大鼠鞘内注射MCP-1中和抗体缓解骨癌痛

目的观察脊髓趋化因子单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotactic protein-1,MCP-1,或CCL2)在骨癌痛大鼠中的可能作用。方法大鼠胫骨骨髓腔接种Walker256肿瘤细胞建立骨癌痛模型。观测造模前、后大鼠机械性痛觉超敏Von Frey阈值并观察造模后d 10～12,鞘内给予MCP-1中和抗体对大鼠Von Frey阈值和脊髓小胶质细胞激活标志物(ox-42)表达的影响。结果大鼠种瘤后6～12 d,机械性痛觉超敏Von Frey阈值进行性下降(P<0.01);与对照组相比,鞘内给予MCP-1中和抗体后,脊髓ox-42的表达水平明显降低(P<0.01),Von Frey阈值的明显升高(P<0.01)。结论大鼠鞘内注射MCP-1中和抗体缓解骨癌痛,其机制可能与抑制小胶质细胞的激活相关。     

骨癌痛大鼠鞘内注射U0126的抗痛觉过敏作用

目的研究鞘内注射(it)U0126对骨癌痛大鼠机械痛敏的影响和对脊髓背角磷酸化cAMP反应元件结合蛋白(pCREB)表达的影响,探讨ERK-CREB信号转导通路在骨癌痛中的作用。方法①40只成年♀SD大鼠分为5组,假模型组Ⅰ和骨癌痛模型组Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ。建模后d 10每只大鼠分别it 10μg U0126、5%二甲亚砜10μl和U0126 0.1、1、10μg(U0126溶于10μl 5%二甲亚砜中),测机械性缩爪阈值(MWT)和双下肢负重差(WBD);②25只成年♀SD大鼠分为5组,T1、T2和T3组在制作骨癌痛模型后d 10,itU0126 10μg后1、6、24 h处死大鼠,M组为模型对照组,it5%二甲亚砜10μl后6 h处死大鼠,S组为空白对照组。免疫组化方法测定L4-6术侧脊髓背角pCREB免疫反应阳性神经元数量。结果鞘内注射U0126 1μg和10μg明显逆转了骨癌痛引起的机械痛敏;鞘内注射10μg U0126明显减少脊髓背角pCREB表达,且效果至少可持续6 h。结论 ERK-CREB通路可能参与骨癌痛。     

二磷酸盐对骨癌痛模型小鼠趋化因子CXCL1及受体CXCR2表达影响的研究

目的分析趋化因子CXCL1及受体CXCR2在小鼠骨癌痛模型中的作用,并探讨二磷酸盐对小鼠骨癌痛模型的干预机制。方法 60只小鼠随机分为3组:对照组、模型组和治疗组。股骨远端骨髓腔注射NCTC2742细胞复制小鼠股骨痛模型,治疗组给予二磷酸盐治疗,对照组和模型组给予等量生理盐水。Real-time PCR分析各组中趋化因子CXCL1和CXCR2mRNA的表达,Western blot检测CXCL1、CXCR2蛋白及肿瘤坏死因子TNF-α以及细胞凋亡蛋白Bax/Bcl2以及Caspase-3的表达。结果模型组小鼠的机械缩爪阈值较对照组有显著的增高(P<0.05,P<0.01),而药物治疗组对模型组小鼠的升高的阈值有显著的改善作用(P<0.01);与对照组比较,骨癌痛模型小鼠趋化因子CXCL1及受体CXCR2表达明显增强(P<0.01),二磷酸盐可以显著抑制CXCL1及CXCR2的表达(P<0.01);与对照组比较,骨癌痛模型小鼠肿瘤坏死因子TNF-α、促细胞凋亡蛋白Bax及Caspase-3的表达明显增高,凋亡蛋白Bcl2的表达明显降低(P<0.01),而二磷酸盐可以显著改善上述指标表达(P<0.01)。结论二磷酸盐通过下调骨癌痛模型小鼠趋化因子CXCL1及受体CXCR2表达、促进细胞凋亡发挥治疗骨癌痛模型小鼠的作用。     

大麻素受体2在胫骨癌痛大鼠脊髓的表达及意义

目的 探讨大麻素受体2(CB2)在胫骨癌痛大鼠脊髓的表达及其在癌痛产生和维持中的作用.方法 雌性SD大鼠42只,体重160～180g,随机分为5组:对照组(C组)、假手术组(S组)、骨癌痛组(BCP组)、DMSO(二甲基亚砜)组(D组)和CB2选择性拮抗剂AM630组(A组).采用右侧胫骨干骺端骨髓腔内注射5μl Walker256(4x10<'5>)乳腺癌细胞制备大鼠胫骨癌痛模型,于接种后第7d从S组和BCP组分别随机选取6只,同C组的大鼠一起处死取脊髓,采用免疫印迹技术观察脊髓CB2的表达,在接种后的第1、2及第3天按照分组D组和A组分别鞘内注射DMSO 0.15μl和溶于1%DMSO的AM630 15μg.分别于注射肿瘤前1d、注射后的第1、3、5、7、14、21d(T<,0-6>)测定机械痛阈和热痛阈.结果 免疫印迹显示C组大鼠脊髓基本没有CB2的表达,与C组及S组相比,BCP组接种后第7d脊髓CB2表达水平升高.鞘内注射AM630癌细胞后大鼠接种后肢提前出现机械痛觉过敏现象.结论 脊髓CB2参与大鼠胫骨癌痛的产生和维持.     

氟代柠檬酸对骨癌痛大鼠CB2表达的影响研究

目的研究氟代柠檬酸(fluorocitrate,FC)对骨癌痛大鼠CB2基因表达的影响及意义。方法 40只SD大鼠注射Walker-256肿瘤细胞,建立骨癌痛模型,另取10只SD大鼠作为假手术组,10只作为对照组。首先比较假手术组和骨癌痛大鼠热缩足反射潜伏期(thermal withdrawl latency,TWL)。再将骨癌痛大鼠随机分为FC组和非FC组,每组20只。FC组术后14 d注射氟代柠檬酸0.01 m L(1 nmol),非FC组注射生理盐水0.01m L,记录大鼠机械缩足阈值(paw withdrawl mechanical threshold,PWMT)。同时采用免疫印迹法测定CB2表达结果,观察灰度值。结果骨癌痛组大鼠TWL先缩短后恢复正常,假手术组基本保持不变,2者在第3 d具有统计学差异(P<0.05)。FC组大鼠注射氟代柠檬酸后,PWMT值有先升高后降低现象。假手术组和骨癌痛组大鼠CB2均明显高于基础值(P<0.05);非FC组大鼠CB2逐渐降低,第7天和第14天时显著高于假手术组(P<0.05)。FC组大鼠与非FC组相比,CB2在7d时有统计学差异(P<0.05),14 d和21 d时略低,但差异无统计学意义。结论患骨癌痛后,机体CB2表达会有一定程度增加,引起疼痛,而氟代柠檬酸可抑制CB2的表达,从而缓解疼痛。     

鞘内注射可乐定对甲醛致痛大鼠脊髓c-fos表达的影响

<正>本研究通过对甲醛致痛大鼠蛛网膜下腔给予可乐定,观察大鼠伤害性行为学反应、脊髓背角Fos蛋白表达的改变,旨在探讨可乐定在甲醛致痛模型中的作用及可能的作用机制。1材料与方法     

胍丁胺对先天嗜酒FH/Wjd大鼠饮酒行为的影响

目的：探讨胍丁胺对嗜酒FH/Wjd大鼠饮酒行为的影响。方法：利用FH/Wjd大鼠先天嗜酒的特点,采用双瓶（5％酒精和自来水）自由选择的方法,观察胍丁胺给药前后以及撤药后对FH/Wjd大鼠饮酒量、饮水量和酒精偏爱率的影响。结果：80和160 mg&#8226;kg-1胍丁胺皮下注射给药可明显抑制大鼠的饮酒量,与给药前（生理氯化钠溶液对照）相比,饮酒量分别下降25.9%和34.7%。进一步研究发现,500 mg&#8226;kg-1胍丁胺灌胃给药同样可以降低大鼠的饮酒量,与给药前（生理氯化钠溶液对照）相比,饮酒量下降41.2%。无论皮下注射或灌胃给药,大鼠的酒精偏爱率均呈现明显下降的趋势。给药期间饮水量呈现一定的上升趋势。灌胃给予胍丁胺对大鼠的进食量无明显影响。结论：胍丁胺能够降低嗜酒FH/Wjd大鼠的饮酒量,可能具有治疗酒精依赖的药理活性。     

鞘内注射盐酸奈福泮对切口痛大鼠脊髓c-fos表达的影响

<正>奈福泮作为一种新型的非麻醉性镇痛药,现在已经被广泛用于临床,其不具有非甾体抗炎药的特性,亦非阿片受体激动剂,其镇痛作用不被阿片受体拮抗药纳洛酮拮抗,也不与吗啡产生耐药性,本身无阿片类药物的依赖性,也无呼吸抑制作用和中枢抑制作用,本实验就是为了探讨在大鼠切口痛模型中鞘内注射奈福泮对脊髓背角c-fos表达的影响。Fos     

骨癌痛大鼠脊髓背角KCC2的表达及可能机制

目的研究骨癌痛大鼠脊髓背角钾离子-氯离子联合转运体2(potassium-chloride cotransporter2,KCC2)的表达变化及其可能机制。方法采用大鼠胫骨骨髓腔接种Walker256肿瘤细胞建立胫骨癌痛模型。观测种瘤前后大鼠机械缩足反射阈值(mechanical withdrawl thresthold,MWT)和脊髓背角KCC2表达水平的变化,观察痛敏形成前鞘内预注射酪氨酸蛋白激酶B(tyrosine protein kinase B,TrkB)中和抗体阻断脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BD-NF)-TrkB途径对KCC2表达和机械性痛觉超敏的影响。结果大鼠种瘤后6～12d,MWT明显下降(P<0.01),出现明显的机械性痛敏,脊髓背角KCC2蛋白水平进行性降低(P<0.01);鞘内预注射TrkB中和抗体的骨癌痛大鼠,其脊髓KCC2表达水平和MWT明显高于注射IgG和不作处理的骨癌痛大鼠(P<0.01)。结论脊髓背角的KCC2可能参与了骨癌痛的发生发展,而BDNF-TrkB途径可能介导了该作用。     

NRG1-ErbB2信号通路对骨癌痛大鼠脊髓胶质细胞及IL-1β的影响

目的探讨NRG1-Erb B2信号通路对骨癌痛大鼠脊髓胶质细胞和IL-1β的影响。方法雌性SD大鼠,随机分为3组,每组12只。Sham组(假手术组);CIBP组:大鼠胫骨内注射Walker256乳腺癌细胞构建骨癌痛模型;CIBP+PD168393组:构建CIBP模型后6 d,鞘内注入PD168393 10μg,每日1次,连续9 d,其余组鞘内注入生理盐水。接种瘤细胞后14 d,检测大鼠脊髓背角GFAP、OX42和IL-1β的变化。结果接种瘤细胞后14 d,CIBP组大鼠GFAP、OX42积分光密度值明显高于Sham组,差异有统计学意义(P<0.01),肿瘤细胞的植入能诱导大鼠同侧脊髓背角GFAP和OX42的表达显著增加,并使星形胶质细胞和小胶质细胞的胞体肥大。而给予Erb B2受体抑制剂PD168393可明显抑制脊髓背角神经化学物质的改变,GFAP和OX42的表达均明显降低(P<0.01)。CIBP组IL-1β于接种瘤细胞后14 d表达增加,明显高于Sham组(P<0.01),给予PD168393能显著抑制IL-1β表达增加(P<0.01)。结论大鼠胫骨接种瘤细胞后,脊髓背角内星形胶质细胞和小胶质细胞被广泛激活,IL-1β释放增加,阻断NRG1-Erb B2受体信号通路能有效抑制脊髓胶质细胞的表达和活化及炎症介质IL-1β的释放,从而产生镇痛作用。     

鞘内注射吗啡对切口痛大鼠脊髓兴奋性氨基酸含量的影响

目的　研究在大鼠切口疼痛模型上鞘内注射吗啡对脊髓 (L4～ 5)兴奋性氨基酸 (天门冬氨酸和谷氨酸 )含量的影响。方法　雄性SD大鼠 32只 ,随机分为 4组 ,每组 8只。组Ⅰ为假手术组 ;组Ⅱ术前 30min鞘内注射人工脑脊液 (ACSF) 2 0 μl;组Ⅲ和组Ⅳ分别在术后 30min和术前 30min鞘内注射吗啡 10 μg。按Brennan法制成大鼠足底切口疼痛模型 ,以累计疼痛评分确定疼痛行为。应用邻苯二甲醛柱前衍生高效液相色谱法测定脊髓兴奋性氨基酸含量。结果　组Ⅱ累计疼痛评分 (17± 3)明显高于组Ⅰ (P <0 0 1) ,与组Ⅱ比较 ,组Ⅲ和组Ⅳ累计疼痛评分 (组Ⅲ :3± 2 ,组Ⅳ :2 5± 2 )明显降低 (P <0 0 1)。与组Ⅰ (天门冬氨酸 :1 90±0 2 8μmol/g ,谷氨酸 :3 9± 0 5 1μmol/g)比较 ,组Ⅱ的脊髓天门冬氨酸 (2 36± 0 39μmol/g)和谷氨酸 (4 8±0 89μmol/g)的含量明显升高 ;组Ⅲ和组Ⅳ的脊髓天门冬氨酸含量分别为 2 0 0± 0 34μmol/g和 2 0 2± 0 2 9μmol/g ,均明显低于组Ⅱ (P <0 0 5 ) ;组Ⅲ和组Ⅳ的脊髓谷氨酸含量分别为 3 9± 0 5 9μmol/g和 4 0± 0 5 6μmol/g ,也明显低于组Ⅱ (P <0 0 5 )。而两用药组上述指标比较以及用药组与组Ⅰ比较均无显著差异 (P >0 0 5 )。结论　在大鼠切口疼痛模型中     

双金痛立停胶囊对骨癌大鼠炎症因子表达及骨代谢的影响

目的 观察双金痛立停胶囊对骨癌痛大鼠炎症因子表达及骨代谢的影响.方法 采用Walker 256乳腺癌细胞复制胫骨癌痛大鼠模型,选取模型复制成功的大鼠随机分为模型组、双金痛立停胶囊组,另设假手术组.从术后第13天开始灌胃给药,每天1次,共10 d.末次给药后腹主动脉采血,运用酶联免疫法(ELISA)检测血前列腺素E2(PGE2)、白细胞介素6(IL-6)、Ⅰ型胶原交联羧基末端肽(ICTP)的含量.结果 与模型组比较,双金痛立停胶囊可明显降低骨癌痛大鼠血浆前列腺素E2、白细胞介素6和血清Ⅰ型胶原交联羧基末端肽的含量(P<0.05或P<0.01).结论 双金痛立停胶囊缓解大鼠骨癌痛可能与抑制炎症因子表达、抑制骨吸收调节骨代谢平衡有关.     

三七总皂甙对大鼠脊髓损伤后iNOS表达及细胞凋亡的影响

目的探讨大鼠脊髓损伤后应用三七总皂甙对诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达及细胞凋亡的影响。方法采用Allen’s法将64,只成年SD大鼠造成脊髓中度损伤模型,再随机分为损伤组和三七总皂甙组,分别给予生理盐水及三七总皂甙注射液治疗,损伤后不同时间点(1、3、7、14d)处死大鼠,用HE染色观察损伤脊髓组织病理变化,用免疫组化染色检测iNOS阳性细胞,原位末端标记法(TUNEL法)标记凋亡细胞。结果HE染色镜检发现脊髓组织病理学改变三七总皂甙组明显轻于损伤组;两组均发现iNOS表达及凋亡细胞,且损伤组iNOS表达及神经细胞凋亡指数均高于三七总皂甙组(P<0．05)。结论三七总皂甙注射液能抑制脊髓损伤后iNOS表达及神经细胞凋亡。     

GABA and central neuropathic pain following spinal cord injury

Spinal cord injury induces maladaptive synaptic transmission in the somatosensory system that results in chronic central neuropathic pain. Recent literature suggests that glial-neuronal interactions are important modulators in synaptic transmission following spinal cord injury. Neuronal hyperexcitability is one of the predominant phenomenon caused by maladaptive synaptic transmission via altered glial-neuronal interactions after spinal cord injury. In the somatosensory system, spinal inhibitory neurons counter balance the enhanced synaptic transmission from peripheral input. For a decade, the literature suggests that hypofunction of GABAergic inhibitory tone is an important factor in the enhanced synaptic transmission that often results in neuronal hyperexcitability in dorsal horn neurons following spinal cord injury. Neurons and glial cells synergistically control intracellular chloride ion gradients via modulation of chloride transporters, extracellular glutamate and GABA concentrations via uptake mechanisms. Thus, the intracellular “GABA-glutamate-glutamine cycle” is maintained for normal physiological homeostasis. However, hyperexcitable neurons and glial activation after spinal cord injury disrupts the balance of chloride ions, glutamate and GABA distribution in the spinal dorsal horn and results in chronic neuropathic pain. In this review, we address spinal cord injury induced mechanisms in hypofunction of GABAergic tone that results in chronic central neuropathic pain.This article is part of a Special Issue entitled ‘Synaptic Plasticity & Interneurons’.     

鞘内注射TDAG8的siRNA对大鼠骨癌痛的缓解作用

目的观察鞘内注射T细胞死亡相关基因8(T celldeath-associated gene 8,TDAG8)的小干扰RNA(small inter-fering RNA,siRNA)对骨癌痛大鼠机械性痛觉过敏以及脊髓TDAG8表达的影响。方法通过将Walker256肿瘤细胞接种在大鼠左侧胫骨骨髓腔内建立骨癌痛模型。观察接种肿瘤前后大鼠机械缩爪反射阈值(paw withdrawl threshould,PWT)和脊髓TDAG8表达水平的变化;并进一步观察痛觉过敏形成后鞘内注射TDAG8的siRNA对大鼠PWT和脊髓TDAG8表达的影响。结果大鼠接种肿瘤后6～18 d,PWT明显下降(P<0.01),脊髓TDAG8的表达明显升高(P<0.01);与对照组相比,鞘内注射siRNA的骨癌痛大鼠,其PWT明显增高(P<0.05),脊髓TDAG8表达水平明显降低(P<0.01)。结论脊髓部位的TDAG8可能参与了大鼠骨癌痛的形成和发展,鞘内注射其siRNA可以通过干扰脊髓TDAG8的表达而具有疼痛缓解作用。     

复方苦参注射液治疗骨转移癌性疼痛的临床效果研究

目的 分析探讨复方苦参注射液治疗骨转移癌性疼痛(癌痛)的临床效果.方法 80例骨转移癌性疼痛患者,随机分为观察组与对照组,各40例.对照组给予硫酸吗啡缓释片治疗,观察组给予硫酸吗啡缓释片联合复方苦参注射液治疗.对比两组治疗前后各项评分、临床疗效.结果 治疗后,观察组疼痛数字分级量表(NRS)评分(1.87±0.42)分...     

鞘内注射巴氯酚对神经病理性痛大鼠的镇痛作用及其对脊髓GABA转运体-1的影响

目的研究鞘内注射GABAB受体激动剂巴氯酚(ba-clofen,Bac)对神经病理性痛大鼠的镇痛作用及其对脊髓GABA转运体-1的影响。方法建立坐骨神经结扎致神经病理性痛大鼠模型。在行为学实验部分,将32只大鼠随机分为NS组、Bac1组、Bac2组、Bac3组(n=8),分别鞘内注射生理盐水、0.1、0.3、1.0μg巴氯酚10μl,并分别于给药前、给药后0.5、1、2、4、8、12、24 h测定大鼠机械缩足反射阈值(mechanical withdrawl threshold,MWT)和热缩足反射潜伏期(thermal withdrawl latency,TWL)以及运动功能。在第2部分,将大鼠分为NS组与Bac组,鞘内分别给予0.3μg巴氯酚或生理盐水,分别于给药前、给药后1、4、8 h取大鼠脊髓腰段,免疫组织化学检测脊髓节段GAT-1免疫阳性神经元(n=6);分别于给药前、给药后30 min、1、2、4、8、12和24 h取大鼠脊髓腰段,用Western blot方法测定脊髓节段GAT-1蛋白含量(n=4)。结果鞘内注射巴氯酚后0.5～2 h,Bac1组、Bac2组与Bac3组大鼠MWT和TWL均较NS组明显升高(P<0.01,P<0.05),鞘内给药后4 h,Bac2与Bac3组大鼠MWT和TWL仍较NS组明显升高(P<0.01,P<0.05),给药后8 h,Bac3组MWT与TWL仍高于NS组(P<0.05)。与NS组和给药前比较,鞘内注射0.3μg巴氯酚后0.5～4h,大鼠脊髓节段的GAT-1蛋白含量均明显降低(P<0.01,P<0.05),大鼠脊髓背角浅层GAT-1免疫阳性染色灰度值亦明显降低(P<0.01,P<0.05),至给药后8 h,GAT-1的表达逐渐增多,与NS组和给药前相比差异均无统计学意义(P>0.05)。结论鞘内注射GABAB受体激动剂巴氯酚可减轻坐骨神经结扎致神经病理性痛大鼠的痛觉过敏,其镇痛作用可能与抑制脊髓水平GAT-1的表达有关。     

Effects of guanidine on synaptic transmission in the spinal cord of the frog

Summary The effects of guanidine on motoneurons of the isolated frog spinal cord were studied by adding the drug to the solution bathing the cord during intracellular recording. Guanidine (5·10^–4 M) did not alter the membrane potential of motoneurons.The main effect was a marked increase of the amplitudes and frequencies of small spontaneously occurring inhibitory postsynaptic potentials. The hyperpolarizing component of postsynaptic potentials evoked by stimulation of dorsal roots was also enhanced by guanidine. Higher concentrations of guanidine (5·10^–3 M) resulted in a very large and irreversible increase of the small spontaneously occurring inhibitory potentials, which now appeared in a regular, rhythmic pattern.The effects of guanidine could easily be blocked by increasing the magnesium ions (15 mM) in the bath solution.These results indicate that guanidine facilitates the release of an inhibitory transmitter in afferent terminals of the frog spinal cord either by a direct action on these terminals or indirectly by an action on nerve endings impinging on inhibitory interneurons.This work was supported by the Deutsche Forschungsgemeinschaft     

骨癌痛小鼠CT影像学及痛行为学特征

目的 观察骨癌痛小鼠CT影像学及痛行为学的改变.方法 将2×105个NCTC2472小鼠纤维肉瘤细胞注射到C3H/HeJ小鼠右侧股骨远端骨髓腔内制作骨癌痛动物模型.分别于注射前、注射后3、5、7、14、21、28d观察小鼠自发性疼痛反应,通过行走评分评价行走诱发患肢痛,热辐射刺激法测量热缩腿反射潜伏期.CT检查观察股骨破坏情况.取股骨行组织切片,HE染色光镜下观察肿瘤组织和骨结构破坏情况.结果 模型组小鼠在注射肿瘤细胞后第14天出现自发性疼痛、热痛敏现象和行走诱发患肢痛,一直持续至28d.CT检查显示有明显的骨破坏,出现病理性骨折.组织学研究显示骨髓腔内肿瘤生长,向外侵蚀破坏骨皮质.结论 从疼痛行为学、CT检查以及组织学等多方面的研究表明,小鼠注射纤维肉瘤细胞后可表现出癌痛的特点.     

海马注射白细胞介素-2对痛阈及甲醛引起的中脑导水管周围灰质和脊髓内P物质样免疫活性的影响(英文)

目的:观察海马内注射白细胞介素-2(IL-2)对痛阈、中脑导水管周围灰质(PAG)和脊髓内P物质(SP)的影响。方法:热痛测试法和免疫组化法。结果:海马内微量注射IL-2480U可使痛阈明显提高,高峰时比对照组增加93％±57％(P<0.01),足底注射甲醛引起双侧PAG SP-LI细胞减少(2.9±2.8 vs 22.1±0.7,12.3±2.0 vs 22.4±1.0,P<0.01)和脊髓同侧背角SP-LI增多(0.836±0.015 vs0.59±0.09,P相似文献