TLSFJM对Th1/Th2样细胞亚群比率的影响

目的 :探讨TLSFJM 对同种异体抗原活化的Th1/Th2样细胞亚群变化的影响。方法 :在混合淋巴细胞反应 (MLR)体系中加入TLSFJM 或IL 4 ,用细胞内免疫荧光染色结合流式细胞术分析TLSFJM 对Th1/Th2样细胞亚群比率的影响。结果 :在TLSFJM实验组中 ,活化淋巴母细胞分化为IFN γ 细胞的比率略有降低 (49.8%→ 4 3.1% ) ,IL 4 、IL 6 细胞的比率有明显降低 ,IL 4 细胞的比率由 75 .4 %降至 4 3.7% ,IL 6 细胞的比率由6 7.8%降至 5 2 .6 %。在未活化小淋巴细胞中 ,也观察到同样的趋势。结论 :TLSFJM 对Th1、Th2样细胞亚群都有抑制 ,但似乎主要作用于Th2样细胞亚群 ,从而使其在Th1/Th2样细胞的比例降低     

子痫前期患者外周血树突状细胞对Th1/Th17细胞分化的影响

目的 观察正常妊娠妇女和子痫前期患者外周血单个核细胞(PBMC)来源的树突状细胞(DC)对Th1、Th17细胞分化的影响.方法 实验组为子痫前期疾病患者32例;对照组为正常妊娠妇女20例.分离正常妊娠组和子痫前期组PBMC,经贴壁获得单核细胞,加GM-CSF,IL-4和LPS培养诱导为成熟DC,流式细胞术检测表面分子标志CD14,CD80,CD83,CD86的表达,ELISA检测培养上清液中IL-23的含量.磁珠分选出CD4+T淋巴细胞,与正常妊娠孕妇外周血单核细胞来源的树突状细胞(N-DC)共同培养,同时添加细胞因子IL-2,或与子痫前期患者外周血单核细胞来源的树突状细胞(P-DC)、IL-2共同培养;或与N-DC共同培养,同时添加细胞因子IL-1p、IL-6;或与P-DC共同培养,并添加细胞因子IL-1β、IL-6.以上各组培养到第6天用流式细胞术检测CD4+ IFN-γ+ Th1、CD4+ IL-17+ Th17细胞比例.结果 P-DC中CD83、CD80、CD86的表达高于N-DC,差异有统计学意义(P＜0.05).P-DC与不同的细胞因子共同作用,促使CD4+T细胞分化为Th1、Th17细胞的能力高于N-DC,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 子痫前期患者外周血DC表型和功能的改变可能与患者免疫失衡有一定关系.     

Th17细胞在小鼠巨细胞病毒感染急性期的作用研究

目的 整体水平观察Th17细胞在小鼠巨细胞病毒(MCMV)播散性感染急性期的作用.方法 建立MCMV播散性感染模型,病毒接种后第3、7、14和28天各处死3只小鼠;同时设模拟感染鼠作为对照.应用real-time PCR法检测MCMV感染鼠脏器MCMV DNA载量;HE染色观察MCMV感染后脾组织病理损伤变化;流式细胞术检测脾细胞中CD4+IL-17A+T细胞比率;ELISA法检测脾细胞培养上清中IL-17A蛋白浓度.结果 感染急性期唾液腺组织中MCMV DNA于感染后14 d最高;脾组织病理损伤也于感染后14 d最严重;与模拟感染对照鼠相比,MCMV感染鼠脾细胞中CD4+IL-17A+T细胞比率呈升高趋势(均P＜0.01),且于感染后14 d达峰值[(1.14±0.09)％ vs (0.19±0.04)％,t=17.551,P=0.000];病毒特异性IL-17A浓度也于感染后14 d达峰值[(81.98±12.37) pg/ml vs (44.96±8.44) pg/ml,t=4.281,P=0.006];脾细胞培养上清中病毒特异性IL-17A水平与唾液腺组织中MCMV DNA载量呈正相关(r=0.54,P＜0.05);脾组织病理损伤越重,脾细胞培养上清中IL-17A浓度越高.结论 Th17细胞主要通过IL-17A参与MCMV播散性感染急性期免疫应答,直接或间接的促进病毒复制或脾组织局部病理损伤,可能是MCMV持续性感染的重要原因之一.     

慢性乙肝患者树突状细胞对Th1/Th2分化的影响

探讨慢性乙肝患者树突状细胞(dendritic cells,DC)对CD4+Th细胞亚群分化的影响。分离慢性乙肝患者外周血单个核细胞(PBMC),以rhIL-4(50 ng/ml)、rhGM-CSF(10 ng/ml)和rhTNF-α(100 u/ml)诱导培养DC。以流式细胞仪检测DC表面CD1a、CD83、CD80、CD86、HLA-DR分子表达情况。MTT法检测DC刺激同种异体淋巴细胞增殖能力。免疫磁珠分离外周血CD4+T细胞亚群,PMA+Ionomycin刺激后胞内荧光染色,流式细胞仪检测辅助性T细胞(helper T cell,Th)内特征性细胞因子IFN-γ/IL-4以判断Th1/Th2分化。ELISA法检测DC或Th细胞培养上清中IL-6、IL-12、IFN-γ和IL-4的含量。结果:慢性乙肝患者的DC表达CD1a、CD83、CD80、CD86、HLA-DR分子水平明显低于正常人(P<0.01);培养至第7天,慢性乙肝患者DC分泌的IL-12水平低于正常人(P<0.01),而分泌的IL-6水平增高(P<0.05)。与正常人相比,慢性乙肝患者外周血中Th1细胞占CD4+T细胞的百分比较低(P<0.01),其Th细胞培养上清中IFN-γ的量也较低(P<0.01)。患者DC与同种异体的健康人Th细胞共培养,刺激Th1型细胞因子IFN-γ产生的能力低于正常人(P<0.01)。慢性乙肝患者体内DC功能的异常可能导致了外周血Th1细胞分化不足。     

IL-12对BALB/c小鼠Th17细胞的分化的影响

目的: 观察细胞因子IL-12对Th17细胞分化的影响.方法: 小鼠脾淋巴细胞经抗CD3单克隆抗体(mAb)和不同浓度的重组小鼠IL-12刺激, 3 d后使用ELISA方法观察培养物上清液中IL-17的产生情况.并使用细胞内细胞因子染色的方法, 通过流式细胞术观察CD3 mAb和重组小鼠IL-12刺激对Th1和Th17细胞分化的影响.结果: Th17细胞不分泌IFN-γ、 IL-5、 IL-10等细胞因子, 不表达Foxp3, 是一个独立的细胞亚群.不同浓度的重组小鼠IL-12可以诱导抗CD3 mAb 的T细胞分泌IFN-γ, 并向Th1细胞方向分化.同时, IL-12可以抑制活化的T细胞分泌IL-17, 抑制T细胞向Th17细胞分化.结论: IL-12可以抑制Th17细胞的分化.     

新生儿巨细胞病毒肺炎Th1/Th2细胞因子测定及意义

目的探讨新生儿巨细胞病毒肺炎血清细胞因子IL4、IFN-7、TNF—α水平及意义。方法选取25例确诊为新生儿巨细胞病毒肺炎．并将其分为丙种球蛋白治疗组和更昔洛韦治疗组，应用ELISA法检测治疗前和疗程结束后血清细胞因子IL-4、IFN-γ、TNF-α的浓度，另选取本院产科同期出生的足月正常新生儿15例为正常对照组，用相同的方法检测其血清中细胞因子IL-4、IFN-γ、TNF-α的浓度。结果相对于健康新生儿．CMV—IgM阳性患儿血清IFN-γ及TNF—α水平升高．差异有统计学意义（t值分别为2．65及3．16．P〈0．05）；而IL-4水平降低，差异有统计学意义（t=2．49．P〈0．05）。丙种球蛋白治疗组（IVIG）和更昔洛韦治疗组治疗前IFN-γ、IL-4、TNF—α水平比较，差异无显著性（t值分别为1．85、1．71及1．76．P〈0．05）；IVIG治疗组中．治疗前后比较．IFN-γ及TNF—α水平降低，差异有统计学意义（t值分别为3．98及5．16，P〈0．01）；而IL-4水平升高，差异有统计学意义（t=2．55，P〈0．05）。更昔洛韦治疗组中．治疗前后比较，IFN-γ及TNF—α水平变化不明显．差异无统计学意义（t值分别为1．75及1．16．P〉0．05）；而IL-4水平无明显降低．差异无统计学意义（t=1．89，P〉0．05）。结论巨细胞病毒肺炎新生儿Th1／Th2存在平衡失调，代表Thl细胞功能水平的细胞因子IFN-γ水平明显增高，呈现低水平的Th1相对优势，表明感染后．免疫平衡遭到破坏．细胞因子分泌失衡，造成机体的免疫炎症损伤，IVIG治疗可以纠正这-平衡失调，提示在新生儿巨细胞病毒肺炎除单-抗病原治疗外，应重视免疫调节治疗。     

Th17细胞与Th1、Treg细胞关系的研究进展

CD4~+T细胞在不同细胞因子环境中可分化为Th1、Th2、Treg、Th17四种亚群,在一定条件下,各Th细胞亚群之间可以互相转化,从而使机体的免疫效应和免疫抑制处于精细而复杂的平衡状态。Th17细胞与自身免疫性疾病和肿瘤的发生发展关系密切,研究Th17细胞与Th1细胞、Treg细胞之间的相互关系,对于预防和治疗自身免疫性疾病和肿瘤等临床难题意义重大。     

Galectin-9对CD4＋T细胞亚群Th1／Th2／Th17／Treg免疫平衡的调节作用

目的研究Galectin．9对CD4＋T细胞亚群Th1／Th2／Th17／Treg免疫平衡的调节作用,并进一步探讨可能的作用机制。方法获取野生型C57BIM6小鼠淋巴细胞,利用MACS分选CD4＋naiT细胞,并分别向Th1／Th2／Th17／Treg进行定向分化,培养5d。所有亚群细胞各分为3组：正常对照组、Galectin-9组和Galectin-9＋α-乳糖组。利用流式检测各组亚群细胞的比例,realtime-PCR检测亚群细胞各组转录因子的基因表达水平。结果与正常对照组和Galectin-9＋α乳糖组相比,Galectin．9组Th1细胞和Th17细胞比例下降,Th2无明显变化,Treg细胞表达增加;T-bet和RORγt的基因表达水平均下降,GATA-3无明显变化,Foxp3的基因水平则升高。结论Galectin-9能抑制Th1和Th17细胞的免疫应答反应,对Th2细胞无明显作用,同时能上调Treg细胞免疫应答。     

腹腔镜子宫肌瘤剔除术对Th1/Th2细胞平衡的影响

目的:为了探讨腹腔镜子宫肌瘤剔除术对Th1/Th2细胞平衡的影响。方法:择期子宫肌瘤患者4 0例,分别采用腹腔镜手术和常规开腹手术,测定术前、术后2、2 4、4 8小时Th1、Th2细胞数量及血清IL 18、IL 10水平。结果:两组术后2小时均出现Th1/Th2细胞平衡向Th2反应转换,Th1细胞、Th1/Th2比值、IL 18下降(腹腔镜组:P <0 0 5 ,P <0 0 1,P <0 0 5 ;开腹组:P <0 0 1,P <0 0 1,P <0 0 1) ,而Th2细胞、抗炎因子IL 10上升(腹腔镜组:P <0 0 1,P <0 0 1;开腹组:P <0 0 1,P <0 0 1)。但腹腔镜组术后2 4小时各项指标即恢复,而开腹组各项指标的变化与术后2小时类似,并持续至术后4 8小时。结论:腹腔镜子宫肌瘤剔除术对Th1/Th2细胞平衡影响小,恢复快,优于开腹手术。     

Th1和Th2细胞在体内的分化

近年来，人们对Th1/Th2细胞在体内的分化及其调控等方面有了许多新的认识。本文就Th1/Th2细胞在体人的分化来源、基因转录和信号调节、影响因素、表面标志及应用方面作一综述，这对进一步探讨免疫系统及其功能具有重要意义。     

Pregnancy-specific glycoprotein 1a activates dendritic cells to provide signals for Th17-, Th2-, and Treg-cell polarization

Because of their plasticity and central role in orchestrating immunity and tolerance, DCs can respond to pregnancy-specific signals, thus promoting the appropriate immune response in order to support pregnancy. Here, we show that pregnancy-specific glycoprotein (PSG1a), the major variant of PSG released into the circulation during pregnancy, targets DCs to differentiate into a subset with a unique phenotype and function. This semi-mature phenotype is able to secrete IL-6 and TGF-β. PSG1a also affected the maturation of DCs, preventing the up-regulation of some costimulatory molecules, and inducing the secretion of TGF-β or IL-10 and the expression of programmed death ligand 1 (PD-L1) in response to TLR-9 or CD40 ligation. In addition, PSG1a-treated DCs promoted the enrichment of Th2-type cytokines, IL-17-producing cells, and Treg cells from CD4(+) T cells from DO11.10 Tg mice. Moreover, in vivo expression of PSG1a promoted the expansion of Ag-specific CD4(+) CD25(+) Foxp3(+) Treg cells and IL-17-, IL-4-, IL-5-, and IL-10-secreting cells able to protect against Listeria monocytogenes infection. Taken together, our data indicate that DCs can be targeted by PSG1a to generate the signals necessary to mount an appropriate, well-balanced, and effective immune response able to protect against invading pathogens while at the same time being compatible with a successful pregnancy.     

Treg/Th17平衡在巨细胞病毒感染发病机制中的作用

目的:研究调节性T细胞(Treg/Th17)细胞失衡在巨细胞病毒感染(CMV)免疫调节机制中的作用。方法:将CMV感染患儿按诊断标准分为激活感染组与潜伏感染组,同时设立正常对照组,采用流式细胞术(FCM)分析各组外周血Treg、Th17的百分比,并计算Treg/Th17比值;同时采用ELISA和RT-PCR法检测Treg主要相关因子(IL-10、Foxp3)和Th17主要相关因子(TGF-β、IL-17、IL-6、IL-23及ROR-γt)表达水平。结果:与对照组比较,CMV感染后Treg细胞百分率降低,Th17细胞升高,致Treg/Th17比值下降(P<0.05);CMV感染后两组间比较,激活感染组Treg/Th17比值和Treg主要相关因子表达水平下降更明显,而Th17主要相关因子表达水平显著上调,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:Treg/Th17平衡参与了CMV感染发病免疫机制,并可能与病毒潜伏-激活状态相关。     

AIM2炎性体识别胞浆鼠巨细胞病毒DNA的实验研究

目的 观察AIM2( absent in melanoma 2)在感染早期识别胞浆小鼠巨细胞病毒(MCMV) DNA的变化状况.方法 建立MCMV全身播散型感染模型,接种MCMV Smith株后第1、3、5和7天各处死3只小鼠;同时设模拟感染小鼠作为正常对照.Western blot检测脾脏巨噬细胞中AIM2、衔接子凋亡相关点样蛋白(ASC)和caspase-1蛋白的表达状况;同时应用ELISA法检测血清中IL-1β和IL-18的水平;空斑法测定感染小鼠唾液腺感染性病毒滴度.结果 MCMV感染后第3、5、7天,小鼠唾液腺组织中感染性病毒滴度逐渐增加;MCMV感染鼠脾脏巨噬细胞中AIM2、ASC和caspase-1蛋白的表达呈现一致的变化,与模拟感染对照鼠比较,AIM2、ASC和caspase-1蛋白相对吸光值在感染后第1天开始升高(P＞0.05),第3天明显升高并达峰值[分别为(1.121±0.243) vs(0.240±0.046),(1.318±0.333) vs (0.248±0.090),(1.085±0.243) vs (0.247±0.064); P＜0.01],其后接近正常;MCMV感染鼠血清IL-1β和IL-18水平在感染后第3天也明显高于模拟感染对照鼠[分别为(112.72±5.20) pg/ml vs (47.86±4.35) pg/ml,(42.74±4.23) pg/ml vs( 22.60±2.82)pg/ml;P＜0.01],其后均逐渐下降接近正常.结论 MCMC感染早期巨噬细胞通过AIM2炎性体识别胞浆MCMV DNA,可能成为CMV感染及感染后所引起的疾病的治疗靶点.     

NK cells modulate the lung dendritic cell‐mediated Th1/Th17 immunity during intracellular bacterial infection

The impact of the interaction between NK cells and lung dendritic cells (LDCs) on the outcome of respiratory infections is poorly understood. In this study, we investigated the effect and mechanism of NK cells on the function of LDCs during intracellular bacterial lung infection of Chlamydia muridarum in mice. We found that the naive mice receiving LDCs from C. muridarum‐infected NK‐cell‐depleted mice (NK‐LDCs) showed more serious body weight loss, bacterial burden, and pathology upon chlamydial challenge when compared with the recipients of LDCs from infected sham‐treated mice (NK+LDCs). Cytokine analysis of the local tissues of the former compared with the latter exhibited lower levels of Th1 (IFN‐γ) and Th17 (IL‐17), but higher levels of Th2 (IL‐4), cytokines. Consistently, NK‐LDCs were less efficient in directing C. muridarum‐specific Th1 and Th17 responses than NK+LDCs when cocultured with CD4⁺ T cells. In NK cell/LDC coculture experiments, the blockade of NKG2D receptor reduced the production of IL‐12p70, IL‐6, and IL‐23 by LDCs. The neutralization of IFN‐γ in the culture decreased the production of IL‐12p70 by LDCs, whereas the blockade of TNF‐α resulted in diminished IL‐6 production. Our findings demonstrate that NK cells modulate LDC function to elicit Th1/Th17 immunity during intracellular bacterial infection.     

细粒棘球蚴感染对哮喘大鼠血清白介素-17水平及Th1/Th2平衡的影响

目的建立细粒棘球蚴感染并发过敏性哮喘实验动物模型及探讨细粒棘球蚴感染对过敏性哮喘的作用。方法 24只健康Wistar大鼠,随机分为3组,A组为正常对照组,B组为单纯哮喘组,C组为细粒棘球蚴感染并发哮喘组。C组大鼠经腹腔注射感染细粒棘球蚴,70 d后,以卵白蛋白(OVA)分别对B组、C组大鼠进行致敏及激发,建立过敏性哮喘模型。取大鼠肺组织作病理切片,观察大鼠肺组织的炎症变化,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠血清白介素-17(IL-17)、白介素-4(IL-4)及干扰素-γ(IFN-γ)的水平。结果与B组比较,C组大鼠血清IL-17和IL-4的水平明显下降(P<0.05),而血清IFN-γ的水平明显上升(P<0.05)。各组大鼠血清IL-4与IFN-γ水平呈密切负相关(r=-0.915),IL-4和IFN-γ水平与IL-17呈负相关关系(r=-0.406,-0.603),P<0.05。结论细粒棘球蚴感染对过敏性哮喘的发生有抑制作用。     

Reciprocal generation of Th1/Th17 and T(reg) cells by B1 and B2 B cells

Regulatory T (T(reg)) cells are indispensable for maintaining peripheral tolerance, whereas T helper (Th)1 and Th17 cells induce inflammation and tissue destruction. Using Foxp3-GFP knock-in mice, we report a novel regulatory role for B cell subsets in influencing the differentiation of T(reg) versus Th1/Th17 cells. Peritoneal B1 cells strongly promoted T cell proliferation and cytokine secretion when presenting nominal or allogeneic antigens, as compared to conventional follicular B (B2) cells. However, peritoneal B1 cells largely failed to convert naive Foxp3(-)CD4(+) T cells into Foxp3(+) T(reg) cells in the presence of TGF-beta and IL-2, in marked contrast to conventional B2 cells, which excelled in T(reg) conversion. Interestingly, under the same T(reg) conversion conditions, peritoneal B1 cells preferentially promoted Th1 and Th17 cell differentiation. Blockade of CD86 but not CD80 costimulation markedly enhanced T(reg) cell induction by B1 cells. Thus, B cell antigen presentation function is inversely correlated with de novo T(reg) cell induction for these B cell subsets. Our findings suggest that B1 and B2 cell subsets play distinct roles in immune regulation by promoting reciprocal differentiation of T cell lineages.     

Th1、Th2、Th17型细胞因子与糖尿病肾病相关性的研究

糖尿病肾病(diabetic Nephropathy,DN)是导致终末期肾脏病(end-stage renal disease,ESRD)的最主要病因,因此,早期诊断和治疗是糖尿病肾病的诊治要点。但目前糖尿病肾病的确切发病机制尚未完全明确,糖尿病肾病的发生发展与血流动力学改变和代谢的紊乱、氧化应激和炎症等多种因素有关,而细胞因子在2型糖尿病及其相关肾脏并发症的病因、发病机制中也起着重要的作用,各种细胞因子的识别将为糖尿病肾病的诊治提供新的潜在治疗靶点。文章就Th1、Th2、Th17型细胞因子与DN相关性的研究作了综述。     

喘可治注射液对人外周血单个核细胞Th1/Th2细胞因子谱的影响

目的：通过研究喘可治注射液对人外周血单个核细胞（PBMCs）Th1／Th2细胞因子谱的影响，探讨喘可治注射液的免疫调节作用机制。方法：以流式微球分析（CBA）法检测不同处理情况下，人外周血单个核细胞分泌Th1（IFN-γTNF-α、IL-2）和Th2（IL4、IL-6、IL-10）细胞因子水平。结果：健康人PBMCs体外培养12小时后，上清中细胞因子主要为TNF-α和IL-6，喘可治使Th1和Th2细胞因子全面升高；喘可治对PDB加离子霉素诱导的PBMCs分泌Th1和Th2细胞因子具有抑制作用，并能抑制流感病人异常升高的INF-γ、TNF-α、IL-6和IL-10分泌。结论：喘可治注射液上调健康人PBMCs分泌TH1和Th2细胞因子，对异常活化的PBMCs分泌的Th1和Th2细胞因子则具有下调作用。     

Leptin deficiency impairs maturation of dendritic cells and enhances induction of regulatory T and Th17 cells

Leptin is an adipose‐secreted hormone that plays an important role in both metabolism and immunity. Leptin has been shown to induce Th1‐cell polarization and inhibit Th2‐cell responses. Additionally, leptin induces Th17‐cell responses, inhibits regulatory T (Treg) cells and modulates autoimmune diseases. Here, we investigated whether leptin mediates its activity on T cells by influencing dendritic cells (DCs) to promote Th17 and Treg‐cell immune responses in mice. We observed that leptin deficiency (i) reduced the expression of DC maturation markers, (ii) decreased DC production of IL‐12, TNF‐α, and IL‐6, (iii) increased DC production of TGF‐β, and (iv) limited the capacity of DCs to induce syngeneic CD4⁺ T‐cell proliferation. As a consequence of this unique phenotype, DCs generated under leptin‐free conditions induced Treg or T_H17 cells more efficiently than DCs generated in the presence of leptin. These data indicate important roles for leptin in DC homeostasis and the initiation and maintenance of inflammatory and regulatory immune responses by DCs.