酶联免疫吸附法与聚合酶链反应法在乙型肝炎病毒检测中的应用比较与临床意义

目的综合分析并解释酶联免疫吸附法(ELISA)和聚合酶链反应法(PCR)在检测乙型肝炎病毒(HBV)时结果的一致性与矛盾性。方法分别对经ELISA法检查HBsAg阳性和阴性的的两组进行荧光PCR法HBV-DNA的检测。结果HBsAg阳性组中HBsAg、HBeAg、抗-HBc三项阳性者，HBV-DNA阳性率100％；HBsAg抗-HBe，抗-HBc三项阳性者，HBV-DNA阳性率45．5％；HBsAg、抗-HBc两项阳性者HBV-DNA阳性率50％；HBsAg阴性组中HBV—DNA阳性率8％。结论两种方法互为补充，在做判断时应综合分析。     

HBV-M与HBV-DNA关系的研究

目的：研究乙肝5项免疫标志物(HBV-M)与乙肝核酸(HBV-DNA)之间的关系，从而评价检测HBV-DNA载量的临床应用价值。方法：血清HBV-DNA采用美国PE公司生产5700荧光定量PCR仪进行定量检测。5项免疫标志物采用ELISA法。结果表面抗原(HBsAg)、e抗原(HBeAg)和核心抗体(抗-HBc)阳性者，HBV-DNA阳性率为99．5％、e抗体、抗-HBc阳性者，HBV—DNA阳性率为56％；单项HBsAg阳性者，HBV-DNA阳性率为50．1％；HBsAg和抗-HBc阳性者，HBV—DNA阳性率为48．3％；5项免疫标志物皆阴性、含有3个抗体或2个抗体以及注射乙肝疫苗后单项抗-HBs阳性者，HBV—DNA阳性率为0。结论:HBV—DNA载量与抗原存在呈正相关性，而与抗体含量呈负相关性；慢性乙型肝炎患者机体无法清除乙肝病毒，HBV复制是激发机体免疫损害的关键环节，因此抗病毒治疗对减少或阻断肝病的发作和病情进展是十分必要的；HBV—DNA检测对乙肝早期诊断、传染性识别、病毒复制水平判断以及抗病毒治疗效果考核等均有重要的临床意义。     

荧光定量PCR检测HBV-DNA与ELISA方法测定乙型肝炎五项指标相关性分析

目的:检测乙型肝炎(乙肝)患者血清中HBV DNA的含量,了解其与免疫学指标的关系。方法:采用荧光定量PCR技术和ELISA方法,分别检测3 120例乙型肝炎患者血清中HBV DNA含量和免疫学指标。结果:HBsAg、HBeAg、抗HBc阳性组HBV DNA检出率为96.8%,HBsAg、抗HBe、抗HBc阳性组HBV DNA检出率为51.5%,HBsAg、抗HBc阳性组HBV DNA检出率为48.5%,另抗HBs阳性组阳性率为3.1%,全阴组阳性率为5.0%。不同乙肝五项指标患者血清HBV DNA的检出率差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:荧光定量PCR技术在乙肝诊断、治疗过程监测及药效评价方面有应用价值。     

HBV-DNA与其病毒免疫标志物的关系

目的:探讨乙型肝炎病毒(HBV)感染者HBV-DNA与病毒免疫标志物的关系。方法:采用实时荧光定量PCR(FQ-PCR)对568份HBV感染者血清中HBV-DNA含量进行检测,同时用ELISA法检测其HBV免疫标志物。结果:HBsAg、HBeAg和HBcAb阳性组HBV-DNA阳性率约为98.9%;HBsAg、HBcAb和HBeAb阳性组HBV-DNA阳性率约为65.4%;HBsAb、HBcAb和HBeAb阳性组HBV-DNA阳性率约为13.9%;三组间HBV-DNA阳性率有明显差异(P<0.01)。HBeAg阳性标本中HBV-DNA阳性率最高,达92.0%;HBsAg与HBV-DNA的符合率最高,为77.6%。结论:检测HBV-DNA含量结合血清病毒标志物对乙型肝炎的临床诊断治疗以及病情判断有重要意义。     

乙型肝炎病毒前S1抗原及HBV-M和HBV-DNA的关系

目的:探讨血清乙型肝炎病毒前S1抗原(PreS1)与HBV其他标志物及其DNA的关系。方法:对620例血清标本进行PreS1、乙肝病毒标志物和HBV-DNA检测。结果:在HBsAg、HBeAg、抗HBc与HBsAg、抗HBe、抗HBc和HBsAg、抗HBc三种阳性模式组,PreS1阳性率为84.8%、41.9%、51%。差异有显著性(P均<0.005)。在PreS1 (+)病例组,PreS1与HBeAg及HBV-DNA阳性率分别为58.87%、48.39%和51.61%,结果符合率达82.19%和87.67%。结论:血清PreS1主要存在于HBsAg携带者,且与HBeAg和HBV-DNA关系密切,是反映HBV复制及传染性的又一可靠血清学指标。PreS1联合HBV标志物同步检测具有重要的临床意义。     

无症状HBsAg携带者血液传染性的研究

本文用斑点杂交法检测了163例无症状HBsAg携带者及105例HBsAg阴性而抗HBc和(或)抗HBs阳性者血清HBV-DNA,借以比较不同血清标志的传染性。无症状HBsAg携带者HBV-DNA检出率为58.3％,其中HBeAg阳性者为90.8％,抗HBe阳性者为14.7％:HBsAg阴性(抗HBc和/或抗HBs阳性)者中HBV-DNA检出率仅为1.9％.表明HBV-DNA与HBeAg关系最密切,HBV-DNA检出率与HBsAg滴度呈正相关,无性别差异,但与年龄有关,年龄越小HBV-DNA检出率越高。大多数无症状HBsAg携带者血中HBV—DNA阳性可持续9个月以上。     

乙肝病毒前S1蛋白与DNA指标关系的探讨

目的探讨乙肝病毒前S1蛋白指标与DNA指标的相关性.方法收集393例HBsAg阳性乙肝患者的血清,采用荧光定量-PCR法检测其HBV-DNA,用ELISA法检测HBV血清标志物及HBV前S1蛋白.结果393例HBsAg阳性血清中,[HBsAg( )HBeAg( )HBcAb( )]52例,[HBsAg( )HBeAb( )HBcAb( )]263例,HB-sAg及HbcAb双阳性78例;HBV-DNA阳性99例(阳性率25.2%);前S1蛋白阳性107例(阳性率27.2%)结论[HBsAg( )HBeAg( )HBcAb( )]组,前S1蛋白与HBV-DNA指标呈显著性相关,而在[HBsAg( )HBeAb( )HB-cAb( )]及[HBsAg( )HBcAb( )]组中,前S1蛋白与HBV-DNA指标无显著性相关.     

输血检查中用乙肝两对半检测代替HBsAg检测的价值探讨

目的通过对受检者乙肝两对半检测，并对其中HBsAg阴性模式进行HBV-DNA检测，判定其HBV感染状况，评价乙肝两对半检测防止输血传播HBV的临床意义。方法对5200例乙肝两对半检测结果进行模式分析，随机抽取各种HBsAg阴性模式进行HBV-DNA检测。结果9种HBsAg阴性模式中，HBV血清标志物全阴模式、抗-HBs阳性模式及抗-HBe阳性模式，HBV-DNA检测结果阴性。抗-HBs和抗-HBe阳性模式120例，检出HBV-DNA阳性2例，阳性率1．7％；抗-HBs和抗-HBc阳性模式120例，检出HBV-DNA阳性4例，阳性率3、3％；抗-HBs、抗-HBe和抗-HBc阳性模式120例，检出HBV-DNA阳性1例，阳性率0．8％；HBeAg和抗-HBc阳性模式31例，检出HBV-DNA阳性25例，阳性率80．6％；抗HBc阳性模式130例。检出HBV-DNA阳性11例，阳性卒8、5％；抗-HBe和抗-HBc阳性模式120例，检出HBV-DNA阳性7例，阳性率5．8％。结论运用乙肝两对半检测，通过模式综合分析，可以更全面判断HBV感染，充分保证输血安全。     

皖北地区乙型肝炎患者HBV血清标志物与HBV-DNA定量检测的比较

目的:比较乙型肝炎病毒血清标志物(HBV-M)与HBV-DNA定量检测的结果。方法:采用酶联免疫法检测388例患者血清HBV-M,同时用荧光定量-聚合酶链反应检测其HBV-DNA含量。结果:乙型肝炎大三阳组患者血清HBV-DNA阳性率为91.25%,阳性患者中HBV拷贝数为107 IU/ml的所占比例最多,小三阳组阳性患者中HBV拷贝数以103 IU/ml为主,大三阳组患者血清HBV-DNA阳性率高于小三阳组(P0.05);HBsAg(+)、HBeAg(±)、抗-HBc(+)组阳性率为66.67%;HBsAg(+)、HBeAg(+)、抗HBc(-)组阳性患者中以105 IU/ml和106 IU/ml为主;HBsAg(+)、HBeAg(-)、HBcAb(+)组阳性率为30.77%。结论:乙型肝炎患者中HBeAg(+)者病毒复制水平最高,其与HBV-DNA密切相关;抗-HBe(+)、抗-HBc(+)患者病毒复制并非完全停止,但其复制水平明显降低;联合检测血清HBV-M与HBV-DNA可反映乙型肝炎患者免疫反应状态和病毒复制水平,为临床监测病情和用药提供实验依据。     

乙型肝炎患者HBV-M与HBV-DNA检测结果分析

目的了解分析各型乙型肝炎患者血清的标志物HBV-M(HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc)与从基因水平测得的HBV-DNA的关系.方法采用ELISA法检测HBV-M,FQ-PCR法检测HBV-DNA.结果各种HBV-M模式都有一定的HBV-DNA检出率.HBsAAg、HBeAg、抗-HEe阳性和HBsAg、HbsAg阳性这两种模式HBV-DNA阳性率最高,分别为91.5%、90.6%.其次为HbsAg、抗-HBc阳性;HbsAg阳性;HbsAg、抗-HBe、抗-HBc阳性,HBV-DNA阳性率分别为50.0%、28.6%和23.4%.在HBsAg阴性的模式中,HBV-DNA阳性率可达8.1%(15/105),单项抗-HBc阳性患者血清HBV-DNA阳性率为8.3%,抗-HBs阳性的病例中亦可检出HBV-DNA阳性(6.0%).HBeAg组的HBV-DNA阳性率为91.4%与抗HBe组的HBV-DNA阳性率(21.1%)比较,有显著差异(P＜0.01).结论 HBeAg与HBV-DNA关系密切,乙型肝炎患者血清学标志物HBV-M无论何种模式,都应检测HBV-DNA,以此确证HBV感染后在体内的复制情况并追踪预后.     

乙型肝炎病毒前S1抗原(Pre-S1)应用价值的探讨

目的:分析HBsAg阳性血清乙型肝炎前S1蛋白(Pre-S1)与乙型肝炎病毒DNA(HBV-DNA)含量检测的关系.探讨Pre-S1的应用价值.方法:用荧光定量PCR技术检测225例HBsAg阳性血清HBV-DNA的含量,同时用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测Pre-S1蛋白.结果:在HBsAg、HBeAg、HBcAb同时阳性标本中Pre-S1Ag阳性率为89.3%、HBV-DNA阳性率为98.6%.在HBsAg、HBeAb、HBcAb同时阳性标本中Pre-S1Ag阳性率为34.6%、HBV-DNA阳性率为30.7%.在不同HBV血清模式(HBV-M)中Pre-S1Ag的出现与HBV-DNA的含量有正相关的关系.结论:Pre-S1Ag与HBeAg、HBV-DVA有较好的相关性,Pre-S1Ag与HBV-DNA一样可以作为HBV复制的指标,对乙肝五项检测有重要补充作用,尤其适合县市级以下基层医院开展.     

乙型肝炎病毒感染者DNA检测分析

①目的 了解HBV感染体内病毒复制情况。②方法 用PCR法检测HBV—DNA。③结果 共发现7种感染标志物组合模式，选用其中6种进行PCR扩增检测分析，以临床上的乙肝“大三阳”(HBsAg、HBeAg、抗-HBc)组HBV—DNA阳性率最高为100％；其次为“小三阳”(HBsAg、抗-HBe、抗-HBc)组HBV—DNA阳性率为30％。④结论 “大三阳”组人群体内乙肝病毒复制性强，具有高度传染性；在抗-HBe阳性携带中，也有相当一部分人具有传染性；单纯抗-HBc阳性中也存在一定的传染性。     

316例HBV感染者血清标志物与HBV-DNA关系分析

目的了解乙型肝炎病毒(HBV)感染者不同血清标志组合与乙肝病毒脱氧核糖核酸(HBV-DNA)的关系。方法对316例HBV感染者血清同时进行ELISA方法测定血清学标志物和PCR法检测HBV-DNA。结果HBsAg(+)HBeAg(+)抗-HBc(+)组,HBV-DNA阳性率为98.59%。HBsAg(+)抗-HBe(+)抗-HBc(+)组阳性率为36.84%,HBsAg(+)抗-HBc(+)组阳性率为29.66%,而在HBsAg(-)组中阳性率为5.88%(2/34)。结论必须把血清标志物与HBV-DNA结合分析,才能更准确地判断肝脏中HBV-DNA复制及有无传染性。     

分析HBsAg与抗-HBs双阳患者血清模式与HBV DNA载量的临床意义

目的：探讨乙型肝炎病毒（HBV）感染者乙型肝炎表面抗原（HBsAg）与乙型肝炎表面抗体（抗-HBs）同时阳性的血清学模式的基因变异与HBV DNA的关系并探究其原因及临床意义。方法乙肝HBV血清学标志物五项指标(HBsAg、HBsAb、HBcAb、HBeAg、HBeAb)采用时间分辨法定量测定,HBV DNA含量的检测采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)。结果本研究入选的50例HBsAg与抗HBs双阳患者血清中共出现4种HBV血清学模式：(Ⅰ) HBsAg、抗-HBs、抗-HBe、抗-HBc阳性模式占42.0%,HBV DNA阳性率占42.8%;(Ⅱ) HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBc阳性模式占32.0%,HBV DNA阳性率占70.5%;(Ⅲ)HBsAg、抗-HBs、抗-HBc阳性模式占24.0%,HBV DNA阳性率占25.0%;(Ⅳ)HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc阳性模式占2.0%,HBV DNA阳性率占100.0%。其中含有HBeAg阳性的Ⅱ、Ⅳ模式与Ⅰ、Ⅲ模式的HBV DNA阳性率分别作两两比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论 HBsAg与抗HBs双阳患者血清中伴有HBeAg阳性者血清中HBV DNA载量最高,HBsAg与抗-HBs双阳模式是免疫系统的个性化表现,应引起临床的重视。     

乙型肝炎病毒母婴传播阻断的研究

本文对276例HBsAg阳性母亲及其新生儿血清进行HBV标志检测。母血HBeAg和PHSA-R阳性率分别为48.9％和52.9％。婴儿脐血HBsAg阳性率9.8％(27/276)。对276例新生儿按0、1、3、6月程序,每次肌肉注射乙肝疫苗10μg进行阻断研究。生后9月龄,脐血HBsAg阴性组212例抗-HBs阳转率86.8％,随访24月龄时抗-HBs阳性率91.4％。脐血HBsAg阳性组27例抗HBs阳转率51.9％,9例HBsAg持续阳性。母血HBV标志和婴儿性别对疫苗阻断效果无明显影响。抗-HBs阳转组婴儿血清PHSA-R和HBV-DNA检测均阴性。表明单独使用乙肝疫苗阻断乙肝病毒母婴传播可取得满意效果。     

乙型肝炎病毒前S1抗原及HBV-M和HBV-DNA的关系

目的：探讨血清乙型肝炎病毒前S1抗原（PreS1）与HBV其他标志物及其DNA的关系。方法：对620例血清标本进行Presl、乙肝病毒标志物和HBV—DNA检测。结果：在HBsAg、HBeAg、抗HBc与HBsAg、抗HBe、抗HBc和HBsAg、抗HBc三种阳性模式组，PreS1阳性率为84．8％、41，9％、51％。差异有显著性（P均〈0．005）。在PreS1（＋）病例组，PreS1与HBeAg及HBV—DNA阳性率分别为58．87％、48．39％和51．61％，结果符合率达82．19％和87．67％。结论：血清PreS1主要存在于HBsAg携带者，且与HBeAg和HBV-DNA关系密切，是反映HBV复制及传染性的又一可靠血清学指标，PreS1联合HBV标志物同步检测具有重要的临床意义。     

HBV-DNA检测在HBV不同血清学指标组合的应用

目的:ELISA方法检测HBV感染标志物,观察不同血清学指标组合的HBV-DNA阳性情况.方法:回顾分析2006-2008年我院就诊乙肝患者778例,用荧光定量聚台酶链反应和酶联免疫吸附试验(ELISA)分别检测其血清的HBV-DNA和HBV血清标志物(HBV-M).结果:1组(HBsAg、HBeAg、抗HBc阳性)、2组(HBsAg、抗HBe、抗HBc阳性)、3组(HBsAg阳性)的患者HBV-DNA的阳性率分别为96.7%、54.2%、18.8%,其拷贝数分别为1.62×108/ml,1.12×106/ml,7.61×104/ml.结论:荧光定量PCR对乙型肝炎早期诊断、传染性的判断及疗效观察具有临床实用及指导意义.     

荧光定量PCR检测HBV-DNA的临床价值

目的:检测血清中乙型肝炎病毒(HBV)DNA拷贝数,以探讨乙型肝炎病毒DNA(HBV-DNA)与血清免疫标志物的关系。方法:荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测血清样本中HBV-DNA含量;酶联免疫吸附法(ELISA)检测HBV血清标志物(HBVM)。结果:在HBsAg(+)HBeAg(+)HBcAb(+)组(大三阳组)患者血清HBV-DNA阳性率为97.63%(371/380),平均拷贝数为1.86×107/ml;HBsAg(+)HBeAg(+)组HBV-DNA阳性率为95.65%(22/23),平均拷贝数为1.75×107/ml;HBsAg(+)HBeAb(+)HBcAb(+)组(小三阳组)患者血清HBV-DNA阳性率为43.68%(83/190),平均拷贝数为4.85×105/ml;HBsAg(+)HBcAb(+)组血清HBV-DNA阳性率为82.22%(37/45),平均拷贝数为2.17×105/m1;小三阳及HBsAg(+)HBcAb(+)组HBV-DNA阳性检出率及拷贝数均低于大三阳及HBsAg(+)HBeAg(+)组,与之比较均具有显著性差异(P<0.05);HBVM全阴性组HBV-DNA检出率为1.78%(2/112),平均拷贝数为1.48×105/ml。结论:荧光定量PCR在乙肝的诊断、判断传染性强弱及评价抗病毒治疗效果方面具有较大的临床应用价值。     

乙型肝炎病毒前S1抗原（Pre-S1）应用价值的探讨

目的：分析HBsAg阳性血清乙型肝炎前S1蛋白(Pre-S1)与乙型肝炎病毒DNA(HBV-DNA)含量检测的关系。探讨Pre-S1的应用价值。方法：用荧光定量PCR技术检测225例HHsAg阳性血清HBV-DNA的含量，同时用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测Pre-S1蛋白。结果：在HBsAg、HBeAg、HBcAb同时阳性标本中Pre-S1Ag阳性率为89．3％、HBV-DNA阳性率为98．6％。在HBsAg、HBeAb、HBcAb同时阳性标本中Pre-S1Ag阳性率为34.6％、HBV-DNA阳性率为30．7%。在不同HBV血清模式(HBV-M)中Pre-S1Ag的出现与HBV-DNA的含量有正相关的关系。结论：Pre-S1Ag与HBeAg、HBV-DVA有较好的相关性,Pre-S1Ag与HHV-DNA一样可以作为HBV复制的指标．对乙肝五项检测有重要补充作用，尤其适合县市级以下基层医院开展。     

巢式聚合酶链反应检测血清中HBV—DNA的临床意义

为了探讨乙肝病毒血清标志物ELISA测定法与定性PCR法测定结果的关系,对106例连续住院的患者通过采集空腹静脉血液3ml,分离血清,分别做ELISA法测定及PCR法检测。结果显示,HBeAg阳性血清标本、HBsAg/HBeAg/抗HBc—IgG三项阳性血清标本、HBsAg/抗HBe/抗HBc—IgG三项阳性血清标本中HBV—DNA阳性率分别为100％(20/20,18/18,16/16),HBsAg阳性血清标本中HBV—DNA阳性率75％(12/16),抗HBs阳性血清标本中HBV—DNA阳性率33.33％(4/12),HBVM全部阴性血清标本中HBV—DNA阳性率18.18％(4/22)。提示了PCR法检测乙肝病毒的方法比血清标志物ELISA法有更高的临床检出率,是检测乙肝病毒最灵敏的实验指标。