹通脉片各剂量组明显短于缺血组（P〈0．05）。 结论：芪丹通脉片能改善海马缺血大鼠学习记忆能力，对局部脑梗死有保护作用。     

组织工程小血管支架应用于异种血管移植的可行性

背景:具有α半乳糖基末端的糖蛋白是引起超急性排斥反应的主要异种抗原.目的:观察脱细胞小血管支架与Wistar大鼠和日本大耳白兔两种种属实验动物血管壁内皮细胞和平滑肌细胞内α半乳糖基的分布特点,探讨经脱细胞处理后的小血管支架应用于异种血管移植的可行性.设计、时间及地点:观察对比实验,于2003-03/2004-12在中国医科大学解剖学教研室完成.材料:采集Wistar大鼠正常尾动脉30条,其中选择15条进行脱细胞处理得小血管支架(小血管支架组),剩余15条未进行脱细胞处理(尾动脉组);采集日本大耳白兔耳背面中央动脉,左右耳各1条,共取15条(中央动脉组).方法:采用亲和组织化学法,将16 mg/L植物凝集素加入组织片作DAB显色后,利用MetaMorth/C5050/BX41显微图像分析系统,检测α半乳糖基阳性反应产物.主要观察指标:光镜下血管壁细胞显色变化;α半乳糖基阳性反应产物的吸光度值.结果:中央动脉组α半乳糖基的表达主要集中于内皮细胞膜和细胞核;尾动脉组内皮细胞膜α半乳糖基表达呈极强阳性;小血管支架组呈弱阳性或阴性表达.3组血管细胞α半乳糖基表达的吸光度值中,尾动脉组内膜低于中央动脉组(P＜0.001);小血管支架组内膜低于中央动脉组、尾动脉组(P＜0.001);小血管支架组中膜低于中央动脉组、尾动脉组(P＜0.001).结论:①Wistar大鼠尾动脉内皮细胞膜异种抗原性比日本大耳白兔中央动脉的抗原性强.②Wistar大鼠脱细胞的尾动脉支架可作为异种组织工程血管材料应用于异种血管移植.     

复方白鲜皮乳防治脱发作用机理研究

目的研究复方白鲜皮乳防治脱发的作用及其相关机制。方法通过环磷酰胺诱导大鼠脱发模型实验、石蜡松香混合物脱发模型实验、醋酸诱导小鼠腹腔通透性实验,以及2,4-二硝基氟苯(DNFB)迟发性超敏反应动物模型实验,探讨复方白鲜皮乳防止脱发、促进毛发生长、对毛细血管通透性的影响以及免疫抑制等作用。结果复方白鲜皮乳各剂量组不能减少环磷酰胺诱导大鼠脱发,对正常小鼠毛囊数无明显影响;大、中剂量可增加环磷酰胺大鼠皮肤毛囊数,各剂量可显著降低醋酸诱导小鼠腹腔通透性增高的作用,减少DNFB增加小鼠耳肿胀的程度及DNFB小鼠的胸腺指数,与赋形剂组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论复方白鲜皮乳各剂量组不能阻止环磷酰胺诱导大鼠脱发,但对环磷酰胺损伤毛囊的作用有一定的对抗作用,对正常小鼠的毛发生长有一定促进作用,这些作用可能与该药具有一定的抗炎和免疫抑制作用有关。     

益气活血中药对缺血心肌降钙素基因相关肽免疫反应神经纤维的影响

目的:观察益气活血中药复方制剂芪丹通脉片对心肌缺血大鼠的保护作用是否与增加降钙素基因相关肽免疫反应阳性神经纤维数量有关。方法:①实验于2004-11/2005-05在解放军第四军医大学神经生物实验室完成。选用清洁级SD雄性大鼠60只。随机将大鼠分为6组:空白对照组、模型组、阳性对照组、芪丹通脉片低剂量组、芪丹通脉片中剂量组、芪丹通脉片高剂量组,每组10只。②灌胃前依据大鼠体质量计算芪丹通脉干粉(由黄芪、丹参、当归、红花、桂枝等组成)低、中、高剂量组及阳性对照组给药量[分别为芪丹通脉干粉0.36,1.08,3.24g/(kg·d),单硝酸异山梨酯片15mg/(kg·d)],用蒸馏水配置成等体积混悬液。按10mL/(kg·d)每天灌胃1次,连续15d,空白对照组与模型组灌胃等体积生理盐水,第15天各组最后一次灌胃30min后,先连续观察并记录一段Ⅱ导的正常心电图,然后模型组及给药组分别腹腔注射垂体后叶素20U/kg造成心肌缺血模型,空白对照组腹腔内注射等剂量生理盐水,造模后继续监测心电图变化。在200倍光镜下观察心肌组织形态学改变(苏木精-伊红染色)。③对心肌中降钙素基因相关肽神经纤维行免疫组化染色,每一标本随机取3张切片,每组10个标本观察30张切片,150个视野,以20倍镜下视野为单位,对随机取出的切片进行观察。将心肌中降钙素基因相关肽免疫反应阳性神经纤维的密度,按每20×光镜视野下阳性纤维数定为如下3个等级:Ⅰ级:0～5根阳性纤维;Ⅱ级:5～10根阳性纤维;Ⅲ级:10根以上或呈网状。④等级资料差异性比较采用秩和检验。结果:大鼠60只均进入结果分析。①模型组有明显心肌缺血病理改变。芪丹通脉片各剂量组心肌缺血病理改变均有不同程度改善。②大鼠腹腔注射垂体后叶素后心电图表现为心肌缺血变化。模型组降钙素基因相关肽免疫反应阳性神经纤维数量明显少于空白对照组(P<0.05),纤维明显变短变细。③芪丹通脉片低、中、高剂量组降钙素基因相关肽免疫反应阳性神经纤维数量明显高于模型组(P<0.05),且呈剂量依赖性。阳性对照组与芪丹通脉片中、高剂量组的降钙素基因相关肽免疫反应阳性神经纤维数量区别不大(P>0.05),但高于模型组(P<0.05)。结论:芪丹通脉片对缺血心肌的保护作用可能是通过促进降钙素基因相关肽合成来实现的,且该种作用随着芪丹通脉片剂量增高而增强。     

银杏黄酮对骨骼肌抗疲劳能力的影响

目的：分析银杏黄酮对大鼠背斜方肌微动脉血液循环、腓肠肌收缩能力及小鼠运动能力的影响。方法：实验于2004-02在广西师范大学体育学院完成。银杏黄酮由桂林思特新技术公司天然植物制品厂生产，银杏黄酮含量24％，银杏内酯含量6％，符合国际标准。①大鼠背斜方肌微动脉血液循环的观察：选用SD大鼠40只，随机数字表法分为空白对照组、银杏黄酮2．0．3．0，4．0g／L浓度组，10只／组。各组大鼠均制备游离肌肉标本，游离面固定于特制灌流盒上，用林格氏液灌流，连续观察管径为15-20μm的横向微动脉30min，分别于观察处滴注0．1g/L的去甲肾上腺素障碍液50μL。当血管出现收缩时，银杏黄酮2．0，3．0，4．0g／L浓度组分别滴注对应的银杏黄酮溶液1mL，空白对照组则滴注等量的生理盐水。测量微动脉血管口径的变化以及血管流态的变化。②大鼠腓肠肌肌肉收缩的观察：所选动物的基本情况及分组与背斜方肌微动脉血液循环观察实验相同，共36只大鼠，9只／组。麻醉后于腓肠肌跟腱处结扎剪断，将悬浮电极尖端插入腓肠肌内，通过生理刺激器以1次／s、电压0．8V分别给予各组腓肠肌标本以连续刺激，至肌肉停止收缩时停止刺激，作为肌肉疲劳时间。然后银杏黄酮2．0，3．0，4．0g／L浓度组分别注射相应浓度的银杏黄酮溶液1mL，空白对照组注射等量生理盐水。5min后继续给予刺激，记录肌肉收缩的情况及肌肉疲劳后恢复正常状态的时间。③运动实验：选用健康雄性昆明种小白鼠60只，随机数字表法分为安静对照组、安静服药组、单纯训练组、服药训练组．15只／组。安静服药组、服药训练组每天早晚各灌胃给药1次，剂量为2．4mL／kg体质量；安静对照组、单纯训练组每天灌予等量的白开水。单纯训练组、服药训练组小鼠每天在规格为100cm&;#215;50cm&;#215;80cm的透明玻璃泳池内进行1次尾部负重游泳训练，30min／次，6d为1个周期，然后休息1d，共训练6周；安静对照组、安静服药组小鼠每天进行15min的无负重游泳适应性训练。各组小鼠第5周进行爬绳实验，测量静止耐力。第6周进行力竭性游泳实验。结果：背斜方肌微动脉血液循环的观察实验选用SD大鼠40只，腓肠肌肌肉收缩的观察实验选用SD大鼠36只，运动实验选用昆明种小白鼠60只，3个实验各自独立，所有动物均进入结果分析。①银杏黄酮对微动脉血管口径的影响：与空白对照组比较，而给药5min后，银杏黄酮各浓度组微动脉血管口径均嘎显增大（P〈0．05或0．01）。②银杏黄酮对微动脉血管流态的影响：与空白对照组比较，银杏黄酮各浓度组微动脉血管流态3级评定、血流停止时间和血流恢复正常条数均有明显差异（P〈0．05或0.01）。③银杏黄酮对腓肠肌肉收缩的影响：与空白对照组比较，银杏黄酮各浓度组肌肉疲劳时间无明显变化（P〉0．05），但肌肉疲劳恢复时间均明显降低（P〈0．05或0．01）。④各组小鼠爬绳及负重游泳能力的比较：安静服药组小鼠的爬绳静止时间明显长于安静对照组（P〈0．05），服药训练组小鼠的负重游泳时间显著强于单纯训练组（P〈0．01）。结论：银杏黄酮具有促进血液循环、提高新陈代谢速率和缩短肌肉疲劳的恢复等功效，在运动训练的协同作用下，能显著提高小鼠的运动能力，延缓疲劳的发生。     

活血通脉片抑制心肌缺血及降低心肌耗氧量的药效学

目的：对活血通脉片的药效作用，从抑制心肌缺血及降低心肌耗氧量进行论证。方法：通过动物实验进行药效学研究。结果：（1）活血通脉片0．4g/kg口服可明显改善Pit致大鼠心电异常；（2）测得给药后心肌耗氧量明显下降，结论：活血通脉片对治疗冠心病，心绞痛有较好疗效。     

不同运动量对小鼠微循环及耐缺氧能力的影响

目的：研究不同运动量对小鼠微循环及耐缺氧能力的影响。方法：昆明种小鼠采用转笼法运动4周后，采用BI-2000图像分析系统测定小鼠耳廓微血管管径及血流速度, 采用小鼠急性脑缺血性缺氧实验、亚硝酸钠模型常压耐缺氧实验，观察并记录小鼠断头后张口呼吸时间及耐缺氧存活时间。结果：与空白对照组比较，高运动组小鼠耳廓微动脉、微静脉流速、微动脉管径均显著增加（P<0.05）；中运动组小鼠耳廓微动脉管径均显著增加（P<0.01）；低运动组小鼠耳廓微动流脉速径及微动脉管均显著增加（P<0.05）。高、中、低运动组小鼠断头后张口呼吸时间均显著延长（P<0.05）；高、低运动组和尼莫地平组小鼠亚硝酸钠模型常压耐缺氧时间均显著缩短（P<0.05）。结论：运动训练具有改善小鼠微循环，增强小鼠耐缺氧能力的作用且与运动量有一定的相关性。     

降血压肽对人脐静脉内皮细胞增殖及内皮素表达的影响

背景：降血压肽是一类能够降低人体血压的多肽，可通过抑制人体血管紧张素Ⅱ的生成而达到降低血压的作用。目的：在细胞分子水平探讨降血压肽对人脐静脉内皮细胞生长及内皮素表达的影响，为进一步将降血压肽开发为降压保健食品提供实验依据。设计：重复测量设计。单位：华南理工大学生命科学与工程学院，深圳职业技术学院应用生物技术系。材料：实验于2004-09／2005-03在深圳职业技术学院应用生物技术研究所完成。降血压肽由深圳职业技术学院应用生物技术研究所制备，在一定条件下抑制血管紧张素转移酶活性一半时所需要的抑制剂浓度为15μmol／L。传至4代的人脐静脉内皮细胞用于实验，随机分为7组：空白对照组、降血压肽150mg／L组、降血压肽300mg／L组、降血压肽600mg/L组、卡托普利阳性对照组、去甲肾上腺素阴性对照组、降血压肽＋去甲肾上腺素组。方法：①脐静脉内皮细胞按一般细胞培养方法进行，培养液为M199＋体积分数为0．15的小牛血清＋青霉素10000U／mL＋链霉素100mg／L。细胞长满致融合状态后，按1：2比例传代，传至第4代的细胞用于实验。②空白对照组含体积分数为0．15小牛血清的M199；降血压肽150，300，600ms／L组在此基础上加入降血压肽至终浓度分别为150，300，600mg／L；卡托普利阳性对照组在此基础上加入卡托普利至终浓度为10^-5mol／L；去甲肾上腺素阴性对照组在此基础上加入去甲肾上腺素终浓度为100μg／L；降血压肽＋去甲肾上腺素组在此基础上加入降血压肽至终浓度300mg／L，去甲肾上腺素至终浓度100μg／L。（3）采用细胞计数法测定各组细胞生长状况，放免法测定不同培养时间各组细胞培养液中内皮素含量，反转录聚合酶链式反应法测定内皮素mRNA的表达，免疫组化测定细胞内皮素蛋白的表达。’主要观察指标：①降血压肽对内皮细胞增殖、分泌内皮素的影响。②降血压肽对内皮细胞内皮素mRNA、内皮素蛋白表达的影响。结果：①降血压肽对内皮细胞增殖、分泌内皮素影响：随着培养时间的延长，与空白对照组比较，卡托普利阳性对照组及降血压肽各剂量组均有抑制内皮细胞生长、降低培养液中内皮素含量的作用（P〈0．01或0．05）；去甲肾上腺素可促进内皮细胞的生长和分泌内皮素，但加入降血压肽后细胞密度和内皮素含量均接近空白对照组（P〉0．05）。（函降血压肽对内皮细胞内皮素mRNA、内皮素蛋白表达的影响：与空白对照组比较，阳性对照卡托普利组及降血压肽各剂量组均可下调内皮素mBNA和内皮素蛋白的表达（P〈0.01或0．05）；去甲肾上腺素可上调内皮素mRNA和内皮素蛋白的表达，加入降血压肽后各基因表达接近空白对照组俨〉0．05）。结论：不同剂量的降血压肽对内皮细胞均有抑制生长作用，可降低细胞释放内皮素的含量，下调内皮素基因的表达，且能够有效对抗去甲肾上腺素的促脐静脉内皮细胞生长及分泌作用。