血站核酸实验室质量监控及分析

正核酸检测技术具有高度敏感性和特异性,能显著缩短血液感染病毒检测"窗口期"~[1],提高隐匿性感染的检出,降低输血残余风险~[2-3]。目前,自《血站技术操作规程》(2015年版)颁布实施以来,已明确将核酸检测纳入血液检测方法之一~[4]。血站行业已实现血液核酸检测全覆盖,建立了核酸检测实验室。由于受到多方面因素的影响,无论是国际还是国内血液安全     

鼠类携带汉坦病毒的核酸检测及核酸序列分析

目的 研究国境口岸地区鼠类自然携带汉坦病毒( Hantavirus,HV)状况,为国境口岸地区鼠类防治及肾综合征出血热疫情控制提供基础数据.方法 利用分子生物学技术,通过对采集于口岸地区的鼠类样品的核酸(RNA)提取、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、凝胶电泳分析以及核酸序列分析等过程,对口岸地区鼠类携带汉坦病毒的状...     

病案质量监控系统的应用

为了加强对病案质量的检查，我院从解放军总医院BBS上下载“病案质量监控系统”。本文结合我院实际使用情况对病案质量监控系统进行讨论。     

2016-2020年日照市中心血站核酸检测实验室质量监控指标及分析

目的 通过对无偿献血者核酸检测结果进行统计分析,掌握核酸实验室质量体系运行状况,达到实验室质量体系的完善及持续改进的目的。方法 对2016-2020年日照市无偿献血者核酸检测技术NAT结果进行回顾性分析,计量资料比较采用χ²检验,设备故障率采用趋势χ²检验。变量之间两两比较采用χ²分割检验。结果 核酸共检测121 772人份,NAT拆分反应率以及NAT检测不合格率分别为29.81%和0.03%,各年份间的NAT拆分反应率(χ²=4.22,P>0.05)和NAT检测不合格率(χ²=2.94,P>0.05)比较,差异无统计学意义;NAT无效批次率为1.64%,2019年无效批次率较高,各年度比较差异有统计学意义(χ²=14.30,P<0.05);NAT无效结果率为1.74%,2016年和2017年无效结果率比较,差异无统计学意义(P>0.005),其余年份间比较差异均有统计学意义(χ²=895.10,P<0....     

医疗质量管理监控系统的应用

医院在总结信息系统应用经验的基础上,研制开发的医疗质量管理监控软件,实现了对病程的记录、下达医嘱、检验检查报告等实时全方位网上监控,通过一系列网上监控手段,控制和防止各个环节数据质量缺陷的发生,通过有效地加强医疗质量监督管理.     

核酸信号放大检测及纳米技术的应用

近年来发展迅速的核酸信号放大检测方法有效地提高了核酸检测的灵敏度，文章对枝状核酸信号放大系统(bDNA)，侵染检测(Invader)，滚环扩增方法(RCA)的检测原理、分析性能以及临床应用等相关问题进行了评述，重点描述了纳米粒子在放大核酸检测信号中的应用，并对信号放大方法与模板扩增方法进行了对比。     

浅谈核酸检测关键环节的质量控制

正河南省红十字血液中心,河南郑州450012     

核酸快速检测系统在新型冠状病毒检测中的应用评价

目的:探讨核酸快速检测系统在新型冠状病毒（SARS-CoV-2）检测中的性能与应用评价。方法:收集北京市疾病预防控制中心和中日友好医院检验科2020年2至7月的临床样本,评价核酸快速检测系统对SARS-CoV-2检测的敏感度、特异度、抗干扰能力、精密度以及临床样本检测符合率。分析敏感度的评价通过检测浓度梯度稀释的SAR...     

蜱类携带粒细胞无形体的核酸检测及核酸序列分析

目的了解蜱类自然感染粒细胞无形体(anaplasma phagocytophilum)的状况,为人粒细胞无形体病的预防、控制提供技术支持。方法利用分子生物学技术,通过对野外采集的蜱类样品的核酸(DNA)提取、聚合酶链反应(套式PCR)、凝胶电泳分析以及核酸序列分析等,对蜱类携带的粒细胞无形体进行确认。结果在大连地区采集的长角血蜱(Haemaphysalis longicornis)中检测到粒细胞无形体。序列分析结果表明,与GenBank数据库中已注册的粒细胞无形体核酸序列有高度的相似性(97%～99%)。结论我国大连地区存在蜱粒细胞无形体感染。应加强对该地区蜱类的监测和控制,防止因蜱类叮咬导致人粒细胞无形体病的暴发流行。     

血站核酸检测工作如何控制质量

随着对输血相关病原体的认识日益深化,经血传播疾病的严重性引起社会广泛关注.国家一直致力于提高病原体检测技术的发展,《血站技术操作规程》要求,血站除了使用传统的ELISA(酶联免疫吸附试验)方法检测献血者血液中各种病原体的抗原抗体之外,NAT(核酸扩增检测)作为一种新的检测策略被纳入整体检测体系中.对献血者血液进行艾滋病...     

病原菌多重核酸检测试剂盒分析性能质量评价研究

[摘要]　目的　了解我国病原菌多重核酸检测试剂盒分析性能的现状,特别是检出限性能的基本情况,为相关研发企业和医疗机构使用者提供参考。 方法　根据体外诊断试剂行业标准《细菌和真菌感染多重核酸检测试剂盒（标准号YY∕T 1725-2020）》,使用“34种细菌和真菌感染多重核酸检测试剂国家参考品（批号370026-201801）”对10种不同检测技术原理的病原菌多重核酸检测试剂盒的分析性能进行评估,包括阳性符合率、阴性符合率、重复性及检出限等,并按照国家参考品的质量标准对评价结果进行统计分析。 结果　10款试剂盒中包括4款呼吸道感染试剂盒、3款中枢神经系统感染试剂盒及3款血流感染试剂盒,检测范围或病原谱覆盖8种革兰阳性细菌、14种革兰阴性细菌及10种真菌和非典型病原体。各试剂盒的阳性符合率、阴性符合率、重复性及检出限等分析性能均符合国家参考品的质量标准。呼吸道、中枢神经系统及血流感染试剂盒病原菌谱及检出限性能差异较大,检出限的中位数分别为5×103 CFU/ml、1×103 CFU/ml及1×106 CFU/ml;各试剂盒病原菌谱中分布和出现频率较高的6种病原菌检出限中位值分别为5×102 CFU/ml（肺炎链球菌）、3×103 CFU/ml（金黄色葡萄球菌的）、1×103 CFU/ml（流感嗜血杆菌）、5×104 CFU/ml（铜绿假单胞菌）、3×106 CFU/ml（鲍曼不动杆菌）及5×104 CFU/ml（大肠埃希菌）。结论　我国已经进入体外诊断试剂注册阶段的病原菌多重核酸检测试剂盒均具有较好的准确性、特异性及重复性。同时,研发企业应注意结合临床具体的需求,设计合理的试剂盒病原菌谱,并持续优化检出限性能。     

乙型肝炎病毒核酸检测试剂临床应用的分析

目的 了解HBV/HCV/HIV联合核酸检测的临床应用.方法 使用Abbott Architecti2000化学发光检测盒对534份血浆样品进行血清学检测,Roche COBAS AmpliPrep/COBAS TaqManHBV Test试剂定量检测分别与2种联合核酸检测结果 进行比较分析.结果 81份HBsAg、HBeAg、抗-HBc 3项均阳性样品联合核酸检测均为HBV阳性,200份HBsAg阴性的样品中联合核酸检测试剂分别有11、19份检测为HBV阳性.HBV DNA定量检测>500 IU/ml的193份样品联合核酸检测试剂阳性符合率分别为96.9%、94.3%,117份样品<500 IU/ml阳性符合率分别为40.2%、45.3%,151份HBV DNA阴性样品联合试剂阴性符合率为99.3%、96.0%.结论 中国人群中存在一定比例低载量HBV携带者,联合核酸试剂作为献血员筛查的补充方法 在提高血液及其制品使用的安全性方面具有一定的临床使用意义.     

六安市手足口病肠道病毒核酸检测及流行病学分析

目的调查2008年5月～2010年4月六安市手足口病病例及其实验室检测结果,分析手足口病的流行特征,为手足口病的防治提供科学依据。方法 2008年5月～2010年4月六安市共报告手足口病病例7 365例,从不同地区、年龄、性别、职业和时间分布进行分析。同时随机采集1份肛拭子、224份咽拭子和9份疱疹液用RT-PCR进行肠道病毒核酸检测。结果每年的3～6月是手足口病发病的高峰期,1～4岁儿童是手足口病发病的重点人群,占发病总人数的76.8%(5 653/7 365)。经RT-PCR检测,2008年采集的标本全为肠道病毒71型(en-terovirus 71,EV71)感染,而2010年1～10月采集标本除EV71和柯萨奇病毒A16型(coxsackievirus A16,CA16)感染外,还有其他肠道病毒感染。7 365例手足口病病例,其中男性5 078例,占68.9%,女性2 287例,占31.1%,男女性别比为2.22∶1。结论 2008年六安市手足口病流行是由EV71引起,而2010年手足口病主要由EV71和CA16,同时还有其他肠道病毒引起。手足口病监测的重点应放在3～6月和1～4岁儿童。     

诺如病毒核酸检测及病毒基因序列分析

〔目的〕通过对国境口岸输入性感染性腹泻暴发病例的快速检测、排查和病原基因序列分析,为病人的诊断、治疗和口岸突发疫情的处置提供依据,保障国境口岸的卫生安全。〔方法〕利用分子生物学技术,通过粪便样本的核酸(RNA)提取、聚合酶链反应(RT-PCR)、凝胶电泳分析以及基因序列测定、基因序列分析等过程,对造成群体腹泻的病原种类进行确认。〔结果〕9份送检的腹泻病人粪便样本中均检测到诺如病毒特异性核酸片段。经基因序列分析,确认检测到的诺如病毒基因型属基因组Ⅰ(GⅠ)。确认造成马耳他籍船舶"蓝海探索"号暴发腹泻病例的病原为诺如病毒。〔结论〕通过核酸检测等技术手段,可快速确认传染病病原种类,为疫情控制、保障国境口岸的卫生安全提供技术支持。     

新型冠状病毒核酸检测分析

在新型冠状病毒具备较高的传染性和隐蔽性,在发作前会经历14天的潜伏期,新型冠状病毒的核酸检测中值得注意的是相当一部分疑似病例都是通过多次检测才确诊了结果,阳性患者的核酸检测阳性率不到五成,检测反馈效率不高,虽然检测仍然是有效途径,但这无疑对于检测的结果、效率和公共卫生安全问题有所影响,需要加以重视和改善。因此,本文对新型冠状病毒核酸检测进行简要分析,主要从假阴性、假阳性的引起因素出发去分析检测问题,并通过一定的实验结果对比来观察核酸检测问题,以期能够为医疗机构尤其是基层医院提供一些核酸检测工作上的帮助。     

两种新冠病毒核酸检测系统检测结果的比对分析

目的 对不同新型冠状病毒(SARS-CoV-2)核酸检测方法进行比较和分析,探讨核酸提取扩增检测一体化的实时荧光定量PCR系统的应用价值。方法 2020年1月—10月于新型冠状病毒肺炎(coronavirus disease 2019,COVID-19)复核样本库中随机抽取确诊病例和排除病例的灭活咽拭子标本,共计10份。采用盲法随机编号,同时使用全自动医用PCR分析系统GeneXpert DX system和ABI QuantStudio Dx实时定量PCR检测系统进行检测,每组均进行平行检测,利用四格表法对结果进行一致性分析。结果 检测结束后揭盲,所有样本纳入统计分析,无剔除数据。经检测,两种方法对8例新冠病毒确诊病例咽拭子检测结果均为阳性,2例排除病例咽拭子检测结果均为阴性;两种方法检测结果一致性好(Kappa系数=1,P值=0.002);使用方法A检测前处理时间为30秒,结果报告时间为48分钟;在核酸检测过程中检测人员与样本接触时间短,气溶胶危险较低,试剂盒全程密封,实验完成后标本处理安全性高。结论 方法A与方法B在新型冠状病毒核酸检测中结果一致,方法A具备操作环节简单、生物安全风险系数小、检测更为快速等优点。     

水体肠道病毒的浓集及核酸检测方法的应用

SARS传染病的流行和流感病毒引起的世界性传播流行，使我们对病毒性疾病的危害愈来愈重视。人类肠道病毒属于微小RNA病毒科，为单股RNA，约7500个碱基，包括脊髓灰质炎病毒、柯萨奇A组、B组病毒、埃可病毒、甲型肝炎病毒以及肠道病毒68—72型。环境水体作为一种疾病传播的媒介，一旦受到污染，特别是肠道病毒的污染，将发生如病毒性肝炎、病毒性腹泻、心肌炎等介水传播的病毒性疾病，给人们身体健康及国民经济建设等造成严重损失。因此，若能对环境水体（如医院排放的污水、生活污水、工业废水等）中致病病毒进行快速有效的检测和控制，则对阻断病原体传播起到非常重要的作用。本文拟对环境水体中的肠道病毒的浓集及核酸检测方法进行综述。     

江苏省新冠病毒核酸检测系统的建设及探讨

江苏省新冠病毒核酸检测系统在大规模核酸检测中发挥了重要作用,该系统具有便捷高效、灵活、完整、可靠、安全等特点.本文对该系统的建设以及业务流程、系统功能进行介绍,探讨与更多系统共享数据的方法,以为其他地区的新冠肺炎核酸检测系统建设提供参考.     

新型冠状病毒RNA核酸的检测方法研究及应用

[目的 ]　研究和建立引起严重的急性呼吸道综合征 (SARS)的新型冠状病毒RNA核酸的检测方法。　 [方法 ]　使用一步法巢式逆转录聚合酶链扩增法 (RT -PCR)。　 [结果 ]　采自临床留观、疑似和临床诊断病人的 10 46份咽漱液 /咽拭子样品中 ,3份样品SARS冠状病毒RNA核酸为阳性 ;在 482份血清样品中 ,有 5份为阳性。　 [结论 ]　一步法巢式RT -PCR能检测患者急性期咽漱液 /咽拭子和血清样品中的新型冠状病毒RNA核酸 ,但样本采集的时间和咽漱液 /咽拭子采集的质量直接影响检测结果     

核酸检测及其临床应用研究进展

随着分子生物学的发展,在核酸检测方面,旧的方法不断完善,新的方法与技术不断涌现,并且在临床应用也越来越广泛,本文就目前这些方法及其临床应用作了综述。