基于纳米材料角度研究石榴皮炭止泻作用物质基础

目的在石榴皮炭Granati Pericarpium Carbonisatum中发现并分离出新型纳米类成分,并通过动物实验来研究其止泻作用。方法利用高温热解法对生石榴皮进行炭化,并对炭化产物进行萃取、滤过分离和透析得到一种具有水溶性的新型纳米类成分,命名为石榴皮炭纳米类成分(GPC-NCs)。采用透射电子显微镜、高分辨透射电子显微镜、傅里叶变换红外光谱、紫外光谱、荧光光谱、高效液相色谱、X射线光电子能谱和X射线衍射对GPC-NCs进行表征。使用小鼠腹泻模型观察小鼠腹泻指数、腹泻潜伏期和肠道传输功能,以此来评价和证实GPC-NCs的止泻作用。结果从石榴皮炭中分离出来的GPC-NCs外形为类球形,粒径均匀分布在1.2~2.3 nm,晶格间距为0.321 nm,荧光量子产率为0.45%。GPC-NCs能够减少小鼠腹泻指数和腹泻潜伏期时间,并对番泻叶水煎剂所致的小肠运动功能亢进具有拮抗作用。结论 GPC-NCs的显著止泻效果,不仅为石榴皮炭的物质基础研究提供了一个新思路,也为GPC-NCs在止泻领域的潜在生物医学和医疗保健应用提供了新的见解。     

绵马贯众炭中新型碳点的发现及其止血作用研究

目的在绵马贯众炭中发现新型的纳米类成分——碳点,并研究其止血作用。方法通过对绵马贯众炭水煎液提取、分离和透析得到一种新型水溶性的纳米类成分碳点,命名为绵马贯众炭碳点(DCC-CDs)。利用透射电子显微镜(TEM)、高分辨透射电子显微镜(HR-TEM)、紫外-可见分光光度法(UV-vis)、傅里叶变换红外光谱(FT-IR)、X-射线光电子能谱分析(XPS)、高效液相色谱(HPLC)等多种仪器和方法,对DCC-CDs进行了表征。通过小鼠断尾和肝脏出血实验评价DCC-CDs的止血作用,通过测定凝血四项及血小板(PLT)数量探讨其止血机制。结果从绵马贯众炭中分离出来的DCC-CDs外形近似球形,分散度良好,粒径分布在1～7 nm。动物实验结果显示DCC-CDs具有良好的止血效果,能显著减少小鼠断尾和肝脏出血时间(P0.01)。此外,DDC-CDs也能使大鼠血液中纤维蛋白原(FIB)浓度和PLT的数量显著升高(P0.05)。结论 DCC-CDs具有止血效果,本研究为应用DCC-CDs治疗出血性疾病的研究提供新思路,也为中药有效成分的探索提供全新的思维模式。     

基于纳米技术研究葶苈子炭治疗急性肺损伤的物质基础及其机制

目的在葶苈子炭Descurainiae Semen Carbonisatum(DSC)中发现并分离出新型纳米类成分,并利用脂多糖致大鼠急性肺损伤(acute lung injury,ALI)模型来研究其保护作用及其可能机制。方法利用马弗炉高温炭化葶苈子,并对炭化产物进行提取分离和透析得到一种水溶性的纳米类成分,命名为葶苈子炭纳米类成分(DSC nano-component,DSC-NCs)。采用透射电子显微镜(TEM)、X射线光电子能谱(XPS)等对DSC-NCs进行表征,并利用CCK-8实验来评价DSC-NCs的安全性。同时,利用脂多糖诱导ALI大鼠模型来评价DSC-NCs的保护作用,通过观察肺组织病理学形态,测定血清中细胞因子白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)含量的变化以及肺组织中氧化损伤超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛的变化情况,研究DSC-NCs对大鼠ALI的保护作用及其可能机制。结果 TEM结果显示DSC-NCs外观形貌近球形,分散度良好,主要集中在2.5～6.5 nm,晶格间距为0.224nm。XPS分析显示DSC-NCs中含有C、O、N等元素,其中C、O元素占主导地位,结合红外光谱可以发现其表面官能团丰富,含有大量的羟基、羧基等基团。此外,细胞毒性实验显示DSC-NCs的安全剂量在500μg/mL以内。动物实验结果显示,DSC-NCs治疗组的肺组织破坏程度和炎性细胞浸润状态得到有效缓解,DSC-NCs能明显降低大鼠血清中TNF-α、IL-6、IL-1β的水平,升高SOD活性和减少丙二醛含量。结论 DSC-NCs对脂多糖诱导的大鼠ALI具有一定的保护作用,初步探讨其作用机制与抑制炎症细胞因子的分泌和减轻过度的氧化应激水平相关。这不仅为探索炭药的物质基础提供了新的见解,也为ALI疾病治疗药物的研究开发提供了新的途径。     

碳点荧光探针的制备及其检测金银花中绿原酸含量的研究

目的 以氯、氮掺杂碳点(Cl/N-CDs)为荧光探针,基于Cl/N-CDs和绿原酸之间的内滤效应,猝灭Cl/N-CDs的荧光,建立了绿原酸荧光检测新方法.方法 以氯化胆碱与尿素形成的低共熔溶剂及柠檬酸为原料,通过一步水热法完成碳点制备,并通过透射电子显微镜,紫外-可见分光光度法,红外光谱,X射线衍射,X射线光电子能谱和...     

乳糖-多柔比星偶联物纳米胶束体内药效学与安全性评价

目的合成乳糖-多柔比星两亲性小分子并制备成纳米胶束,并对其肝癌靶向性和体内抗肿瘤药效及安全性进行评价。方法采用薄膜水化法制备乳糖-多柔比星纳米胶束(lactose-doxorubicin nanomicelles,Lac-DOX NMs),采用动态光散射法测定其粒径,透射电镜观察形态;通过细胞摄取实验考察Lac-DOX NMs对肿瘤细胞的靶向性; CCK-8法测定纳米胶束和游离多柔比星的细胞毒性;构建BALB/c-nu小鼠皮下移植瘤模型,考察Lac-DOX NMs的体内抗肿瘤药效;通过血生化检测,考察该制剂对小鼠肝功能的影响以评价制剂的安全性。结果成功制备了乳糖-多柔比星纳米胶束(Lac-DOX NMs),粒径为(169. 2±0. 9) nm;细胞摄取实验表明,Lac-DOX NMs对Hu H-7肝癌细胞具有靶向性;细胞毒性实验测得纳米胶束和游离DOX的IC50分别为3. 596和2. 131μg·mL^-1;药效实验结果显示,Lac-DOX NMs能够显著抑制小鼠移植瘤的增长,Lac-DOX NMs高、低剂量的肿瘤抑制率分别为69. 72%和52. 40%,均高...     

中药衍生碳点研究进展

中药炭药及中药提取物经高温炭化会产生"中药炭质药物纳米粒",其过程与碳量子点(carbon quantum dots, CDs)的制备工艺类似。由于粒径小于10 nm,称之为"中药衍生碳量子点"。炭药的质量标准是"存性",以中药为原材料制备而成的CDs,不仅具有止血、抗肿瘤等功效,而且具有低毒、水溶性好、生物相容性高、光致发光性能优异等特点,可用于离子检测、药物分析传感、细胞成像、药物递送等领域。从中药衍生碳点在疾病治疗、生物传感和细胞成像等方面的最新进展进行了综述,并对其当前面临挑战和未来发展方向提出建议。     

线粒体靶向的载紫杉醇TPP-PEG-PE纳米胶束的体外评价及促肿瘤细胞凋亡研究

目的制备载紫杉醇TPP-PEG-PE纳米胶束,研究其体外释放行为,考察其线粒体靶向性及促A549肺癌细胞凋亡效果。方法采用薄膜水化法制备载紫杉醇TPP-PEG-PE纳米胶束,以载药量、包封率、粒径为考察因素,优选载紫杉醇TPP-PEG-PE纳米胶束的制备工艺参数,再对优选工艺的纳米载药系统进行表征,采用体外释药、线粒体靶向、肺癌细胞毒性和细胞凋亡实验对该载药系统进行评价。结果载紫杉醇TPP-PEG-PE纳米胶束粒径为(18.7±0.8)nm,Zeta电位为(13.4±0.5)m V,透射电子显微镜结果表明,载紫杉醇TPP-PEG-PE纳米胶束为大小较为均一的规则圆球型。线粒体靶向实验表明TPP-PEG-PE纳米胶束可以促进药物聚集在线粒体部位,肺癌细胞毒性实验显示载紫杉醇TPP-PEG-PE纳米胶束抗细胞凋亡效果良好,Hoechst染色提示凋亡肺癌细胞出现了大量形态学改变,载紫杉醇TPP-PEG-PE纳米胶束可以明显提高促凋亡Caspase-3活性以及减少抗凋亡蛋白Bcl-2和c-IAP1表达量,均显著优于载紫杉醇PEG-PE纳米胶束和紫杉醇组的实验结果(P0.01)。结论载紫杉醇TPP-PEG-PE纳米胶束具有良好的肺癌细胞线粒体靶向性和促肺癌细胞凋亡作用,是一种潜在高效的肺癌细胞线粒体靶向给药系统。     

乳糖酸修饰聚酰胺-胺树枝状大分子接枝白藜芦醇纳米颗粒的制备及体外评价

目的制备乳糖酸(LA)修饰聚酰胺-胺树枝状大分子(PAMAM)接枝白藜芦醇(Res)的纳米颗粒,并进行体外评价。方法采用发散法合成G3.0PAMAM,将末端部分羧基化(PAMAM-COOH),经酯化反应键合Res、酰胺化反应接枝LA在载体表面,制备LA-PAMAM-Res纳米颗粒,用核磁共振氢谱(~1H-NMR)、红外光谱(IR)进行表征;LA-PAMAM-Res物理包载Res制备LA-PAMAM-Res/Res纳米颗粒,并用透析法检测其包封率;HPLC检测2种纳米颗粒的载药量,激光粒度分析法考察其粒径,透析法测定其体外药物释放性能,溶血性实验评价其生物安全性;MTT法考察PAMAM、PAMAM-COOH、Res、LA-PAMAM-Res和LA-PAMAM-Res/Res的细胞毒性及抗癌活性。结果成功制备了LA-PAMAM-Res和LA-PAMAM-Res/Res纳米颗粒。LA-PAMAM-Res/Res的包封率为(75.1±2.2)%,LA-PAMAM-Res和LA-PAMAM-Res/Res的载药量分别为(7.2±0.9)%和(18.4±1.1)%,粒径分别为(126.3±3.4)nm和(251.0±15.7)nm,72 h时体外药物释放度分别为(23.83±0.43)%和(35.28±0.72)%,溶血率均低于5%,且载体PAMAM-COOH比PAMAM具有较小的细胞毒性,LA-PAMAM-Res和LA-PAMAM-Res/Res仍具有抑制肿瘤增殖活性。结论制备了能使药物缓慢释放、生物相容性良好、低细胞毒性和具有抗癌活性的LA-PAMAM-Res和LA-PAMAM-Res/Res纳米颗粒,且LA-PAMAM-Res/Res进一步提高了Res的载药量。     

基于脂肪酸代谢轮廓分析川楝子的肝毒性研究

目的从脂肪酸代谢轮廓的角度评价川楝子(TF)水提醇沉物和川楝子+延胡索(TF+CR)水提醇沉物的小鼠肝毒性。方法采用气相-质谱联用技术定量分析对照组、TF组和TF+CR组小鼠血清中15种游离脂肪酸和酯化脂肪酸,结合化学计量学方法分析小鼠给药后脂肪酸代谢轮廓的变化和生物标识物。结果血清脂肪酸定量测定结果经主成分分析表明TF给药后小鼠的血清脂肪酸代谢轮廓明显偏离正常水平,而具有保肝作用的CR可逆转这种偏离;偏最小二乘法-判别分析表明棕榈油酸、十八碳烯酸和花生四烯酸对表征TF小鼠肝毒性具有重要贡献,可作为评价TF肝毒性的生物标识物。结论 TF肝毒性与脂肪酸的代谢轮廓密切相关。     

雄黄纳米粒的制备及其靶向Survivin蛋白诱导A549细胞凋亡的研究

目的 制备雄黄纳米粒并考察其理化性质,研究雄黄纳米粒对人肺癌细胞A549增殖凋亡的影响.方法 以聚乙烯吡咯烷酮K30 (PVP)为载体,通过生物模板法制备雄黄纳米粒.采用透射电子显微镜(transmission electron microscope,TEM)、红外光谱分析、紫外光谱分析以及粒度分析等方法对所制备的纳米...     

Structural characterization,in vivo toxicity and biological activity of two new pyro-type diterpenoid alkaloids derived from 3-acetylaconitine

Objective: The transformations that occur in diterpenoid alkaloids during the process of sand frying for Chinese herbal medicine preparation have yet to be clarified. This study investigated the structural changes that take place in 3-acetylaconitine during a simulation of heat-processing and evaluated the toxicity and biological activity of the pyrolysis products.Methods: The diterpenoid alkaloid 3-acetylaconitine was heated at 180 °C for 15 min to simulate the process of sand frying. The pyrol...     

白藜芦醇纳米乳的制备及大鼠体内的药动学研究

目的制备白藜芦醇纳米乳并探讨其在大鼠体内的药动学行为。方法以油酸乙酯作为油相,聚氧乙烯氢化蓖麻油RH40为乳化剂,无水乙醇为助乳化剂,采用滴定法绘制伪三元相图以优化纳米乳处方,对所制备的白藜芦醇纳米乳进行粒径、透射电镜及红外光谱测定等理化性质的表征。大鼠ig给药后,采用HPLC测定其血药浓度,计算其药动学参数,利用DAS软件分析其药动学特征。结果白藜芦醇纳米乳处方为药物-油相-混合乳化剂-水的质量比为1∶10∶24∶65,所制备纳米乳的粒径为40 nm左右,电镜观察其形态为圆形球状结构,红外光谱结果表明白藜芦醇以活性的反式结构存在于纳米乳的油相中。与白藜芦醇混悬剂相比,白藜芦醇纳米乳在大鼠体内的血药浓度时间曲线下面积(78.89 h·μg/mL)为混悬剂(54.42h·μg/mL)的1.45倍,达峰浓度(3.29μg/mL)是混悬剂(1.70μg/mL)的1.93倍,可以提高白藜芦醇口服给药的生物利用度。结论所制备的纳米乳制剂有希望为白藜芦醇的有效递送提供新的给药途径。     

碳点的研究进展及其在鹿茸研究中应用前景分析

碳点是一种具有优异荧光性质的新兴纳米材料。相比于传统的有机染料和半导体量子点,碳点具有毒性低和生物相容性好等优点。目前,碳点在分析检测、荧光成像、药物运载等诸多领域有着广泛的应用。鹿茸是一味具有多种药效的传统名贵中药,也是罕见的具备再生能力的哺乳动物器官。鹿茸的生物学特性和药效与其化学成分有着密切联系。简要综述了碳点在荧光检测、荧光成像以及光诊疗方面的应用进展,对碳点应用于鹿茸生物学特性及其化学成分分析研究的可行性进行了探讨。     

茶皂素为乳化剂制备黄芩苷纳米乳及其促小鼠毛发生长的药效学研究

目的 以茶皂素为天然乳化剂制备黄芩苷纳米乳（baicalin nanoemulsion,Bai-NE）,并探究其对C57BL/6小鼠毛发生长的促进作用。方法 采用超声乳化法制备Bai-NE,利用单因素实验法对Bai-NE的处方和制备工艺进行优化,并对最优处方和工艺制备的Bai-NE进行理化性质和稳定性考察。以C57BL/6小鼠为研究对象,评价Bai-NE对毛发生长的促进作用。结果 Bai-NE的最佳处方为茶皂素用量为0.5%,油相用量为5%,最佳制备工艺为超声功率180W,超声时间10min,超声次数1次。制得的Bai-NE为O/W型乳液,外观均一,平均粒径为（225.1±0.6）nm,多分散指数（polydispersity index,PDI）为0.082±0.031,载药量为1.10mg/g,pH值为7.25±0.20。稳定性结果显示,Bai-NE具有良好的离心稳定性和储存稳定性。Bai-NE能显著促进C57BL/6小鼠的毛发生长。结论 茶皂素可作为一种潜在的天然乳化剂用于Bai-NE的制备,制备的Bai-NE对C57BL/6小鼠的毛发生长有促进作用。     

胡椒薄荷叶挥发油化学成分及活性分析

目的:研究胡椒薄荷Mentha piperita叶挥发油的化学成分及其生物活性,为胡椒薄荷资源的开发利用奠定基础。方法:采用超临界CO_2萃取法提取叶片挥发油,通过气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)分析其化学成分,分别采用DPPH法和卤虫幼体研究其抗氧化活性及生物毒性,纸片扩散法及埃及伊蚊幼虫毒杀法评价其抗菌活性和杀虫活性。结果:用超临界CO_2萃取法提取得到的挥发油得率为0.089%,从中鉴定了11个化学成分,已鉴定出的组分占挥发油总量的93.0%,其中芳樟醇占总挥发油的49.9%,可以认为是其主要成分;挥发油对DPPH的半数抑制浓度(IC50)0.45 g·L~(-1),对卤虫幼体的半数致死浓度(LC50)526.0 mg·L~(-1);在挥发油质量浓度为10 g·L~(-1)时,对大肠埃希菌抑菌圈直径为(9±1)mm,对金黄色葡萄球菌效果不明显;对埃及伊蚊的LC50339.6 mg·L~(-1)。结论:胡椒薄荷叶挥发油对大肠埃希菌有一定的抑制作用,在抗氧化及杀虫方面具有一定活性,但是相对较弱,不宜用于杀虫剂产品开发;此外,胡椒薄荷叶挥发油具有弱的生物毒性。本研究为胡椒薄荷的开发利用提供了科学依据。     

黄芩苷分子印迹聚合物制备及其机制分析

目的:采用沉淀聚合法制备黄芩苷分子印迹聚合物并评价其性能。方法:以黄芩苷为模板分子,丙烯酰胺为功能单体,乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂,偶氮二乙丁腈为引发剂,采用沉淀聚合法制备黄芩苷分子印迹聚合物。用透射电镜和红外光谱分别对聚合物形态和结构进行表征分析。用静态吸附、动态吸附及选择性试验考察聚合物对模板分子吸附性。结果:使用沉淀聚合法得到的分子印迹聚合物具有较好的分散性,形态均匀,粒径分布较好,并且对黄芩苷具有较高的吸附量、较快的吸附速率和高度的选择性。结论:黄芩苷分子印迹聚合物为从黄芩中高效分离活性成分黄芩苷提供新方法。     

基于析因设计的佛手散防治帕金森病作用机制探讨

目的探讨佛手散防治帕金森病(PD)的作用及相关机制。方法体内实验采用利血平模型,观察小鼠肛温和运动不能指标,考察当归挥发油和川芎挥发油及其联合应用的影响;体外实验采用荧光分光光度法,以犬尿胺为底物,检测人单胺氧化酶(hMAO)活性和抑制模式,在此基础上,采用2×4析因设计,探讨当归挥发油与川芎挥发油之间的相互作用。结果利血平实验发现联合应用当归挥发油和川芎挥发油可显著改善模型小鼠肛温下降和运动不能;酶活性实验发现当归挥发油和川芎挥发油对h MAO-A和h MAO-B均为竞争性抑制作用,两者配伍使用时对h MAO-A和h MAO-B的活性均有显著的协同增效作用。结论佛手散中的当归、川芎在防治PD中具有显著的协同增效效应,其机制可能与抑制h MAO活性有关。     

Percutaneous penetration enhancement effect of essential oil of mint (Mentha haplocalyx Briq.) on Chinese herbal components with different lipophilicity

ObjectiveTo investigate the percutaneous penetration effect of essential oil of mint from Mentha haplocalyx Briq. on the complex active components in Chinese herbal external preparations, and assess its toxicity on the skin cells.MethodsThe cytotoxicity of mint oil on HaCaT keratinocytes and CCC-ESF-1 fibroblasts was measured using an MTT assay. Five model drugs with a wide range of lipophilicity, namely osthole, tetramethylpyrazine, ferulic acid, puerarin, and geniposide, were tested using in vitro permeation studies to investigate the percutaneous penetration enhancement effect of mint oil. Secondary structure alterations of skin stratum corneum (SC) were measured using Fourier transform infrared spectroscopy (FTIR). Saturation solubilities and SC/vehicle partition coefficients of the five model drugs with and without mint oil were also determined to understand the potential mechanisms of the essential oil.ResultsHalf maximal inhibitory concentration (IC₅₀) values of mint oil were significantly higher in HaCaT and CCC-ESF-1 cell lines than values in the well-established and standard penetration enhancer Azone.ConclusionsMint oil at proper concentration could effectively facilitate percutaneous penetration of both lipophilic and hydrophilic drugs, and exhibit higher efficiency for moderate hydrophilic drugs. Mechanisms of penetration enhancement by mint oil could be explained with saturation solubility, SC/vehicle partition coefficient and the secondary structure change of SC.     

基于经皮微透析的桉油在体促渗活性及其皮肤刺激性评价

目的考察桉油作为经皮促渗剂的皮肤刺激性与在体经皮促渗活性,为其在外用制剂中的合理应用提供数据支持。方法采用CCK-8实验测定桉油对人永生化表皮细胞(HaCaT细胞)的细胞毒性,利用皮肤水分流失(TEWL)仪测定桉油对大鼠腹皮完整性的影响,评价其作为经皮促渗剂的皮肤刺激性;选择川芎嗪和栀子苷为亲脂性和亲水性模型药物,利用反向渗析法测定微透析探针对模型药物的在体回收率,测定在桉油作用下对川芎嗪和栀子苷的皮肤药动学行力的影响。结果桉油对HaCaT细胞的半数抑制浓度(IC50)为2.452 mmol/L,显著高于常用化学促渗剂氮酮的0.266 mmol/L,同时桉油作用下对大鼠皮肤TEWL值具有一定影响,但弱于氮酮,提示桉油可能具有一定皮肤刺激性,但明显弱于氮酮;大鼠在体经皮微透析实验显示,桉油对川芎嗪和栀子苷的经皮促渗倍数(ER)分别为11.40和13.79,提示其对亲脂性和亲水性药物均具良好的在体促渗效果,对亲水性药物的促渗作用稍好,虽然桉油的整体促渗效果弱于氮酮,但对川芎嗪的促渗倍数与氮酮(ER=15.89)相接近。结论桉油对亲脂性药物和亲水性药物具有良好的在体经皮促渗效果,且与化学促渗剂相比,具有相对温和的皮肤刺激性,这为其在外用制剂中的应用提供了数据支持。