氟喹诺酮类药物对金黄色葡萄球菌及其耐药突变体的耐药性研究

目的:研究5种氟喹诺酮类药物(FQ)对金黄色葡萄球菌ATCC29213及其同源耐药突变体的最低抑菌浓度(MIC)、防细菌耐药突变体选择浓度(MPC)和突变选择窗(MSW),比较其防耐药变异能力,了解细菌对FQ耐药的发生发展过程。方法:肉汤法富集1010CFU.ml-1金黄色葡萄球菌ATCC29213,采用平板稀释法测定莫西沙星、加替沙星、司帕沙星、左氧氟沙星和环丙沙星对金黄色葡萄球菌ATCC29213及筛选的耐药突变体的MIC、暂定MPC(MPCpr)和MPC。结果:莫西沙星、加替沙星、司帕沙星、左氧氟沙星和环丙沙星对金黄色葡萄球菌ATCC29213的MPC分别为0.2、0.3、0.3、1.4、3.2μg.ml-1。选择指数(MPC/MIC)分别为6.5、4.8、9.7、11.2、12.8。5种氟喹诺酮类药物筛选的第一步突变体对筛选药物的MIC较ATCC29213升高2~8倍。左氧氟沙星筛选的第二步突变体的MIC较第一步突变体又升高8~16倍。所有突变体的MSW边界都较其源菌株明显升高。结论:莫西沙星、加替沙星限制金黄色葡萄球菌耐药突变菌体选择的能力强于司帕沙星、左氧氟沙星和环丙沙星。金黄色葡萄球菌对FQ药物产生耐药是逐步发生的。第一步耐药突变体的产生,使筛选出下一步耐药突变体的几率明显增大,从而导致耐药菌的富集和扩散。     

氟喹诺酮药物对金黄色葡萄球菌同源耐药突变株的耐药突变选择窗研究

目的通过测定不同氟喹诺酮（FQ）药物对同源金黄色葡萄球菌耐药突变株的MIC和防耐药突变浓度（mutant prevention concentration。MPC），分析不同药物的抗菌活性及限制耐药突变株选择的能力。方法分别采用环丙沙星和加替沙星琼脂平板筛选金黄色葡萄球菌ATCC25923同源的第一步和第二步耐药突变株。采用琼脂平板稀释法测定各耐药突变株的MIC和MPC。计算选择指数（MPC／MIC）。结果加替沙星和莫西沙星对金黄色葡萄球菌ATCC25923第一步耐药突变的MPC值（1—2μg／ml）明显低于环丙沙星、左氧氟沙星和帕珠沙星（4—16μg／m1），以上5种FQ药物对第一步耐药突变的MPC值和选择指数分别为ATCC25923的2—8倍和1-4倍。加替沙星和莫西沙星对第二步耐药突变的MPC值为8—16μg／ml。结论对于金黄色葡萄球菌ATCC25923同源的第一步耐药突变株。加替沙星和莫西沙星限制下一步耐药突变株选择的能力强于环丙沙星、左氧氟沙星和帕珠沙星，结合药动学参数，环丙沙星、左氧氟沙星和帕珠沙星很容易选择出下一步耐药突变株；而加替沙星和莫西沙星则能够限制下一步耐药突变株的选择。对于第二步耐药突变株，加替沙星和莫西沙星则很容易筛选出对这两种药物也耐药的菌株。临床上为延长加替沙星和莫西沙星的应用时间，对于已对左氧氟沙星耐药的菌株应避免应用加替沙星和莫西沙星单药治疗。     

6种氟喹诺酮类药物对凝固酶阴性葡萄球菌的防耐药变异浓度分析

目的 比较6种氟喹诺酮类药物对临床分离凝固酶阴性葡萄球菌耐药突变体的选择能力.方法 选择呼吸道标本,对苯唑西林、环丙沙星敏感的凝固酶阴性葡萄球菌34株,采用标准琼脂二倍稀释法、标准琼脂平板稀释法,测定6种氟喹诺酮类药物对凝固酶阴性葡萄球菌的最低抑菌浓度(MIC)、防耐药变异浓度(MPC).结果 MPC值比较,莫西沙星最低(MPC90为1 mg/L),左氧氟沙星和环丙沙星最高(MPC90均为32 mg/L).莫西沙星、卡屈沙星和加替沙星的MPC90/MIC90较低,均为2.结论 莫西沙星、卡屈沙星和加替沙星对凝固酶阴性葡萄球菌的MPC值较低,突变选择窗范围相对较窄.     

氟喹诺酮类药物对粪肠球菌的防耐药突变浓度研究

目的通过测定4种氟喹诺酮类药物(FQ)对粪肠球菌ATCC29212及其同源耐药突变体、粪肠球菌临床分离株的最低抑菌浓度(MIC)、防耐药突变浓度(MPC)和突变选择窗(MSW),比较其抗菌活性及防耐药突变的能力。方法采用4种FQs(环丙沙星、左氧氟沙星、莫西沙星和加替沙星)筛选粪肠球菌ATCC29212同源的第一步耐药突变体,用加替沙星筛选第二步耐药突变体;采用琼脂二倍稀释法测定粪肠球菌ATCC29212及其同源耐药突变体、粪肠球菌临床分离株的MIC、暂定MPC(MPCpr)和MPC,并计算MIC90、MPCpr90、选择指数SI(MPCpr90/MIC90及MPC/MIC)。结果加替沙星、莫西沙星、左氧氟沙星和环丙沙星对粪肠球菌ATCC29212的MPC分别为1.2、1.2、5.6和6.4μg/m L,选择指数分别为3.4、6、8和8;对30株环丙沙星敏感的粪肠球菌临床分离株的MPCpr90分别为2、1、4和4μg/m L,选择指数分别为4、4、8和8;而加替沙星和莫西沙星对15株环丙沙星中介耐药株的MPCpr90分别为32和16μg/m L,选择指数均达到了32。4种FQs药物对ATCC29212第一步耐药突变体的MIC及MPC值均较其源菌株升高;加替沙星和莫西沙星对第二步耐药突变体的MPC已高达32μg/m L;加替沙星、莫西沙星和左氧氟沙星对第一步耐药突变体的MSW较源菌株增宽。结论对于粪肠球菌临床分离株、ATCC29212及其同源的耐药突变体,加替沙星和莫西沙星的抗菌活性均高于左氧氟沙星和环丙沙星,且加替沙星和莫西沙星限制粪肠球菌耐药突变体被选择出来的能力强于左氧氟沙星和环丙沙星,结合药动学参数,加替沙星和莫西沙星能限制下一步耐药突变株的产生,而环丙沙星和左氧氟沙星则很容易筛选出下一步耐药突变株。但对于第二步耐药突变株,加替沙星和莫西沙星则很容易筛选出对这两种药物也耐药的菌株。因此,临床上为延长加替沙星和莫西沙星的使用寿命,对于环丙沙星非敏感的菌株应避免应用加替沙星和莫西沙星单药治疗。     

比较6种氟喹诺酮类药物对金黄色葡萄球菌的防耐药变异浓度

目的比较6种氟喹诺酮类药物对临床分离金黄色葡萄球菌耐药突变体的选择能力。方法用呼吸道标本,选择对苯唑西林、环丙沙星敏感的金黄色葡萄球菌36株,采用标准琼脂二倍稀释法、标准琼脂平板稀释法,测定6种氟喹诺酮类药物对金黄色葡萄球菌的MIC、MPC。结果 MPC值比较,莫西沙星最低;而环丙沙星最高。选择指数(MPC90/MIC90)较低有如下4种:莫西沙星、卡屈沙星、加替沙星和帕珠沙星,均为2。6种药物MPC90值与其体内药动学参数比较,莫西沙星和卡屈沙星小于其Cmax。结论莫西沙星、卡屈沙星和加替沙星对金葡菌的MPC值较低,突变选择窗范围相对较窄。     

4种氟喹诺酮类药物对嗜麦芽寡养单胞菌防耐药变异浓度的测定

目的为了解4种氟喹诺酮类药物对嗜麦芽寡养单胞菌的防耐药变异能力,以指导临床合理用药。方法采用标准琼脂二倍稀释法测定莫西沙星、左氧氟沙星、洛美沙星、环丙沙星对嗜麦芽寡养单胞菌的最低抑菌浓度;将总量为1.2×1010CFU的细菌接种于含不同浓度药物的琼脂平皿上,无菌落生长的最低药物浓度即为该药的防耐药变异浓度(MPC)。结果莫西沙星和左氧氟沙星对嗜麦芽寡养单胞菌的敏感率为100%,洛美沙星敏感率为64.5%,环丙沙星敏感率为9.7%。莫西沙星和左氧氟沙星MPC90为64mg/L,洛美沙星和环丙沙星MPC90为256m g L/。4种药物的M PC90/MIC90均为64。结论莫西沙星和左氧氟沙星对嗜麦芽寡养单胞菌具有高度的抗菌活性,但结合药代动力学参数,4种药物血药浓度均位于MIC和MPC之间,提示单药治疗易导致耐药突变菌株的富集生长,应联合用药以限制细菌耐药的发生。     

氟喹诺酮类药物浓度对预防肺炎链球菌耐药的影响研究

目的检测氟喹诺酮类药物对肺炎链球菌临床耐药的预防作用,并比较防突变浓度（MPC）与最低抑菌浓度（MIC）间的关系,为临床合理用药提供依据。方法采用琼脂二倍稀释法检测5种抗菌药物的MIC值,计算MIC50和MIC90值;采用新鲜制备的1010 CFU/mL菌液测定MPC值,测定MPC值,接种细菌浓度〉1010,计算MPC50和MPC90值,并比较MPC/MIC。结果在5种药物中,莫西沙星的MPC50和MPC90值最低,分别为1mg/L和2mg/L,环丙沙星最高,为16mg/L和32mg/L;测定菌株对莫西沙星、左氧沙星的MPC/MIC范围主要在8～16,对加替沙星、司巴沙星的MPC/MIC范围主要在16～32,对环丙沙星的MPC/MIC范围主要在32～64。结论莫西沙星、左氧沙星抗菌谱广,而且MPC值较低,并可以防止肺炎链球菌突变的发生。     

山楂果胶寡糖联用氟喹诺酮类药物对葡萄球菌防耐药浓度的影响分析

目的 探讨山楂果胶寡糖与氟喹诺酮联合用药对金黄色葡萄球菌防耐药浓度的影响,为临床合理使用现有抗生素、防治细菌耐药产生提供理论依据.方法 采用标准琼脂二倍稀释法测定左氧氟沙星、环丙沙星对30株临床分离的金黄色葡萄球菌和金黄色葡萄球菌质控菌株ATCC25923的最低抑菌浓度(MIC),采用标准琼脂平板稀释法测定2种FQ药物对临床分离金黄色葡萄球菌的防突变浓度,计算单药和联合山楂果胶寡糖用药后该药的MPC50、MPC90.结果 左氧氟沙星单药对30株金黄色葡萄球菌的MPC范围在2～64mg/L,MPC90为32mg/L;联合山楂果胶寡糖后MPC范围为0.5～16 mg/L,MPC90降至8 mg/L.环丙沙星单药对30株金黄色葡萄球菌的MPC范围1～32mg/L,MPC90为16mg/L;联合山楂果胶寡糖后MPC范围0.25～8mg/L,MPC90降至4 mg/L,两组各项指标比较差异有显著性(P<0.05).结论 联合山楂果胶寡糖用药能降低环丙沙星、左氧氟沙星MPC,减少细菌耐药突变体的选择性富集扩增,防止抗菌药物耐药的产生.     

山楂果胶寡糖联用氟喹诺酮类药物对葡萄球菌防耐药浓度的影响分析

目的 探讨山楂果胶寡糖与氟喹诺酮联合用药对金黄色葡萄球菌防耐药浓度的影响,为临床合理使用现有抗生素、防治细菌耐药产生提供理论依据.方法 采用标准琼脂二倍稀释法测定左氧氟沙星、环丙沙星对30株临床分离的金黄色葡萄球菌和金黄色葡萄球菌质控菌株ATCC25923的最低抑菌浓度(MIC),采用标准琼脂平板稀释法测定2种FQ药物对临床分离金黄色葡萄球菌的防突变浓度,计算单药和联合山楂果胶寡糖用药后该药的MPC50、MPC90.结果 左氧氟沙星单药对30株金黄色葡萄球菌的MPC范围在2～64mg/L,MPC90为32mg/L;联合山楂果胶寡糖后MPC范围为0.5～16 mg/L,MPC90降至8 mg/L.环丙沙星单药对30株金黄色葡萄球菌的MPC范围1～32mg/L,MPC90为16mg/L;联合山楂果胶寡糖后MPC范围0.25～8mg/L,MPC90降至4 mg/L,两组各项指标比较差异有显著性(P<0.05).结论 联合山楂果胶寡糖用药能降低环丙沙星、左氧氟沙星MPC,减少细菌耐药突变体的选择性富集扩增,防止抗菌药物耐药的产生.     

左氧氟沙星药代动力学/药效动力学参数与金黄色葡萄球菌耐药的相关性研究

目的：探讨左氧氟沙星药代动力学/药效动力学（PK/PD）参数与金黄色葡萄球菌耐药的相关性。方法：建立兔组织笼金黄色葡萄球菌感染模型,给予不同剂量的左氧氟沙星灌胃治疗。抽取组织笼内组织液进行药代动力学测定,计算PK/PD参数,同时监测组织笼内细菌药物敏感性变化。结果：PK/PD参数AUC24/MIC、AUC24/MPC、Cmax/MIC、Cmax/MPC、T〉MPC和Tmsw和耐药发生相关（MIC：最小抑菌浓度,MPC：防耐药变异浓度,MSW：耐药突变选择窗）,T〉MIC与耐药的发生无相关性。当AUC24/MIC在20～150h时,容易发生耐药,保持药物AUC24/MPC〉25h可以限制耐药的发生。体内MSW的上、下限分别为AUC24/MPC=25h和AUC24/MIC=20h。结论：AUC24/MPC、Cmax/MPC和T〉MPC可能是预测耐药发生的独立参数。     

中药影响左氧氟沙星对金黄色葡萄球菌的耐药突变选择窗的初步研究

目的:研究中药在左氧氟沙星对金黄色葡萄球菌耐药突变选择窗(MSW)上的影响。方法:采用琼脂平板稀释法测定几种中药制剂的最低抑菌浓度(MIC)、防突变浓度(MPC),得出其选择指数(SI)。选择SI值较低的中药制剂双黄连与大蒜素分别与左氧氟沙星联用,琼脂平板稀释法测定不同浓度下双黄连/大蒜素与左氧氟沙星联用对金黄色葡萄球菌MSW上的影响。结果:双黄连和左氧氟沙星联用(2MIC+8MIC,4MIC+4MIC)可使左氧氟沙星对金黄色葡萄球菌的MSW缩小至0.4～0.8倍;而不同浓度大蒜素与左氧氟沙星联用,则未见明显作用。结论:双黄连注射剂与左氧氟沙星联用可缩小左氧氟沙星对金黄色葡萄球菌的MSW,从而降低金黄色葡萄球菌对左氧氟沙星的耐药性。     

左氧氟沙星联合万古霉素缩小金黄色葡萄球菌耐药突变选择窗的初步研究

目的:在体外初步探讨联合用药可缩小单药对细菌的耐药突变选择窗(MSW),为临床合理使用现有抗菌药物,防止细菌耐药产生提供理论依据。方法:应用肉汤法富集1010CFU/mL细菌,琼脂平板二倍稀释法测定左氧氟沙星、万古霉素单药和两药联用对金黄色葡萄球菌ATCC29213的最低药物浓度(MPC)和MSW。结果:左氧氟沙星、万古霉素单药对金黄色葡萄球菌ATCC29213的MSW分别为16和64。万古霉素和左氧氟沙星联合用药(1MIC 8MIC,2MIC 4MIC)使左氧氟沙星单药对ATCC29213的MSW缩小2～4倍。左氧氟沙星联合万古霉素用药(1MIC 16MIC,2MIC 8MIC)使万古霉素对ATCC29213的MSW缩小4～8倍。结论:万古霉素和左氧氟沙星联合用药可缩小各自单药对金黄色葡萄球菌ATCC29213的MSW。     

山楂果胶寡糖联用氟喹诺酮类药物对葡萄球菌防耐药浓度的影响分析

目的探讨山楂果胶寡糖与氟喹诺酮联合用药对金黄色葡萄球菌防耐药浓度的影响,为临床合理使用现有抗生素、防治细菌耐药产生提供理论依据。方法采用标准琼脂二倍稀释法测定左氧氟沙星、环丙沙星对30株临床分离的金黄色葡萄球菌和金黄色葡萄球菌质控菌株ATCC25923的最低抑菌浓度（MIC）,采用标准琼脂平板稀释法测定2种FQ药物对临床分离金黄色葡萄球菌的防突变浓度,计算单药和联合山楂果胶寡糖用药后该药的MPC50、MPC90。结果左氧氟沙星单药对30株金黄色葡萄球菌的MPC范同在2～64mg／L,MPC90为32mg／L;联合山楂果胶寡糖后MPC范围为0．5～16mg／L,MPC90降至8mg／L。环丙沙星单药对30株金黄色葡萄球菌的MPC范围1～32mg／L,MPC90为16mg／L;联合山楂果胶寡糖后MPC范围0．25～8mg／L,MPC90降至4mg／L,两组各项指标比较差异有显著性伊〈0．05）。结论联合山楂果胶寡糖用药能降低环丙沙星、左氧氟沙星MPC,减少细菌耐药突变体的选择性富集扩增,防止抗菌药物耐药的产生。     

莫西沙星抑制金黄色葡萄球菌耐药突变体选择的体外PK/PD研究

目的:建立体外药效学模型,研究盐酸莫西沙星抑制金黄色葡萄球菌耐药突变体选择的体外PK/PD参数。方法:用琼脂平皿二倍稀释法测定金黄色葡萄球菌102526及105006的MIC、MPC,建立微生物法并测定莫西沙星药物浓度,建立体外药效学模型,用梯形法计算AUC_0-t:MIC及AUC_0-t:MPC。结果:微生物方法学的精密度RSD<10%,相对回收率范围为95%~105%。敏感菌102526对莫西沙星的MIC及MPC分别为0.064,0.25 mg·L^-1,其主要PK/PD参数AUC_0-24/MIC和AUC_0-24/MPC分别为307,76.75 mg·h·L^-1;C_max/MIC及C_max/MPC分别为63.75及15.94。中介耐药菌105006对莫西沙星的MIC和MPC分别为1,8 mg·L^-1,其24 hAUC/MIC均远小于125 mg·h·L^-1,C_max/MIC亦小于10。结论:本研究成功建立了体外药效学模型,用其研究莫西沙星对金黄色葡萄球菌的体外抗菌活性,研究中测定了莫西沙星的PK/PD参数和细菌恢复生长曲线,验证了药物浓度处于耐药突变选择窗内时可选择性富集中介耐药菌的耐药突变窗理论。     

利奈唑胺、万古霉素对甲氧西林耐药的金黄色葡萄球菌的防耐药突变体选择浓度的研究

目的：比较利奈唑胺、万古霉素对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的防耐药突变选择能力;研究防耐药突变体选择浓度（MPC）和最低抑菌浓度（MIC）的相关性。方法：采用琼脂微量稀释法测定利奈唑胺、万古霉素对35株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）临床分离菌株的MPC和MIC;采用线性回归法比较利奈唑胺、万古霉素对MRSA的MPC和MIC的相关性;结合人体药代动力学数据,预测利夺唑胺、万古霉素对MRSA的防耐药突变体选择能力。结果：利奈唑胺、万古霉素对35株MRSA的MPC90值（抑制90％的细菌发生细菌耐药的最低防耐药突变体选择浓度）分别为16.8μg／mL,选择指数（MPC90／MIC90）均为8。两药对MRSA的MPC和MIC的线性相关系数R^2分别为0．32和0．008。结合两药药代动力学参数,利奈唑胺药物浓度在整个给药间隔落在耐药突变选择窗理论（MSW）中,万古霉素药物浓度在大部分给药间隔落在MPC之上。结论：万古霉素对MRSA的防耐药选择能力强于利奈唑胺;MPC和MIC的相关性差。     

4种氟喹诺酮类药物对肺炎克雷伯杆菌的防耐药变异浓度

目的 为了解4种氟喹诺酮类药物对肺炎克雷伯杆菌的防耐药突变能力，以指导临床合理用药。方法 采用标准琼脂二倍稀释法测定加替沙星、左氧氟沙星、洛美沙星、环丙沙星对肺炎克雷伯杆菌的最低抑菌浓度；将总量为1．2×10^10CFU的细菌接种于含不同浓度药物的琼脂平皿上，无菌落生长的最低药物浓度即为该药的防耐药变异浓度。结果 加替沙星的敏感率为91．3％。左氧氟沙星的敏感率为82．6％，洛美沙星的敏感率为70％，环丙沙星的敏感率为52％。就MPC90而言，加替沙星=左氧氟沙星〈环丙沙星〈洛美沙星。突变选择窗由小至大为左氧氟沙星〈加替沙星〈环丙沙星〈洛美沙星。结论 加替沙星、左氧氟沙星对肺炎克雷伯杆菌有高度的抗菌活性，但结合药代动力学参数，4种药物的血药浓度均位于最低抑菌浓度和防耐药变异浓度之间，提示单药治疗易导致耐药突变株的富集生长，应联合用药以防止细菌耐药的发生。