人胶质瘤细胞株U251,SHG-44,U87研究进展

脑胶质瘤是神经外科最常见的恶性肿瘤,手术是其首选治疗方法,但由于脑胶质瘤为侵袭性生长,手术很难彻底切除,术后极易复发,而放、化疗对脑胶质瘤细胞缺乏特异性,因此,如何控制脑胶质瘤的恶性增殖和侵袭性生长是目前临床医学亟待解决的问题之一。对于脑胶质瘤的研究,实验研究中常用人胶质瘤细胞株U251,SHG-44和U87,本文就其相关研究进展进行综述。     

Ezrin蛋白在膀胱癌中的表达及意义

用EnVision免疫组织化学方法检测Ezrin蛋白在膀胱癌中的表达。结果膀胱癌组织Ezrin蛋白阳性表达率高于癌旁组织,癌旁组织高于正常膀胱组织（P均〈0．05）;Ezrin蛋白的表达与组织学分级和病理学分期无相关性（P〉0．05）。提示Ezrin蛋白可能参与膀胱癌的发生,但其表达水平与肿瘤恶性程度无关。     

替莫唑胺对人胶质瘤细胞系U251细胞的增殖影响

目的探讨替莫唑胺（TMZ）对人胶质瘤细胞系U251细胞的杀伤作用及其作用机理。方法将人胶质瘤细胞系U251细胞分成空白对照组、TMZ组和常用化疗药物组,TMZ组下设10、25、50、100、200、400μmol／L组,常用化疗药物组（ADM、MTX、VCR、DDP）各药物浓度均为其IC50值。各组分别于作用后24、48、72h观察细胞形态学改变,用MTT比色法检测细胞活力,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率。结果①TMZ组各浓度对U251细胞的抑制率分别为4．23％、7．43％、31．63％、64．53％、82．18％、86．15％,呈良好的时间—剂量效应关系,其1％为81μmol,初始抑制浓度为50μmol;②ADM、MTX、VCR、DDP对U251细胞的抑制率分别为39．27％．44．59％、54．56％、55．28％,VCR、DDP两药的抑制作用明显优于ADM、MTX（P均〈0．01）,与TMZ的杀伤作用相当（P〉0．05）;③流式细胞仪检测显示,U251细胞经TMZ作用后出现G2／M期阻滞,但促凋亡作用不强。结论TMZ对胶质瘤细胞有明显的杀伤作用,并呈时间和剂量依赖性;TMZ可使胶质瘤细胞阻滞于G2／M期,但其促凋亡作用不强;替奠唑胺对U251细胞的杀伤作用优于其他4种常用化疗药物。     

Ezrin蛋白在大肠癌组织中的表达及临床意义

目的探讨Ezrin蛋白在大肠癌组织中的表达及临床意义。方法采用流式细胞技术（FCM）检测58例大肠癌患者（肠癌组）癌组织及癌组织远端正常黏膜（对照组）的Ezrin蛋白表达,对Ezrin蛋白表达与大肠癌组织分化程度、淋巴结转移情况等相关因素进行分析。结果肠癌组Ezrin蛋白表达明显高于对照组（P〈0．01）：Ezrin蛋白表达与大肠癌患者的年龄、性别、肿瘤部位及癌组织分化程度均无统计学差异（P均〉0．05）,与有无淋巴结转移有统计学差异（P〈0．05）。结论Ezrin蛋白高表达提示癌组织的浸润、侵袭能力和淋巴结转移风险高,FCM检涮女肠癌绡织Ezdn罾白嘉扶可椎嘶怖床评估帛者而后冉钉新指标     

Ezrin蛋白表达对胃癌组织MVD的影响

采用免疫组化SP法检测正常胃黏膜、不典型增生胃黏膜及胃癌组织Ezrin蛋白的表达及微血管密度（MVD）。结果正常胃黏膜、不典型增生胃黏膜及胃癌组织中Ezrin蛋白阳性表达率及MVD值两两比较均有统计学差异（P〈0.05）。胃癌组织Ezrin蛋白的表达与肿瘤浸润深度和淋巴结转移密切相关（P〈0.01）;胃癌组织MVD值与其分化程度、浸润深度和淋巴结转移密切相关（P〈0.01）;Ezrin蛋白阴性的胃癌患者低于Ezrin蛋白阳性（P〈0.01）。提示Ezrin蛋白在胃癌组织中的高表达可促进胃癌组织的微血管生成,进而促进胃癌的侵袭与转移。     

胆管癌组织中Ezrin蛋白表达水平及其临床价值

目的探讨胆管癌组织中Ezrin蛋白的表达变化与胆管癌病理分期及转移的关系。方法收集胆管癌标本30例,同时选取10例良性胆管疾病作为对照。免疫组化方法检测癌组织Ezrin的表达情况,采用半定量方法对各组织表达情况进行分析。结果良性组织Ezrin蛋白阳性表达率60%,平均得分3.10;胆管癌组织表达较强,阳性表达率90%,评价得分6.96。Ⅰ/Ⅱ期胆管癌阳性表达率82%,平均得分4.64;Ⅲ/Ⅳ期阳性表达率95%,平均得分8.32。伴随淋巴结转移的胆管癌组织阳性表达率94%,平均得分9.11;未转移的胆管癌阳性表达率85%,平均得分4.09。并且上述差异均有统计学意义。结论相对于正常组织,Ezrin在胆管癌中高表达,并且与病理分期、淋巴结转移相关。     

Ezrin和Moesin在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的探讨Ezrin和Moesin在非小细胞肺癌组织中表达及其与临床病理及预后的关系。方法采用免疫组织化学法检测30例良性病变肺组织、60例肺癌组织标本中Ezrin和Moesin的表达。结果正常肺组织中Ezrin、Moesin均无阳性表达。肺癌组织中Ezrin阳性表达率68.3%;Moesin阳性表达率为71.7%。非小细胞肺癌组织中Ezrin和Moesin阳性表达率显著高于正常肺组织(P<0.05)。Ezrin和Moesin阳性表达与非小细胞肺癌淋巴结转移及临床分期相关(P<0.05),Ezrin和Moesin表达呈正相关(P<0.05)。结论 Ezrin和Moesin在非小细胞肺癌表达与肺癌临床分期和淋巴结转移密切相关,两者表达具有正相关性,两者联合检测对非小细胞肺癌预后判断有一定参考意义。     

Ezrin蛋白在结肠癌组织中的表达及意义

目的进一步探讨结肠癌的发生、发展机制。方法应用免疫组织化学染色法检测69份结肠癌组织及其对应癌旁良性组织、23份转移淋巴结组织中Ezrin蛋白、Ki-67蛋白表达,分析Ezrin蛋白表达与结肠癌临床病理特征及Ki-67蛋白表达的关系。结果Ezrin、Ki-67蛋白在结肠癌组织及转移淋巴结组织中的阳性表达率均明显高于癌旁组织（P均〈0．01）,Ezrin蛋白在结肠癌组织中的表达与组织分化程度及有无淋巴结转移、浆膜侵犯有关（P均〈0．01）;Ezrin蛋白与Ki-67蛋白表达呈显著正相关,P〈0．05（r=0．317）。结论Ezrin蛋白在结肠癌发生、发展中起重要作用;此为结肠癌的分子靶向治疗提供了依据。     

恶性脑胶质瘤U87细胞系肿瘤干细胞放疗敏感性的体外实验研究

目的探讨脑胶质瘤细胞系U87细胞及其肿瘤干细胞（CSCs）对体外放疗的敏感性。方法应用神经干细胞（NSCs）培养基分离培养形成细胞球克隆,检测细胞球细胞的NSCs特性。采用不同剂量放射线照射U87细胞及其CSCs,应用集落形成实验和生存曲线检测其生存情况。结果 U87细胞在NSCs培养基中形成悬浮的细胞球克隆,具有自我更新和多向分化能力,表达CD133、Nestin;两种细胞的存活率均随照射剂量增加而下降,且CSCs的存活率明显高于U87细胞（P〈0.01）。结论在体外条件下,CSCs的放射敏感性明显低于U87细胞,其可能是恶性脑胶质瘤放疗抵抗的主要原因。     

Ezrin蛋白在老年多发性肌炎患者骨骼肌中的表达

目的探讨Ezrin蛋白在老年多发性肌炎患者骨骼肌中的表达。方法选取12例老年多发性肌炎患者骨骼肌标本,冰冻连续切片,HE及酸性磷酸酶组织化学染色;抗-Ezrin蛋白单克隆抗体免疫组织化学染色,对比观察同源肌纤维染色情况。结果 Ezrin蛋白在炎性细胞浸润的血管周围及肌间隙内呈阳性表达,在正常肌纤维上表达不明显。结论 Ezrin蛋白在老年多发性肌炎患者骨骼肌中与炎性反应关系密切。     

氯化甲基汞抗裸鼠皮下U251胶质瘤细胞的体内实验研究

目的 在建立裸鼠皮下U251胶质瘤模型基础上,通过体内实验及相关形态学研究,分析氯化甲基汞(MMC)的抗脑胶质瘤作用.方法 制备裸鼠皮下U251胶质瘤模型,随机分为对照组和实验组,实验组裸鼠注射U251脑胶质瘤细胞1 w后,每天灌胃给予10 mg/kg体重MMC,连续5 d,对照组给予相同体积的生理盐水.全部裸鼠于肿瘤接种后14 d处死.结果 大体病理显示实验组肿瘤体积明显小于对照组,病理组织学观察发现实验组U251胶质瘤细胞生长密度较对照组低,并可见细胞体积变小、核固缩等凋亡的形态学改变.透射电镜显示实验组肿瘤细胞发生核固缩、染色质周边化、核断裂、胞浆空泡变性等改变,实验组瘤体汞含量明显高于对照组.结论 MMC对裸鼠U251胶质瘤细胞增殖具有明显的抑制作用,其机制可能是通过诱导胶质瘤细胞凋亡实现的,相关分子机制有待进一步深入研究.     

人ACE2蛋白结构和功能的生物信息学分析

目的 探讨研究人ACE2蛋白的生物学特征。方法 从NCBI数据库中获取ACE2蛋白氨基酸序列,利用在线服务器分析其生物学特征, 包括其结构特征、理化性质、信号肽以及糖基化、磷酸化位点等翻译后修饰情况,并通过STRING构建ACE2相互作用网络,综合分析ACE2互作蛋白的生物学过程、细胞组分、分子功能和信号通路的功能富集。结果 ACE2蛋白由805个氨基酸组成,为不稳定的亲水性蛋白质,含有信号肽和跨膜区,理论等电点为5.36。该蛋白存在6个糖基化位点和80个磷酸化位点。有多个相互作用蛋白,主要定位于细胞膜和细胞外,参与血压调节、激素调节等生物学过程,与肾素-血管紧张素、G蛋白偶联受体结合、趋化因子和松弛素等信号通路密切相关。结论 结合人ACE2蛋白结构和功能的生物信息学分析结果,讨论ACE2蛋白在介导SARS-CoV-2入侵和引发肺部损伤的可能性机制,为SARS-CoV-2病毒的入侵、阻断以及药物研发提供一定的理论依据。     

Ezrin蛋白和CD44-V6蛋白在结肠腺癌中的表达及其意义

目的 探讨结肠腺癌组织中Ezrin及CD44-V6蛋白的表达及意义.方法 应用免疫组化SP法检测Ezrin及CD44 -V6蛋白在80例结肠腺癌和20例癌旁肠组织中的表达情况.结果 Ezrin及CD44-V6蛋白在癌旁肠组织中阳性表达率分别为35.0％ 、25.0％,而在结肠腺癌组织中的阳性表达率明显增高,分别为83.75％ 、82.5％,Ezrin及CD44-V6蛋白在癌旁肠组织组与结肠腺癌组相比,差异有统计学意义(P＜0.01);Ezrin及CD44-V6蛋白表达与肿瘤组织分化程度、浸润深度、淋巴结转移及分期有关(P＜0.01);Ezrin及CD44-V6蛋白在结肠癌组织中的表达呈显著正相关,差异有显著性(P＜0.01);在Ezrin及CD44-V6蛋白同时阳性表达组中,淋巴结转移率高达65％显著高于两者均为阴性表达组淋巴结转移率14.29％,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 Ezrin及CD44-V6蛋白过表达可能与结肠癌患者的侵袭及淋巴结转移具有显著相关性,联合检测Ezrin及CD44-V6蛋白有助于预测结肠腺癌的恶性程度和转移潜能.     

骨桥蛋白和Ezrin蛋白在原发性肝癌组织中的表达及其与临床特征和预后的相关性

目的研究骨桥蛋白和埃兹蛋白(Ezrin蛋白)在原发性肝癌组织中的表达及其与临床特征和预后的相关性。方法将2012年1月至2014年12月于濮阳市油田总医院治疗的原发性肝癌手术切除标本46例作为研究对象(A组),进行回顾性分析,同时选取不典型增生肝组织标本46例为B组,以及正常肝组织标本46例作为C组,采用原位杂交以及免疫组化法检测骨桥蛋白和Ezrin蛋白在三组中的表达及其与临床特征和预后的相关性。结果 A组患者骨桥蛋白和Ezrin蛋白阳性表达率明显高于B组与C组(P0.05),B组患者骨桥蛋白阳性表达率高于C组(P0.05);骨桥蛋白和Ezrin蛋白的表达水平与患者性别、年龄、HBsAg阳性表达、有无肝硬化、肿瘤大小、肿瘤分化程度、AFP水平、肿瘤数目、TNM分期等临床病理特征无明显相关性(P0.05),而在发生转移与癌组织累计肝被膜患者中骨桥蛋白的阳性表达率明显高于未发生转移及未累及肝被膜患者(P0.05),且肿瘤越大Ezrin蛋白在癌组织中的阳性表达率越高(P0.05);骨桥蛋白阳性患者中位生存时间为32.10个月,阴性患者平均生存时间为37.10个月,差异具有统计学意义(P0.05),Ezrin蛋白阳性患者中位生存时间为30.10个月,阴性患者平均生存时间为38.10个月,差异具有统计学意义(P0.05)。结论骨桥蛋白和Ezrin蛋白在原发性肝癌患者具有较高的阳性表达率,提示骨桥蛋白和Ezrin蛋白在原发性肝癌的发生、发展以及转移中起重要作用;骨桥蛋白和Ezrin蛋白与患者预后不良有密切关系,可通过检测这两种蛋白的阳性表达情况,来监测患者病情变化。     

大蒜素对人脑胶质瘤U251细胞侵袭与迁移的影响及其机制探讨

目的探讨大蒜素对人脑胶质瘤U251细胞体外迁移侵袭作用的影响及可能机制,为大蒜素在脑胶质瘤治疗中的应用提供依据。方法用高度纯化的大蒜素制剂处理人脑胶质瘤U251细胞（大蒜素组）,应用划痕试验、Tran—swell迁移与侵袭试验、Westernblotting法测定药物处理后U251细胞迁移、侵袭能力变化以及侵袭相关蛋白MMP2、MMP9表达;并与未做干预的对照组比较。结果大蒜素能明显抑制细胞生长,抑制细胞侵袭与迁移,呈量效和时效关系（P〈0．001）,大蒜素组较对照组明显增加（P〈0．001）,有浓度依赖性。结论大蒜素能抑制U251细胞侵袭与迁移,该抑制作用具有时间、浓度依赖性。其作用机制可能为下调人脑胶质瘤U251细胞MMP2、MMP9表达。     

艰难梭菌TPI蛋白的生物信息学分析

目的 利用生物信息学方法对艰难梭菌TPI蛋白的结构和功能进行分析并预测其优势B细胞以及T细胞抗原表位。方法 在NCBI数据库获取TPI蛋白的氨基酸序列;使用ProtParam软件分析蛋白的理化性质;通过Signal 6.0 Sercer和TMHMM 2.0 Sercer软件预测蛋白的信号肽及跨膜区;采用SOMPA和SWISS-MODEL软件分析蛋白的二级结构和三级结构;利用软件ABCpred、IEDB和SYFPEITHI预测TPI蛋白的优势T、B细胞表位。结果 TPI蛋白由247个氨基酸组成,理论pI值5.05;归类于稳定蛋白质,属于亲水性蛋白;不含信号肽序列及跨膜结构域;蛋白的二级结构中α螺旋占52.63%,延伸链占15.38%,β-转角占7.69%,无规卷曲占24.29%;预测该蛋白含有多个优势B细胞及T细胞表位。结论 通过生物学信息的方法预测艰难梭菌TPI蛋白含有多个潜在的B细胞及T细胞抗原表位,为艰难梭菌感染的血清学诊断和亚单位疫苗的研制提供了理论基础。     

结核分枝杆菌Hrp1蛋白的生物信息学分析

目的 应用生物信息学预测分析Hrp1蛋白结构功能和生物学特性.方法 生物信息学软件ORF Finder、SO-SUI、Protpapram、ProtScale、Signal IP、Tmpred、TMHMM、NetNGlyc、NetPhos-3.1-Servera、PSORT、WoLF PSORT、TargetP-2.0...     

维氏气单胞菌TolC蛋白的生物信息学分析

目的 利用生物信息学技术预测和分析维氏气单胞菌TolC蛋白的生物学特性、结构、功能及进化关系,为研究其致病机制以及开发新的疫苗和新的药物靶点提供参考。方法 从NCBI蛋白质数据库中获取TolC序列,使用ProtParam、ProtScale、SignalP5.0、TMHMM2.0、PSORTb、NetPhos3.1、CD-search、SPOMA、SWISS-MODEL、ABCpred、IEDB等生物信息学工具分析和预测TolC蛋白的理化性质、亲疏水性、跨膜区域、信号肽、保守结构域、亚细胞定位、磷酸化位点、二级和三级结构、B细胞抗原表位和互作蛋白。利用MEGA5.2构建系统进化树,分析不同细菌间TolC蛋白的进化关系。结果 TolC蛋白由439个氨基酸组成,分子式为C₂₁₁₂H₃₄₁₄N₆₀₀O₆₈₉S₅,是稳定的亲水性蛋白。该蛋白亚细胞定位于细胞外,无跨膜结构域,有信号肽SP(Sec/SPI),含有52个磷酸化位点和多个B细胞抗原表位。蛋白的主要二级结构为α-螺旋,三级结构为...     

胃癌及癌前病变中幽门螺杆菌感染与Ezrin蛋白表达的关系

目的探讨细胞骨架蛋白Ezrin在胃癌、癌前病变中的表达与Hp感染关系,及其在胃癌发生发展中可能的机制。方法采用免疫组化方法检测49例胃癌及癌前病变组织及16例正常胃黏膜标本中Ezrin蛋白的表达情况,并用快速尿素酶试验或Warthin．Starry胃螺旋染色法检测幽门螺杆菌（Hp）感染。结果胃癌及癌前病变组织Hp感染率显著高于正常组织（P〈0．01）;Ezrin蛋白表达在正常胃组织、癌前病变组织和胃癌组织中呈递减趋势,三者比较差异有统计学意义（P均〈0．05）;胃癌组织及癌前病变组织中Hp感染阳性组Ezrin蛋白的表达显著低于阴性组（P〈0．05）。结论在胃黏膜癌变过程中,Ezrin蛋白表达逐渐下调,Ezrin蛋白表达与Hp感染相关,提示Hp感染可通过影响Ezrin蛋白表达,在胃癌的发生发展过程中发挥一定作用。     

不同U87细胞数量对裸鼠原位恶性胶质瘤模型构建的影响

目的 观察不同数量的人恶性胶质瘤U87细胞对裸鼠原位恶性胶质瘤模型构建的影响。方法 将20只裸鼠随机分成A、B、C、D组各5只,于右侧纹状体分别注射0、0.05×105、0.2×105、1×105/μL的U87细胞悬液5μL。接种前及接种后4周称取体质量,接种4周后取脑组织测量肿瘤体积,并行脑组织病理检查。结果 接种后4周,D组体质量较A组降低(P<0.05),其他组间无统计学意义。A组无肿瘤形成,脑组织病理检查未见异常;B、C、D组均可见肿瘤组织,细胞核中Ki-67蛋白表达强阳性;肿瘤体积分别为(1.57±0.09)、(4.25±1.15)、(16.32±0.41)mm3,组间比较,P均<0.05。结论 U87细胞颅内接种可构建原位恶性胶质瘤模型,且接种细胞数量越多建模效果越好。