稳定过表达成纤维细胞激活蛋白的口腔鳞状细胞癌细胞株的构建

目的 构建人成纤维细胞激活蛋白（FAP）过表达慢病毒载体,转染口腔鳞状细胞癌（OSCC）细胞株SCC9,构建稳定过表达FAP的OSCC细胞株。方法 采用聚合酶链反应（PCR）技术获得FAP片段,利用基因重组技术构建过表达FAP的慢病毒载体,包埋病毒并收集上清液感染SCC9细胞株,通过流式细胞荧光分选技术（FACS）进行筛选,获得稳定过表达FAP的SCC9细胞株。结果 对阳性克隆进行酶切鉴定和基因测序证明FAP的慢病毒载体构建成功,实时荧光定量PCR和Western blot检测结果证明成功构建稳定过表达FAP的SCC9细胞株。结论 本研究有助于获得纯化FAP蛋白,为进一步研究FAP在OSCC发生发展过程中的机制奠定基础。     

透明质酸在口腔鳞状细胞癌组织中的表达

目的 本研究旨在探讨透明质酸在不同分化口腔鳞状细胞癌中的表达及意义.方法 应用免疫组织化学法检测37例不同分化程度口腔鳞状细胞癌组织中透明质酸的表达.结果 按阴性(-)、弱阳性( )、阳性( )、强阳性( )表示,并进行统计学分析.结果 透明质酸主要表达于肿瘤间质和细胞外基质,细胞膜和胞浆中染色相对较少.37例口腔鳞状细胞癌组织中,低分化鳞癌透明质酸的表达明显高于高分化鳞癌(P＜0.05),表达随肿瘤分化程度降低而增强.结论 透明质酸的表达与口腔鳞状细胞癌的分化程度有关,分化越低,其表达越强.透明质酸的高表达可能有利于病变的侵袭和转移.     

mRNA差异表达与口腔鳞状细胞癌相关研究进展

口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma ,OSCC)是头颈部肿瘤发病率较高的肿瘤,严重危害人类的生命健康;信使核糖核酸(Messenger RNA,mRNA)作为合成蛋白质的直接模板,在基因表达中起重要作用。研究发现口腔肿瘤中的mRNA有差异性表达,本文就mRNA表达的影响因素及口腔鳞状细胞癌中mRNA差异表达的研究进行一综述。     

维吾尔族口腔鳞状细胞癌患者中血清鳞状细胞癌抗原的表达研究

目的 探讨维吾尔族口腔鳞状细胞癌(OSCC)患者血清中鳞状细胞癌抗原(SCC-Ag)的表达.方法 采用化学发光法检测90例维吾尔族OSCC患者(OSCC组)和90例维吾尔族其他口腔恶性肿瘤患者(口腔非OSCC恶性肿瘤组)、101例维吾尔族口腔良性肿瘤患者(良性肿瘤组)和120例维吾尔族正常对照者(正常组)的血清SCC-Ag水平,并对其中60例OSCC和60例口腔非OSCC恶性肿瘤患者治疗前后SCC-Ag水平进行检测,分析SCC-Ag在OSCC诊断、治疗疗效中的意义.结果 OSCC组的SCC-Ag水平明显高于口腔非OSCC恶性肿瘤组(P=0.002),良性肿瘤组(P=0.001)和正常组(P=0.001).OSCC患者血清SCC-Ag阳性率为43.3％(39/90),明显高于其他3组(P=0.000 1).OSCC患者TNM晚期的术前SCC-Ag水平的表达高于早期水平(P<0.05).复发组和未复发组的术前、术后、放化疗后SCC-Ag水平相比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).手术及放化疗前后鳞状细胞癌患者血清SCC-Ag水平变化差异有统计学意义(P＜0.0 1),然而,在口腔非OSCC恶性肿瘤组治疗疗效差异无统计学意义(P>0.05).结论 血清SCC-Ag对维吾尔族OSCC患者的早期诊断敏感性不高,但在评价治疗疗效,预测肿瘤复发方面有重要的临床意义.     

口腔鳞状细胞癌组织中C-erbB-2蛋白表达的免疫组化定量分析

目的 探讨C-erbB-2蛋白在口腔鳞状细胞癌组织中表达的意义。方法 采用单克隆抗体免疫组化S-P法，对58例口腔鳞状细胞癌和12例正常口腔粘膜进行免疫组化染色，检测C-erbB-2基因的表达情况，并采用全自动图像分析仪对染色结果进行定量分析。结果 口腔鳞状细胞癌中C-erbB-2的表达高于正常粘膜，高分化口腔鳞状细胞癌表达低于中低分化者，颈淋巴结转移组高于未转移组。结论 C-erbB-2在口腔鳞状细胞癌中存在过度表达，其表达程度越高，提示肿瘤的恶性肿瘤程度越高，越容易发生转移或局部浸润。     

K_v3.4在口腔扁平苔藓和口腔鳞状细胞癌中的表达

目的:研究钾离子通道蛋白kv3.4在正常口腔黏膜(normal oral mucosa,NOM)、口腔扁平苔藓(oral lichen planus,OLP)、口腔鳞状细胞癌(squamous cell carcinoma,OSCC)中的表达及意义。方法:免疫组织化学技术检测16例NOM、20例OLP和30例OSCC组织中kv3.4的表达,采用Wilcoxon秩和检验,α=0.05。结果:kv3.4在OSCC中的表达强度高于OLP(P<0.05),kv3.4在OLP组织的表达高于正常组织(P<0.05),且糜烂型OLP中的表达高于非糜烂型OLP(P<0.05),差异均具有统计学意义。结论:kv3.4可能与OLP及OSCC的发生、发展有一定的关系。     

HERG1在口腔扁平苔藓和口腔鳞状细胞癌中的表达

目的：研究钾离子通道蛋白HERG1在正常口腔黏膜（normal oral mucosa,NOM）、口腔扁平苔藓（oral lichen planus,OLP）、口腔鳞状细胞癌（squamous cell carcinoma,OSCC）中的表达及意义。方法：免疫组织化学技术检测16例NOM、20例OLP、30例OSCC组织中HERG1的表达。采用χ2检验,P〈0.05为差异具有统计学意义。结果：HERG1在OSCC中的表达强度高于OLP（P〈0.05）,HERG1在OLP组织的表达高于正常组织（P〈0.05）,且糜烂型OLP中的表达高于非糜烂型OLP（P〈0.05）,差异均具有统计学意义。结论：HERG1可能与OLP及OSCC的发生发展有一定的关系。     

口腔扁平苔藓及口腔鳞状细胞癌Caspase-3及Bcl-2表达的研究

口腔扁平苔藓(oral lichen planus，OLP)是一种皮肤黏膜联发疾病，1972年世界卫生组织将OLP归入癌前状态。口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma，OSCC)为口腔中最常见的肿瘤之一。大量研究认为肿瘤的产生与细胞凋亡受阻有关，细胞凋亡和细胞增殖相辅相承，很多肿瘤正是由于细胞增殖与死亡的速度平衡失调造成的，失调的程度决定着肿瘤的发生和发展。     

口腔鳞状细胞癌组织的基因表达

目的研究与口腔鳞状细胞癌（OSCC）发生相关的表达阳性基因,为探究OSCC的发生机制奠定基础。方法采用美国SuperArray公司的肿瘤基因芯片（OHS-802）检测口腔正常组织和OSCC组织的肿瘤相关基因表达差异,进一步使用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）法对部分阳性基因进行验证,寻找与OSCC恶变发生、发展相关的基因。基因芯片实验采用化学发光检测试剂盒,X线胶片曝光,图片需保存为灰度（8或16位色）的电子文档,使用综合型GEArray表达分析配套软件进行完整的芯片数据分析。RT-PCR电泳结果采用Kodak凝胶成像分析系统对部分基因的表达水平进行定量,然后将其与芯片分析的数据结果进行相似性分析。结果经Kodak凝胶成像分析系统定量后,证实正常组织和OSCC组织间CLK-3、CTNNB-1、GDF-15、FKBP-8、SOCS-3、NF-1、BCL-2、XRCC-1、ACP-2共9个SupperArray阳性基因的RT-PCR结果,在表达水平上和SupperArray芯片检测方法获得的结果差异有统计学意义（P〈0.05）。OSCC发生的分子机制较为复杂,特别是与细胞周期调控基因、生长因子基因和细胞增殖分化基因关系密切。结论本研究为深入了解OSCC的发生机制奠定了基础。     

miRNA-149在口腔鳞状细胞癌中的表达及其临床意义

目的：通过对比检测口腔鳞癌患者肿瘤组织与癌旁组织miRNA-149的表达水平,分析其在口腔鳞癌中潜在的临床意义。方法：收集28例口腔鳞癌患者的肿瘤组织及其2cm癌旁组织,通过实时定量PCR反应检测miR-149在二者间的表达水平江分析其水平与口腔鳞癌患者性别、年龄、吸烟史、TNM临床分期以及病理分级之间的相关性。结果：口腔鳞癌患者肿瘤组织中miR-149的表达水平显著低于对照组,且发现miR-149的表达水平在有淋巴结转移的、TNM临床分期较晚以及病理分化较差的肿瘤中明显降低。结论：miR-149在口腔鳞癌患者肿瘤组织中表达显著下调,其表达水平与肿瘤的淋巴结浸润、转移以及病理分级有着重要的关系,从而miR-149可能会成为将来判断口腔鳞癌临床分期的一个重要的标记物。     

Claudin-1在口腔鳞状细胞癌中的表达

目的:探讨Claudin-1在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)中的表达水平、分布特征及其与临床病理因素之间的关系。方法:采用免疫组化SP法检测67例OSCC与10例癌旁口腔上皮中Claudin-1的表达信号。采用SPSS 13.0软件包进行计数资料χ2检验。结果:Claudin-1在口腔上皮中以强阳性表达为主。在高分化鳞癌中,阳性表达近似于口腔上皮,信号分布于细胞膜;在中、低分化鳞癌中,信号分布趋向细胞质,其表达水平呈递减趋势。Claudin-1在OSCC间质纤维增生区域阳性表达信号呈增强趋势;在OSCC淋巴细胞密集区表达水平升高。Claudin-1的表达与临床分期、组织分型、是否有淋巴结转移均有相关性(P<0.05)。临床分期中,Ⅲ+Ⅳ期癌组织Claudin-1阳性表达水平明显低于Ⅰ+Ⅱ期组;组织分型中,中、低分化组Claudin-1阳性表达水平显著低于高分化组;有颈淋巴结转移组,Claudin-1阳性表达水平显著低于无转移组(P<0.05)。结论:Claudin-1在OSCC不同临床分期及组织分型中均有不同程度表达,随着肿瘤分化程度降低,表达信号下调,且Claudin-1的表达水平与肿瘤细胞微环境相关。     

microRNA表达调控与口腔鳞状细胞癌

［摘要］ 微小RNA(microRNA,miRNA)属于一类小非编码RNA,可以通过作用于目标信使RNA(messenger RNA, mRNA)来调控生物进程。miRNA具有作为肿瘤生物标志物和药物作用靶点的潜能,因此阐明其在肿瘤发生发展中的作用机制十分重要。口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)是一种常见的口腔恶性肿瘤,预后不良。该文对miRNA在OSCC中的生物学功能,相关表达谱改变,调控机制和临床应用前景作一综述。     

存活蛋白在口腔鳞状细胞癌中的表达及意义

目的 探讨存活蛋白(survivin)与口腔鳞状细胞癌发生和预后的相关性.方法 收集口腔鳞状细胞癌21例(试验组)及良性肿物10例(对照组)的口腔脱落细胞、唾液、血清及组织,应用酶联免疫吸附测定和实时定量聚合酶链式反应技术检测标本中存活蛋白及mRNA表达.结果 试验组脱落细胞的存活蛋白表达质量浓度[(43.93±33.30) ng/L]显著高于对照组[(8.49±3.73)ng/L] (P＜0.01);口腔脱落细胞存活蛋白表达浓度随淋巴结转移而升高(P＜0.05);口腔鳞状细胞癌组织存活蛋白mRNA的表达通过相对定量倍数关系比较,为正常组织的3.3倍,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 存活蛋白在口腔癌的发生过程中起重要作用,口腔脱落细胞的存活蛋白检测可早期诊断口腔鳞状细胞癌并判断预后.     

口腔鳞状细胞癌中Slug及E-cadherin的表达

目的探讨口腔鳞状细胞癌(OSCC)中Slug及E-cadherin表达及差异性。方法收集口腔鳞癌标本30例,正常口腔黏膜组织20例,使用rt-PCR的方法检测Slug及E-cadherin mRNA的表达情况,分析其病理特征相关性。结果口腔鳞癌组织中Slug的表达高于正常口腔黏膜组织(P<0.05),而口腔鳞癌组织中E-cadherin的表达低于正常口腔黏膜组织(P<0.05),Slug和E-cadherin表达与TNM分期、淋巴结是否转移相关(P<0.05),而与性别、年龄、细胞分化程度、肿瘤浸润大小无关(P>0.05)。结论口腔鳞状细胞癌中Slug和E-cadherin的表达与肿瘤的发展、侵袭、转移密切相关。     

microRNA-21在口腔鳞状细胞癌中的表达与预后关系

目的:探讨microRNA-21在口腔鳞状细胞癌中的表达情况,以及与预后关系。方法:选取98例口腔鳞状细胞癌患者组织及正常黏膜组织标本,同时,选取50例非肿瘤患者黏膜组织,分别提取标本中总RNA,利用RT-PCR检测microRNA-21在口腔鳞状细胞癌及正常黏膜组织中相对表达量,探讨其与临床病理特征的关系,利用Kaplan-Meier法分析其与预后的关系。结果:microRNA-21在口腔鳞状细胞癌组织中相对表达量(2.37±1.01),显著高于正常黏膜组织中的(0.97±0.08)和非肿瘤患者黏膜组织中的(0.94±0.07),差异具有统计学意义(P<0.05),;microRNA-21表达与患者性别、年龄、肿瘤位置、肿瘤大小和TNM分期无关,而与分化程度和是否发生淋巴结转移有关(P<0.05);将microRNA-21相对表达量的中位值2.41为界,将所有患者分为高表达组和低表达组,高表达组患者中位生存期38个月,低表达组患者中位生存期44个月,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:microRNA-21在口腔鳞状细胞癌中呈高表达,且与分化程度和淋巴结转移有关,并可影响患者预后。     

口腔鳞状细胞癌与人乳头状瘤病毒感染的关系

本文用抗牛乳头状瘤病毒（ＢＰＶ）的抗血清对３１例口腔鳞状细胞癌中的人乳头状瘤病毒（ＨＰＶ）结构抗原进行检测，证明其中３０例口腔鳞状细胞癌中ＨＰＶ结构抗原一，说明口腔癌的发病与ＨＰＶ感染有密切关系，对防治ＨＰＶ感染，减少口腔癌的发病有着重要意义。     

表皮生长因子受体在口腔扁平苔藓、口腔乳头瘤及口腔鳞状细胞癌中的表达

目的:研究表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)在口腔扁平苔藓(OLP)、口腔鳞状细胞乳头瘤(SCP)及口腔鳞状细胞癌(SCC)中的表达,探讨其在口腔黏膜炎症、增生及癌发生过程中的意义.方法:用免疫组化方法检测EGFR在20例口腔黏膜扁平苔藓(单纯增生10例,伴糜烂10例)、20例口腔乳头瘤、20例口腔鳞状细胞癌及5例正常口腔黏膜中的表达.采用Fromowitz法计数阳性细胞.应用SPSS11.5软件包分析EGFR在不同病变中的表达差异.结果:EGFR在非糜烂型扁平苔藓组主要表现为弱阳性表达;糜烂型扁平苔藓组强阳性表达率为20％;乳头瘤组的强阳性表达率为25％;鳞状细胞癌的强阳性表达率为60％.扁平苔藓糜烂组和非糜烂组之间EGFR强阳性表达率有显著差异(P＜0.05);糜烂组OLP与乳头瘤组的强阳性表达率无显著差异;口腔鳞癌组的强阳性表达率显著高于扁平苔藓组及乳头瘤组.结论:EGFR可能成为口腔鳞癌化学预防作用的重要靶点.     

E—cadherin在口腔鳞状细胞癌中的表达及其临床意义

应用E—cadherin（E—CD）单克隆抗体通过免疫组织化学ABC方法，对石蜡包埋的40例口腔鳞状细胞癌标本进行分析，探讨E—CD基因的表达与口腔鳞状细胞癌临床病理的关系。结果表明：E—CD阴性表达和弱阳性表达共16例，占40％，细胞膜和细胞浆均见表达。E—CD基因表达与口腔鳞状细胞癌患者性别、年龄、肿瘤临床分期均无明显关系。而E—CD基因表达减弱或阴性口腔鳞状细胞癌患者比阳性者分化低，浸润深．易见淋巴结转移。提示E—CD表达对判断口腔鳞状细胞癌生物学行为有重要作用，是临床判断其恶性程度和制定治疗方案有价值的参考指标。