米诺环素对急性视神经炎大鼠视网膜神经节细胞的保护作用

目的:探讨米诺环素对大鼠视神经炎视网膜神经节细胞(RGCs)的影响,并与甲基强的松龙比较。方法:选取22只雌性Wistar大鼠随机分为正常对照组和实验组,实验组又分为实验对照组(EAE组)、米诺环素组、甲基强的松龙组(MP组)。HE染色观察视神经病理改变,TUNEL法检测RGCs凋亡率。结果:EAE组视神经纤维空泡样变性,轴突不规则肿胀,大量炎性细胞浸润,轴突内空泡样变性,髓鞘松解脱落,微丝微管消失,EAE大鼠视神经病理变化符合脱髓鞘性视神经炎改变。正常大鼠几乎未见RGCs凋亡,EAE组、米诺环素组、MP组较正常组相比,差异均有显著统计学意义(P<0.01),EAE组、MP组较米诺环素组相比,差异均有统计学意义(P<0.05),MP组与EAE组间的差异有统计学意义(P<0.05)。结论:采用豚鼠脊髓匀浆诱导建立大鼠EAE模型,其视神经病理学改变符合脱髓鞘性视神经炎的表现。米诺环素可抑制脱髓鞘性视神经炎RGCs凋亡,而甲基强的松龙对脱髓鞘性视神经炎RGCs无直接保护作用。     

急性视神经炎冲击疗法的临床研究

目的 评价静脉滴注甲基强的松龙（intravenous methylprednisolone，IVMP）治疗急性视神经炎（acute optic neuritis，AON）的临床疗效及疗效的影响因素。方法 总结分析我院2002～2004年住院116例（176眼）患者的临床资料。结果 （1）IVMP治疗后患者的视力、视野、眼底、视觉诱发电位均有不同程度的改善（P〈0．01）。（2）IVMP的疗效受诸多因素的影响：5～14岁年龄段疗效最好（X^2=13．10，P（0．05）。就诊时机在15天之内效果好（X^2=29．51，P〈0．01）。就诊时视力与IVMP疗效之间有显著相关性（X^2=18．69，P（0．05）。其中以0．2～0．5视力组疗效最好。头部MR1无病灶的患者IVMP疗效好（X^2=6．87，P（0．05）。发病初有眶周疼痛的患者，对IVMP的反应好（X^2=7．42，P（0．05）。另一方面，不同性别对IVMP疗效影响差异无显著性（X^2=3．66，P〉0．05）。脑脊液检查结果与IVMP疗效之间无显著相关性（OB组P〉0．05，MBP组P〉0．05，IgG组P〉0．05）。结论 大剂量IVMP治疗急性视神经炎合理有效。     

甲基强的松龙冲击疗法治疗急性视神经炎

我们对1998～2001年急性视神经炎患者28例,采用大剂量甲基强的松龙冲击疗法,并与常规剂量地塞米松疗法24例进行对照,报道如下。1资料与方法1.1 一般资料 治疗组28例(46眼),男性19例,女性9例;年龄16～35岁,平均23.4岁。双眼球后视神经炎10例(20眼),单眼6例,双眼视神经乳头炎8例(16眼),单眼4例。其中4例发病时间为1个月以上,其余均为3～15天,视力为无光感至O.15。对照组24例(44眼),男15例,女9例;年龄17～38岁。2例发病时间为1个月以上,其余为2～13天,视力为无光感至0.1,双眼球后视神经炎1 5例(30眼),单眼2例,双眼视神经乳头炎5例(10眼),单眼2例。     

甲基强的松龙冲击疗法治疗失明的急性视神经炎

14例24眼失明的急性现神经炎经一般治疗无效后，采用静脉内大剂量甲基强的松龙冲击疗法，取得了满意的疗效。随访6至12月无复发。表明甲基强的松龙冲击疗法疗效高、作用快、副作用少、无复发，值得推广设究。     

急性视神经炎与多发性硬化视神经功能障碍的临床研究

目的 探讨急性视神经炎(AON)与多发性硬化(MS)视神经功能的改变特点及治疗.方法 采用x2检验与t检验对患者视神经功能改变的特点进行分析.结果 (1)视神经功能检查:AON及MS均有视力下降;不同程度的视神经萎缩、视神经乳头水肿表现;客观检查显示视野损害、对比敏感度下降、色觉异常;二者进行比较在视力下降及视神经乳头水肿方面差异均有显著性;AON及MS的诱发电位检查均存在异常,表现在P100潜伏期延长,两组相比差异有显著性意义(P＜0.05).(2)脑脊液免疫球蛋白检查:视神经炎鞘内IgG合成率低于MS(P＜0.01).(3)AON及MS经大剂量肾上腺素糖皮质激素及时治疗后,视力恢复到0.5以上者约31.2%～36.3%.结论 AON是MS的最常见症状之一,视神经炎与MS视神经脊髓炎型的视神经损害发生频率高且程度重,迫切需要对AON患者进行早期诊断,并及时给予大剂量肾上腺素糖皮质激素治疗.     

糖皮质激素联合复方樟柳碱治疗急性视神经炎临床分析

目的评价甲基强的松龙联合复方樟柳碱(compound anisodine,CA)治疗急性视神经炎(optic neuritis,ON)的效果。方法对1998年1月至2010年1月在我院收治的44例(58眼)ON患者的病案资料进行回顾性分析。结果甲基强的松龙治疗ON有效率为57.14%,甲基强的松龙联合CA治疗ON有效率为83.33%,两种治疗方法比较有统计学意义(=4.7947,<0.05)。结论甲基强的松龙联合CA治疗ON的效果优于甲基强的松龙单独治疗组。     

以急性视神经炎首发的多发性硬化视神经功能障碍分析

目的 探讨以急性视神经炎(acute optic neuritis,AON)为首发的多发性硬化(multiple sclerosis,MS)视神经功能的改变特点,及时治疗并尽大可能恢复视神经功能.方法 对每例以视神经炎为首发的MS患者行视力、眼底、视野及视诱发电位检查,部分患者行CT或者MRI,脑脊液测定和寡克隆区带检查.采用χ2检验与t检验对患者视神经功能改变的特点进行分析.结果 (1)视神经功能检查:所有患者均有视力下降;不同程度的视神经萎缩、视神经乳头水肿表现;客观检查显示视野损害、视诱发电位、色觉异常;与无伴AON的MS患者进行比较,在视力下降及视神经乳头水肿方面差异均有统计学意义;视诱发电位检查均存在异常,表现在P100潜伏期延长,AON组异常率为63.6%～72.7%,无伴AON的MS组为21.4%～28.5%,两组相比差异有显著性意义(P＜0.05).(2)脑脊液免疫球蛋白检查:视神经炎鞘内IgG合成率低于无伴AON组(P＜0.01).(3)所有患者经大剂量肾上腺素糖皮质激素及时治疗后,视力恢复到0.5以上者约31.2%～36.3%.结论 AON是MS的最常见症状之一,视神经炎与MS视神经脊髓炎型的视神经损害发生频率高且程度重,迫切需要对AON患者进行早期诊断,并及时给予大剂量肾上腺素糖皮质激素治疗.     

米诺环素对大鼠视网膜诱导型一氧化氮合酶表达的影响

目的探讨米诺环素对大鼠视神经损伤后的保护作用。方法观察米诺环素对诱导型一氧化氮合酶（iNOS）表达的影响。成年SD大鼠54只（右眼54只）,随机分为正常组6只（右眼6只）、实验组24只（右眼24只）、对照组（右眼24只）。后两组均制备右眼视神经钳夹伤模型,伤后1h分别给予45mg／kg米诺环素和等量生理盐水腹腔注射,此后1次／d。于伤后1、3、7、14d取材,观察视网膜组织形态学变化,利用计算机图像分析技术对经免疫组织化学染色后视网膜组织中iNOS表达的平均光密度值进行半定量检测。结果1d、3d,7d及14d实验组iNOS表达水平明显较对照组降低（t1d=9．497、t3d=11．203、t7d=15．622、t14d=4．889,均P〈0．001）。结论米诺环素可通过抑制视神经钳夹伤后视网膜组织中iNOS的表达,而对损伤视神经起到抗氧化和抗凋亡作用。     

急性视神经炎临床特征和疗效分析

目的:观察和分析54例(81眼)急性视神经炎患者资料,探讨其临床特点和治疗效果。方法:回顾性研究1996-10/2007-10入住我科的急性视神经炎患者54例(81眼)的发病原因、视力、瞳孔运动障碍、眼底、视野和视诱发电位(visual evoked potential,VEP)的改变,治疗效果和预后。结果:急性视神经炎发病原因较多,其中多发性硬化占9%,瞳孔运动障碍者占63%,以相对瞳孔传导阻滞(rela-tive afferent papillary defect,RAPD)为主。急性视神经乳头炎(acute neuropapillitis)患者眼底均有不同程度的改变。视功能损害严重,视野表现多种改变,以中心暗点多见,占78%。VEP异常率高,以潜伏期延长为主,占73%。采用以静脉滴注甲基强的松龙(intravenous methylprednisolone,IVMP)为主的综合治疗后,患者视力显著提高,治愈率为62%,总有效率为93%。治疗效果与发病原因、视神经炎分型无关,与就诊时间有关,就诊时间越快,治疗效果越好。结论:急性视神经炎发病原因多样,视功能损害重,但治疗效果较好,及时诊断和治疗是提高视功能的关键。     

右美沙芬对糖尿病视网膜神经病变中Caspase-3表达的影响

目的 观察右美沙芬对糖尿病大鼠视网膜神经病变中Caspase-3表达的影响.方法 健康成年Sprague Dawley大鼠48只,12只作为正常对照组(D组),36只大鼠链脲佐菌素腹腔注射建立糖尿病大鼠模型,并随机分为糖尿病模型组(A组),10 mg·kg-1右美沙芬治疗组(B组;造模成功后一次性腹腔注射10 mg·kg-1右美沙芬),30 mg·kg-1右美沙芬治疗组(C组;造模成功后一次性腹腔注射30 mg·kg-1右美沙芬),每组各12只.各组分别于4周末、8周末各处死大鼠6只,行免疫组织化学法检测视网膜组织Caspase-3蛋白的表达.结果 视网膜Caspase-3光密度值:A组4周、8周时分别为0.256±0.031和0.374±0.234,B组分别为0.244±0.122和0.352±0.152,C组分别为0.174±0.021和0.256±0.138,D组分别为0.074±0.018和0.072±0.233.A组4周Caspase-3蛋白表达主要见于神经节细胞层,8周时阳性表达进一步增加,扩展到内核层.C组Caspase-3表达变化规律与A组基本一致,但4周、8周时阳性表达量均低于A组(均为P＜0.05),A组与B组间4周和8周时Caspase-3阳性表达量差异均无统计学意义(均为P＞0.05).D组4周、8周时大鼠视网膜上几乎无Caspase-3阳性表达.结论 早期糖尿病大鼠视网膜Caspase-3参与了糖尿病视网膜病变的发病机制,右美沙芬可以抑制Caspase-3蛋白的表达,对糖尿病视网膜病变有一定的治疗作用.     

大豆黄酮玻璃体腔注射对大鼠视神经损伤的影响

目的：大豆黄酮(Daidzein)玻璃体腔内注射是否对视神经急性损伤有保护和修复作用。

方法：SD雄性大鼠72只,建立大鼠急性视神经钳夹损伤模型,随机分为正常组、PBS阴性对照组、大豆黄酮治疗组(10μmol/L,100μmol/L,1 000μmol/L)、鼠神经生长因子(mNGF,100ng/mL)阳性对照组; 玻璃体内注射3d后处死各组大鼠,用组织病理(HE)、免疫组化检测以及Western Blot分析来观察和评价视网膜形态变化及进行各组间视网膜Caspase-3蛋白和GAP-43蛋白表达的比较。

结果：与正常组和阴性对照组相比,不同浓度的大豆黄酮各治疗组和阳性对照组的视网膜形态结构较完整,Caspase-3蛋白的表达相对降低,GAP-43蛋白的表达相对较高,其差异有统计学意义(P<0.05)。

结论：大豆黄酮玻璃体腔注射对大鼠急性视神经损伤具有修复和保护作用。     

α-硫辛酸对视网膜缺血再灌注损伤中Caspase-3表达的影响

目的观察大鼠视网膜缺血再灌注损伤(retinal ischemia-reperfusion injury,RI-RI)过程中α-硫辛酸对Caspase-3表达的影响。方法采用升高眼压的方法制作实验性RIRI的大鼠模型。将60只SD大鼠随机分为正常组、单纯α-硫辛酸组、单纯缺血再灌注组及α-硫辛酸干预组,同时后3组根据再灌注时间的不同分成1d、3d、7d组,HE染色光镜观察视网膜组织变化,应用SABC免疫组织化学法检测大鼠RIRI后视网膜组织Caspase-3表达的变化。结果正常组及单纯α-硫辛酸组视网膜组织Caspase-3不表达。单纯缺血再灌注组视网膜在再灌注后1d时Caspase-3表达显著,3d表达已明显下降,7d进一步降低。α-硫辛酸干预组各观察指标变化趋势基本与单纯缺血再灌注组相似,但表达明显减弱,2组相比较,于再灌注1d和3d时差异有统计学意义(P<0.05)。结论Caspase-3参与了RIRI的形成,α-硫辛酸可以抑制Caspase-3蛋白的表达;α-硫辛酸在RI-RI中可能通过抑制细胞凋亡而达到其保护作用。     

加味补阳还五汤在大鼠视神经损伤修复中的作用研究

目的　探讨加味补阳还五汤在视神经挫伤大鼠损伤修复中的具体作用机制,为临床提供实验依据。方法　30只SD大鼠随机分为药物组、生理盐水组及空白对照组,前两组大鼠右眼建立视神经损伤模型后分别给予加味补阳还五汤、生理盐水灌胃,空白对照组不做处理。分别于造模前及造模后1 d、1周、2周、4周、6周,各组均行闪光视觉诱发电位观察P波振幅和潜伏期的变化,HE染色观察视网膜组织形态学改变,免疫组织化学染色检测视网膜Caspase-3蛋白表达的变化。结果　闪光视觉诱发电位结果显示,造模后4周、6周,药物组P波潜伏期明显缩短,P波振幅趋于平稳,与生理盐水组相比差异均有统计学意义（均为P＜0.05）。HE染色结果显示,空白对照组视网膜组织结构层次清晰,药物组和生理盐水组造模后可见视网膜组织结构紊乱,明显水肿;随时间推移与生理盐水组相比,药物组的视网膜组织形态逐渐恢复,视网膜神经节细胞形态逐渐接近空白对照组。免疫组织化学染色结果显示,生理盐水组及药物组均在造模后1 d Caspase-3蛋白开始表达,造模后1周达到峰值,而后逐渐减少;与生理盐水组相比,造模后2周、4周、6周药物组Caspase-3蛋白表达均显著降低（均为P<0.05）。结论　加味补阳还五汤在大鼠视神经损伤后能改善视神经的损伤,促进视神经修复。     

PEDF对视神经夹伤模型大鼠视网膜组织中NO和Caspase-3表达的影响

目的:分析色素上皮衍生因子(pigment epithelium-deriverd factor,PEDF)对视神经夹伤模型大鼠视网膜组织一氧化氮(nitrogen monoxide,NO)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(cysteine-containing aspartate-specific proteases-3,Caspase-3)表达的影响.方法:选择60只SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、PEDF组各20只,除空白对照组外,均建立视神经夹伤大鼠模型,均取左侧眼球为标本,造模成功后,模型组玻璃体腔内注射平衡盐溶液5μL,PEDF组玻璃体内注射5μL PEDF(浓度0.2μg/μL).2wk后取视网膜组织,行HE染色后光镜下观察视网膜形态的变化,采用比色法测定NO含量的变化,采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法、蛋白印迹法(Western-blot)检测Caspase-3 mRNA和蛋白表达情况.结果:HE染色发现,空白对照组视网膜组织排列整齐且清晰,视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)呈单层细胞排列,细胞为卵圆形,大小均匀,分布均匀,细胞核清晰,排列紧密,边界清晰;模型组视网膜组织结构稀疏,RGCs呈空泡样变化,整体细胞数量减少,残留RGCs细胞核见固缩,染色不均.PEDF组视网膜组织残留神经节细胞轻微水肿,但RGCs细胞层排列尚且紧密,且受损程度明显轻于模型组;模型组、PEDF组Caspase-3 mRNA和蛋白水平高于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05);PDEF组Caspase-3 mRNA和蛋白水平低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05).模型组、PEDF组NO含量高于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05);PEDF组NO含量低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05).结论:采用PEDF干预可下调视神经损伤大鼠Caspase-3、NO的表达,减轻RGCs细胞损伤.     

促红细胞生成素对慢性高眼压下大鼠视网膜Caspase-9表达的影响

目的 探讨促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)在视网膜神经节细胞凋亡途径中的作用机制.方法 选取120只大鼠随机分为12组,每组10只20眼;巩膜烧灼法制作大鼠慢性高眼压模型.用药组每只大鼠腹腔注射EPO.应用RT-PCR法、Western blotting印迹法检测备组视网膜组织甲Caspase-9基因Mrna及蛋白表达情况.检测用药前后ERG-b波波幅和视网膜厚度的变化.结果 EPO用药组视网膜水肿明显减轻,视网膜厚度变薄的趋势明显减弱,与未用药组比较差异有统计学意义.用药组ERG-b波波幅明显恢复,2组差异有统计学意义;Caspase-9 Mrna和蛋白在用药后除高眼压后3 d组外,表达均明显减少,与未用药组比较,差异有统计学意义.结论 EPO对慢性高眼压后的视网膜具有保护作用,其机制之一是通过抑制Caspase-9介导的凋亡信号转导途径来完成的.     

E-64d对大鼠视网膜缺血再灌注损伤中Calpain和Caspase-3表达的调控作用

目的 探讨E-64d（半胱氨酸蛋白酶抑制剂及钙激活中性蛋白酶抑制剂）在大鼠视网膜缺血再灌注损伤（RIRI）中对Calpain／Caspase-3表达的调节作用。方法 将80只SD大鼠随机分为正常组、视网膜缺血再灌注组、对照组和E-64d治疗组，并分为1、3、6、24、72h5个时间段。通过前房穿刺加压法制成RIRI动物模型，采用Western—blot以及RT—PCR方法测定在大鼠RIRI模型中的Calpian、Caspase-3蛋白和mRNA表达情况。结果缺血再灌注24hm—Calpain、Caspase-3蛋白的表达缺血再灌注组较正常组上升，而E-64d组表达与正常组相似，比缺血再灌注组下降。E-64d能下调视网膜缺血再灌注后m—calpain／calpastatin的mRNA比值，在24h与缺血组有显著统计学差异。结论 E-64d能降低视网膜缺血再灌注时m—Calpain、Caspase-3蛋白的表达，调控m—Calpain和Calpastatin的mRNA比值。     

Caspase-3在MNU诱导的视网膜变性大鼠中的作用

目的研究Caspase3在N甲基N亚硝脲(MNU)诱导的光感受器细胞凋亡过程中的表达并观察其与细胞凋亡的关系。方法大鼠MNU腹腔注射造模后,分别在不同时间段,利用免疫组织化学法检测视网膜中Caspase3的表达,同时用TUNEL法检测视网膜细胞的凋亡。结果MNU腹腔注射后,外核层中Caspase3的表达渐增强,至2d时达高峰,此后渐下降。细胞凋亡数量的变化趋势与前者一致。结论Caspase3可能在MNU诱导的光感受器细胞凋亡中发挥主要作用,其表达量的高低与细胞凋亡的程度有密切联系。     

Caspase-3抑制剂z-DEVD-fmk治疗兔外伤性视神经损伤的研究

目的 观察半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)抑制剂z-DEVD-fmk对兔外伤性视神经损伤的治疗效果.方法 实验研究.选取2～3月龄中国白兔52只(104只眼),4只(8只眼)作为空白对照,48只(96只眼)应用液压冲击颅脑损伤仪建立兔外伤性视神经损伤模型,左眼玻璃体腔注射2%二甲基亚砜5μl为对照组(A组);右眼玻璃体腔注射Capase-3抑制剂z-DEVD-fmk 5μl为实验组(B组).给药后1 d、4 d、7 d、10 d、14 d、21 d行闪光视觉诱发电位(F-VEP),视网膜病理学检查,并应用免疫组织化学方法检测视网膜中Caspase-3表达.所得数据采用t检验、单因素方差分析、q检验及直线相关分析进行统计学处理.结果 给药后7 d,实验组的F-VEP P1波潜伏(90.50±7.61)ms与对照组(113.59±12.92)ms相比缩短(t=4.060,P＜0.05),视网膜神经节细胞计数实验组(237.62±8.50)较对照组(207.03±11.04)有所增多(t=-5.843,P＜0.05),均可持续至给药后21 d,实验组的F-VEP P1波潜伏(67.97±7.93)ms与对照组(134.22±8.50)ms相比缩短(t=13.950,P＜0.05);视网膜神经节细胞计数实验组(207.13±12.21)较对照组(156.32±8.45)增多(t=-10.307,P＜0.05).Caspase-3的A值于给药后7 d,实验组(0.396±0.023)低于对照组(0.458±0.024),差异有统计学意义(t=6.200,P＜0.05).F-VEP P1波潜伏期与Caspase-3 A值呈正相关(r=0.95,P＜0.05).结论 z-DEVD-fmk通过抑制视网膜Caspase-3的表达,对兔外伤性视神经损伤具有治疗作用,可促进神经功能的恢复.