大鼠舌白斑癌变过程中线粒体琥珀酸脱氢酶活性变化的研究

目的:探讨大鼠口腔癌变过程中线粒体琥珀酸脱氢酶(Succinate dehydrogenase,SDH)的活性变化及其生物学意义.方法:2×10-5 4-硝基喹啉-1-氧化物(4NQO)饮水喂养Wistar大鼠9~32周建立大鼠舌癌变模型,提取30例大鼠舌癌变过程不同病理阶段的舌背组织线粒体,酶标仪检测SDH酶活性的变化.结果:在大鼠舌白斑癌变过程中,线粒体SDH活性呈逐渐下降趋势,其中,重度异常增生、鳞癌组织中SDH酶活性显著低于正常黏膜(P<0.05). SDH的基因表达及酶活性变化趋势较为一致. 结论:SDH酶活性和mRNA表达水平的下降与口腔癌发生发展相关,三羧酸循环在口腔黏膜癌变过程可能起到重要作用.     

大鼠舌癌变过程中NF-κB和cyclinD1蛋白的表达

目的：探讨大鼠口腔癌变过程中核转录因子κBp65（NF-d3p65）、cyclinDl蛋白的表达及其生物学意义。方法：0．002％4-硝基喹啉-1-氧化物（4NQO）饮水喂养Wistar大鼠9～32周建立大鼠舌癌变模型,用免疫组化sP法检测38例大鼠舌癌变过程不同病理阶段组织中NF-d3P65、cyclinD1蛋白的表达。结果：常黏膜、轻度异常增生、中度异常增生、重度异常增生、原位癌、鳞癌组织中,NF-d3的阳性率分别是20％、20％、50％、62．5％、50％和83．33％,（鳞癌与正常黏膜组织中NF-d3P65的表达有显著性差异（P〈0．05）;cyclin D1阳性率分别是20％、60％、62．5％、87．5％、100％和83．33％,重度异常增生、原位癌、鳞癌组织中cyclin D1表达显著高于正常黏膜（P〈0．05或P〈0.01）。两者的表达均与组织的病理学分级相关（P〈0．01）,两者的表达在鳞癌阶段具有相关性（P〈0．05）。结论iNF-κBp65、cydinDl蛋白表达与口腔癌发生发展相关,NF-d3通路在口腔黏膜癌变过程起重要作用,NF-κB、cyclinD1可能成为口腔癌变病变生物标志物之一。     

大鼠舌癌癌变过程中琥珀酸脱氢酶的表达变化

目的：探讨大鼠口腔癌变过程中琥珀酸脱氢酶（Succinate dehydrogenase,SDH）的表达及其生物学意义。方法：0.002%4-硝基喹啉-1-氧化物（4NQO）饮水喂养Wistar大鼠9-32周建立大鼠舌癌变模型,用实时荧光定量PCR法检测30例大鼠舌癌变过程不同病理阶段组织中SDH的表达水平。结果：轻度异常增生、中度异常增生、重度异常增生。鳞癌组织病理分级中,中度异常增生、重度异常增生、鳞癌组织中SDH表达显著低于正常黏膜（P〈0.05或P〈0.01）。SDH表达与组织的病理学分级相关（P〈0.01）。结论：SDH基因表达与口腔癌发生发展相关,三羧酸循环在口腔黏膜癌变过程中可能起到重要作用。     

芪蓝颗粒对大鼠舌黏膜癌变中Bcl-2及P53表达的影响

目的观察芪蓝颗粒对4-硝基喹啉-1-氧化物（4NQO）诱导的大鼠舌癌变的抑制及对Bcl-2蛋白、P53蛋白表达的影响。方法SD大鼠150只,随机分为癌变模型组,低、中、高剂量芪蓝颗粒干预组以及正常对照组,以4NQO饮水喂养诱导大鼠舌黏膜癌变,同时给予芪蓝颗粒干预癌变过程,取9、18、27、36周舌标本进行组织病理学观察,采用Polymer法检测大鼠舌组织中Bcl-2蛋白及P53蛋白的表达。结果芪蓝颗粒干预的各组大鼠的癌变率均低于癌变模型组（P〈0.05）。芪蓝颗粒干预各组及正常对照组中Bcl-2蛋白、P53蛋白的阳性表达明显低于癌变模型组（P〈0.01）。结论芪蓝颗粒可抑制口腔粘膜癌变,对细胞凋亡相关的Bcl-2蛋白和P53蛋白的调控可能是其抑癌机制之一。     

PTEN、p53在口腔黏膜白斑和口腔鳞癌组织中的表达及意义

目的:探讨抑癌基因PTEN、p53在口腔黏膜白斑(oralleukoplakia,OLK)和口腔鳞癌(oralsquamouscellcancer,OSCC)组织中的蛋白表达及意义。方法:应用免役组化S-P法检测10例正常口腔黏膜、25例口腔黏膜白斑(其中白斑伴上皮异常增生15例,白斑不伴上皮异常增生10例)及32例口腔鳞癌组织中抑癌基因PTEN和p53的蛋白表达情况,分析两者之间的相互作用关系及其在口腔鳞癌发生、发展过程中的作用。结果:正常口腔黏膜和白斑不伴上皮异常增生组织中PTEN蛋白全部阳性表达;白斑伴上皮异常增生组织中PTEN蛋白阳性表达率为93. 3%;OSCC组织中PTEN蛋白的阳性表达率为71. 9%,其中高、中、低分化OSCC组织中PTEN蛋白的阳性表达率分别为85. 7%、75%和33. 3%,统计学分析表明PTEN在OSCC组织中的蛋白表达与组织分化程度明显相关(P<0. 05)。正常口腔黏膜组织中p53蛋白阴性表达;白斑组织中p53蛋白的阳性表达率为48%;OSCC组织中p53蛋白的阳性表达率为56. 3%,其中高、中、低分化OSCC组织中p53蛋白的阳性表达率分别为57. 1%、58. 3%和50%,统计学分析表明p53在OSCC组织中的蛋白表达与组织分化程度无明显相关(P>0. 05)。p53阴性表达的14例OSCC组织中有5例PTEN也阴性表达。结论:OSCC组织中PTEN和p53蛋白异常表达,说明PTEN和p53基因突变或缺失     

Livin、Bcl-2在舌癌中的表达及临床意义

目的:探讨舌癌组织中Livin蛋白的表达及其与Bcl-2蛋白表达的相关性。方法:采用免疫组织化学法(SABC法)检测Livin、Bcl-2在舌癌和正常舌黏膜组织中的表达。应用SPSS 13.0统计软件对数据进行统计学分析。结果:舌癌与正常舌黏膜组织中Livin蛋白阳性表达率分别为68.89%和10%,二者有非常显著的差异(P<0.01);Livin的高表达与舌癌组织学分化程度相关(P<0.05),与颈淋巴结转移密切相关(P<0.05)。舌癌与正常舌黏膜组织中Bcl-2蛋白阳性表达率分别为60.0%和0,二者有非常显著的差异(P<0.01);经Spearman等级相关分析,Livin与Bcl-2之间呈正相关(r=0.353,P=0.027)。结论:Livin蛋白在舌鳞癌组织中高表达,显著高于正常舌黏膜组织:Bcl-2蛋白在舌鳞癌组织中高表达,而在正常舌黏膜组织中无表达:在舌鳞癌组织中Livin与Bcl-2蛋白表达呈正相关。     

口腔癌前病变、口腔鳞癌中诱导型一氧化氮合酶与p53蛋白表达及细胞增殖相互关系的研究

目的:探讨诱导型一氧化氮合酶(inducible netric oxide synthase,iNOS)在口腔鳞癌发展过程中的表达及与p53蛋白表达和细胞增殖的相互关系。方法:采用免疫组化SABC法检测10例正常口腔黏膜、8例上皮单纯增生、20例上皮异常增生和32例口腔鳞癌组织中iNOS、p53及Ki-67蛋白的表达。结果:口腔鳞癌发展过程中存在着iNOS、p53、Ki-67表达的上调;三种蛋白的表达与上皮异常增生的病理分级有关(P<0.05),与鳞癌的病理分级无关;各组中iNOS和p53表达之间均存在显著正相关(P<0.05);iNOS阳性表达的鳞癌组织中Ki-67标记指数较阴性者显著增高(P<0.05)。结论:iNOS与p53蛋白互为反馈影响,在口腔鳞癌发展过程中意义重大;鳞癌中iNOS的阳性表达可能提示该组织的快速增殖优势。     

舌鳞状细胞癌中Cyclin D1和CDK4的表达及意义

目的:分析细胞周期素D1(CyclinD1)和细胞周期素依赖激酶4(CDK4)在舌鳞状细胞癌中的表达及意义.方法:用免疫组织化学方法检测CyclinD1和CDK4在39例舌癌和15例正常舌黏膜中的蛋白表达,及其与组织学分级和颈部淋巴结状态之间的关系.应用χ2检验分析舌癌中CyclinD1和CDK4与在正常舌黏膜中表达的差异,应用Spearman等级相关分析CyclinD1和CDK4的表达关系.结果:CyclinD1、CDK4在舌癌中的阳性表达率分别为69.2%、61.5%,均高于正常舌黏膜,有显著性差异(P<0.01),CyclinD1和CDK4在舌癌中的表达成正相关(P<0.05),伴有颈部淋巴节转移组的阳性表达率高于无转移组,有显著性差异(P<0.05).结论:CyclinD1和CDK4在舌癌组织中呈过表达,并与其发生、发展密切相关.     

细胞角蛋白19和间隙连接蛋白43在4-亚基硝氧喹啉诱发大鼠舌黏膜癌变过程中表达的研究

目的 研究4-亚基硝氧喹啉（4NQO）诱发大鼠口腔黏膜癌变过程中细胞角蛋白19（CK19）和间隙连接蛋白43（Cx43）的表达,探讨口腔黏膜癌变过程中CK19与Cx43的相关性。方法 利用4NQO诱导SD大鼠的口腔黏膜癌变,运用免疫组织化学的方法检测CK19、Cx43在口腔黏膜癌变过程中各阶段的动态变化。结果 在大鼠正常舌黏膜组织中,CK19阳性染色的细胞散在分布于黏膜基底层;随着大鼠舌黏膜上皮异常增生程度的增加,CK19表达于黏膜基底上层;在口腔鳞状细胞癌（OSCC）组织中,CK19阳性染色细胞分布在黏膜各层。CK19在正常舌黏膜、轻度上皮异常增生、中度上皮异常增生、重度上皮异常增生、OSCC组织中阳性表达率分别为30.00%、50.00%、58.33%、80.00%、91.67%,差异有统计学意义（P<0.05）。在正常舌黏膜中Cx43蛋白主要表达于大鼠舌黏膜上皮细胞的细胞膜上,上皮的基底层、棘层和颗粒层呈阳性染色。随着大鼠舌黏膜上皮异常增生程度的增加,Cx43的表达明显下降。Cx43在正常舌黏膜、轻度上皮异常增生、中度上皮异常增生、重度上皮异常增生、OSCC组织中阳性表达率分别为100.00%、85.71%、66.67%、40.00%、33.33%,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 在大鼠舌黏膜癌变过程中,CK19蛋白表达水平随病变程度加重显著升高,提示CK19与口腔上皮细胞的癌变有关;Cx43蛋白表达水平随病变程度加重显著下降,Cx43表达下降是口腔黏膜癌变的早期事件。CK19与Cx43蛋白表达呈负相关,CK19和Cx43的联合检测对OSCC的早期诊断有重要的作用,有利于提高OSCC早期诊断的灵敏度和特异性。     

survivin在口腔鳞状细胞癌中的表达及其与 bcl-2,P53,bax表达之间的关系

目的初步探讨口腔鳞状细胞癌中凋亡抑制蛋白survivin的表达和临床意义,以及survivin的表达与bcl-2,P53,bax表达之间的关系。方法采用免疫组化二步法,DAB染色。27例口腔鳞癌和1例乳腺癌阳性对照病例手术前均未进行放疗、化疗或生物治疗。结果27例口腔鳞癌组织中survivin阳性表达率为88.89%(24/27),11例正常组织中survivin没有表达。在口腔鳞癌不同的临床病理分级survivin的表达有差异(P<0.05),其表达随着临床病理分级的增加而增加。Survivin在有淋巴结转移者阳性表达率(100%)高于无淋巴结转移者(82.35%),但统计学比较无差异(P>0.05)。口腔鳞癌中survivin的表达在不同的年龄组和性别间无差异(P>0.05),而在不同部位的鳞癌中表达有差异(P<0.05)。口腔鳞癌中survivin的表达和bcl-2,突变型P53的表达成正相关,(P<0.05),而与bax的表达成负相关,(P<0.05)。结论①Survivin可作为口腔鳞癌诊断的一项重要指标;②Survivin可作为口腔鳞癌基因治疗和免疫治疗的靶分子;③在口腔鳞癌基因治疗方面可以考虑协同抑制突变型P53和bcl-2的表达,或者提高bax的表达来提高疗效。     

Increased survivin expression in high-grade oral squamous cell carcinoma: a study in Indian tobacco chewers

BACKGROUND: Oral cancer is one of the five leading sites of cancer in the Indian population. In the present study we analyzed the expression of apoptosis regulating genes, viz. survivin, Bcl-2, Bax and p53 in precancerous and cancerous lesions of the buccal mucosa of Indian tobacco chewers. METHOD: Paraffin-embedded tissue samples from 38 patients with primary oral squamous cell carcinoma (OSCC) and 17 patients with leukoplakia were used. The expression of survivin, Bcl-2, Bax, and p53 was evaluated using immunohistochemical staining method. RESULTS: Thirty-six percent OSCC were found to be positive for nuclear p53 staining while none of the precancerous lesions showed p53 positivity. Survivin, Bcl-2 and Bax expression was found to increase with increased grade of malignancy. Increase in survivin expression was statistically most significant (P < 0.001). CONCLUSION: Increased expression of anti-apoptotic survivin in high-grade tumors suggests that survivin is likely to contribute significantly to apoptosis resistance in response to therapy.     

口腔癌前病变细胞凋亡状况及Bcl-2、Bax表达的研究

目的 :通过对口腔白斑、扁平苔藓病变发展及癌变过程中细胞凋亡状况和凋亡相关蛋白表达水平的研究 ,探讨口腔白斑、扁平苔藓的癌变机理及病变机制。方法 :采用原位末端转移酶标记法及免疫组化法 ,观察分析 10例正常口腔黏膜上皮 ,18例扁平苔藓 ,2 3例白斑 ,2 2例口腔鳞癌上皮组织中细胞凋亡状况及凋亡相关蛋白Bcl- 2、Bax的表达水平。结果 :上皮 (轻 ,中 ,重 )不典型增生 ,鳞癌及糜烂型扁平苔藓的凋亡指数均高于正常 (P <0 .0 1)。Bcl- 2在白斑、扁平苔藓上皮细胞层无异常表达 ,但在扁平苔藓固有层淋巴细胞浸润处过度表达 ,在鳞癌组织中显高表达 (P <0 .0 1)。Bax在上皮单纯增生、轻、中度不典型增生和鳞癌及糜烂型扁平苔藓组织中显过度表达 (P <0 .0 5 )。结论 :白斑、扁平苔藓的病变发展及癌变过程中 ,上皮细胞凋亡状况发生了改变 ,Bax参与了白斑癌变的早期事件。扁平苔藓的发病机制与Bcl- 2、Bax在特定部位的过度表达有关     

凋亡蛋白Bcl-2、Bax在白斑、口腔扁平苔藓中的表达

目的:观察凋亡蛋白Bcl-2、Bax在白斑、口腔扁平苔藓上皮细胞中的表达,探讨其在口腔白斑、口腔扁平苔藓癌变过程中的作用机制。方法:采用免疫组化法检测10例正常口腔黏膜上皮、18例口腔扁平苔藓、23例白斑、22例口腔鳞癌上皮组织中凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达水平。结果:Bcl-2在白斑、口腔扁平苔藓上皮细胞层无异常表达,但在口腔扁平苔藓淋巴细胞浸润带过度表达。Bcl-2在鳞癌组织中呈高表达,与正常黏膜相比有显著性差异(P<0.05)。Bax在上皮单纯增生、轻度、中度不典型增生和低分化鳞癌及糜烂型口腔扁平苔藓组织中呈过度表达,与正常黏膜相比有显著性差异(P<0.05)。结论:Bax参与了口腔白斑癌变的早期事件,而Bcl-2在不典型增生转化为鳞癌的阶段并未发生作用。口腔扁平苔藓的发病机制可能与Bcl-2抑制淋巴细胞凋亡,使细胞免疫亢进,从而刺激上皮细胞Bax过度表达,诱导角朊细胞凋亡有关。     

生存素、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3在口腔癌前病变及口腔癌中的表达

目的 探讨生存素(survivin)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)在口腔癌发生中的作用,以期为口腔癌的监测和治疗提供参考.方法 选取首都医科大学口腔医学院病理科存档石蜡标本45例,其中口腔白斑伴上皮轻-中度异常增生16例,口腔白斑伴上皮重度异常增生12例,口腔高-中分化鳞状细胞癌17例;正常口腔黏膜组织10例.采用免疫组化SP法对生存素、caspase-3的表达进行检测;脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的原位缺口末端标记法对细胞凋亡指数进行检测.结果 生存素表达在正常黏膜、白斑伴上皮轻-中度异常增生、白斑伴上皮重度异常增生及口腔癌中逐渐增加,阳性细胞率分别为(1.05±1.21)%、(6.06 ±4.87)%、(12.49 ±8.41)%和(21.89±10.45)%;caspase-3的表达在3个病例组中逐渐下降,正常对照、白斑伴上皮轻-中度异常增生、白斑伴上皮重度异常增生及口腔鳞状细胞癌组阳性细胞率分别为(12.37 ±5.48)%、(19.51 ±13.15)%、(9.76±7.83)%和(6.08 ±6.91)%;正常对照、白斑伴轻-中度异常增生、白斑伴重度异常增生及口腔鳞状细胞癌组凋亡指数分别为(0.89 ±0.46)%、(1.29 ±0.63)%、(0.65 ±0.40)%和(0.21 ±0.12)%,前3组与口腔鳞状细胞癌组相比差异有统计学意义(P<0.05).结论 生存素在口腔癌的发生过程中起重要作用,随着生存素表达的增加,caspase-3和凋亡指数呈下降趋势;生存索可能通过抑制caspase-3的表达,从而抑制细胞的凋亡,促进口腔癌的发生.     

Survivin, a potential early predictor of tumor progression in the oral mucosa

Survivin is a recently described apoptosis inhibitor selectively over-expressed in most tumors. Immunohistochemistry was used to investigate a potential role of survivin as an early predictor of malignant transformation in precancerous and cancerous lesions of the oral cavity. Survivin was present in 10/30 cases (33%) of oral precancerous lesions without malignant progression, and in 15/16 cases (94%) of oral precancerous lesions evolved into full-blown squamous cell carcinoma. Tumors that progressed from these precancerous lesions retained widespread survivin positivity (100%). Variations among group means were highly statistically significant (p < 0.001). No significant correlation was found between survivin expression and the degree of dysplasia. High expression of cytoplasmic/nuclear survivin is an early event during oral carcinogenesis and may provide a useful tool for the identification of precancerous lesions at higher risk of progression into invasive carcinoma.     

P53 expression and clinical significance in oral squamous cell carcinoma]

P53 protein expression was investigated in oral squamous cell carcinomas and oral premalignant lesions by monoclonal antibody Do-1 and immunohistochemistry technique. 4 of 12 (33.3%) samples of severe epithelial dysplasia and 25 of 44 (56.8%) samples of squamous cell carcinoma expressed P53 protein while all the normal mucosa, mild and moderate epithelial dysplasia were negative. The P53 expression in carcinomas was associated with differentiation, lymph node metastasis and tumour stage. This result indicated that P53 genic mutation might be an early event in oral mucosa carcinogenesis and related to oral tumor progression. Detection of P53 protein probably has clinical significance in identifying the premalignant lesions of oral mucosa and predicting the prognosis of oral carcinomas.     

Survivin在口腔鳞癌组织中的表达及其与COX-2相关性研究

目的:探讨凋亡抑制基因Survivin在口腔鳞癌组织中的表达及其与COX-2表达的相关性。方法:运用S-P免疫组化技术,检测Survivin和COX-2蛋白在50例口腔鳞癌组织、10例正常口腔黏膜组织中的阳性率。结果:Survivin蛋白在10例正常口腔黏膜组织中呈阴性,而在50例口腔鳞癌组织中有42例阳性,占84%,差异有极显著性差异(P<0.01),COX-2蛋白在口腔鳞癌组织中的阳性率为86%(43/50)。Survivin蛋白阳性率与年龄和性别不相关,而与COX-2蛋白阳性呈正相关(P<0.05)。Survivin蛋白在低分化癌组织中的表达比在高分化癌中高,但在统计学上无明显差异性。结论:肿瘤组织中Survivin蛋白的高阳性表达对口腔鳞癌的发生发展起重要作用;COX-2蛋白在口腔鳞癌组织中也有高阳性表达,并与Survivin有相关性。两者可能存在共同的激活机制,从而抑制口腔鳞癌细胞的凋亡。