胚胎停育患者蜕膜组织中AQP3、TGF-β1的表达

目的检测转化生长因子-β1 (TGF-β1)、水通道蛋白3 (AQP3)在妊娠早期胚胎停育患者蜕膜组织中的表达,探讨它们与胚胎停育的关系。方法选择2017年10月-2018年5月就诊于华北理工大学附属医院妇科门诊经B超确诊为胚胎停育的患者为病例组,在妊娠同一时期正常妊娠要求行人工流产术的孕妇作为对照组。Western blot、免疫组化法检测TGF-β1、AQP3的蛋白在两组患者蜕膜组织中的表达;采用RT-PCR法检测两组蜕膜组织中TGF-β1、AQP3的mRNA的表达。结果病例组中TGF-β1、AQP3的蛋白表达水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0. 05);病例组中TGF-β1、AQP3的mRNA表达量高于对照组,差异有统计学意义(P<0. 05)。结论 TGF-β1和AQP3两者可能与胚胎停育关系密切,可能共同参与了早孕期胚胎停育的发生。     

乳腺癌局部微环境中免疫相关细胞因子mRNA表达状态及临床病理意义

目的 研究乳腺癌局部微环境中免疫相关细胞因子干扰素(IFN)-γ、白介素(IL)-10和转化生长因子(TGF)-βmRNA表达的状况,并与临床病理特征相比较,探讨其意义.方法 48例乳腺浸润性导管癌手术切除标本,根据是否淋巴结转移分为两组,采用地高辛末端标记的寡核苷酸探针,以原位杂交技术检测肿瘤浸润单个核细胞和肿瘤细胞IFN-γ、IL-10和TGF-βmRNA的表达状况.结果 淋巴结转移组乳腺癌细胞TGF-β和IL-10 mRNA表达明显高于无淋巴结转移组(TGF-β[%/积分指数]:46.25±12.88/0.49±0.27 vs 19.33±7.69/0.28±0.18;IL-10[%/积分指数]:39.08±17.49/0.42±0.19 vs 22.58±7.87/0.33±0.17,t=4.330,P<0.01;t=2.962,P<0.05),TGF-βmRNA在乳腺癌细胞中表达的差别更为明显.未检出IFN-γmRNA阳性肿瘤细胞.肿瘤间质浸润的单个核细胞中,淋巴结转移组IFN-γmRNA阳性细胞明显低于TGF-β、IL-10 mRNA阳性细胞(TGF-β:35.58±13.62/0.40±0.25,IL-10:40.83±15.49/0.47±0.22,IFN-γ:18.17±8.41/0.18±0.08,t=3.005,P<0.05;t=4.390,P<0.01;t=3.563,P<0.01).结论 乳腺癌组织局部微环境中,调节T细胞和Th2免疫相关细胞因子mRNA表达明显占优势,使得肿瘤免疫微环境趋于抗瘤免疫反应抑制状态.     

胚胎停育绒毛组织中PRX3、PLGF、PSG1的表达

目的：分析过氧化物还原酶3(PRX3)、胎盘生长因子胚胎生长因子(PLGF)、妊娠特异性糖蛋白1(PSG1)在胚胎停育患者绒毛组织中的表达。方法：选取2020年1月-2022年8月本院收治的84例胚胎停育患者作为观察组，60例正常早孕行人工流产者作为对照组；采用PCR及western blot法检测两组绒毛组织中PRX3、PLGF、PSG1的mRNA及蛋白水平，logistics模型分析绒毛组织PRX3、PLGF、PSG1与胚胎停育关系。结果：观察组PRX3及PSG1 mRNA(3.43±0.84、3.31±1.34)和蛋白水平(1.74±0.39、2.39±0.54)均高于对照组(1.54±0.42、2.26±0.43、1.01±0.27、1.83±0.39),PLGF mRNA(0.34±0.05)和蛋白水平(0.51±0.11)均低于对照组(0.42±0.06、0.93±0.24);绒毛组织中高PRX3、PSG1水平和低PLGF水平均与胚胎停育有关(均P<0.05)。结论：相较于正常早孕，胚胎停育患者绒毛组织中PRX3、PSG1明显偏高，PLGF水平明显偏低。     

整合素α2β1和CD44V3表达与宫颈鳞癌临床病理关系探究

目的:分析整合素α2β1和CD44V3在宫颈鳞癌中的表达及临床意义。方法:收集2015年1月—2017年1月本院诊治的宫颈鳞癌标本36例(宫颈鳞癌组)、子宫平滑肌瘤手术切除的良性病变宫颈黏膜组织标本36例(对照组),应用免疫组化检测检测宫颈组织中的整合素α2β1、CD44V3的mRNA表达水平。结果:对照组整合素α2β1mRNA的表达值(0.09±0.03)低于宫颈鳞癌组(0.52±0.08)(t=30.197,P=0.000),整合素CD44V3mRNA的表达(0.13±0.02)低于宫颈鳞癌组(0.65±0.11)(t=27.906,P=0.000);整合素α2β1和CD44V3在宫颈鳞癌组织中阳性率(66.7%、72.2%)均高于对照组(27.8%、38.9%)(χ~2=10.923、8.100,P=0.001、0.004);整合素α2β1和CD44V3的阳性表达与宫颈鳞癌患者的年龄无相关性(P0.05),但与宫颈鳞癌患者的PTNM分期、分化程度、是否淋巴结转移及浸润深度均存在相关性(P均0.05)。整合素α2β1和CD44V3在宫颈鳞癌组织中的表达呈正相关性(r=0.369,P0.05)。结论:整合素α2β1和CD44V3在宫颈鳞癌组织中呈高表达,且与患者的PTNM分期、分化程度、是否淋巴结转移及浸润深度密切相关,整合素α2β1和CD44V3联合检测可为宫颈鳞癌患者的诊治及预后评估提供参考。     

基质金属蛋白酶在稽留流产发生中的作用和调控机制研究

目的研究基质金属蛋白酶在稽留流产患者绒毛组织中的表达变化,探讨其在稽留流产中的作用及其调控机制。方法选取2015年11月至2016年5月期间就诊于苏州大学附属第一医院计划生育门诊和苏州市立医院北区妇产科的稽留流产患者30例作为实验组,同期健康早孕流产患者30例作为对照组。采用ELISA法检测血浆TGF-β1水平,定量PCR(RT-PCR)检测患者绒毛组织中NF-κB、TGF-β1、TIMP-1和MMP-9的mRNA表达情况,采用蛋白印迹法(Western Blot)检测分析NF-κB、TGF-β1、TIMP-1和MMP-9的蛋白水平。结果实验组血浆中TGF-β1的平均水平低于对照组(P0.05);实验组绒毛组织中MMP-9的mRNA表达量高于对照组,而NF-κB1、TGF-β1和TIMP-1mRNA表达量均低于对照组(P0.05);实验组绒毛组织中MMP-9的蛋白表达水平高于对照组,NF-κB p50、TGF-β1和TIMP-1的蛋白表达水平均低于对照组(P0.05)。结论 NF-κB表达水平的降低导致TGF-β1水平降低,从而影响MMP-9/TIMP-1的平衡,使ECM过度降解,导致胚胎植入失败及胎盘形成障碍,最终发生胚胎停育。     

宫腔粘连患者子宫内膜组织跨膜前列腺雄激素诱导蛋白1和转化生长因子β1的表达情况

目的探讨跨膜前列腺雄激素诱导蛋白1(prostate transmembrane protein androgen induced 1,PMEPA 1)和转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)在宫腔粘连(intrauterine adhesions,IUA)患者子宫内膜组织中的表达量及相关性。方法选取武汉大学人民医院妇产科2016年6月至2017年12月因IUA行宫腔镜手术治疗的患者50例为粘连组,20例因不孕症行宫腔镜手术的非IUA患者为对照组,采集两组患者子宫内膜组织,根据粘连的评分标准评分并分级,粘连组又分为轻度组(10例)、中度组(19例)、重度组(21例),收集的内膜组织采用qRT-PCR和Western blot检测PMEPA 1和TGF-β1的mRNA和蛋白的表达量并在蛋白表达水平作两者相关性分析。结果 (1)PMEPA 1 mRNA的表达:中、重度粘连组低于对照组和轻度粘连组,重度组低于中度组,差异均有统计学意义(t=7.719、12.84、2.614,P0.0001、0.0001、0.05);轻度组与对照组比较差异无统计学意义(P0.05)。(2)PMEPA 1蛋白的表达:轻、中、重度粘连组均低于对照组(t=2.886、6.669、15.47,P0.05、0.001、0.0001),重度组低于中度组(t=5.119,P0.0001)。(3)TGF-β1的mRNA和蛋白的表达:粘连组高于对照组(t=4.988、8.816、9.0514,P均0.001)。(4)PMEPA1和TGF-β1在中、重度组中呈负相关关系(r=-0.6342、-0.8407,P=0.0035、0.0001)。结论 PMEPA 1和TGF-β1可能参与IUA的发生发展。     

不明原因胚胎停育绒毛和蜕膜组织芳香烃受体和细胞色素P4501A1蛋白的表达及意义

目的:探讨芳香烃受体(aryl hydrocarbon receptor,AhR)和细胞色素P4501A1(cytochrome P4501A1,CYP1A1)蛋白在胚胎停育患者绒毛及蜕膜中的表达。方法:分别选取30例不明原因胚胎停育患者作为病例组和30例正常早期妊娠人工流产妇女作为对照组,采用免疫组织化学方法检测2组患者绒毛和蜕膜组织中AhR和CYP1A1蛋白表达水平。结果:绒毛组织中,病例组AhR蛋白表达水平(0.58±0.03)高于对照组(0.25±0.04),病例组CYP1A1蛋白表达水平(0.60±0.01)高于对照组(0.22±0.03),差异均有统计学意义(P0.05)。蜕膜组织中,病例组AhR蛋白表达水平(0.56±0.03)高于对照组(0.26±0.04),病例组CYP1A1蛋白表达水平(0.57±0.01)高于对照组(0.24±0.03),差异均有统计学意义(P0.05)。结论:胚胎停育患者绒毛和蜕膜组织中AhR和CYP1A1蛋白表达明显增高,可能与不明原因胚胎停育的发生有关。     

特异性免疫治疗对哮喘大鼠肺组织RORγtmRNA表达的影响

目的研究特异性免疫治疗(SIT)对哮喘大鼠肺组织维甲酸相关孤核受体γt(RORγt)mRNA表达的影响及其机制。方法将24只正常清洁级雄性SD大鼠随机分成正常对照组(C组)、哮喘组(A组)和特异性免疫治疗组(SIT组),A组和SIT组通过卵白蛋白(OVA)致敏建立哮喘大鼠模型,SIT组再行OVA雾化吸入减敏。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素-17(IL-17)及转化生长因子β1(TGF-β1)水平,采用实时荧光定量PCR方法检测肺组织RORγt mRNA表达水平。结果三组IL-17、TGF-β1和RORγt mRNA差异均有统计学意义(P0.05)。A组IL-17、TGF-β1及RORγt mRNA均高于C组(P0.05);SIT组IL-17及TGF-β1均高于C组(P0.05),RORγt mRNA与C组差异无统计学意义(P0.05);SIT组IL-17和TGF-β1及RORγt mRNA均低于A组(P0.05)。RORγt mRNA与TGF-β1及IL-17均呈正相关(P0.05)。结论 SIT可能通过减少TGF-β1分泌抑制RORγt表达,进而抑制Th17生成及IL-17分泌,减轻气道炎症反应。     

妊娠期糖尿病孕妇中FoxM1基因的表达及其与胰岛素的关系

目的探讨妊娠期糖尿病孕妇中FoxM1基因表达变化以及与胰岛素的关系。方法选择东莞市石碣医院产科门诊行产检的GDM孕妇、正常孕妇各100例作为研究对象,分别为研究组和对照组,采用放射免疫法检测两组孕妇血清胰岛素水平,并采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测两组孕妇血液中FoxM1基因表达。结果确诊GDM时,研究组孕妇的血清胰岛素表达水平明显高于对照组孕妇(t=12.22,P0.05);分娩后6 h,两组孕妇的血清胰岛素表达水平均下降,研究组孕妇的血清胰岛素表达水平仍明显高于对照组孕妇(t=13.67,P0.05)。确诊GDM时,研究组孕妇血液FoxM1 mRNA表达水平(2.38±0.45)明显高于对照组孕妇(1.25±0.37)(t=19.40,P0.05);分娩后6 h,两组孕妇血液FoxM1 mRNA表达水平均下降,研究组孕妇的血液FoxM1 mRNA表达水平(1.39±0.27)仍明显高于对照组孕妇(0.74±0.16)(t=20.71,P0.05)。研究组孕妇血清胰岛素表达水平与其血液FoxM1基因表达呈正相关(r=0.56,P0.05)。结论 FoxM1基因参与了GDM发病机制,且其表达与GDM孕妇血清胰岛素表达水平呈正相关。     

职业紧张对胚胎停育影响的病例-对照研究

目的探讨职业紧张与胚胎停育发生的关系。方法采用病例-对照研究,选择240例确诊的胚胎停育孕妇为病例组,同期228名正常妊娠的产妇为对照组,进行个人基本情况调查和职业紧张测量。选择其中资料完整的研究对象,对职业紧张与胚胎停育之间的关系进行2检验、t检验与非条件logistic回归分析。结果付出-回报失衡问卷显示,外在付出病例组得分明显高于对照组(P<0.01),病例组内在投入得分≥17分者有55例(22.9%),高于对照组(P=0.038);工作内容问卷显示,2组在上级支持、同事支持和社会支持得分差异具有统计学意义(P<0.05,P<0.01);logistic回归分析发现存在职业紧张的孕妇胚胎停育患病的比值比(OR)为1.801,95%可信区间(95%CI):1.040~3.119。结论胚胎停育的发生可能与职业紧张有关,社会支持、体育锻炼可能是胚胎停育的保护因素。     

平喘汤对哮喘大鼠气道转化生长因子-β1 mRNA和Ⅲ型胶原表达的影响

目的:探讨平喘汤对哮喘大鼠模型气道壁厚度及转化生长因子-β1 mRNA(TGF-β1 mRNA)和Ⅲ型胶原表达的影响及可能的作用机制。方法:将40只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、哮喘组、地塞米松组、平喘汤组,每组10只。用卵白蛋白(OVA)致敏吸入激发制备哮喘模型。在哮喘激发4周后测量肺组织的TGF-β1 mRNA和气道壁Ⅲ型胶原的表达。结果:模型组TGF-β1mRNA、Ⅲ型胶原表达明显高于正常对照组(P<0.05);平喘汤组和地塞米松组TGF-β1 mRNA、Ⅲ型胶原表达显著低于模型组(P<0.05);气道壁厚度模型组明显高于正常对照组(P<0.05);平喘汤组和地塞米松组显著低于模型组(P<0.05)。结论:平喘汤通过降低TGF-β1 mRNA的过度表达,抑制Ⅲ型胶原的沉积,减轻气道重塑的发生。     

阴道多普勒超声联合人绒毛膜促性腺激素检查预防早期妊娠胚胎停育研究

目的分析阴道多普勒超声检联合血清绒毛膜促性腺激素(β-HCG)检查在预防早期妊娠胚胎停育中的价值。方法分析2015年1月至2016年2月,湖州市妇幼保健院就诊的218例妊娠早期孕妇的临床资料,孕妇子宫动脉血流有改变为A组(153例),血流无改变为B组(65例)。根据β-HCG水平,将A组中10≤β-HCG≤50IU/L分为A1组(74例),β-HCG50IU/L者分为A2组(79例)。A1组孕妇肌注黄体酮和绒促性素,连用至孕12周;A2组孕妇未进行处理;B组孕妇治疗同A1组。比较三组孕妇干预前后血清绒毛膜促性腺激素水平和妊娠成功率。结果 A1组和A2组孕妇胚胎仍存活,B组孕妇胚胎已停止发育。A1与A2组干预前后血β-HCG水平差异均有统计学意义(t=38.431,6.739,P0.01);干预前A1组和B组的β-HCG低于A2组,差异有统计学意义(F=40.061,P0.01);干预后B组β-HCG水平均低于A1组、A2组,差异有统计学意义(F=46.362,P0.01);干预后A1组β-HCG水平低于A2组,差异有统计学意义(t=7.585,P0.01)。A1组与A2组的妊娠成功率分别为95.95%(71/74)和98.73%(78/79),均高于B组0%(0/65),差异有统计学意义(χ~2=127.481、140.023,P0.01)。结论妊娠早期孕妇根据血β-HCG检测结果及阴道超声监测子宫动脉血流的改变情况可有助于早期识别早期妊娠胚胎停育,提高妊娠成功率。     

2,3,7,8-四氯二苯并二噁英对人芳香烃受体和转化生长因子α mRNA表达的影响

目的 研究2,3,7,8-四氯二苯并二嗯英(TCDD)染毒对表皮细胞芳香烃受体(AhR)和转化生长因子(TGF-α)表达的影响.方法 利用半定量逆转录PCR技术(RT-PCR)对24 h TCDD染毒组进行AhR和TGF-α基因表达的测定,并分析两者之间的相互关系.结果 以β-actin为内参照,测定细胞中AhR和TGF-α mRNA表达的相对含量.结果 显示随着TCDD浓度的增高,细胞中AhR mRNA的相对表达量呈现下降的趋势,r=-0.548,各染毒组与对照组相比差异有统计学意义(F=4.124,P=0.021),两两比较7×10-10 mol/L组(0.0620±0.0085)和7×10-9 mol/L组(0.0518±0.0194)与对照组(0.1138±0.9227)之间的差别有统计学意义(t=-3.48,P＜0.05;t=-4.17,P＜0.01),且其相对表达量分别为对照组的55%和45%.TGF-α mRNA的相对表达量随浓度的增加则呈现上升的趋势,相关系数r=0.695(P＜0.01),各组之间差异有统计学意义(F=15.789,P=0.000),在7×10-10 mol/L组(0.1474±0.0390)和7×10-9 mol/L组(0.2133±0.0364)相对表达量与对照组(0.0561±0.0100)的差别具有统计学意义(t=4.49,P＜0.01;t=7.74,P＜0.01),且其相对表达量是对照组的2.6倍和3.8倍.同时对AhR与TGF-α mRNA相对表达水平进行相关分析,两者呈负相关,r=-0.561(P＜0.05).结论 TCDD对细胞增殖过程中可影响基因表达,AhR表现为下调,TGF-α表现为上调,且两基因表达量之间存在负相关关系.     

胚胎停育患者蜕膜和绒毛组织中MMP-9、TIMP-1的表达及意义

目的:探讨胚胎停育患者蜕膜和绒毛组织中MMP-9、TIMP-1的表达情况,分析其与胚胎停育的关系。方法:随机选择早孕胚胎停育患者37例为Ⅰ组(其中Ⅰ1组为合并感染的胚胎停育22例,Ⅰ2组为未合并感染的胚胎停育15例),Ⅱ组正常早孕患者25例作为对照组。用免疫组化(sp)法测定蜕膜及绒毛组织中MMP-9、TIMP-1的表达情况。结果:胚胎停育患者蜕膜组织中MMP-9表达水平高于对照组(P<0·05),TIMP-1的水平低于对照组(P<0·05);而MMP-9及TIMP-1的水平在各组之间均无差异(P>0·05)。结论:基质金属蛋白酶(MMP-9)在感染引起的胚胎停育中起关键性作用,MMP-9/TIMP-1的平衡失调可能是导致胚胎停育的主要原因之一。     

矽肺患者血液中转化生长因子-β1表达水平的研究

为探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)与矽肺的关系,采集16例矽肺患者和15例正常人的静脉血8 ml,应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血液中TGF-β1的含量.提取外周血淋巴细胞中的总RNA以及血清中的总蛋白质,分别用RT-PCR和Western-blot检测方法检验TGF-β1的mRNA和蛋白质表达水平.结果显示,矽肺患者血清TGF-β1为(203.14±32.38)μg/ml,正常人血清TGF-β1为(42.66±15.50)μg/ml,两者差异有统计学意义(t=19.51,P<0.01);矽肺患者血液中TGF-β1水平明显高于正常人.TGF-β1可作为矽肺患者的血清学检测指标.     

β-catenin、Smad3及TGF-β1在宫腔粘连患者子宫内膜组织中的表达及意义

目的 研究β-catenin、Smad3及TGF-β1在宫腔粘连(IUA)患者粘连组织中的表达水平,探讨其在IUA中的作用机制.方法 选择 2014年5月至2016年5月在乌鲁木齐市妇幼保健院行宫腔镜下宫腔粘连松解术的IUA患者 60 例为实验组,常规行宫腔镜检查患者60例为对照组.采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测实验组 IUA 患者的粘连组织、靠近粘连的子宫内膜和对照组的正常子宫内膜组织中β-catenin mRNA、Smad3mRNA及TGF-β1 mRNA的表达水平.结果 对照组患者正常子宫内膜组织中与实验组轻度、中度、重度IUA患者粘连组织中的β-catenin mRNA、Smad3 mRNA、TGF-β1 mRNA的表达比较,从低到高依次排序:对照组<实验组轻度粘连<实验组中度粘连<实验组重度粘连,对比差异有统计学意义(F值分别为20.35、19.62、22.32,均P<0.05),β-catenin mRNA、Smad3 mRNA、TGF-β1 mRNA在实验组IUA 患者粘连组织、靠近粘连的子宫内膜中的表达均高于对照组正常子宫内膜,差异有统计学意义(P值分别为0.038、0.003、0.004);β-catenin mRNA、Smad3 mRNA、TGF-β1 mRNA在粘连组织中的表达高于靠近粘连的子宫内膜,差异有统计学意义(P值分别为0.016、0.001、0.008).在IUA患者粘连组织中TGF-β1与Smad3的表达呈正相关(rs=0.44,P=0.01);TGF-β1与β-catenin 的表达亦呈正相关(rs=0.42,P=0.02);Smad3与β-catenin的达无相关性(rs=0.037,P=0.85).结论 在 IUA 中 β-catenin 、TGF-β1及Smad3的高表达可能与宫腔粘连的发生有密切相关;β-catenin和TGF-β1/Smad通路可能协同参与子宫内膜纤维化及促进宫腔粘连的形成.     

CYP7B1与ER在胆汁淤积孕鼠胎鼠肝脏中的表达

目的 探讨雌激素受体(ERα、ERβ)与胆固醇7α羟化酶(CYP7B1)mRNA在妊娠期肝内胆汁淤积(ICP)孕鼠、胎鼠肝脏中的表达及其意义.方法 对照组孕鼠30只注射精制植物油;研究组孕鼠30只注射17-α-乙炔雌二醇.两组孕鼠分别于妊娠第13天、17天、21天断尾采母鼠血检测,于妊娠第21天抽取母鼠、胎鼠血并提取肝脏组织.应用酶联免疫吸附试验检测两组孕鼠及胎鼠血清中胆酸水平;应用实时定量PCR技术检测两组胎鼠肝脏ERα、ERβ、CYP7B1 mRNA的表达.结果 ①在妊娠第17天、21天研究组母鼠胆汁酸水平明显高于对照组(55.7±3.2μmol/L vs 23.4±1.2μmol/L,t=2.541,P<0.05;61.4±2.4μmol/L vs 25.5±2.1μmol/L,t=2.621,P<0.05);研究组胎鼠胆汁酸水平明显高于对照组(27.4±2.3μmol/L vs 11.5±2.6μmol/L,t=2.631,P<0.05);②研究组胎鼠肝脏CYP7B1 mRNA水平明显高于对照组(2.15±0.01vs 0.25±0.02,t=2.563,P<0.05);③研究组ERα mRNA水平明显高于对照组(0.81±0.02 vs 0.35±0.01,t=2.534,P<0.01).结论 ICP孕鼠胎鼠肝细胞ERα、CYP7B1的表达升高,胆汁酸的合成与代谢调节机制存在障碍,可能是导致ICP胎儿围生儿死亡发生的原因之一.     

激活蛋白-1介导二氧化硅诱导的巨噬细胞细胞因子的表达

目的 探讨SiO2诱导小鼠巨噬细胞RAW 264.7细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和转化生长因子-β1(TGF-β1)表达改变是否与激活蛋白-1(AP-1)活化有关.方法 用AP-1的抑制剂姜黄素处理巨噬细胞后,用Western blotting检测核蛋白AP-1(c-jun/c-fos)的表达,用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测细胞上清液中TNF-α、TGF-β1蛋白的含量;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测TNF-α、TGFβ1 mRNA的表达.结果 10和20 μmol/L姜黄素处理组c-jun的核蛋白表达为1.150±0.020、1.010±0.108,c-fos的核蛋白表达为0.430±0.023、0.256±0.015,明显低于SiO2刺激组(1.550±0..029、0.860±0.036),差异有统计学意义(P《0.01),且呈剂量依赖关系.20μmo/L姜黄素处理组TNF-α、TGFo-β1蛋白表达分别为123.58±45.78、32.12±5.34,明显低于SiO2刺激组(1582.18±437.52、55.60±5.51);TNF-α、TGF-β1 mRNA表达水平分别为0.74±0.01、0.22±0.04,也明显低于SiO2刺激组(2.27±0.33、2.96±0.15),差异均有统计学意义(P《0.01).结论 SiO2刺激巨噬细胞生成TNF-α、TGF-β1与AP-1的活化有关.     

MMP-9、TIMP-1与TGF-β1在妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中的表达及意义

目的通过研究基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及其抑制物(TIMP-1)与转化生长因子β1(TGF-β1)在妊娠期高血压疾病患者胎盘中的表达,探讨其与本病发病的关系。方法选择2005年11月—2006年11月在我院住院分娩的孕妇63例,分为子痫前期轻度组、子痫前期重度组、妊娠期高血压组、正常妊娠(对照)组,采用免疫组化法检测63例胎盘标本绒毛上皮组织中MMP-9、TIMP-1和TGF-β1的表达。结果①妊娠期高血压患者与正常妊娠者MMP-9的阳性表达,差异无显著性(P>0.05),而子痫前期轻度、重度组MMP-9阳性表达明显弱于正常妊娠组(P=0.012<0.05,P=0.0<0.01);子痫前期TIMP-1的阳性表达略弱于正常妊娠,但无显著性差异(P>0.05);MMP-9/TIMP-1明显下降。②子痫前期重度组胎盘TGF-β1含量明显高于对照组(P=0.019<0.05);子痫前期轻度组、妊娠期高血压组和对照组比较差异无显著性差异(P=0.215>0.05)。③对照组和妊娠期高血压组MMP-9和TGF-β1的表达无相关性(P>0.05);但子痫前期患者,MMP-9和TGF-β1存在明显完全负相关性(r=-1.0,P=0.0<0.01)。结论妊娠期高血压疾病患者MMP-9表达及下降,使得胎盘浅着床,胎盘局部缺血缺氧;TGF-β1表达增多,可能是引发妊娠期高血压疾病的重要原因之一。     

来氟米特对转化生长因子β_1诱导的体培养的大鼠肾小球系膜细胞中Smad2表达的影响

目的观察来氟米特(leflunomide,LEF)在转化生长因子(transforming growth factor,TGF)-β_1刺激大鼠肾小球系膜细胞(glomerular mesangial cell,GMC)表达Smad2过程中发挥的作用。方法建立体外培养大鼠肾小球系膜细胞模型,经鉴定造模成功后第7代用于实验。按照对模型大鼠体外培养的肾小球系膜细胞的处理方式不同,将其分为TGF-β_1组(TGF-β_1 5 ng/mL),LEF-1组(LEF 5μg/mL+TGF-β_1 5 ng/mL),LEF-2组(LEF 50μg/mL+TGF-β_1 5 ng/mL)和对照组(无血清RPMI 1640培养液+20%胎牛血清)。分别于15 min,30 min,1 h,2 h和6 h收集标本,用间接免疫荧光法检测各组磷酸化Smad2(phosphorylation-Smad2,p-Smad2)蛋白表达变化;采用荧光半定量RT-PCR法检测各组Smad2mRNA表达变化。结果对照组磷酸化Smad2蛋白少量表达,阳性细胞率为(21.40±1.51)%。TGF-β_1组阳性细胞率为(70.00±3.23)%,30 min时表达开始升高,1 h及2 h时表达明显增高,6 h表达开始下降。各时间点LEF-1组和LEF-2组磷酸化Smad2蛋白表达下降,阳性细胞率分别为(23.60±2.80)%和(25.81±1.29)%,细胞荧光强度呈减弱趋势。与TGF-β_1组相比,LEF-1组和LEF-2组磷酸化Smad2蛋白表达下降,差异有显著意义(P0.05)。但LEF-1组和LEF-2组与对照组比较,差异无显著意义(P0.05)。肾小球系膜细胞中Smad2mRNA相对表达量,TGF-β_1组显著高于对照组,2 h时达高峰。LEF-1组和LEF-2组Smad2mRNA显著低于TGF-β_1组,差异有显著意义(P0.01);但LEF-1组和LEF-2组间比较,差异无显著意义(P0.05)。LEF-1组和LEF-2组Smad2mRNA相对表达量1h时较低,之后逐渐升高,说明随时间延长,来氟米特对体外培养的肾小球系膜细胞干预作用逐渐减弱。结论经转化生长因子-β_1刺激后,体外培养的大鼠肾小球系膜细胞磷酸化Smad2蛋白和Smad2mRNA相对表达量分别增加,来氟米特可降低Smad2蛋白和Smad2mRNA表达水平,为来氟米特的肾脏保护作用提供理论依据。